放射线治疗诱发脑肿瘤的研究进展

放射治疗随着医疗设备和治疗技术的不断进展,目前已广泛应用于颅脑部的肿瘤及一些良性疾病。随着颅脑放疗的临床应用,陆续有放疗远期严重并发症———诱发脑肿瘤的报道。本文从放射线治疗诱发脑肿瘤的病因学研究、判定标准及诱发类型、潜伏期及发病率、影响因素、治疗与预后等问题的研究现状进行综述。     

神经减压缓解糖尿病大鼠触诱发痛的机制研究

目的探讨周围神经减压术缓解糖尿病大鼠触诱发痛的机制。方法将健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组,分别为Ⅰ组(正常对照,n=10)、Ⅱ组(糖尿病模型,n=20)、Ⅲ组(糖尿病模型+乳胶管置入,n=10)、Ⅳ组(糖尿病模型+乳胶管置入+神经减压,n=10)及Ⅴ组(糖尿病模型+乳胶管置入+单纯术区显露,n=10)。糖尿病模型采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,神经减压法即去除坐骨神经乳胶管。建模后3 d,采用up-down法检测各组大鼠的缩足阈值,保留Ⅱ~Ⅴ组中出现触诱发痛的大鼠。采用透射电镜观察5组大鼠坐骨神经的形态,分别对有髓和无髓神经纤维进行测量。进一步采用蛋白质免疫印迹(WB)和免疫荧光实验对5组大鼠脊髓后角γ-氨基丁酸B型(GABAB)受体的表达进行定量和定位检测。结果术后3周,STZ注射结合乳胶管置入(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)较单纯性STZ注射(Ⅱ组)大鼠触诱发痛的发生率高[分别为86.7%(26/30)、55.0%(11/20),χ^2=6.254,P=0.012]。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的缩足阈值[分别为(4.06±1.28)g、(3.09±1.43)g、(4.02±1.96)g、(4.15±1.87)g]均低于Ⅰ组[(13.41±1.88)g,均P<0.05];术后5周,Ⅳ组的缩足阈值高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组(均P<0.05)。电镜观察结果显示,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组有髓和无髓神经纤维的面积、密度均较Ⅰ组减小(均P<0.05),有髓神经纤维的g比例较Ⅰ组增加(均P<0.05);Ⅳ组有髓纤维的面积和密度均大于Ⅱ、Ⅴ组(均P<0.05)、g比例低于Ⅱ、Ⅴ组(均P<0.05)。WB结果显示,神经减压术后3周,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组GABAB受体的表达量均较Ⅰ组下降(均P<0.05),而Ⅳ组高于Ⅴ组(P<0.05)。免疫荧光结果显示,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组中GABAB受体在脊髓背角内神经丝蛋白(NF)-200+区和NF-200+神经元的表达均较Ⅰ组下调(均P<0.05)。结论周围神经减压术可缓解糖尿病大鼠触诱发痛,主要通过去除有髓神经纤维的压迫、解除GABAB受体下调介导的中枢敏化,从而恢复脊髓兴奋性升高的病理状态。     

经胎盘诱发脑肿瘤动物模型的发生发展过程初探

一、材料与方法1 材料 :本实验选用Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｅｌｙ大鼠 (ＳＤ)。所用药物为 :五硝基乙基脲 ,(ＮＥＵ)Ｓｉｇｍａ公司 ;抗ＧＦＡＰ单克隆抗体 ,ＺＹＭＥＤ公司 ;ＨＲＰ ,生物素标记羊抗鼠ＩｇＧ ,羊血清 ,ＤＡＢ显色剂等均购自北京中山公司。2 方法 :(1)肿瘤实验组 :取孕17天ＳＤ大鼠 12只 ,腹腔内注射ＮＥＵ ,剂量为 10 0ｍｇ/ｋｇ。共产子鼠12 0只 ,母乳喂养 30天后雌雄分开。处死时间为产后 30、 6 0、 90、 12 0天各 2 0只、 15 0天 40只。 (2 )母乳对照组 :取孕 17天ＳＤ大鼠 8只 ,分娩后即给母鼠经腹腔内注射相同剂量的(Ｎ…     

