HIF-1、GLUT-1与子宫内膜癌的研究进展

缺氧诱导因子-1是在缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子.缺氧诱导因子-1能启动靶基因转录,使机体适应缺氧的微环境,其还在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等多方面起着重要作用.葡萄糖转运蛋白-1是一种膜性易化葡萄糖转运蛋白,是已知的葡萄糖转运蛋白家族中分布最广的转运体.在缺氧缺血条件下,缺氧诱导因子-1a通过介导缺氧反应基因而上调葡萄糖转运蛋白-1的表达.葡萄糖转运蛋白-1和缺氧诱导因子-1a联合阳性表达可能成为临床恶性肿瘤诊断,特别是早期诊断的指标,联合检测这两种指标在反映癌症发生发展过程中起关键作用.该文就缺氧诱导因子-1、葡萄糖转运蛋白-1与子宫内膜癌发生发展关系的研究进展作以概述.     

萍乡地区9株高危HPV16L1基因的克隆及序列分析

目的 了解萍乡地区地方株HPV16 L1基因结构特点,分析其结构蛋白L1基因多态性及蛋白特性变化,为基于L1基因工程疫苗的设计和应用提供理论依据.方法 设计HPV16型L1基因特异性引物,从宫颈脱落上皮细胞提取DNA,进行PCR扩增鉴定,将扩增的片段同T-载体连接,然后导入到大肠杆菌DH-5α中培养,提取质粒DNA进行测序.结果 将测序结果导出数据后,根绝NCBI网站上公布的GENBANK数据库,利用BLAST工具将9个样本的序列同相应的标准株序列进行比对,9个HPV16样本同标准株的同源性分别为98.9％～99.6％.结论 9株萍乡地方株HPV16L1基因与标准株之间的差异,特别可能会造成HPV16 L1蛋白免疫原性的差异.实验结果可为研制适应本地区的基于HPV16 L1的基因工程疫苗提供可靠实验依据.     

缺氧诱导因子-1α调节研究的进展

缺氧诱导因子-1(HIF-1)广泛参与哺乳动物细胞中缺氧诱导产生的适应性反应,是机体细胞适应低氧的重要转录调节因子.HIF-1蛋白α亚基(HIF-1α)受细胞内氧分压精细调节,对于低氧环境中机体的生存和肿瘤组织的生长具有重要意义.正常氧分压条件下,HIF-1α通过泛素-蛋白水解酶系统迅速降解,在胞浆中含量很低.当受到细胞氧分压降低或其它调节因素作用时,HIF-1α降解途径被阻断,从而在胞浆中积聚、活化,并转移到细胞核,与HIF-1蛋白β亚基(HIF-1β)形成二聚体HIF-1分子,后者与相应的靶基因序列结合,调节基因的转录.在对HIF-1α蛋白质稳定性及转录活性的调节过程中,其氨基酸残基的羟基化和磷酸化是多种因素的主要调节方式.     

CYP1B1基因敲除对高脂膳食诱导小鼠肥胖的抑制作用

目的 从整体水平探讨基因CYP1B1在机体脂肪代谢中的作用.方法 选择3周龄SPF级CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性小鼠各16只,给予低(LFD)、高脂肪(HFD)饲料,每组8只.连续喂养11周.测定血清中甘油三酯(TG)的含量和肝脏组织中过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)、脂肪酸转移酶(CD3...     

甲型H1N1流感病毒抗原HA基因进化分析

目的 分析甲型H1N1流感病毒抗原HA基因的突变和分子进化树.方法 由河南省各市(地)疾病预防控制中心和流感监测哨点医院采集流感患者咽拭样本,从咽拭样本中分离甲型H1N1流感病毒毒株,选择20株提取病毒RNA,设计引物运用逆转录-聚合酶键反应(RT-PCR)技术扩增编码HA蛋白的基因序列,测序分析核酸和编码的蛋白序列突变位.结果 分离到51株新型H1N1流感病毒;扩增20株HA编码基因,18株成功扩增到HA编码基因,2部分基因片段分别为1 024 bp和654 bp,与预期大小相符;BLAST分析结果显示,在中国多个地区分布有甲型H1N1流感病毒HA基因433 T/C(N端145 S/P)突变株,进化树分析结果显示,这一位点的突变有可能是来自于猪-人之间相互感染.结论 甲型H1N1流感病毒抗原HA基因在中国内地传播期间个别氨基酸位点发生了突变,但是抗原性未改变.     

