胎猪皮肤前体组织异种移植模型的研究

目的探讨胎猪皮肤前体组织异种移植模型及移植后发育过程。方法取精确胎龄为56d的胎猪皮肤前体组织,分组进行移植,①背部创面模型组：制备成微粒皮后移植到BALB／c裸鼠背部创面,以人尸体皮覆盖;背部皮下模型组：制备成小张邮票皮,植入裸鼠背部皮下;耳廓皮下模型组：制备成微粒皮植入裸鼠耳廓皮下。各组于移植后观察其生长发育特性,并于移植后6周和12周取材行HE染色观察其组织结构形态。新生组织块大小采用双样本t检验。结果各模型的胎猪皮肤前体组织移植后均能存活并继续生长,背部创面模型组生长能力显著大于耳廓皮下模型组,新生皮肤组织均具有真皮和表皮,耳廓皮下模型的真皮附属器仅见毛囊（毛发）．偶见皮脂腺,未见汗腺,但是背部创面模型组及背部皮下模型组不仅能发育成毛囊（毛发）、还见大量皮脂腺和汗腺。结论背部创面移植模型最适合于胎猪皮肤前体组织异种移植及移植后发育的研究。     

人甲状腺未分化癌细胞裸鼠皮下移植模型的建立

目的 :建立人甲状腺癌细胞裸鼠皮下移植模型。方法 :用人甲状腺未分化癌细胞系 TA- K细胞悬液裸鼠皮下注射及瘤块皮下植入的方法建立人甲状腺未分化癌裸鼠皮下移植模型 ,观察移植后肿瘤生长特点及组织学特征。结果 :皮下注射法与肿瘤块植入法均可出现皮下肿瘤 ,染色体检查证实裸鼠皮下移植瘤的染色体组型与人体肿瘤一致。皮下注射方法肿瘤注射后经过 1 1～ 1 8d的潜伏期后才进入倍增期 ,瘤块皮下植入方法则跨过潜伏期直接进入倍增期。结论 :利用人甲状腺未分化癌细胞系 TA- K成功建立人甲状腺癌裸鼠皮下移植模型 ,肿瘤块植入法比皮下注射法省时、经济、稳定 ,是对传统皮下注射法的改进     

紫花牡荆素对人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 研究紫花牡荆素(Casticin)对人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 建立人卵巢癌HO一8910细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组3只:生理盐水组、多西紫杉醇组(0.5rng/kg)、低剂量Casticin组(5 mg/kg)、中剂量Casticin组(10 rng/kg)和高剂量Casficin组(20 mg/kg).观察各组裸鼠移植瘤生长情况和裸鼠体重的变化;观察裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数的变化;FCM测定瘤组织细胞凋亡率;Western Blot分析瘤组织细胞凋亡的分子生物学机制.结果 Casticin对移植瘤生长有明显抑制作用.呈剂量和时问依赖性;而对裸鼠体重、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酐值和外周血白细胞计数均无影响.经Casticin作用16d,裸鼠移植瘤细胞表现出剂量依赖性增加的亚二倍峰,Bd-2蛋白表达降低.caspase-3蛋白表达增高.结论 Casticin具有抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的作用,并通过降低Bcl-2蛋白表达,活化Caspase-3蛋白表达诱导瘤组织细胞凋亡.     

央芪汤流浸膏敷贴制剂对胃癌动物模型的干预作用研究

目的:通过将央芪汤制作成流浸膏制剂,检测央芪汤流浸膏制剂对胃癌动物模型中瘤体的抑制作用。方法:将人胃癌SGC-7901细胞悬液皮下接种于裸鼠背部皮下,当接种部位肿瘤长至最大径4~5mm时,将裸鼠随机分为四组(10只/组):A组(央芪汤敷贴剂);B组(氟尿嘧啶注射液);C组(央芪汤敷贴剂+氟尿嘧啶注射液);D组(生理盐水对照组)。给药期间观察裸鼠的一般情况及移植瘤的生长状况,连续用药24d,并继续观察4d后,颈椎脱位处死裸鼠,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测bcl-2及caspase-3蛋白。结果:央芪汤流浸膏可明显提高胃癌细胞株SGC-7901在裸鼠皮下移植瘤的caspase-3蛋白表达,显著抑制SGC-7901在裸鼠皮下移植瘤抗凋亡蛋白bcl-2的表达。结论:央芪汤流浸膏可以明显增加荷瘤裸鼠肿瘤细胞凋亡,有明显差异,表明央芪汤流浸膏可以通过促进胃癌细胞的凋亡达到抗肿瘤的目的。     