U251细胞系来源的脑肿瘤干细胞原位移植瘤动物模型的建立

目的 从U251细胞系中分离脑肿瘤干细胞并以其为移植物建立动物模型.方法 应用悬浮培养法获得脑肿瘤干细胞,用免疫磁珠分选法分离CD133阳性和阴性细胞;将上述3种细胞植入裸鼠颅内.取移植组织切片观察及进行再培养.结果 免疫磁珠分离技术可获得CD133阳性细胞.悬浮培养法所得的细胞和CD133阳性及阴性细胞进行裸鼠原位移植的成瘤率分别为71.4％、80％和0％.结论 U251细胞系中存在脑肿瘤干细胞.裸鼠颅内注射移植脑肿瘤干细胞能够建立肿瘤模型.     

左旋多巴诱发异动症大鼠模型基底节区谷氨酸脱羧酶表达的研究

目的 研究左旋多巴诱发异动症(LID)大鼠模型尾壳核、苍白球及黑质网状部谷氨酸脱羧酶(GAD)表达的变化。方法用免疫组织化学方法观测大鼠尾壳核、苍白球及黑质网状部GAD的表达变化，用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪与免疫组织化学相结合的双重反应技术观测GAD的细胞分布状况。结果 LID大鼠较正常及非LID大鼠尾壳核区GAD明显增加，尤其在尾壳核外侧区增加更明显，且主要分布在纹状体黑质神经元内，苍白球区GAD明显增加，而黑质网状部GAD减少。结论 大鼠基底节区GAD表达变化与LID的发生有关，直接通路活动异常及基底节环路功能异常参与大鼠LID的发生。     

建立脑肿瘤裸小鼠原位移植模型的方法探讨

目的 探讨建立脑肿瘤裸小鼠原位移植模型的方法.方法 于脑立体定向仪辅助定位下,分别将经体外培养的脑肿瘤干细胞球(SU-1和SU-2)和人多形性胶质母细胞瘤细胞系单细胞悬液缓慢注射至裸小鼠右侧尾状核;徒手将SHG44细胞皮下移植瘤组织块、人多形性胶质母细胞瘤体外细胞系移植成功获得的颅内肿瘤组织块和肺癌脑转移瘤组织块接种于裸小鼠右侧尾状核,HE染色检测不同来源肿瘤细胞致瘤率.结果 细胞悬液注射法致瘤率为100%(45/45).肿瘤组织块直接移植法致瘤率分别为:SHG44细胞皮下移植瘤为93.33%(14/15),人多形性胶质母细胞瘤体外细胞系移植瘤为98.46%(128/130),肺癌脑转移瘤为72.31%(47/65);裸小鼠死亡率为1.41%(3/213).形成的可移植性肿瘤分为侵袭性明显和不明显两种类型,与亲本肿瘤特征一致.结论 两种移植方法均可成功制备包括脑肿瘤干细胞在内的人胶质瘤裸小鼠原位移植模型,反映了亲本肿瘤最基本的致瘤性和侵袭性特征.细胞悬液注射法操作时间较长,但为体外培养的单个细胞和细胞球移植所必须;肿瘤组织块直接移植法可用于临床肿瘤、可移植性肿瘤的直接接种,操作时间短、效率高,适用于批量实验.     

毗邻中央沟脑肿瘤对体感诱发磁场的影响

目的 探讨毗邻中央沟脑肿瘤对体感诱发磁场的影响.方法 回顾性分析16例邻近中央沟脑肿瘤病人的脑磁图结果.其中高级别恶性肿瘤7例,低级别恶性肿瘤9例.对不同恶性程度肿瘤病人的双侧体感诱发磁场强度进行统计学分析.结果 高级别恶性肿瘤病侧半球的体感诱发磁场强度显著性高于对侧半球(P＜0.05),而低级别肿瘤病侧与对侧半球之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 对比脑肿瘤病侧与健侧体感磁场强度的变化,有助于判断肿瘤是否浸润邻近脑功能区,从而判断预后.     

