MPTP诱导小鼠肝脏帕金森病样病理变化研究

目的 研究1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型中肝脏生理功能变化和病理改变.方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组和模型组,皮下注...     

MPTP诱导野生型和A53T转基因型小鼠帕金森病模型纹状体中神经递质变化

目的 探究帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型纹状体中多巴胺等神经递质的变化.方法 通过腹腔注射丙磺舒(probenecid)、皮下注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)制备PD野...     

中药提取物CTE对MPTP所致帕金森病小鼠模型的神经保护作用

目的:研究中药提取物CTE对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病小鼠模型是否具有神经保护作用。方法:首先建立MPTP所致帕金森病小鼠模型,连续4 d给予MPTP(30 mg.kg-1,qd,ip)。用高低剂量(50和100 mg.kg-1,qd,ig)中药提取物CTE预处理MPTP所致帕金森模型小鼠。之后进行行为学检测,包括一般行为学检测和滚筒实验。最后,用HPLC-EC法测定纹状体中多巴胺(DA)及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量。结果:在MPTP所致的帕金森病小鼠模型,中药提取物CTE能显著改善小鼠的行为能力;且能显著提高小鼠纹状体内多巴胺含量。结论:中药提取物CTE对MPTP所致帕金森病小鼠模型有神经保护作用。     

基于PKA信号通路探讨胆南星对MPTP诱导帕金森病模型小鼠的保护作用

目的 探讨胆南星对帕金森病（PD）模型小鼠的改善作用及可能机制。方法 将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、胆南星低剂量组[0.39 g/（kg·d）]、胆南星高剂量组[1.56 g/（kg·d）]和阳性对照药左旋多巴片组[80 mg/（kg·d）],每组12只。除正常组小鼠注射等体积生理盐水外,其余各组连续5 d腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶[MPTP,35 mg/（kg·d）]建立亚急性PD模型;造模完成后连续给药治疗7 d,于造模前1 d、造模第5天和末次给药后进行爬杆实验和线悬挂测试。采用免疫荧光法检测小鼠脑黑质中酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数量;采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及脑黑质中IL-1β、TNF-α、环氧合酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平;采用Western blot法检测小鼠脑黑质中cAMP依赖的蛋白激酶催化亚单位α(PKA C-α)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)以及铁蛋白重链多肽1(FTH1)蛋白的表达。结果 末次给药后,与正常组比...     

莫达非尼对1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶所致的帕金森病的神经保护作用

目的　观察莫达非尼对 1 甲基 4苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导的帕金森病 (PD)模型的神经保护作用。方法给C5 7BL 6小鼠腹腔注射MPTP4d制备PD模型 ,与MPTP同时给予莫达非尼 (ip ,5 0or10 0mg·kg- 1 ·d- 1 ) 4天后 ,再连续给莫达非尼 10天。观测莫达非尼对小鼠的自发活动 ,震颤潜伏期、维持期和震颤评分及爬杆时间的影响 ,及对纹状体和黑质的酪氨酸羟化酶 (TH)阳性细胞和尼氏体的影响。测定纹状体中多巴胺 (DA) ,去甲肾上腺素 (NA)和 5 羟色胺 ( 5 HT)含量。结果　莫达非尼 ( 5 0和 10 0mg·kg- 1 )呈剂量依赖性显著减少了自发活动、震颤和爬杆的行为缺陷 (P <0 .0 5和P <0 .0 1,n =10 ) ,阻止了MPTP造成的TH和尼氏体数量的减少 (P <0 .0 5 ,n =10 ) ,及纹状体中DA ,NA和 5 HT含量的降低 (P <0 .0 5 ,n =10 )。结论在MPTP诱导的PD小鼠模型中 ,莫达非尼可改善MPTP引起的帕金森病行为缺陷 ,且对单胺能神经细胞的损伤有保护作用。     