p27mt对裸鼠肝癌移植瘤组织VEGF表达的影响

目的:研究外源性突变型p27基因(p27mt)对裸鼠皮下肝癌移植瘤血管生长的影响。方法:用人原发性肝癌细胞株SMMC-7721构建人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将腺病毒介导的突变型p27(Ad-p27mt组)注射瘤体2,1d后观察移植瘤的血管变化,免疫荧光法检测组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果:Ad-p27mt组移植瘤血管单支、纤细,VEGF表达低于对照组和Ad-Lac Z组(P<0.05)。结论:p27mt抑制裸鼠皮下移植瘤滋养血管生成可能通过降低血管中VEGF表达完成。     

外源性激素对异种移植后人胎卵巢组织的影响

目的:探讨外源性促性腺激素对异种移植后的冻融人胎卵巢组织卵泡发育的影响。方法:将冻融人胎卵巢组织移植到裸鼠肾被膜下,裸鼠随机分为A、B、C 3组,分别以不同方式给予外源性促性腺激素—孕马血清促性腺激素(PMSG),并分别于术后10~14周、18~22周、26~30周回收移植物,行组织学评价和增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学分析。结果:10~14周和18~22周各组的原始、初级、次级卵泡数之间差异均无统计学意义(P>0.05)。26~30周,A、B组次级卵泡数显著高于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组均可见窦卵泡发育。结论:冻融人胎卵巢组织异种移植于雌性去势裸鼠后,无外源性激素作用环境下卵泡也可发育至窦卵泡;而不同方式的外源性促性腺激素作用均可进一步促进组织中卵泡的发育。     

艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤细胞凋亡的影响

目的：观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤细胞凋亡的影响。方法：将人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右侧腋皮下,建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为：模型、环磷酰胺及艾迪注射液高、中、低剂量5个组,加上1个对照组（未接种肿瘤细胞）,各组动物按各自药物和剂量腹腔注射（ip）给药,连续14d。末次给药后处死动物,剥取瘤块,用流式细胞仪测定移植瘤组织的细胞凋亡率,并用电子显微镜观察其超微结构。结果：艾迪注射液高剂量组的细胞凋亡率明显高于模型组,电镜下可见明显的凋亡表现。结论：艾迪注射液具有促进裸鼠人胃癌移植瘤组织细胞凋亡的作用。     

重组人生长激素对裸鼠胃癌移植瘤生长及血清VEGF浓度的影响

目的:研究重组人生长激素(rhGH)对裸鼠人胃癌移植瘤生长及血清VEGF水平的影响。方法:取60只雄性裸鼠进行实验,通过免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞株SGC-7901及MKN-45生长激素受体(GHR)的表达状况,将GHR阳性表达的胃癌细胞株SGC-7901及GHR阴性表达的胃癌细胞株MKN-45分别接种于4只裸鼠皮下,制作裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,3周后取出移植瘤制成组织匀浆,接种于剩余52只裸鼠。依据接种细胞种类不同分为移植瘤GHR阳性表达和GHR阴性表达裸鼠,不同GHR表达的裸鼠进一步分为对照组(C组:予0.9%NaCl,0.2 ml.d-1)、rhGH低剂量组(L组:予rhGH0.5 U.kg-1.d-1)、rhGH高剂量组(H组:予rhGH2.5 U.kg-1.d-1),连续给药14 d,观察并记录各组裸鼠体重和肿瘤体积变化,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量。结果:SGC-7901为GHR阳性表达的人胃癌细胞株,MKN-45为GHR阴性表达的人胃癌细胞株。对于接种GHR阳性表达的人胃癌细胞株的裸鼠,rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大(P<0.05),且H组促增长效应显著(P<0.05),3组...     

Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的　观察PTK抑制剂Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法　对 3 0例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,共分为 5组 :对照组 (含 0 0 4%DMSO的生理盐水 ) 0 2mg kg ,Genistein治疗组 0 4mg kgGenistein治疗组 (皮下注射 ) ,Cisplatin( 4mg kg ,静脉推注 )治疗组 ,Genistein与Cisplatin联合治疗组。观察不同药物治疗后第 7、14、2 1、2 8d各组裸鼠皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化 ,并进行病理组织学检查。结果　 0 .4mg kgGenistein皮下注射 ,对SKOV3裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用 ,与对照组相比 ,瘤体重量降低 ,肿瘤体积减小 ,坏死面积显著增加 ,但对裸鼠体重无明显影响。应用 0 4mg kgGenistein与 4mg kgCisplatin(静脉推注 )联合处理SKOV3裸鼠移植瘤有增强抑制作用。结论　Genistein具有抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 ;Genistein与化疗药物联合应用可增强抑瘤作用     

两种人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较研究

目的 比较两种人卵巢癌裸鼠移植瘤模型.方法 将1例人卵巢癌组织移植裸鼠,建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上,传代第十五代实体瘤细胞和人卵巢癌SKOV3细胞分别皮下移植裸鼠.观察两种人卵巢癌裸鼠肿瘤生长速度、存活时间、组织病理学检查、染色体.结果 实体瘤细胞皮下移植瘤生长速度高于SKOV3细胞皮下移植瘤(P＜0.05).实体瘤细胞皮下移植瘤裸鼠可存活30～58 d;SKOV3细胞皮下移植瘤裸鼠存活96～158 d.病理检查:肉眼观察实体瘤瘤细胞皮下移植瘤:瘤为实体,血性少量腹水,有肝、脾转移;SKOV3细胞皮下移植瘤呈囊形,肿瘤长大后可出现破溃,坏死、脱落,未见腹水及肝、脾转移.组织病理显微镜观察均呈乳头状生长,癌细胞生长活跃,细胞核大小不规则,核分裂多见与人癌组织一致.实体瘤细胞皮下移植瘤染色体多为亚二倍体和多倍体;SKOV3细胞皮下移植瘤多为三倍体或四倍体.结论 实体瘤细胞与SKOV3细胞皮下移植瘤有区别,实体瘤模型与人卵巢癌更为一致,并向肝、脾转移.     

Mixed culture of fetal pituitary-hypothalamic-nigral cells

ＭｉｘｅｄｃｕｌｔｕｒｅｏｆｆｅｔａｌｐｉｔｕｉｔａｒｙｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃｎｉｇｒａｌｃｅｌｓＷａｎｇＹｉｆａｎｇ王一芳，ＺｈａｎｇＮｉｎｙｕａｎ张宁远，ＬｕＳｈｕｎｘｉｎｇ陆顺兴，ＣｈｅｎｇＢａｏｇｅｎ程宝庚ＰｅｎｇＣｈａｎｇｐｉｎｇ彭长...     

骨髓干细胞移植改善dystrophin-/-/utrophin-/-鼠运动功能

目的 研究骨髓干细胞移植治疗Duchenne型肌营养不良鼠(dystrophin/utrophin gene double knock-outmice,dko鼠)的运动功能改善情况。方法 获取4～5周龄C57BL/6鼠的骨髓干细胞,体外培养3 d,以1.0×10~7/只静脉移植到经7Gy γ射线预处理的dko鼠(7～8周龄)。8～9周后,检测移植鼠运动功能、肌电图及肌肉组织dystrophin蛋白表达情况。结果 骨髓干细胞移植8～9周后,11只dko鼠牵引运动坠落次数为(3.09±2.47)次,与对照组(非移植组)dko鼠(16.78±3.6)次比较,有显著性差异;肌电图指标中,动作电位时限和最大收缩电位波幅分别为(4.99±1.62)ms,和(2872±1474.33)μV,与对照组(3.69±0.40)ms和(1210.00±551.00)μV比较,有显著改善;其肌肉组织有7％肌纤维表达了dystrophin蛋白。结论 静脉移植同种、同系鼠骨髓干细胞后,dko鼠的运动功能、电生理有了显著改善;其部分骨骼肌细胞有缺失蛋白的表达。提示干细胞移植治疗DMD有较理想的前景。     