男性精神分裂症患者视觉诱发磁场的初步研究

目的:以脑磁图(MEG)研究精神分裂症患者视觉诱发磁场(VEFs)的特点. 方法:20例男性精神分裂症患者(患者组)和13名正常人(对照组),给予右眼左半垂直视野黑白翻转格图形视觉刺激,记录受试者VEFs的M100波形、潜伏期、振幅及激活脑区的等电流偶极(ECD)的磁源性影像(MSI)的XYZ值. 结果:所有受试者VEFs的最基本波形为M100,位于距状裂两侧的皮质.与对照组比较,患者组VEFs的M100波形存在异常,潜伏期明显延长,振幅显著降低(P均<0.05);且ECD的XYZ值显示其M100反应的ECD位置在X轴上分布偏移. 结论:MEG可检测出精神分裂症患者VEFs存在异常,其视觉皮质中枢功能亦存在异常.     

神经干细胞和脑肿瘤干细胞相关性研究

1992年Reynolds从小鼠纹状体分离到神经干细胞（NSC），2003年Sing从脑肿瘤组织中分离到脑肿瘤干细胞（BTSC），这是神经科学领域发生的具有里程碑意义的两次突破性进展．其中NSC和BTSC之间的关系是当今神经肿瘤学界的热门话题。本文结合笔者近年的研究，介绍两者的相似性和不同点、BTSC是否起源于NSC，旨在为脑肿瘤起源细胞和分子病因研究提供新思路，为分子外科治疗寻找新靶点。     

原发和复发脑肿瘤干细胞的生物学特征观察

目的 比较原发和复发脑肿瘤干细胞的牛物学特征.方法 源于同一患者的原发和复发脑肿瘤干细胞在干细胞培养液中长期传代培养、冻存和复苏,观察其生物学特性.结果 在于细胞培养液中培养出了悬浮的干细胞球,加血清培养时能贴壁分化为多形性瘤细胞.两者都具有分化抑制特性,染色体为异倍体.肿瘤球裸小鼠原位移植,原发为局部侵袭性生长,复发为广泛浸润、播散性生长.结论 对同一患者原发和复发脑肿瘤干细胞生物学特征比较,可为进一步研究肿瘤发生、发展、侵袭和播散等拓展思路.     

高岭土诱导大鼠脑积水模型的建立和监测

目的 高岭土诱导Wistar大鼠脑积水后系统监测大鼠体质量、颅内压、脑室面积和胼胝体厚度的改变.方法 雄性Wistar大鼠60只,按随机数字表顺序分为实验组(n＝40)和对照组(n=20).实验组40只大鼠再随机分为A、B、C、D、E五个亚组,向枕大池内注入25％无菌高岭土混悬液0.1 ml;对照组注入等量无菌生理盐水,注入后3d、1周、2周、4周和8周后行体质量、MRI检查及颅内压监测,经视交叉切片测量胼胝体厚度.结果 实验组共有23只大鼠脑室不同程度的扩大,侧脑室随时间延长逐渐扩大;脑积水大鼠体质量明显低于对照组;颅内压在高岭土注入后3d明显增高,7d左右达峰值,8周时颅内压有所下降,但仍明显高于正常值;胼胝体厚度随脑室扩张逐渐变薄.结论 高岭土注入枕大池可成功诱导建立大鼠交通性脑积水模型,脑积水后大鼠体质量、颅内压、脑室扩张和胼胝体厚度呈一系列连续的变化,不同时间窗各有特点.     

抑郁模型大鼠脑内色氨酸及5-羟色胺的改变

目的研究慢性轻度不可预见性应激抑郁模型大鼠脑内色氨酸(TP)及5-羟色胺(5-HT)含量的变化,探讨抑郁障碍可能发病机制。方法将大鼠随机分为抑郁模型组(10只,以下简称抑郁组)和对照组(10只),对抑郁组大鼠进行连续21d的慢性应激。进行行为学观察;用高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠脑内海马、前额叶、下丘脑和纹状体4个部位的5-HT及TP含量。结果(1)抑郁组大鼠慢性应激后的自主活动为(35±9)分,明显低于对照组的(73±9)分,差异有统计学意义(P<0.001)。(2)抑郁组大鼠海马、前额叶5-HT含量分别为(0.34±0.08)ng/mg组织和(0.55±0.06)ng/mg组织,均低于对照组[分别为(0.46±0.06)ng/mg组织和(0.66±0.09)ng/mg组织],差异均有统计学意义(P均<0.01);TP含量分别为(3.76±0.34)ng/mg组织和(4.08±0.51)ng/mg组织,均高于对照组[分别为(3.23±0.38)ng/mg组织和(3.49±0.44)ng/mg组织],差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组大鼠下丘脑和纹状体5-HT及TP含量的差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论脑内5-HT的合成功能降低是抑郁障碍的可能发病机制之一。     