侧脑室注射DJ-1蛋白对MPTP致帕金森病小鼠的神经保护作用

目的:观察DJ-1蛋白对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine,MPTP)致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠是否具有神经保护作用。方法:分别采用SDS-PAGE和生物质谱仪对DJ-1蛋白的纯度和活性位点进行检测。然后将DJ-1蛋白注射进入小鼠侧脑室内,24 h后小鼠腹腔注射MPTP造模,通过滚筒实验、自主活动实验和竖直网格实验观察行为学变化,使用HPLC-ECD对纹状体内神经递质含量进行测定,通过酪氨酸羟化酶(tyroxine hydroxylase,TH)免疫组化染色观察SN区域多巴胺能神经元的存活状态。结果:SDS-PAGE和质谱实验表明DJ-1蛋白纯度较高,且活性位点未产生氧化;将DJ-1蛋白注射进入PD小鼠侧脑室后,小鼠行为学明显改善,纹状体内神经递质含量降低有所恢复,黑质区域多巴胺能神经元细胞死亡显著减少。结论:侧脑室注射DJ-1蛋白能够显著改善MPTP致的小鼠帕金森病症状,具有一定的神经保护作用。     

帕金森病小鼠和大鼠模型黑质纹状体中胆绿素还原酶B的表达

目的探讨胆绿素还原酶B(biliverdin-Ⅸβreductase,BVRB)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phe-nyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)帕金森小鼠模型和6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)帕金森大鼠模型黑质-纹状体内的表达。方法通过高效液相色谱的方法检测纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量,通过免疫印迹的方法检测黑质纹状体内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,以确认模型的成功建立。对黑质纹状体BVRB的表达进行免疫印迹分析。结果与正常对照组相比,MPTP小鼠及6-OHDA大鼠模型纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量均明显下降(P<0.01),黑质纹状体内TH表达水平也明显下降(P<0.05),而黑质纹状体BVRB的表达水平在两种模型中均明显增高(P<0.05)。结论黑质纹状体BVRB的高表达可能与帕金森病的氧化应激机制相关。     

低分子量硫酸软骨素对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的:观察低分子量硫酸软骨素(CS)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(PD)模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为对照组、MPTP损伤组以及低分子量CS低、高剂量组(100、400 mg/kg)。对照组和MPTP损伤组小鼠均灌胃等容生理盐水,各给药组小鼠均灌胃相应药物,每天1次,连续17 d。自给药后第11天开始,除对照组外,其余各组小鼠均于给药后腹腔注射MPTP溶液(20 mg/kg),每天1次,连续5 d,以复制PD模型。末次给药后,采用转棒式疲劳仪评价小鼠(每组10只)行为学的改变情况,采用免疫组织化学法和免疫荧光法检测小鼠(每组3只)中脑黑质中多巴胺神经元的损伤情况[酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞百分比、荧光强度百分比],采用高效液相色谱法检测小鼠(每组6只)脑纹状体中多巴胺的含量,采用化学比色法检测小鼠(每组6只)中脑黑质中氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)]水平。结果:与对照组比较,MPTP损伤组小鼠在转棒上的滞留时间显著缩短,中脑黑质中TH阳性细胞明显减少、荧光强度明显减弱,其阳性细胞百分比和荧光强度百分比,脑纹状体中多巴胺的含量以及中脑黑质中SOD、GSH-Px的活性均显著降低,MDA的含量显著升高(P<0.01)。与MPTP损伤组比较,低分子量CS各剂量组小鼠在转棒上的滞留时间显著延长,中脑黑质中TH阳性细胞明显增加、荧光强度明显增强,其阳性细胞百分比、荧光强度百分比以及脑纹状体中多巴胺的含量均显著升高,且高剂量组上述指标均显著长于或高于低剂量组(P<0.05或P<0.01);低分子量CS各剂量组小鼠中脑黑质中SOD、GSH-Px的活性均显著升高,低分子量CS高剂量组小鼠中脑黑质中MDA的含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:预防性给予低分子量CS可剂量依赖性地减轻MPTP致PD模型小鼠中脑黑质中多巴胺能神经元的损伤,增加其脑纹状体中多巴胺的分泌。这种作用可能与抑制脂质过氧化反应、提高组织的抗氧化能力相关。     

人参皂苷Re对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的研究人参皂苷Re对 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (1 methy 4 phenyl 1,2 ,3,6 te trahydropyridine ,MPTP)诱致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。方法通过给C5 7BL小鼠皮下注射MPTP制备帕金森病 (parkinson’sdisease ,PD)模型 ,灌胃给予人参皂苷Re预处理后 ,运用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)、免疫组织化学染色以及图像分析等技术分别对纹状体前脑啡肽原 (preproenkephalin ,PPE)mRNA、前强啡肽原 (preprodynorphin ,PPD)mRNA的表达水平和黑质酪氨酸羟化酶 (TH)、γ 氨基丁酸 (GABA)免疫反应阳性神经元数目等多项指标进行考察。结果Re能使黑质致密部 (SNc)的TH阳性神经元和黑质网状部 (SNr)的GABA阳性神经元数目显著增多 ;Re高剂量预防组 (2 6mg·kg-1)PPD扩增产物较模型组显著增加 (P <0 0 5 ) ;Re预防组的PPE扩增产物与模型组比没有显著差异。结论人参皂苷Re对MPTP诱致帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元具有明显的保护作用 ,其作用可能与改变GABA能神经元以及PPDmRNA表达水平 ,从而调节PD中直接回路和间接回路的兴奋 抑制平衡有关     

