蛋白激酶C抑制剂抑制白细胞介素1对胃细胞的作用

用富含成骨细胞的小鼠头颅骨细胞测试白细胞介素（ＩＬ－１）对骨细胞的作用以及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ－７对ＩＬ－１作用的影响。结果表明ＩＬ－１（２５￣１００Ｕ／ｍｌ）呈剂量依赖方式抑制骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性；而对耐酒石酸酸性磷酸酶活性有增强作用。Ｈ－７（５￣２０μｍｏｌ／Ｌ）对ＩＬ－１上述作用具有剂量依赖抑制作用。提示ＩＬ－１对骨细胞的作用可能与ＰＫＣ有关。     

白细胞介素1刺激破骨细胞性骨吸收作用的实验研究

目的：了解白细胞介素1β（IL－1β）在破骨细胞性骨吸收中的刺激作用及其相应的作用机制。方法：分别将新生大鼠破骨细胞单独以及和成骨细胞联合接种于预置象牙片的培养板中。24h后培养液中加入不同浓度的IL－1β。继续培养48h,然后取出象牙片,超声处理后行甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨吸收陷窝的数目并计算其部面积。结果：IL－1β能够明显增加坡骨细胞和成骨细胞联合培养组象牙片上吸收陷窝的数目和面前,且刺激作用呈剂量依赖性,但对单独培养的破骨细胞无明显刺激作用。结论：IL－1β的刺激骨吸收作用由成骨细胞所介导,而非直接作用于破骨细胞。     

降钙素基因相关肽抑制白细胞介素-1介导骨的吸收作用

目的　了解白细胞介素 - 1β(IL - 1β)在破骨细胞性骨吸收中的刺激作用 ,并评价降钙素基因相关肽 (CGRP)的拮抗效果 .方法　将新生大鼠破骨细胞和成骨细胞混合培养 ,接种于预置象牙片的培养板中 .2 4 h后培养液中分别加入 IL-1β和不同浓度的 CGRP.继续培养 4 8h,然后取出象牙片 ,超声处理后行甲苯胺蓝染色 ,光镜下观察骨吸收陷窝数目并计算其总面积 .结果　 IL - 1β明显增加象牙片上吸收陷窝的数目 (37.2± 8.2 vs 2 2 .4± 5 .7) per slice (P <0 .0 1)和面积(μm2 ,976 1± 2 775 vs4 2 2 4± 1381,P<0 .0 1) ,而 CGRP则能够显著抑制 IL- 1β的刺激作用 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,且抑制作用呈剂量依赖性 (r1 =- 0 .5 6 ,P<0 .0 1;r2 =- 0 .4 9,P<0 .0 5 ) .结论　 CGRP可直接作用于破骨细胞并抑制其活化 ,并调节成骨细胞相关因子的释放而间接影响破骨细胞功能 .     

白细胞介素-4对破骨细胞的分化作用

目的:观察IL-4对诱导骨髓干细胞分化形成破骨细胞的作用.方法:用终浓度为10-8 mol.L-1的1,25(OH)2D3诱导成年小鼠骨髓干细胞分化形成破骨细胞,在此过程中加入不同质量浓度梯度的 IL-4(0、0.1、1、10 μg.L-1) 以及用IL-4的抗体中和IL-4.取IL-4(1 μg.L-1)处理过的第6天的培养上清液,先用抗IL-4抗体中和残余IL-4,再以体积分数1%,10%,20%,0加入另一新培养4 d含有骨片的骨髓细胞培养体系中,计数骨片上骨吸收陷窝数及面积,玻片上抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP)阳性多核细胞和单核细胞数.结果:随IL-4(质量)浓度的增加,骨片上形成的骨吸收陷窝及面积数,玻片上的TRAP阳性细胞数呈量的依赖性的减少,加抗体组抵消了IL-4的抑制作用,加条件培养液组和未加组上述参数没有显著差别.结论:IL-4具有抑制骨髓干细胞分化形成破骨细胞的作用,这种作用不是通过使其它细胞形成可溶性因子,可能是直接作用于靶细胞(能分化为破骨细胞和巨噬细胞的前体细胞),使定向分化为TRAP阳性单核细胞的前体细胞转向分化为巨噬细胞, 破骨细胞数目减少,从而抑制了骨吸收.     

白细胞介素1和白细胞介素6在周围神经再生中的作用

目的：采用比较的方法，观察白细胞介素-1（IL-1）和白细胞介素-6（IL-6）在周围神经再生的作用。方法：选用SD大鼠40只，在右后肢坐骨神经形成1cm缺损，取同侧颈静脉桥接，注入不同的实验制剂，分为（1）IL-1和IL-6组；（2）雪旺氏细胞培养液组；（3）IL-1和IL-6封闭组；（4）培养液组作为对照。分别于术后1个月和3个月做电生理测定和组织学观察。结果：电生理测定和组织学观测的结果都显示，第一，二组明显优于第三，四组，结论：IL-1和IL-6有促进周围神经损伤后的再生作用。     

白细胞介素1对鼠甲状腺细胞钙离子的作用

白细胞介素１对鼠甲状腺细胞钙离子的作用巴建明罗国春潘长玉李楠白细胞介素１（ＩＬ－１）对甲状腺功能有抑制作用，但其作用的机理迄今尚不明确。为此，我们利用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）就ＩＬ－１β及促甲状腺激素（ＴＳＨ）对鼠甲状腺（ＦＲＴＬ－５）细胞内...     