Glial fibrillary acidic protein (GFAP) in rat brain tumors transplacentally induced by ethylnitrosourea (ENU)

The immunohistochemical distribution of glial fibrillary acidic protein (GFAP) in neoplastic lesions induced in the rat by ENU is reported. GFAP was present in hypertrophic reactive astrocytes, which were numerous in early neoplastic proliferations, in microtumors of the white matter, and in those collected at the periphery of large tumors. They were absent in cortical oligodendroglial foci and microtumors. No GFAP-positive cells were observed in hyperplasias of the white matter: astrocyte-like cells of large tumors were GFAP-negative. The significance of reactive astrocytes and the problem of the astrocytic component in transplacental ENU tumors are discussed.     

高脂诱导肥胖小鼠焦虑表型的评价

目的：研究高脂食物诱导肥胖小鼠的焦虑样行为。方法将12只C57BL／6J雌性小鼠随机分为2组,分别喂养高脂食物及普通食物8周,观察小鼠的体质量变化,用高架十字迷宫、黑白箱、新物体刺激实验测定动物的行为。结果模型组小鼠在高架十字迷宫、黑白箱、新物体刺激实验中均有明显的焦虑表现。结论高脂食物可作为一种诱导肥胖伴焦虑小鼠模型的造模方式,为进一步研究两者之间的关系提供工具支持。     

犬顽固性颅内高压模型的初步建立

目的 通过建立犬脑顽固性颅高压模型,从基础实验层面出发,加深了解外伤后顽固性颅高压的病理生理学机制.方法 杂种犬10只,制作脑硬膜外水囊压迫模型,动态监测压迫及解压后3 h过程中的动脉压、颅内压、脑电图等多种神经生理指标变化情况.结果 (1)在水囊体积最大时刻,平均动脉压(97.5±7.8)mmHg及脑温(35.6±0.36)℃分别较其基础值(83.7±13.0)mmHg、(36.8±0.30)℃有显著升高(P=0.023)及降低(P<0.05).(2)随着水囊体积增大,颅内压逐渐升高伴脑灌注压不断降低.(3)解压后,再次出现类似水囊压迫的二次顽固性颅高压(62.2±6.6)mmHg.结论 本实验初步复制出了类似于人类脑外伤后继发性顽固性颅内高压的动物模型,具有较好的可靠性及可重复性.多项生理指标的监测为进一步加深了解该发病机制提供了可靠的依据.     

A preliminary investigation of promotion of brain tumours by hexachlorophane in Sprague-Dawley rats transplacentally exposed to N-ethylnitrosourea

Two-stage carcinogenesis (initiation and promotion) has been demonstrated in various mammalian tissues, but there is no conclusive evidence that it occurs in the nervous system. The present work has investigated the possibility that it might occur in the brain of the rat. Pregnant Sprague-Dawley rats were given an initiating dose (10 mg/kg intravenously (i.v.)) of N-ethylnitrosourea (ENU), which resulted in a low but consistent yield of brain tumours in the offspring. The dose was determined in a prior dose-response investigation. The 'initiated' offspring were treated postnatally with the putative promoter, hexachlorophane, and its ability to increase tumour incidence was examined by standardized step sectioning of the brain from rats killed at 6 months. There was no evidence of promotion of ENU-induced brain neoplasms by hexachlorophane in the rat. The experimental procedure led to a reproducible incidence of glial tumours in the pups.     