α-倒捻子素对帕金森病小鼠的神经保护作用

目的探讨α-倒捻子素对帕金森病小鼠的神经保护作用。方法2018年7月至2019年8月,将40只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为四组,分别为对照组、模型组、α-倒捻子素给药组(低剂量组、高剂量组),每组10只。模型组与α-倒捻子素给药组使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病小鼠模型。α-倒捻子素给药组分别给予5 mg¹kg¹1¹d¹1、15mg¹kg¹1¹d¹1的α-倒捻子素灌胃给药。给药后14 d,使用爬杆实验、转棒实验、悬挂实验观测小鼠的行为学表现;高压液相电化学技术测定纹状体多巴胺、高香草酸、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的含量;免疫荧光染色检测酪氨酸羟化酶(TH)表达;TUNEL染色检测细胞凋亡水平;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白表达。结果与对照组(9.3±1.7)s、(205.8±31.3)s、(2.2±0.4)分、(2051.4±195.2)ng/g、(1 677.3±128.0)ng/g、(395.8±41.1)ng/g、(1.00±0.17)、(1.00±0.14)、(1.00±0.15)比较,模型组小鼠的爬杆时间(19.8±3.5)s升高,转棒停留时间(118.9±28.4)s和悬挂实验得分(1.0±0.3)分均降低;纹状体多巴胺(911.3±88.5)ng/g、高香草酸(11190.5±83.3)ng/g、DOPAC(187.9±20.3)ng/g含量降低;黑质区TH表达降低;黑质区细胞凋亡水平升高;黑质区B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)(0.23±0.11)表达量降低,Bcl-2相关X蛋白(Bax)(3.15±0.42)和活化胱天蛋白酶-9(cleaved-caspase-9)(4.27±0.52)表达量升高(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组和高剂量组小鼠的爬杆时间［(15.4±3.1)s、(11.9±2.6)s］降低,转棒停留时间［(166.7±19.9)s、(192.1±21.5)s］和悬挂实验得分［(1.5±0.4)分、(1.9±0.6)分］均升高;纹状体多巴胺［(1 388.6±159.9)ng/g、(1728.2±180.6)ng/g］、高香草酸［(1 366.7±109.2)ng/g、(1 510.8±112.4)ng/g］、DOPAC［(266.5±33.7)ng/g、(320.3±40.4)ng/g］含量升高;黑质区TH表达升高;黑质区细胞凋亡水平降低;黑质区Bcl-2表达量［(0.44±0.19)、(0.94±0.22)］升高,Bax［(2.06±0.38)、(1.18±0.20)］和cleaved-caspase-9表达量［(2.29±0.43)、(1.30±0.28)］降低(P<0.05)。高剂量组的上述指标均优于低剂量组(P<0.05)。结论α-倒捻子素可以改善帕金森病小鼠的行为学表现,上调多巴胺及其代谢产物的含量,促进TH表达,抑制细胞凋亡水平。     

FSD-C10抑制MPTP诱导的帕金森病小鼠氧化应激及炎性反应研究

目的 研究口服FSD-C10对帕金森病（Parkinson's disease,PD）小鼠的治疗作用,并探讨其相关机制。方法 小鼠随机分为正常组、PD组和FSD-C10组（50 mg·kg^-1）,旷场行为学测试评估小鼠移动的总距离、休息时间、穿格次数;Western blotting检测脑组织酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）、ROCKⅡ;比色法检测脑组织过氧化氢酶（catalase,CAT）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛和一氧化氮（nitric oxide,NO）;ELISA检测脑组织肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）及白介素-6（interleukin-6,IL-6）。结果 与正常组比较,PD组小鼠移动的总距离、穿格次数降低（P<0.01）,休息时间延长（P<0.01）,TH表达降低（P<0.05）,ROCKⅡ表达增高（P<0.05）,CAT活力下降（P<0.05）,GSH含量降低（P<0.01）,丙二醛含量升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β、IL-6及NO升高（P<0.05或P<0.01）。与PD组比较,FSD-C10组小鼠移动的总距离、穿格次数增加（P<0.05）,休息时间缩短（P<0.01）,TH表达增高（P<0.05）,ROCKⅡ表达降低（P<0.05）,CAT活力增加（P<0.01）,GSH含量升高（P<0.01）,丙二醛含量降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β、IL-6及NO下降（P<0.01）。结论 口服FSD-C10可以改善PD小鼠的行为学表现,对PD有明确的治疗作用,其作用机制可能与恢复氧化-抗氧化体系平衡、减少炎性因子分泌相关。     

