炒桃仁总蛋白对小鼠B细胞功能影响的实验研究

桃仁作为一味重要的活血化瘀中药 ,在临床主要用于血瘀证的治疗。国内外对它的化学成分和药理活性已进行了不少研究 ,但对桃仁的重要组分—蛋白质 ,其约占桃仁比重的 5 0 % [1] 的研究仅集中在其抗炎、镇痛作用[2 ] ,有关其对免疫功能影响的研究国内未见报道 ,本研究鉴于桃仁临床用药多采用其炮制品 ,故选用炒桃仁提纯总蛋白作为研究对象 ,通过测定抗体形成细胞的产生、血清溶血素的生成、对ＬＰＳ诱导的Ｂ细胞转化功能的影响 ,探讨炒桃仁总蛋白对小鼠Ｂ细胞功能影响 ,以期为该药的临床应用提供实验依据。1　材料与方法1 .1　材料1 .1 .1　…     

肺瘤平膏及其拆方对树突状细胞抗原递呈功能影响的分子机制研究

目的：观察肺瘤平膏及其拆方干预体外培养体系中DC抗原递呈功能的作用并探讨其分子机制。方法：建立体外人血PBMC诱导分化成熟DC的诱导培养体系,从健康人外周血中分离获得PBMC,采用多种细胞因子（TNFα、IL-4、GM-CSF）联合诱导,获得了分化与功能相对成熟的DC,并采用流式细胞仪检测技术,对肺瘤平膏及其拆方含药血清干预成熟DC与抗原递呈功能相关表面分子表达,及其对DC分泌IL-12水平影响进行初步研究。结果：肺瘤平膏可上调DC与抗原递呈功能相关膜分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表达,并促进DC分泌IL-12水平,其方中扶正部分的作用不容忽视。结论：在扶正培本治则指导下的肺瘤平膏能够调节DC抗原递呈功能,提高机体的抗肿瘤免疫监视功能。     

用基因芯片研究桃仁蛋白A对小鼠纤维肉瘤基因表达的影响

目的:本研究用基因表达谱芯片研究桃仁蛋白A(PSPA)对小鼠纤维肉瘤基因表达的影响.方法:将4096条小鼠cDNA用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片,利用实验组和对照组肿瘤组织的mRNA通过逆转录方法,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上,制成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,重复2次实验.结果:通过计算机数据处理,筛出差异表达的基因64条.结论:PSPA通过影响相关基因的表达发挥抗肿瘤作用.     

脾虚型慢性乙型肝炎患者树突细胞功能的变化

目的 探讨脾虚型慢性乙型肝炎患者树突状细胞(DC)的功能变化.方珐分离培养慢性乙型肝炎脾虚、非脾虚患者及健康人外周血DC,以倒置显微镜和电镜观察DC外部形态和超微结构,流式细胞仪测定DC表面HLA-DR、CD86、CD80、CD40、CD14、CD11c的表达,混合淋巴细胞反应测定两组DC的功能.结果 慢性乙型肝炎脾虚组DC表面的协同刺激分子HLA-DR、CD86、CD80、CD40、CD11c均较正常对照组明显降低(P<0.01);与非脾虚组相比,脾虚组HLA-DR、CD80、CD11c降低明显(P<0.05).两组DC的刺激活性均降低,且脾虚组比非脾虚组降低更明显(P<0.05).结论 慢性乙型肝炎脾虚患者的DC成熟度降低,功能缺陷,提示脾虚与DC成熟障碍具有明显的相关性.     

