银杏叶提取物对哮喘大鼠STAT6及IL-13表达的影响

目的：研讨银杏叶提取物（Egb）对哮喘大鼠信号转导和转录激活因子6（STAT6）、IL-13表达的影响，探讨其治疗哮喘的机制。方法：28只清洁级大鼠随机分为3组，对照组、模型组和Egb组，以卵白蛋白注射致敏雾化吸入激发法复制哮喘模型。用免疫组织化学法分别检测肺组织中STAT6蛋白表达水平，用流式细胞分析测定STAT6阳性细胞的表达率；用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-13浓度；对BALF进行细胞计数及嗜醵№垃细胞（EOS）分类计数。结果：①BALF中细胞总数和EOS占细胞总数的百分比（EOS％）模型组均显著高于对照组（P〈0．01），Egb组较模型组均显著降低（P〈0．01）；②BALF中IL-13的浓度模型组显著高于对照组（P〈0．01），Egb组较模型组显著降低（P〈0．01）；③模型组肺组织中STAT6蛋白表达和STAT6阳性细胞的表达率均较对照组明显增强（P〈0．01），Egb组较模型组明显减弱（P〈0．01）。结论：哮喘大鼠肺组织中STAT6蛋白有较强表达；Egb有抑制哮喘大鼠气道炎症的作用，其下调STAT6的表达、使IL-13分泌减少可能为其重要作用机制。     

银杏叶提取物对大鼠心肌梗死后转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GBE)对急性心肌梗死(AMI)后转化生长因子-β1表达的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,银杏叶组3组。按文献方法假手术组左冠状动脉前降支下只穿线不打结,另外两组均结扎左冠状动脉前降支。其中银杏叶组腹腔注银杏叶提取物2 m L/kg,假手术组和模型组分别腹腔注射等量生理盐水,连续注射4周后,HE染色观察心肌组织形态,免疫组织化学检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、I型胶原蛋白的表达。结果:银杏叶治疗组心功能明显优于模型组,心脏重量/体重、左室重量/体重低于模型组(P0.05),TGF-β1、I型胶原蛋白的表达明显低于模型组(P0.01)。结论:银杏叶提取物能够通过降低TGF-β1、I型胶原蛋白的表达抑制急性心肌梗死引起的心室重构。     

银杏叶提取物对肺纤维化大鼠模型肺组织MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的观察银杏叶提取物对肺纤维化大鼠模型肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法将96只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、强的松组和银杏叶提取物干预组,每组各24只,除正常对照组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,银杏叶提取物干预组用银杏叶提取物灌胃,强的松组用强的松混悬液灌胃,其余2组用生理盐水灌胃。每组分别于造模后第7、14、28天随机取8只大鼠,采集肺组织,采用免疫组织化学分析法分别检测MMP-9和TIMP-1的表达及含量。结果与模型对照组比较,强的松组、银杏叶提取物组大鼠第7、14、28天时肺组织MMP-9及TIMP-1表达减少。结论银杏叶提取物对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化不同时间点肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达均有一定程度的降低作用,有可能通过调整MMP-9及TIMP-1的相对平衡关系,对肺纤维化起到一定的防治作用。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1及其受体表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝组织TGF-β1及其受体表达的影响。方法:采用CCl4诱导大鼠肝纤维化,同时分别以200、100、50mg/kg.d的GbE进行干预,6周后取肝组织,采用免疫组化法测定肝组织TGF-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ蛋白的表达。结果:模型大鼠肝组织TGF-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ蛋白表达较正常组明显增高,GbE各剂量组肝组织TGF-β1及其受体表达也较模型组显著下降。结论:GbE可能通过降低TGF-β1及其受体的表达,抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化的发生及发展。     

TGF-β1在哮喘大鼠模型中动态变化及柴朴汤的干预研究

目的：通过观察TGF-β1在哮喘大鼠模型中动态变化,并用柴朴汤进行干预,探讨柴朴汤在哮喘大鼠中的治疗作用,为哮喘的预防及治疗提供进一步的思路。方法：以卵清白蛋白致敏及反复激发复制哮喘大鼠模型,常规切片观察气道内管壁厚度及气道平滑肌厚度;用RT-PCR检测TGF-β1mRNA的表达;用免疫组化法检测TGF-β1蛋白的表达。结果：大鼠哮喘激发后2周出现气道平滑肌增厚,并且随着激发时间的延长,气道平滑肌逐渐增厚。同时,哮喘大鼠支气管肺组织中TGF-β1mRNA及TGF-β1蛋白表达随着激发时间的延长而逐渐升高,呈现出一定的动态变化。用柴朴汤干预后,TGF-β1的表达下调。结论：在哮喘气道重塑过程中,TGF-β1的表达随着激发时间的延长逐渐增加,是一个动态变化的过程,柴朴汤抑制气道重塑的机制可能与下调TGF-β1的表达有关。     