人脑胶质瘤干细胞移植于表达绿色荧光蛋白裸小鼠的研究

目的 培育表达绿色荧光蛋白(GFP)的裸小鼠,并探讨将其用于人胶质瘤干细胞(HGSC)移植实验研究.方法 将C57BL/6J-GFP转基因小鼠与NC系裸小鼠进行交配,在继代时严格挑选都表达GFP的无毛雄鼠与有毛母鼠交配,通过肉眼、免疫组织化学和荧光显微镜等方法观察GFP在裸小鼠皮肤和脏器中的表达情况,继将HGSC原位移植于表达GFP的裸小鼠,以观察移植瘤的生长情况.结果 传至8代的裸小鼠,包括脑在内的全身主要器官和细胞都表达GFP.对用于HGSC原位移植的脑,能清晰辨认出不发光的瘤细胞和发光的宿主细胞.而瘤细胞经人特异白细胞抗体(HLA)连接红色荧光剂(PE)的免疫组织化学染色后,在共聚焦显微镜下可清晰显示与宿主脑细胞的组织学关系.结论 用免疫功能健全、表达GFP的转基因鼠与免疫功能缺陷的裸小鼠杂交,可获得脑等组织器官表达GFP的裸小鼠.对其进行HGSC原位移植,因可清晰辨认移植瘤与宿主组织的关系而有望用于肿瘤组织重构的研究.     

龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤缺损的作用

[目的]观察龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤缺损创面的促进作用.[方法]将人成纤维细胞种植入胶原海绵,人角质形成细胞种植在表层,构建组织工程皮肤,并移植入裸鼠皮肤缺损创面;实验动物随机分为4组,选用"活血圣药"龙血竭于移植后2 d分别进行创面外敷、单纯口服、创面外敷+口服治疗,并设空白对照组.组织工程皮肤移植后9 d取材检测,观察创面局部表皮厚度、真皮层中层粘连蛋白(Ln)、Ⅰ型胶原蛋白的表达及毛细血管增生情况.[结果]龙血竭能促进组织工程皮肤移植后表皮的发育及真皮层中毛细血管的增生,增强Ln、Ⅰ型胶原蛋白的分泌,龙血竭外敷+口服组效果最佳.[结论]龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤创面有促进作用.     

半相合细胞移植对CT-26结肠癌荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的:探讨半相合细胞移植的移植物对CT-26结肠癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及潜在机制。方法:取C57BL/6小鼠的脾细胞和骨髓细胞作为供体细胞;取18只CB6F1小鼠(受体),随机分成对照组、环磷酰胺组和移植组,每组6只,皮下种植小鼠结肠癌CT26细胞建立荷瘤小鼠模型;然后分别于尾静脉注射0.2 mL生理盐水、环磷酰胺、环磷酰胺+脾细胞+骨髓细胞,连续4周;于不同时间点检测3组小鼠肿瘤体积变化;于2周时取3组小鼠肿瘤、肝脏、小肠和皮肤组织,HE染色观察组织变化;ELISA法检测肿瘤组织中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α和TGF-β含量;流式细胞术检测移植组3 d、2周、4周时小鼠外周血细胞(H-2Kd/b)嵌合率;结果:2周时,环磷酰胺组和移植组小鼠肿瘤体积明显小于对照组(P均<0.01);与对照组和环磷酰胺组相比,移植组肿瘤组织中IL-2、IL-10、IFN-γ与TNF-α含量明显增高(P均<0.05),IL-4和TGF-β含量明显降低(P均<0.05);与移植3 d时相比,2、4周时移植组小鼠外周血中H-2Kb所占比例显著增加(P均<0.01...     

大鼠胚胎皮肤前体复合物裸鼠移植模型的构建

目的 筛选大鼠胚胎皮肤裸鼠移植的最佳妊娠时间窗,探索研究胚胎皮肤及其附件发育机制并进行干预的新方法。方法 获取不同胎龄(E14.5d、E16.5d、E18.5d)的携带少量皮下组织的大鼠胚胎皮肤前体复合物(ESPCs),以皮瓣下埋植的方式移植到裸鼠背部。7d后打开皮瓣并暴露成活的ESPCs,观察其成活后胚胎皮肤及附件生长发育的组织学变化。结果 E16.5d、E18.5d移植物可顺利成活并继续生长发育,最终生成带皮肤附件的完整的皮肤结构;E14.5d移植物则形成畸胎瘤样肿物。结论 通过皮瓣下埋植可成功移植大鼠ESPCs;E16.5d左右为ESPCs移植的最佳妊娠时间。     

