体积─排阻色谱法检测细胞色素C中的大分子蛋白

以葡聚糖凝胶G50作填料,用体积—排阻色谱法分离细胞色素C中的大分子蛋白。经豚鼠过敏试验证实,此大分子蛋白具有致敏性,当制品中大分子蛋白的量超过10％时,过敏试验呈阳性反应。此法快速、简便、重现性好,可检测细胞色素C中的致敏性杂质。     

凝胶过滤法检测细胞色素C过敏的研究

<正> 引起细胞色素C(以下简称细C)过敏的原因主要是细C的聚合体及非细C的大分子杂蛋白。中国药典90年版规定用豚鼠试验法检查细C的过敏。此法操作时间长(3周),而由于动物的个体差异和实验条件及操作水平的不同,其结果的准确性也有很大的差异,常常会出现假阳性或假阴性反应。因此,寻找快速、简便、可靠的细C过敏原的检测方法具有十分重要的现实意义。我们利用凝胶层析具有分子筛过滤作用,分离细C溶液中不同分子量的组分,并检测     

角度激光光散射仪和体积排阻色谱法联用检测双黄连注射液中的高分子物质

目的:多角度激光光散射仪与体积排阻色谱法联用(MALLS-SEC)测定双黄连注射液中的高分子物质。方法:以0.7%Na2SO4缓冲液(加0.05%NaN3)为流动相,流速0.5 mL.min-1,TSK-GEL G3000SWxl凝胶排阻色谱柱与多角度激光光散射仪和示差折光检测器联用。结果:该方法对相对分子质量4600～133800 g.mol-1范围内物质线性关系良好(r=0.9922)。结论:本方法简便、快速、准确。     

分子排阻色谱法检测双黄连注射液中的高分子杂质

目的分子排阻色谱法考察双黄连注射液中高分子杂质。方法采用分子排阻色谱法测定了3个厂家6批双黄连注射液,用TSKk-GEL G2000SWxL色谱柱,以乙腈-水-三氟乙酸(体积比40∶60∶0.07)为流动相,流速为0.5 mL·min-1,柱温为30℃,二极管阵列检测器,检测波长为214 nm。结果相对分子质量对数与出峰时间呈良好的线性关系(r=0.996 8),相对分子质量对照品(人胰岛素)检出限为0.386 mg·L-1,6批双黄连注射液中均未检出高分子物质,加速稳定性试验检测相对分子质量3 108>Mr≥1 638杂质的含量稳定。结论国内的双黄连注射液质量稳定,在加速稳定性试验中无高分子物质聚合产生,作者建立的检测方法可用于双黄连注射液中高分子杂质的检查。     

细胞色素C中致敏性杂质的高效液相色谱检测

本文利用离子交换高效液相色谱对细胞色素C的纯度进行了分析,并以豚鼠过敏反应作对照.发现细胞色素C的过敏性反应与其纯度密切相关,引发豚鼠过敏性反应的过敏原是细胞色素C中存在的致敏性杂质,对细胞色素C进行纯度检测可取代豚鼠过敏反应检测.与豚鼠过敏反应检测法相比,高效液相色谱法具有操作简便、快速和结果重现性好等优点.     

胸腺肽α1含量测定的体积排阻色谱法

目的:建立胸腺肽α1含量测定的体积排阻HPLC.方法:色谱柱为TSK-GEL3000SWxl(7.8mm×300mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(0.05mol/L)-异丙醇(2.5%);流速:0.5ml/min;检测波长:214nm,进样:10μl.结果:线性范围为0.02152～0.6888mg/ml,r=0.9975.回归方程为:C=-2.95×104 9.26×106A.回收率为99.14%,RSD为1.58%(n=6).结论:本方法快速、可靠、简单、灵敏度高.     

低分子肝素分子量的测定

用高效液相色谱法，以低分子肝素的标准对照品为标准，测定了低分子肝素的平均分子量。其重均分子量范围在3500～5000，分子县在8000以下者占85％以上。对该法的实验条件进行了探讨。     

高效凝胶渗透色谱法测定莫海林分子量及其分布

目的 :建立一种莫海林分子量及其分布测定的质控方法。方法 :采用高效凝胶渗透色谱法 (HPGPC) ,色谱柱为ShodexAsahipakGF 5 10HQ (7 6mm× 30 0mm) ,以已知分子量的葡聚糖 (Dextran)为标样 ,0 2mol·L-1硫酸钠 (稀硫酸调至pH 5 0 )为流动相 ;柱温 35℃ ;流速 0 5mL·min-1;示差折光检测器。结果 :利用GPC软件处理 ,得到莫海林的数均、重均分子量和分子量累积重量分布曲线。结论 :本文所建立的HPGPC法简便、快速、重现性好 ,适合于该类药物的质量控制     