调节DC抗原递呈功能——中西医结合抗肿瘤免疫治疗思路研究

细胞免疫应答是机体抗肿瘤主动免疫应答反应的主要途径。抗原递呈细胞(antigen-presenting cell,APC)尤其是分化成熟的树突状细胞(dendritic cell,DC)向T细胞(包括CD4^+、CD8^+细胞)有效地递呈肿瘤抗原,是机体抗肿瘤免疫应答的关键。现已证实DC数量的多少与肿瘤浸润程度、淋巴结转移和预后密切相关。近年来有关DC参与肿瘤特异性主动免疫     

健脾方对脾虚型慢性乙型肝炎患者树突细胞功能的影响

目的研究健脾方对慢性乙型肝炎（简称慢乙肝）患者树突细胞（DC）功能的影响。方法筛选慢乙肝脾虚证患者60例,随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予干扰素（赛诺金500万U,肌肉注射,每周3次）,治疗组在此基础上加用健脾方（每日1剂,分2次服用）,用药6个月。分离培养外周血DC,流式细胞仪测定DC表面HLA-DR、CD86、cD80、CD40、CD14、CD11c的表达,混合淋巴细胞反应测定两组DC的功能,治疗前后各检测1次。结果治疗组DC表面的CD86、CD80、CD40、CD11c明显高于对照组（P〈0．01或P〈0．05）。刺激指数、IFN-γ、IL-12的变化亦显著优于对照组（P〈0．05）。结论健脾方明显改善DC的功能,调节免疫功能可能是其提高临床疗效的机理之一。     

桃仁承气汤对小白鼠免疫机能的影响

20g／kg．10g／kg桃仁承气汤能提高脾脏和胸腺指数、抗体滴度、T淋巴细胞酯酶染色阳性率和吞噬率。结果表明，该方对机体的特异性和非特异性免疫机能均有增强作用。     

桃仁蛋白梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究

电泳作为一种分离蛋白质的手段已是含蛋白中药材鉴定的常用方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳( PAGE)是利用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合形成的立体网状物作为载体对不同的带电物质进行分离的电泳方法。梯度 PAGE是 PAGE的改进方法 ,可用来将不同大小的蛋白质分开 ,配合标准相对分子质量蛋白可以对待测蛋白质进行相对分子质量测定。从已有的资料来看 ,用于鉴定的电泳方法有平板PAGE[1] ,圆盘 PAGE[2 ] ,SDS- PAGE[3] ,高效毛细管电泳 [4 ] ,同功酶等电聚焦 [5] ,醋酸纤维薄膜电泳 [6]等。到目前为止 ,还未见用梯度 PAGE法进行中药鉴定…     

桃仁承气汤对兔体外血栓形成和血小板粘附功能的影响

桃仁承气汤(TRCQT)为《伤寒论》经方。本文发现它有抑制兔体外血栓形成和抑制血小板粘附的功能,但对小白鼠血小板数无影响。因而为抗血栓形成提供了药理依据。     

桃仁总蛋白对荷瘤鼠IL-2、IL-4水平的影响

以荷瘤小鼠作为研究对象从IL-2、IL-4等细胞因子水平变化来探讨桃仁总蛋白的免疫调节和抗肿瘤活性.方法:分为模型组、实验组、环磷酰胺(CY)组、联合用药组和正常对照组,采用ELISA法测定IL-2、IL-4水平.结果:PSP能提高血清IL-2、IL-4水平,改善荷瘤机体免疫功能低下状态.     

桃仁蛋白的单剂量及重复给药毒性试验

目的:通过桃仁蛋白单剂量及重复给药毒性试验,评价该药物用药安全性。方法:①单剂量毒性试验方法:在一日内单次给药。动物选择:昆明小鼠;给药途径:腹腔注射;②重复给药毒性试验方法:固定剂量每日连续给药。动物选择:W istar大鼠;给药途径:腹腔注射。结果:单剂量毒性试验结果提示,最大耐受剂量为300mg/(kg.d);重复给药毒性试验结果提示在给药期及恢复期对大鼠红细胞、白细胞、血小板等全血指标、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌酐、尿素氮、总蛋白、白蛋白、胆固醇、血糖等血清指标均无明显影响;心、肝、脾、肺、肾等10个脏器大体标本外观、病理切片组织学结构无明显异常。结论:桃仁蛋白腹腔注射无急性和长期毒性作用。     