银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠肺组织结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 96只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、强的松组(C组)和银杏叶提取物干预组(D组),每组各24只,除A组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,D组用银杏叶提取物灌胃,C组用强的松混悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃.每组分别于7,14和28 d随机处死8只大鼠,制备肺组织切片,用免疫组化SABC法分别检测各时间点各组大鼠肺组织中的CTGF的表达.结果 与A组比较,各时间点B、C、D组CTGF表达均显著增高(P＜0.01).与B组比较,各时间点,C、D各组CTGF表达均低于B组(P＜0.01或P＜0.05).结论 CTGF可能在肺泡炎、肺纤维化的发生发展过程中起着重要的作用,其表达程度与肺纤维化的程度密切相关;银杏叶提取物可能通过抑制CTGF的表达对肺组织起着修复及保护作用.     

银杏叶制剂对哮喘大鼠T淋巴细胞体外增殖和凋亡的影响

目的探讨银杏叶制剂治疗哮喘的部分机理。方法将14只大鼠分成2组(健康对照组7只,哮喘组7只),分别采集外周血,并分离出T淋巴细胞体外分组培养(分空白组、银杏叶制剂BN-52021组、银杏叶制剂EGb761组),各组分别以不同浓度的BN-52021和EGb761干预不同时间。用MTT法分别测定各组细胞的增殖情况,用Annexin V/PI双染法流式细胞仪测定BN-52021不同浓度组的细胞凋亡情况。结果与空白组比较,EGb761在低浓度时促进T淋巴细胞增殖,而高浓度时则起抑制作用(均P＜0．05)；BN- 52021对体外培养的哮喘和健康大鼠T淋巴细胞的增殖均有抑制作用,其作用强度(在一定的范围内)随剂量的增加和时间的延长而加强(均P＜0．05)；但对哮喘大鼠的抑制作用明显强于健康大鼠(P＜0．05)；T淋巴细胞凋亡率随BN-52021浓度增加而增加(P＜0．01)。结论银杏叶制剂因其成分和干预浓度的不同而对体外培养的大鼠T淋巴细胞增殖活性的影响不同,对哮喘与健康大鼠T淋巴细胞的作用也有差异。银杏内酯B是抑制T淋巴细胞增殖的主要活性成分,其不仅可抑制T淋巴细胞的体外增殖,而且还可增加T淋巴细胞凋亡率。     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织转化生长因子-β1表达的影响

支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞和淋巴细胞等多种炎症细胞参与的慢性气道炎症,本病反复发作,可导致气道重塑,致使病情缠绵难愈.     

麻杏二三汤对哮喘大鼠肺组织TGF-β1和ET-1表达的影响

目的：探讨麻杏二三汤对哮喘大鼠气肺组织 TGF-β1和 ET-1表达影响。方法：40只 SD 大鼠随机分为空白组、模型组、麻杏二三汤组、地塞米松组,各组共10只。除空白组,采用鸡卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）＋氢氧化铝干粉联合致敏法造模2周,之后激发哮喘发作、分组给药,激发20 d 后处死大鼠,观察体重、肺系数、病理组织学变化和采用酶联免疫吸附试验（ELIEA）法检测肺组织 TGF-β1和 ET-1含量。结果：1）与空白组比,模型组大鼠体重较小、肺系数增大、支气管管壁和支气管平滑肌厚度增高以及肺组织 TGF-β1、ET-1表达升高（P ＜0.05）。2）与模型组比,两个药物干预组均可见肺系数、支气管壁和平滑肌厚度以及肺组织 TGF-β1、ET-1含量显著降低;麻杏二三汤组在降低支气管管壁和支气管平滑肌厚度上效果更佳（P ＜0.05）。结论：气道重塑构建中 TGF-β1、ET-1表达与其成正相关;麻杏二三汤可以延缓气道重塑进而治疗哮喘,其机制可能与下调 TGF-β1、ET-1含量有关。     