应用荧光成像技术研究磷酸铝凝胶在小鼠胃肠道中的分布

目的：应用荧光成像技术考察磷酸铝凝胶（洁维乐?誖）在小鼠胃肠道中的分布情况。方法：采用荧光探针Cy5标记洁维乐,经灌胃给药后在不同时间点对小鼠离体胃肠道进行荧光成像;同步监测小鼠的其他器官（心脾肝肾肺）的荧光分布。结果：口服Cy5标记物洁维乐后,在0.5 h时标记物已进入肠道内;2 h已分布至胃肠道各部位,且胃和小肠荧光信号开始减弱,4 h时盲肠和结肠的荧光信号增强,8 h后盲肠和结肠呈减弱趋势,然而在胃肠道停留时间可达24 h;同时,在小鼠其他器官内未显示荧光信号。结论：荧光探针Cy5可成功地对洁维乐进行胃肠道可视化示踪。     

Electrophysiological and neurochemical correlates of the neurotoxic effects of 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) on central catecholamine neurons in the mouse

Summary 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) is an agent which produces a parkinsonian syndrome in man. To explore the use of MPTP in a rodent model of parkinsonism, male albino mice (NMRI) were given MPTP (50 mg/kg, s.c.) twice with a 6–8 h interval. Up to 10 weeks after injection, mice were killed and high-pressure liquid chromatography was used to assay dopamine (DA) and noradrenaline (NA) concentrations in various regions of the CNS. At 4 and 10 weeks after injection, DA levels were significantly reduced in occipital cortex (-40%), hippocampus (-30%), and striatum (-60%). NA levels were reduced by 60–80% in frontal and occipital cortex, hippocampus, and cerebellum. Neither DA nor NA concentration was reduced in spinal cord. Dopaminergic denervation was also suggested by electrophysiological data which showed that treatment with MPTP increased the spontaneous discharge rate of caudate neurons and decreased the potency of locally administered phencyclidine, an indirect DA agonist. However, denervation was evidently not complete enough to produce postsynaptic receptor supersensitivity, as MPTP treatment did not increase the potency of locally applied DA, and it did not increase ³H-spiperone binding in striatal membrane preparations. These results suggest that MPTP causes regionally selective and long-term reductions of catecholamine transmission in the CNS of the mouse.This work has been supported by the Swedish MRC (04X-2295, 14X-03185, 14P-5868, 14P-5867); M. Bergvalls Stiftelse, Jeansson's Stiftelse, The Expressen Prenatal Research foundation and The Swedish Council for Planning and Coordination of Research (Project: Chemical Hazards in the Environment).     

Crotalphine Attenuates Pain and Neuroinflammation Induced by Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in Mice

Multiple sclerosis (MS) is a demyelinating disease of inflammatory and autoimmune origin, which induces sensory and progressive motor impairments, including pain. Cells of the immune system actively participate in the pathogenesis and progression of MS by inducing neuroinflammation, tissue damage, and demyelination. Crotalphine (CRO), a structural analogue to a peptide firstly identified in Crotalus durissus terrificus snake venom, induces analgesia by endogenous opioid release and type 2 cannabinoid receptor (CB2) activation. Since CB2 activation downregulates neuroinflammation and ameliorates symptoms in mice models of MS, it was presently investigated whether CRO has a beneficial effect in the experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). CRO was administered on the 5th day after immunization, in a single dose, or five doses starting at the peak of disease. CRO partially reverted EAE-induced mechanical hyperalgesia and decreased the severity of the clinical signs. In addition, CRO decreases the inflammatory infiltrate and glial cells activation followed by TNF-α and IL-17 downregulation in the spinal cord. Peripherally, CRO recovers the EAE-induced impairment in myelin thickness in the sciatic nerve. Therefore, CRO interferes with central and peripheral neuroinflammation, opening perspectives to MS control.     