兔异体异位下丘脑-垂体移植的实验

目的 探讨幼兔的下丘脑－－垂体异体异位移植后,细胞成活及内分泌重建的可能性,方法 以徒手定向穿刺成兔垂体区,射频毁损垂体建立去垂体动物模型,将制备好的幼兔下丘脑－垂体组织植入模型兔的臀部肌肉内,放免测定术后１,３及８ｗｋ血清Ｔ４,ＰＲＬ,ＧＨ水平。结果 垂体去除组上述激素水平持续下降,移植组术后８ｗｋ上述激素恢复到术前水平,术后３ｗｋ移植物ＨＥ染色见垂体及下丘脑细胞结构良好,术后８ｗｋ透射电镜下见     

胎肝干细胞抗原阳性细胞向肾脏细胞分化的研究

目的　探讨小鼠胚胎肝组织中的 ,干细胞抗原 1阳性的细胞 (Sca 1+ 细胞 )向肾组织上皮细胞分化的潜能。方法　取 14 5d的小鼠胎肝 ,制作细胞悬液 ;用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+ 细胞 ;用PCR鉴别Y-染色体性别决定区域 (SRY)基因序列 ;将 2× 10 3 个雄性小鼠Sca 1+细胞输注给经 10Gy剂量60 钴全身照射的雌性小鼠体内 ;于移植后 2个月 ,处死受体小鼠 ,取肾脏组织固定 ,制片 ;用免疫组织化学染色和荧光原位杂交检测雌性受体小鼠肾脏组织内供体小鼠胎肝Sca 1+细胞的分布和横向分化情况。结果　在肾小管上皮内和肾小球边缘 ,分别发现存在Y染色体阳性的供体来源的细胞 ,同时呈现肾组织的部分特征 ,表型分别为RCA+ 、CYP+ 1A2 、CD4 5 -、F-4/ 80 和波形蛋白阳性、CD-45、F-4/ 80 。结论　小鼠胎肝Sca 1+ 细胞 (其中绝大部分是造血干细胞 ) ,具有向肾组织上皮细胞分化的潜能     

亚硒酸钠对荷瘤小鼠体内硒含量，GSH－Px活力和MDA含量的影响

目的：探讨荷瘤小鼠体内硒水平，谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化和亚硒酸钠对这种变化的影响。方法：采用ＤＡＮ荧光法、ＤＴＮＢ比色法及ＴＢＡ荧光法分别测定荷瘤及正常小鼠体内微量元素硒的含量、ＧＳＨ－Ｐｘ活力及过氧化脂质产物ＭＤＡ的含量。结果：发现荷瘤小鼠体内全血及肝组织中硒的含量、肝匀浆中ＧＳＨ－ｐｘ活力均明显低于正常小鼠。亚硒酸钠虽然在该实验剂量下对Ｓ－１８０肉瘤的生长没有显著的抑制作用，但能纠正荷瘤小鼠全血及肝组织中硒含量的下降，增加全血及肝组织中ＧＳＨ－Ｐｘ活力，降低血浆中ＭＤＡ的含量，对抗ＣＣｌ４引起的肝组织中ＧＳＨ－ｐｘ活力下降。结论：亚硒酸钠能对抗肿瘤对机体抗氧化能力的削弱作用，这时肿瘤的预防和治疗有一定意义。     

功能性垂体腺瘤体外培养和激素分泌的特征研究

目的 :研究垂体生长激素 (GH)腺瘤和垂体催乳素 (PRL)腺瘤体外细胞培养及激素分泌特点。　方法 :11例垂体GH腺瘤和 15例垂体PRL腺瘤进行体外原代细胞培养 ,观察细胞形态的改变和生长特点 ,检测肿瘤细胞基础激素分泌量随培养时间的变化。　结果 :11例垂体GH腺瘤细胞培养成功 10例 ,15例垂体PRL腺瘤细胞培养成功12例 ;贴壁后的细胞被拉长 ,呈椭圆形、梭形或多边形 ,团状或片状生长 ;培养基中GH和RPL分泌量在一周内均维持较高水平。　结论 :按本研究条件培养的垂体腺瘤细胞有良好的分泌功能 ,可进行药物干预实验研究 ,对研究垂体腺瘤发病机制、药物治疗具有重要意义