白细胞介素24的研究进展

白细胞介素是一组由白细胞产生的在细胞间发挥作用的细胞因子，具有重要的免疫学功能。白细胞介素24（interleukin-24，IL-24）又称黑色素瘤分化相关基因7（melanoma differentiation associated gene-7，mda-7），是1995年美国哥伦比亚大学的Jiang等[1]人通过差减杂交的方法从人干扰素（IFN-β）和蛋白激酶C活化剂mezerein（MEZ）诱导的人类HO-1黑色素瘤细胞中获得的。     

蛋白激酶Pkmyt1对小鼠1-细胞期受精卵发育的抑制作用

目的: 通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wild type(WT) (野生型) mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法: 构建pcDNA3.1/myc- Pkmyt1-WT质粒。超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组和Pkmyt1-WT mRNAs注射组,收集各组卵细胞后采用Western blotting法检测Pkmyt1蛋白表达和Cdc2-pTyr15磷酸化状态;相差显微镜观察受精卵的形态变化并计数卵裂率。结果: pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒构建成功。与未注射组(0.414±0.016)和TE缓冲液注射组(0.441±0.013)比较,受精卵显微注射Pkmyt1-WT mRNAs 4 h后,Pkmyt1蛋白表达水平(1.112±0.025)增高(P<0.01)。与未注射组(60.81%±3.27%)和TE缓冲液注射组(61.79%±4.08%)比较,Pkmyt1-WT-mRNA注射组卵裂率(34.2%±3.25%)显著降低 (P<0.01)。Pkmyt1-WTmRNA注射组在注射hCG后29.0 h检测到微弱的磷酸化信号,29.5 h检测不到任何磷酸化信号。结论: Pkmyt1过表达后磷酸化Cdc2-pTyr15可抑制小鼠1-细胞期受精卵的卵裂率,提示Pkmyt1负调控小鼠受精卵有丝分裂的进程。     

PKC抑制剂与电离辐射对Panc-1凋亡的影响

目的:探讨特异性蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红碱(CH)与小剂量照射联合应用对Panc-1细胞凋亡的作用.方法:采用MTT法检测CH和电离辐射对细胞增殖活性的抑制.用流式细胞仪检测CH与电离辐射对细胞凋亡的诱导.利用免疫细胞化学法检测CH对受照后Panc-1细胞凋亡相关蛋白(p53,Bcl-2,Bax)的影响.应用瑞-吉姆萨染色在光镜下观察细胞的形态学变化.结果:MTT结果显示CH增加了电离辐射对Panc-1增殖活性的抑制,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).流式细胞仪检测显示CH和照射二者具有协同作用,使凋亡指数增加,且呈药物浓度依赖性.免疫细胞化学方法显示CH使受照射后Panc-1细胞的p53和Bax蛋白表达增加,而对Bcl-2蛋白的表达无明显影响.形态学观察可见典型的凋亡小体.结论:CH通过降低Panc-1细胞的凋亡阈值,调节凋亡相关蛋白表达,抑制细胞增殖,提高射线对Panc-1细胞凋亡的诱导,以增加Panc-1细胞对射线的敏感性.     

木犀草素对人白血病HL-60细胞内蛋白激酶C的抑制作用

目的　观察木犀草素对HL- 60细胞内蛋白激酶C活性的影响。方法　采用台盼蓝拒染法,在不同条件下测定细胞增殖的抑制率。PKC活性通过测定转移到CK2 底物上的[γ 32P]ATP的32P的放射性活度来检测。结果　木犀草素能够显著地抑制HL- 60细胞内PKC的活性并呈剂量依赖性关系,其IC50为2.38μmol/L,作用效果强于阳性对照槲皮素(IC50=2.54μmol/L)。结论　木犀草素作为一种细胞内的PKC抑制剂具有潜在的抗肿瘤临床应用价值。     

An experimental study on the regulation of expression of Th2 cytokines from T lymphocytes by protein kinase C in asthma