高原缺氧人群中编码HIF-2α的基因EPAS-1突变

低氧诱导转录因子是关于HIF-1的首次描述，随后发现它能提高多个基因的转录，这些基因可以编码红细胞生成蛋白、血管圆形（血管塑形）蛋白、和糖酵解的蛋白。随后HIF-2被确定，虽然它与HIF-1高度相似，和HIF-1一样有潜能去结合和调节一些同样的基因，但它应对缺氧的生物作用是与HIF-1截然不同。HIF-2介导过程中的一些涉及人们对高原暴露的反应包括红细胞生成、铁稳态、新陈代谢和血管通透性，尤其是最新发现的EPAS-1的突变在适应高原是有可能带来比单一的突变Epo基因更多的优势，除此以外，该基因还是藏族人类适应高原环境的关键基因。本文将对编码HIF-2α的基因EPAS-1的突变进行介绍和说明。     

GSTM1和GSTT1基因多态性对苯乙烯接触工人苯乙烯代谢的影响

目的 探讨GSTM1和GSTT1基因多态性对苯乙烯接触工人苯乙烯代谢的影响.方法于2006年11月选择山东省某玻璃钢游艇生产企业喷漆车间工龄在1年以上、防护情况基本相同的全部工人共计56人作为研究对象.分别测定个体苯乙烯接触剂量、尿中代谢产物——苯乙烯巯基尿酸的浓度,采用多重PCR技术检测GSTM1和GSTT1基因多态...     

甲型流感病毒NS1蛋白应用研究进展

流感病毒是引起急性流感的病原体,具有传染性强、变异快和宿主范围广的特点.随着对流感病毒研究的深入,人们对流感病毒的认知度不断提高,对其的开发利用也随之启动,其中对最短的NS基因及其编码蛋白(NS1和NS2)的研究开发更令人注目.NS1蛋白虽在病毒出芽时未被包装,但在感染细胞中发挥了多种生物功能,如对宿主细胞IFN的调节...     

谷胱甘肽S转移酶基因多态性对1-溴丙烷接触者神经传导速度的影响

[目的]探讨谷胱甘肽S转移酶基因多态性对1-溴丙烷(1-BP)接触者神经传导速度的影响.[方法]选择116名1-BP接触工人为接触组,133名无1-BP接触史的工人为对照组,用神经电生理检测技术测定工人的运动神经传导速度(MCV)、感觉神经传导速度(SCV)和末端潜伏期(DL),用等位基因特异性扩增(ASA)方法检测两组GSTT1和GSTM1基因型的分布.[结果]GSTT1基因多态性和1-BP接触对工人的SCV和DL的影响有交互作用,SNK两两比较结果显示,与对照组GSTT1基因携带者相比,接触组中GSTT1基因缺失型工人的SCV明显减慢[分别为(45.3±5.0)m/s和(40.1±5.3)m/s]、DL明显延长[分别为(6.3±1.3)ms和(8.3±2.0)ms],差别有统计学意义(P＜0.05);去除交互项后的两因素方差分析显示,GSTT1基因多态性对工人的MCV有独立的影响(P＜0.05).未发现GSTM1基因多态性对接触者外周神经传导速度有影响.[结论]GSTT1基因多态性与接触者对1-BP外周神经毒性的易感性有关.     

极低频磁场对细胞色素氧化酶亚基1基因转录水平的影响

目的　克隆和鉴定本研究室经DD法在Daudi细胞中筛选到的一个极低频磁场的特异反应基因 (MF 1) ,并在多种磁场敏感细胞中证实该基因反应的普遍性 ,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法　克隆、序列分析MF 1片段 ;选择HL 6 0、L12 10和中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)等细胞 ,用Northern技术观察该基因在不同条件的磁场辐照 (5 0Hz磁场 ,磁通密度分别是 0 .1mT和 0 .8mT ,辐照时间分别是 2 0min和 2 4h)后该基因转录水平的变化。结果　克隆测序及与GeneBank同源性比较表明 ,MF 1序列与细胞色素氧化酶亚基 1基因 (CO1)有 10 0 %同源性。HL 6 0、L12 10和CHL等细胞在 0 .1mT、0 .8mT磁场辐照 2 0min后 ,CO1转录水平 (分别为 0 .38± 0 .12、0 .37± 0 .0 4 )均比对照组 (0 .5 8± 0 .12 )下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;辐照 2 4h后 ,3种细胞该基因转录水平 (分别为 0 .4 6± 0 .0 9、0 .4 5± 0 .0 9)亦比对照组 (0 .6 5± 0 .0 6 )下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　CO1是磁场辐照密切相关的反应基因之一。磁场可能通过影响CO1的转录水平来影响细胞色素氧化酶的活力 ,从而影响多种生物学效应     

脂肪组织炎症在CYP1B1基因敲除抑制小鼠营养性肥胖及其胰岛素抵抗中的作用

目的 探讨脂肪组织炎症在CYP1B1基因缺失小鼠保护营养性肥胖及其胰岛素抵抗中的作用和可能机制.方法 选择3周龄SPF级CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性小鼠各16只,给予低(LFD)、高脂肪(HFD)饲料,每组8只,连续喂养11周.采用实时定量RT-PCR测定脂肪组织中巨噬细胞相关炎症因子、胰岛素通路中...     