银杏叶与银杏叶提取物及其片剂中萜类内酯薄层色谱分析

目的研究银杏叶与银杏叶提取物及银杏叶片中萜类内酯薄层色谱鉴别。方法以银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B及银杏内酯C为对象,研究温度对其薄层色谱的影响。结果温度无显著影响。结论该薄层色谱鉴别法可在室温下进行。     

HPLC法测定银杏叶提取物中总黄酮甙含量

目的 :采用 HPL C法测定银杏叶提取物中总黄酮甙含量。方法 :选用 ODS3柱 ,甲醇 - 0 .4%磷酸溶液 (5 0 :5 0 )为流动相 ,检测波长 370 nm。结果 :线性范围在 0 .6 45～ 2 .5 80μg(r=0 .9999) ,平均加样回收率为99.34 % ,RSD为 1.0 6 (n=5 ) ,所测定 3个厂家生产的 9批银杏叶提取物的含量在 2 4.1%～ 2 8.8%之间。结论 :方法简便快速 ,适合于银杏叶提取物的质量控制。     

银杏叶提取物对犬低温体外循环肺损伤的保护作用

目的 观察银杏叶提取物对犬低温体外循环时肺损伤的保护作用。方法 将14只健康杂种犬随机分为对照组和银杏组,每组7只。银杏组在犬麻醉后开胸之前给予银杏叶提取物金纳多8mg/kg静脉滴注,对照组以等量生理盐水同速度静脉滴注。体外循环60min,心脏复跳并循环120min后采集肺组织检测肺组织湿/干重比及通透性,用生化法检测肺组织丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶（MPO)活力、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力,用ELISA法检测肺组织白介素1-β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板活化因子(PAF)水平。结果 与对照组比较,银杏组肺组织湿/干重比减少,通透性降低（P<0.05);MDA含量减少、MPO 活力降低,T-SOD活力升高（P<0.05);IL-1β、IL-8、PAF水平明显降低（P<0.05)。结论 银杏叶提取物对犬低温体外循环肺损伤有较好的保护作用,其机制可能与其减轻体外循环时肺组织缺血再灌注损伤和全身炎症反应相关。     

Extract of Ginkgo biloba induces glutamate cysteine ligase catalytic subunit (GCLC)

The extract of Ginkgo biloba (EGb), containing 24% flavone glycosides and 6% terpenoids, is widely used to treat early-stage Alzheimer's disease, vascular dementia, peripheral claudication and vascular tinnitus. Its marked antioxidant activity has recently been demonstrated in both cell lines and animals. Glutathione (GSH) plays an important role in the antioxidant system by conjugating to xenobiotics to facilitate their export from cells. Glutamate cysteine ligase (GCL) is the rate-limiting enzyme for GSH synthesis and its catalytic subunit (GCLC) determines this de novo synthesis. Thus, induction of GCLC is a strategy to enhance the antioxidant capability in cells. The present study aimed to investigate the induction effect of EGb on GCLC in HepG2 and Hep1c1c7 cell lines. Real-time PCR, Western blot and enzyme activity assay were used to detect induction and it was found that GCLC was induced by EGb in these two cell lines. It is suggested that the antioxidant activity of EGb is (or is partly) through the induction of GCLC.     

银杏叶提取物GBE50对缺氧致内皮细胞功能的影响

目的初步探讨缺氧对人脐静脉内皮细胞功能的影响,以及银杏叶提取物GBE50在其中的作用。方法应用流式细胞技术、TUNEL、RT—PCR及Western blot等方法,探讨缺氧及GBE50对内皮细胞功能的影响。结果缺氧干预内皮细胞24h后,细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平及早期、晚期凋亡率均明显增加,伴随内皮素（endothelin-1,ET-1）mRNA水平及内皮型一氧化氮合成酶（endothelial oxide synthase,eNOS）蛋白水平的升高。缺氧前4h给予GBE50干预后发现,GBE5025μg／ml时可显著降低细胞早期及晚期凋亡率及ET-1 mRNA水平（P〈0．05）,部分降低因缺氧导致的ROS水平及eNOS蛋白表达的增高（P〉0．05）。结论缺氧可导致血管内皮功能障碍,而GBE50可部分或显著逆转缺氧所致的内皮功能障碍,GBE50对缺氧所致的内皮功能障碍有一定的保护作用。     