Summary To explore the regulatory role of protein kinase C (PKC) in the expression of Th₂ cytokines, interleukin-4 (IL-4) and interleukin-5 (IL-5) by T lymphocytes in asthma. T lymphocytes were isolated and purified from blood and bronchial alveolus lavage fluid (BALF) of each guinea pig of normal control group and asthmatic group and from peripheral blood of the asthmatic patients and normal controls, and were stimulated with PKC accelerant phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and inhibitor Ro31-8220. The expression of IL-4 and IL-5 mRNA and protein was detected by using in situ hybridization staining and ELISA respectively. The expression of IL-4 and IL-5 mRNA and protein of asthmatic T lymphocytes stimulated with PMA was significantly higher than that of asthmatic T lymphocytes stimulated without PMA respectively (P<0. 01) and that of normal T lymphocytes stimulated with PMA respectively (P<0. 01). The expression of IL-4 and IL-5 mRNA and protein of asthmatic T lymphocytes stimulated with PMA and Ro31-8220 was significantly lower than that of asthmatic T lymphocytes stimulated only with PMA respectively (P<0. 01). It was concluded that PKC might participate in regulating the expression of IL-4 and IL-5 in asthmatic T lymphocytes, and the activation of PKC in T lymphocytes might play an important role in the pathogenesis of asthma. This project was supported by a grant from National Natural Sciences foundation (No. 30070332) and Education Ministry college cadreman teachers imbursement plan (2000 year).     

蛋白激酶C在兔肺缺血预处理保护中的作用

目的 :探讨蛋白激酶C(PKC)在兔肺缺血预处理保护中的作用。方法 :采用在体兔单肺原位缺血再灌注模型。 5 0只日本大耳兔随机均分为 5组。假手术组 (S)、缺血 /再灌注组 (I/R)、缺血预处理组 (IPC)、多粘菌素B组 (PMB)和缺血预处理加多粘菌素B组 (IPC +PMB)。实验末测血浆SOD活力和MDA含量 ,肺湿干重比和肺泡损伤数比值 ,观察肺超微结构变化。结果 :①I/R组与假手术组相比 ,SOD活力下降 ,MDA含量、湿干重比及肺泡损伤数比值增加 (P均 <0 .0 1)。IPC组与I/R组相比 ,SOD活力增加 ,MDA含量、湿干重比及肺泡损伤数比值下降 (P均 <0 .0 1)。I/R组、PMB组及IPC +PMB组之间的检测指标对比无明显变化 (P均 >0 .0 5 )。②电镜显示I/R组、PMB组及IPC +PMB组均有明显的肺超微结构损伤 ,而IPC组损伤不明显。结论 :缺血预处理对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用 ,且可被PKC抑制剂多粘菌素B取消 ,提示PKC参与肺缺血预处理的保护作用     

支气管哮喘急性发作与C反应蛋白、白细胞介素-8及细胞间黏附分子-1的关系

[目的]探讨C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-8及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)与支气管哮喘急性发作的关系.[方法]采集哮喘急性发作组及缓解组患者静脉血,离心后取血清,利用免疫透射比浊法检测CRP水平,采用酶联免疫吸附法测定IL-8及ICAM-1水平,以28例健康体格检查者作为对照组.[结果]哮喘急性发作组血清CRP,IL-8及ICAM-1水平较缓解组及对照组均明显升高(P<0.01),缓解组血清IL-8和ICAM-1水平与对照组比较均显著增高(P<0.01).[结论]血清CRP,IL-8及ICAM-1水平检测可作为支气管哮喘急性发作期病情分期评估指标.     

Inhibitory effect of matrine on tumor necrosis factor production and protein kinase C activity

ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｍａｔｒｉｎｅｏｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣａｃｔｉｖｉｔｙＺｈａｎｇＪｕｎｐｉｎｇ（张俊平）；ＨｕＺｈｅｎｌｉｎ（胡振林）；ＬｉｎＷｅｎ（林文）；...     

地塞米松及酪氨酸蛋白激酶抑制剂对胃上皮细胞白介素-8分泌抑制作用的实验研究

目的 :探讨慢性胃肠道炎症机制及其防治 ,本文对肿瘤坏死因子和白细胞介素 (白介素 ) 1β诱导的胃上皮细胞白介素 8分泌作用使用地塞米松及酪氨酸蛋白激酶抑制剂进行了体外实验研究。方法 :胃上皮细胞经体外培养后由肿瘤坏死因子和白介素 1β刺激 ,由酶联免疫法检验其白细胞介素 8的分泌 ,并与地塞米松和蛋白激酶抑制剂组相比较。结果 :地塞米松在 10 -8,10 -7,10 -6,10 -5mol/L可抑制肿瘤坏死因子和白介素 1β诱导的胃上皮细胞白介素 8分泌。酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素和核比霉素A具有类似效应 ,但蛋白激酶C和A抑制剂却无抑制效应。结论 :本文结果提示细胞介素诱导的胃上皮细胞白细胞介素 8的分泌可能是促进胃部炎症性疾病的原因之一 ,抑制白细胞介素 8的产生可为胃肠道炎症的防治机制提供理论依据     

蛋白激酶C抑制剂对脑缺血大鼠突触体游离钙的影响

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（Ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ）参与神经损伤机制。方法：采用大鼠全脑缺血模型,观察脑缺血／再灌流后突触体游离钙的变化及ＰＫＣ的抑制剂灯盏花对突触体游离钙的影响。结果：脑缺血／再灌流可以导致突触体游钙增加的抑制剂灯盏花可以阻止脑缺血／再灌流导致突触体游离钙增加。结论：ＰＫＣ参与神经元缺血性损伤可能与其促进钙内流有关。