大剂量黄芪对急性白血病患儿外周血树突状细胞的诱导和抗原呈递功能的影响

目的观察大剂量黄芪对急性白血病患儿外周血单核细胞体外诱导扩增为树突状细胞（DC）及对DC抗原呈递功能的影响。方法44例急性白血病完全缓解期患儿分为黄芪组与对照组,黄芪组20例,对照组24例。黄芪组于常规化疗同时应用大剂量黄芪（90g／d）1个月,对照组仅常规化疗。提取两组外周血单个核细胞（MNC）,贴壁获得单核细胞,加入白细胞介素-4（IL-4）、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、肿瘤坏死因子（TNF-α）等细胞因子培养7～8天,利用流式细胞仪进行DC的表型鉴定,用混合淋巴细胞反应鉴定DC的抗原呈递能力。结果黄芪组与对照组从外周血单核细胞诱导生成的DC形态学差异无显著性;黄芪组DC的细胞数量平均为4．4×10^6／2．5×10^6MNC,对照组DC的数量平均为2．6×10^6／2．5×10^6MNC,两组比较差异有显著性（P〈0．001）;黄芪组DC可较强地刺激同种异体淋巴细胞增殖,与对照组比较差异有显著性（P〈0．001）。结论大剂量黄芪可提高急性白血病患者外周血单核细胞诱导生成DC的数量并增强DC的抗原呈递功能。     

人参蛋白对小鼠免疫功能影响的研究

目的:探讨人参蛋白对小鼠免疫功能的影响。方法:选用昆明小鼠,分别进行对二硝基氟苯(DNFB)致小鼠迟发性超敏(DTH)反应实验、小鼠炭廓清实验、耐缺氧实验及常温游泳实验,并测定肝脏SOD、MDA含量。结果:人参蛋白对DNFB致小鼠耳肿胀具有明显增强作用(P0.01),可明显提高碳廓清实验小鼠吞噬指数,增加小鼠脾和胸腺脏器指数(P0.01),延长小鼠游泳时间及耐缺氧时间(P0.05),提高肝脏SOD含量并降低MDA含量(P0.05)。结论:人参蛋白具有增强小鼠细胞免疫、单核—巨噬细胞功能、增加免疫器官重量、耐缺氧、抗疲劳、抗氧化作用。     

中药对冠心病患者C反应蛋白、内皮功能的影响

冠心病发生是多种危险因素共同作用的结果,炎症因子、内皮功能的损伤与冠心病发生尤为密切,就中药对冠心病患者C反应蛋白、内皮功能影响的研究进展,分析旨在探讨更好地防治冠心病。     

HepG2肝癌细胞外泌体对人树突状细胞成熟与功能的影响

目的:观察HepG2肝癌细胞外泌体对人树突状细胞(Dendritic cells,DC)成熟和功能的影响。方法:采用透射电镜、Nano FCM和Western Blot鉴定和测定外泌体的形态、粒径分布及特征性蛋白的表达,用细胞因子GM-CSF(20 ng/ml)、IL-4(10 ng/ml)、IFN-β(105U/ml)和LPS(10 ng/ml)诱导刺激DC成熟,用流式细胞术检测DC成熟相关表面分子CD80、CD83、CD86、HLA-DR的表达,ELISA检测培养上清液中细胞因子IL-12的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果:HepG2、MIHA来源外泌体表达CD63、Alix,同时不表达细胞色素C(Cytochrome C);在HepG2肝癌细胞外泌体刺激下,DC的CD80、CD83阳性表达率较仅加入LPS的对照组明显降低(P<0.05),而CD86、HLA-DR表达较对照组无明显差异;ELISA测定结果显示,200μg/ml HepG2 EXO干预后的DC较对照组分泌IL-12的量明显减少(P<0.05);CCK-8检测显示,200μg/ml HepG2EXO干预的DC较对照组刺激异体淋巴细胞增殖的能力明显降低(P<0.05)。结论:HepG2肝癌细胞外泌体对DC表面成熟相关分子表达、细胞因子的分泌、刺激异体T淋巴细胞增殖的能力均有一定的抑制作用。     