创伤性脑损伤大鼠海马蛋白质差异表达研究

目的 应用蛋白质组学方法分析研究大鼠创伤性脑损伤后海马组织差异表达蛋白质,为筛选脑损伤早期诊断的生物学标志物提供理论依据.方法 采用双向凝胶电泳分离总蛋白,硝酸银染色,PDQuest 7.0图像分析软件分析获得的差异蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对检测到的差异蛋白质点进行鉴定,获得肽质量指纹图谱,查阅蛋白质数据库得到所需蛋白质相关信息,分析大鼠创伤性脑损伤后4 h、8 h、12 h、24 h和48 h海马组织中差异表达蛋白质,每组样品电泳重复3次,每帧图谱检测到1800余个蛋白质点;选择2个背景清晰、重复性及分辨力良好、在各组表达差异明显并呈现时序性变化的蛋白质点进行质谱分析.结果 经双向凝胶电泳分离共获得18帧图,每组3帧,其中对照组及损伤后12 h组蛋白质图谱显示分离效果良好,蛋白质点清晰,点染色程度较深,数目较多.横纹和纵纹较少,图谱平均匹配率>80%.采用PDQuest 7.0图像分析软件对蛋白质图谱进行定量分析证实,相对分子质量为58.00×103的差异蛋白质为葡萄糖调节蛋白(葡萄糖调节蛋白58),在损伤后4 h、8 h和12 h表达水平上调;相对分子质量为28.40×103的差异蛋白质为蛋白酶体α亚单位3型.在损伤后4 h、8 h、12 h、24 h和48 h表达水平均上调.结论 葡萄糖调节蛋白58和蛋白酶体α亚单位3型可能与创伤性脑损伤的发生、发展密切相关,此为探讨脑损伤的发病机制提供了重要线索.     

尼莫地平对实验性脑损伤的治疗作用

目的研究钙拮抗剂尼莫地平对实验性颅脑创伤的治疗作用及其机制.方法采用家兔落体致伤闭合性颅脑创伤模型,致伤后静脉给予尼莫地平治疗,于电子显微镜下观察脑组织超微结构变化;以干湿法测定脑组织含水量;荧光标记法测定神经细胞胞浆内游离Ca2+水平;经颅多普勒超声仪观察大脑中动脉血流速度变化;并结合颅内压监测综合评定尼莫地平对实验性颅脑创伤的治疗作用.结果尼莫地平治疗组家兔神经细胞胞浆内的游离Ca2+水平显著下降,脑组织毒性损害表现减轻,大脑中动脉痉挛得到改善,脑水肿程度减轻,但颅内压变化与未用药组相比差异无显著性意义(P＞0.05).结论尼莫地平可阻断脑损伤后神经细胞"钙超载"引起的一系列病理过程,解除脑血管痉挛,改善脑血流量,具有保护脑组织的作用.     

选择性血管结扎法建立大鼠脑动脉瘤模型

目的 探讨选择性血管结扎法对大鼠脑动脉瘤形成的影响.方法 SD大鼠50只,随机分为3组:(1)A组20只:结扎左侧颈总动脉+两侧肾动脉后支(各侧1支);(2)B组20只:"8"字形结扎左侧颈内、外动脉+电凝并切断两侧肾动脉(各侧只留1个分支);(3)C组为假手术组10只.术后喂养含0.9%的盐及0.12%β-氨基丙腈的饲料.4周后处死,取大鼠脑动脉Willis环,在光镜下观察其病理的变化.结果 A组大鼠ACA/OA分叉处均未见有进展期动脉瘤,仅3个早期动脉瘤样改变.B组大鼠中发现12个进展期动脉瘤和2个早期动脉瘤样改变.C组中未见动脉瘤形成.结论 血管壁结构的破坏或变弱和高血液动力学压力是动脉瘤形成的主要因素.     

大鼠尾壳核内注射凝血酶对AQP4蛋白表达的影响

目的研究凝血酶对水孔蛋白-4(aqaporin-4,AQP4)表达的影响及引起脑出血后脑水肿形成的机制.方法在立体定向仪下向大鼠右侧尾壳核注射15 U凝血酶,在不同时间段对注射部位邻近脑组织AQP4蛋白进行免疫组化检测.结果注射凝血酶6 h后尾壳核AQP4蛋白表达开始增高,在第1 d达高峰,并维持到第3 d,以后逐渐下降到正常水平.结论凝血酶能促进脑微血管周围的AQP4蛋白表达的增加,加速水分的跨膜流动,引起星形胶质细胞水肿和血脑屏障的破坏,导致脑出血早期阶段脑水肿的发生.