苗族人群细胞色素及GSTMI基因多态性分布

目的 了解细胞色素P4501A1(CYP1A1)与谷胱甘肽硫转移酶(GST)M1基因多态性在贵州苗族人群中的分布.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CYP1A1和GSTM1基因的多态性.结果 97人中CYP1A1基因型为野生型、杂合型、突变型的分别有69,18,10人,分别占71.13%,18.56%,10.31%;野生型等位基因频率为0.805,突变型等位基因频率为0.195.97人中有67人为GSTM1基因缺陷型,GSTM1缺陷型占69%.结论 贵州苗族CYP1A1m1突变型等位基因频率明显低于亚洲人.而高于欧洲人群;贵州苗族GSTM1基因缺陷率与中国汉族人相比无明显差异,但明显高于日本人、韩国人、德国人和波兰人.     

探讨NDUFV1基因变异与儿童遗传性脑白质病的关系

目的探讨NDUFV1基因变异与儿童遗传性脑白质病的关系。方法对郑州大学附属儿童医院2018年3月-2018年6月临床诊断的3例儿童遗传性脑白质病进行血乳酸、脑脊液乳酸检查和基因分析检测NDUFV1基因变化。结果3例患儿血乳酸、脑脊液乳酸均有不同程度升高,遗传学分析提示NDUFV1有3种基因变异类型(NDUFV1基因的p.R377C、p.R377T、p.T368P)。结论儿童遗传性脑白质病是较少见的遗传性代谢性疾病,对有特殊临床表现的患儿可进行NDUFV1基因变异筛查。     

天津市不同感染途径HIV-1感染者流行毒株亚型分析

目的 了解天津市HIV-1毒株的流行情况,比较不同感染途径HIV-1感染者中流行毒株的亚型分布.方法 采集100例感染途径已知的HIV-1感染者抗凝全血标本,提取DNA,用巢式聚合酶链式反应扩增病毒gag基因,并进行序列测定和亚型分析.结果 100份样品中,有87份样品被成功扩增出HIV-1的gag基因片段,通过系统进化分析,确定天津市HIV-1流行毒株分属4个亚型和重组型,其中CRF01 _AE比例最大,达59.77％(52/87),主要分布在通过同性和异性性传播的HIV-1感染者中,而在通过静注吸毒感染的HIV-1感染者中以CRF07_BC亚型为主.结论 天津市HIV-1流行株至少有4种基因亚型,且不同感染途径HIV-1感染者流行毒株的亚型分布略有不同,应加强对HIV-1毒株亚型变异的监测,及时调整防治策略.     

肠道干细胞特异性表达基因Musashi-1启动子的克隆及功能分析

目的:克隆MSI-1基因的启动子,并进行功能鉴定.方法:通过PCR介导重组的方法,从小鼠基因组DNA中克隆MSI-1基因的5'侧翼片段.Northern Blotting检测MSI-1基因在体外细胞系的表达情况,选择转录分析的细胞平台.构建不同长度的5'末端缺失质粒,通过体外瞬时转染和荧光素酶活性测定,检测这些5'末端缺失质粒的相对转录活性.结果:Colon26细胞系和B16细胞系均存在MSI-1基因的表达,但Colon26量更多.MSI-1基因转录起始位点下游73 bp至上游4 939 bp的DNA序列的相对转录活性是pGL3-basic的29.9倍.结论:pMSI 73～-4 939具有驱动报告基因表达的活性,可以作为MSI-1基因的启动子.MSI-1基因转录起始位点上游4 011～4 939 bp之间存在调节MSI-1基因表达的顺式作用元件,可能与MSI-1基因的组织特异性表达有关.MSI-1基因启动子的克隆将为应用该启动子进行肠道干细胞的分离和纯化提供了条件.     