绿豆蛋白对染铅大鼠肾功能及SOD、MDA的影响

目的:观察绿豆提取物蛋白A与蛋白B对染铅大鼠肾功能及抗氧化活性的影响。方法:建立染铅大鼠模型,连续给药30天,测定血肌酐、血尿素氮及血尿酸、血清SOD及MDA。结果:绿豆蛋白B(30g/kg)对能降低染铅大鼠血肌酐、血尿素氮及血尿酸含量(P<0.05),绿豆蛋白A(15g/kg)、绿豆蛋白B(30g/kg)均能显著性降低染铅大鼠的血清MDA含量,绿豆蛋白B(30g/kg)显著性提高染铅大鼠的血清SOD活力(P<0.05)。结论:绿豆蛋白对染铅大鼠具有一定的改善肾功能及提高抗氧化的作用。     

血脂康对慢性心力衰竭患者心功能、血清C-反应蛋白和血脂的影响

目的探讨血脂康对慢性心力衰竭（CHF）患者心功能和血清C-反应蛋白（CRP）的影响。方法68例患者随机分为两组,对照组（30例）应用血管紧张素转换酶抑制剂、B受体阻滞剂、利尿剂和洋地黄制剂治疗,血脂康组（38例）在对照组基础上加用血脂康治疗0．5年,治疗前后采用超声心动图和酶联免疫法分别测定心功能和CRP水平。结果（1）NYHA心功能分级、左室舒张期末内径和左室收缩期末内径治疗后两组均显著下降（P〈0．05）,且血脂康组显著低于对照组（P〈0．05）;左室射血分数和E／A峰比值显著上升（P〈0．05）,且血脂康组显著高于对照组（P〈0．05）。（2）CRP：治疗后血脂康组较治疗前显著降低（P〈0．01）,且显著低于对照组（P〈0．05）;对照组治疗前后比较差异无显著性。结论血脂康在改善心功能的同时能降低血清CRP水平。     

黄芪多糖诱导脐血单核细胞分化为树突状细胞的实验研究

目的：探讨黄芪多糖在体外对脐血单核细胞向树突状细胞分化的作用。方法：无菌奈件下采集脐血，用淋巴细胞分离液分离获得脐血单个核细胞。将获得的单核细胞分为2组，实验组：在含有不同浓度（50、100、200mg／L）黄芪多糖的10％胎牛血清的RPMI-1640完全培养液中培养；对照组：在未加黄芪多糖的RPMI-1640完全培养液中培养。培养过程中用倒置光学显微镜和扫描电镜观察细胞形态；收集部分培养第12天的细胞利用流式细胞仪检测两组细胞表面CD1a、CD80、CD83、CD86分子的表达。结果：在培养的第72h后实验组细胞形态开始变化，随着培养时间的延长，树突状结构更加明显，第12天细胞呈典型的树突状细胞形态；对照组细胞生长缓慢。细胞无成簇生长，培养至第12天细胞呈梭形巨噬细胞形态。培养至10天的实验组细胞扫描电镜下可见细胞表面粗糙，胞体突起成不规则形态，突起的长短、粗细、薄厚不等。培养12天后实验组细胞别高达DCs特异性抗原CD1a、CD80、CD83和CD86，与对照组对应比较差异均有显著性（P〈0．01）。结论：黄芪多糖体外可诱导脐血单核细胞（DCs前体细胞）定向分化功能性（成熟）DCs。     

桃仁炮制的初步实验研究

对桃仁的4种不同炮制规格(生、蝉、炒、蒸品),进行了水、醇、醚溶性浸出物和苦杏仁甙的含量测定分析。比较了4种样品煎液的安全性。为桃仁的合理应用提供了初步的实验依据。