Deoxynivalenol in the Gastrointestinal Tract of Immature Gilts under per os Toxin Application

Deoxynivalenol is also known as vomitoxin due to its impact on livestock through interference with animal growth and acceptance of feed. At the molecular level, deoxynivalenol disrupts normal cell function by inhibiting protein synthesis via binding to the ribosome and by activating critical cellular kinases involved in signal transduction related to proliferation, differentiation and apoptosis. Because of concerns related to deoxynivalenol, the United States FDA has instituted advisory levels of 5 µg/g for grain products for most animal feeds and 10 µg/g for grain products for cattle feed. The aim of the study was to determine the effect of low doses of deoxynivalenol applied per os on the presence of this mycotoxin in selected tissues of the alimentary canal of gilts. The study was performed on 39 animals divided into two groups (control, C; n = 21 and experimental, E; n = 18), of 20 kg body weight at the beginning of the experiment. Gilts received the toxin in doses of 12 µg/kg b.w./day (experimental group) or placebo (control group) over a period of 42 days. Three animals from two experimental groups were sacrificed on days 1, 7, 14, 21, 28, 35 and 42, excluding day 1 when only three control group animals were scarified. Tissues samples were prepared for high performance liquid chromatography (HPLC) analyses with the application of solid phase extraction (SPE). The results show that deoxynivalenol doses used in our study, even when applied for a short period, resulted in its presence in gastrointestinal tissues. The highest concentrations of deoxynivalenol reported in small intestine samples ranged from 7.2 (in the duodenum) to 18.6 ng/g (in the ileum) and in large intestine samples from 1.8 (in transverse the colon) to 23.0 ng/g (in the caecum). In liver tissues, the deoxynivalenol contents ranged from 6.7 to 8.8 ng/g.     

低剂量多层螺旋CT尿路成像在泌尿系疾病中的应用

目的探讨低剂量多层螺旋CT尿路造影(CTU)对泌尿系疾病的临床应用价值。方法对36例临床拟泌尿系病变患者,使用呋塞米后,低剂量多层螺旋CT扫描后,行多平面重建(MPR)、曲面重组(CPR)及容积再现技术(VR),分析病变的原因。结果 36例泌尿系患者中,肾癌2例,肾盂肾炎3例,肾脓肿1例,输尿管结石18例、泌尿系先天畸形5例、输尿管炎症4例、输尿管癌2例、子宫肌瘤1例,所有病例均经临床或手术病理证实。结论多层螺旋CT尿路成像不仅可清楚直观显示泌尿系病变位置、大小和性质,还能显示周围的病变,有助于临床制定合理的治疗方案。     

超声内镜技术在胃肠道疾病中的临床应用观察

目的观察超声内镜技术在胃肠道疾病中的临床应用。方法总结2008年10月至2012年11月期间在我院用超声内镜技术诊断的胃肠道疾病患者40例病例资料,所有患者经超声内镜技术检查后,检查结果与实验室病理学检查结果以及手术过程确证结果相比较,统计学方法比较两种疾病检查方法的一致性。结果 40例患者中早期食管癌患者12例,胃窦胃癌患者10例,腔内异物(胃石症或者肠道结石)患者18例,所有患者经病理学检验和手术过程确证,结果有1例超声内镜诊断为胃癌患者手术确诊胃淋巴瘤患者,确诊率为97.5%。结论超声内镜技术在胃肠道疾病确诊中具有满意的临床应用。     

奥曲肽与蛇凝血素酶联合治疗下消化道大出血

目的:观察奥曲肽与蛇凝血素酶联合治疗下消化道大出血的疗效.方法:下消化道大出血患者39例分为治疗组26例,对照组13例,在补液、输血、一般止血药治疗的基础上,治疗组加蛇凝血素酶1～2 kU,iv,反复出血时可重复使用,奥曲肽首剂0.1 mg,iv,然后25 μg&#8226;h 1静脉滴注维持至出血停止后24 h;对照组加用垂体后叶素0.2 U&#8226;min 1静脉滴注, 出血停止后减量为0.1 U&#8226;min 1维持24 h.结果:治疗组有效率80.8%,对照组有效率46.2%(P＜0.05).结论:奥曲肽与蛇凝血素酶联合治疗下消化道出血,疗效显著,无不良反应.