转化生长因子-β1及其基因多态性在尘肺领域的研究进展

转化生长因子-β1(TGF-β1)被认为是迄今发现的最直接的促肺纤维化细胞因子,具有多种生物学功能.本文就近年来TGF-β1在尘肺的发生、发展过程中的一些研究如尘肺动物模型、尘肺患者体内TGF-β1的变化及发展、TGF-β1基因多态性与尘肺病的关系、TGF-β1与其他细胞因子的相关性作一综述.     

低氧诱导因子的脑保护作用

低氧诱导因子-1是低氧诱导因子家族中最先被发现的蛋白因子,组织低氧时,低氧诱导因子-1表达显著增加,它是缺氧环境的重要调节因子,对低氧反应性基因的转录有调控作用,并参与低氧反应的信号转导过程.该文叙述了低氧诱导因子-1的结构及其基因定位和靶基因,介绍了低氧诱导因子-1的活性调节,如诱导血管内皮生长因子、促红细胞生成素和一氧化氮合酶等靶基因的转录,成为低氧应答时稳定细胞内环境的调节中心.     

Effect of TIMP1 Gene in Proliferation of Human Colon Carcinoma Cells

目的 采用体外试验探讨基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因对人结肠癌(HCT-8)细胞增殖的影响.方法 构建TIMP1基因的真核表达载体和RNA干扰质粒(pcDNA3.1-TIMP1-K、TIMP1 RNAi、pcDNA3.1和空白对照),将TIMP1基因真核表达质粒和RNA干扰质粒分别瞬时转染入HCT-8细胞48～72h后,采用Real TimePCR方法检测TIMP1基因在HCT-8细胞中基因转录表达水平,并用Western blot方法检测TIMP1基因在HCT-8细胞中蛋白表达水平,采用MTr试验检测TIMP1基因过表达和干扰后对HCT-8细胞增殖的影响.结果 成功构建了TIMP1真核表达质粒和RNA干扰质粒.与空白对照比较,质粒pcDNA3.1-TIMP1-K在HCT-8细胞中mRNA和蛋白的相对表达含量较高,质粒TIMP1 RNAi的mRNA和蛋白表达含量较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).构建过表达质粒(pcDNA3.1-TIMP1-K)转染HCT-8细胞后,与空白对照相比,第1～4天HCT-8细胞的活性无显著变化(P＞0.05),第5～7天TIMP1基因过表达能够促进HCT-8细胞的增殖活性(P＜0.05);构建干扰质粒(TIMP1 RNAi)转染HCT-8细胞后,与空白对照相比,第1～4天HCT-8细胞生长无显著变化(P＞0.05),第5～7天TIMP1基因过表达能够抑制HCT-8细胞增殖(P＜0.05).结论 TIMP1基因过表达后能够促进人结肠癌细胞的增殖,在一定条件下还能够抑制人结肠癌细胞的增殖.     

转化生长因子-β1基因多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的关系

原发性高血压(EH)是一类由多基因和环境因素共同影响导致的复杂遗传性疾病,是最常见的慢性心血管病之一,其病因和发病机制尚未完全阐明.新疆哈萨克族人群是EH易感人群,居全国各民族高血压患病率的前5位[1].哈萨克族人群居住在气候寒冷,交通不便,相对隔离的山区,无异族通婚史,有着鲜明的民族聚集和高发的特征.目前国内外有关单核苷酸多态性(SNP)与疾病的关联研究,在SNP位点的选择上除了注意功能区(启动子和外显子)外,由于不同连锁标记间连锁不平衡(LD)模式,为增加基因分型的有效性,还需进行标签SNP(tagSNP)与疾病的关联研究.由于转化生长因子-β1(TGF-β1)基因是血压和血管重构的重要调节因子,可能导致高血压的发病,而TGF-β1基因多态性在高血压中的作用尚无确切结果,因此本研究采用SNaPshot技术对TGF-β1基因的tagSNP多态位点开展研究,以期进一步阐明基因型与EH发生的关联.     

人类肥胖相关新基因LYRMl在人前体脂肪细胞分化过程中的表达变化

[目的] 观察LYRM1基因在人前体脂肪细胞分化过程中表达水平的变化. [方法] 体外培养人前体脂肪细胞,采用RT-PCR及Western-Blot技术检测LYRM1基因在人前体脂肪细胞分化不同阶段(前体脂肪细胞;0、2、6、12 d)核酸及蛋白水平的表达变化. [结果] LYRM1基因在分化第2 d(Day2)时核酸及蛋白表达水平均明显上调,与各时段的表达水平差异有显著性(P<0.01),其余各组之间差异无显著性(P>0.05). [结论] 初步揭示了LYRM1基因在人前体脂肪细胞分化过程中的表达变化趋势.