超高效液相色谱法同时测定银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分的含量

 目的 建立同时测定银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分含量的超高效液相色谱方法。方法 采用UPLC-UV法,色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈(4.6 mm×50 mm, 1.8 μm）,流动相A为乙腈,流动相B为0.4%磷酸,梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速为0.6 mL·min^-1。结果 11种黄酮苷线性良好,加样回收率分别为98.48%（RSD=1.84%）,99.98%（RSD=1.33%）,95.81%（RSD=0.56%）,99.49%（RSD=1.14%）,100.34%（RSD=1.03%）,98.05%（RSD=1.52%）,99.11%（RSD=1.93%）,99.57%（RSD=1.62%）,97.56%（RSD=1.80%）,100.99%（RSD=2.03%）,101.61%（RSD=0.82%）,n=9。44批银杏叶提取物样品中各黄酮苷类成分的含量存在差异。结论 本方法简便快速,结果准确可靠,灵敏度高,重复性好,能够较为精确全面地反映银杏叶提取物中黄酮苷类成分的含量,可用于其质量控制研究。     

银杏叶提取物对神经系统疾病的影响及其作用机制

随着世界人口老龄化的发展及神经系统疾病发病率的升高，对神经系统具有保护作用的临床药物研究正日益受到人们的重视，银杏叶提取物（EGB）便是其中之一。近代实验研究证明EGB的主要有效成分为黄酮和萜类，具有清除自由基、拮抗血小板活化因子、降低血脂、增强中枢神经系统功能、调节神经递质和激素水平、改善血流流变状态、抗炎抗过敏等药理作用。其因具有多种药理作用且不良反应少而引起了医学研究人员的重视，且在临床得到广泛的应用。主要就近年来对EGB对神经系统疾病影响的研究进展做一综述。     

银杏叶提取物对神经系统疾病的影响及其作用机制

随着世界人口老龄化的发展及神经系统疾病发病率的升高,对神经系统具有保护作用的临床药物研究正日益受到人们的重视,银杏叶提取物(EGB)便是其中之一。近代实验研究证明EGB的主要有效成分为黄酮和萜类,具有清除自由基、拮抗血小板活化因子、降低血脂、增强中枢神经系统功能、调节神经递质和激素水平、改善血流流变状态、抗炎抗过敏等药理作用[1]。其因具有多种药理作用且不良反应少而引起了医学研究人员的重视,且在临床得到广泛的应用。主要就近年来对EGB对神经系统疾病影响的研究进展做一综述。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠血管功能的影响

目的:探讨银杏叶提取物对高糖高脂诱导的Ⅱ型糖尿病大鼠血管张力变化的影响及可能的机制.方法:将大鼠随机分为正常对照组(Control)、糖尿病组(DM)、银杏叶提取物高剂量(H)及低剂量(L)组,灌胃5周后检测血清中晚期糖化终产物(AGEs)、血脂的含量和肠系膜上动脉张力变化.结果:H组甘油三酯、胆固醇、AGEs含量明显比DM组降低,高钾激动下,DM组血管的维持相下降明显;去内皮血管苯肾上腺素(PE)激动引起的收缩PD2DM组减少,血管顺应性有下降的趋势.尽管L组变化不明显,但H组对高钾(下降率:22.52±5.48%vs DM:44.19±11.03%,P＜0.05)、PE(PD2:6.15±0.22vsDM:6.62±0.13,P＜0.05)激动的反应明显优于DM组,血管功能学改善明显.结论:银杏叶提取物能降低糖尿病大鼠血清甘油三酯、胆固醇、AGEs含量,减少自由基对血管的损伤,从而改善血管功能病变.     

银杏叶提取物对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用

目的:研究银杏叶提取物对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用.方法:异丙肾上腺素(4 mg·kg~(-1)·d~(-1),10 d,sc)制备大鼠心肌损伤模型并以银杏叶提取物(100 mg·kg~(-1)·d~(-1),13 d,ig)或倍他乐克(10 mg·kg~(-1)·d~(-1),13 d,ig)进行治疗,记录大鼠体重和左心室重,计算心室重指数,测定血流动力学及心肌酶谱AST,LDH,CK,HBDH,CKMB等指标.结果:模型组体重增长速度显著放缓(P＜0.01),心室重指数显著升高(P＜0.05),血流动力学指标显示大鼠心功能显著下降(P＜0.01,P＜0.05),心肌酶谱含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比,银杏叶提取物组体重增长速度变大,心室重指数明显下降(P＜0.05),血清中心肌酶谱含量明显下降(P＜0.05),血流动力学指标明显恢复(P＜0.05),与倍他乐克组无显著差异.结论:银杏叶提取物对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌损伤有保护作用.