分子排阻色谱法测定德谷胰岛素高分子蛋白含量

目的 建立德谷胰岛素高分子蛋白质的定量分析测定方法。方法 采用Insulin HMWP色谱柱（7.8 mm×300 mm,10 μm）,以冰醋酸-异丙醇-水（4：3：10）为流动相,流速为0.5 mL·min^-1,检测波长为280 nm,利用分子排阻色谱法分离德谷胰岛素单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行定量分析。结果 该方法的检测限和定量限分别为0.18和0.47 μg;仪器精密度RSD为0.51%,德谷胰岛素在0.125~4.0 mg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=20.864 1X-0.125 9,R²=1.000 0;德谷胰岛素主峰与高分子蛋白质峰的分离度>2.0。结论 建立的方法操作简便,灵敏度高,可有效地对德谷胰岛素高分子蛋白质进行定量分析。     

凝胶色谱法测定头孢替唑钠的聚合物

目的 　建立凝胶色谱法测定头孢替唑钠的聚合物的方法。 方法 　采用葡聚糖凝胶 Pharmadex G-10柱 ( 16mm× 3 3 cm) ,流动相 :A:0 .1mol· L- 1 磷酸盐缓冲液 ( p H7.0 ) ;B:水。流速为 1.0 ml· min- 1 ;检测波长为 2 5 4nm,进样量为 2 0 0μL。结果 　头孢替唑钠在 6.696～ 2 9.5 4mg· m L - 1范围内 ,浓度与聚合物的峰面积呈良好线性关系 ( r=0 .9986)。 结论 　该方法简便 ,准确 ,重现性好     

凝胶色谱法测定参芪扶正注射液中的高分子物质

目的:建立测定参芪扶正注射液中高分子物质的方法。方法:采用凝胶色谱法。色谱柱为TSKGEL2000SWxl(300mm×7.8mm,5μm),流动相为乙腈-0.83%三氟乙酸溶液(40∶60),流速为0.7mL·min-1,检测波长为214nm。结果:参芪扶正注射液中高分子物质在分子量1638～13700范围内,分子量对数与出峰时间呈良好线性关系(r=0.9848)。各批样品含高分子物质的量均≤1.0%。结论:该方法操作简便,结果准确、可靠,可以作为参芪扶正注射液的内控质量标准方法。     

凝胶色谱法测定普鲁卡因青霉素中的高分子聚合物

目的:建立普鲁卡因青霉素中高分子聚合物测定方法。方法:采用凝胶色谱法。色谱柱为Sephadex G-10(40～120μm)凝胶柱,流动相A为0.03 mol.L-1磷酸盐缓冲液(pH 7.0),流动相B为超纯水,流速1.5 mL.min-1;检测波长254 nm。结果:普鲁卡因青霉素的进样浓度在10～50 mg.mL-1的范围内与青霉素聚合物的峰面积呈良好线性关系(r=0.999 6)。结论:该方法灵敏、准确、简便,可用于本品的质量控制。     

凝胶色谱法测定注射用硫酸头孢匹罗高分子杂质

目的：建立注射用硫酸头孢匹罗高分子杂质的测定方法。方法：采用Sephadex G-10凝胶高效液相色谱系统，以头孢噻肟钠对照品为替代对照品进行测定，按自身对照外标法进行计算。结果：注射用硫酸头孢匹罗高分子杂质含量小于0．04％．结论：方法简便，结果可靠，为注射用硫酸头孢匹罗高分子杂质的质量控制提供参考。     

头孢菌素类抗生素中高分子杂质的研究进展

头孢菌素类抗生素中的高分子杂质是引发速发型过敏反应的过敏原,是药物分析研究的重点.高分子杂质分为外源性杂质和内源性杂质,目前内源性聚合物是药物质量控制的重点.本文对近年来头孢菌素中高分子杂质的聚合特性、结构特点和分离分析方法研究进行了综述.     

低分子量羟丙甲纤维素的分子量及其分布的测定

目的测定低分子量羟丙甲纤维素的分子量及其分布。方法利用高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射检测器(HPSEC-RID-MALLS)技术,以0.1mol·L-1硝酸钠-甲醇(95∶5)为流动相,采用Shodex OHpak SB-804 HQ(8.0 mm×300mm)凝胶柱进行检测。结果低分子量羟丙甲纤维素的重均分子量测定误差≤2%,数均分子量和分子量分布误差均≤5%,结果准确可靠。结论利用HPSEC-RID-MALLS技术可测定低分子量羟丙甲纤维素的分子量及其分布。