胶体染料法与ELISA法对沿江居民感染日本血吸虫情况调查

目的准确掌握当前我区日本血吸虫病流行情况,为我区提出适合我区预防控制血吸虫病规划和策略提供科学依据。方法采用胶体染料法与ELISA法同时对我区沿江常住居民进行血清流行病学调查。结果对润州区沿江乔家门村6~65岁1 314名居民开展血吸虫抗体检测,受检1 196名,受检率为91%,胶体染料法检测阳性70人,阳性率为5.85%;ELISA法检测阳性50人,阳性率为4.18%。胶体染料法与ELISA法检测均为阳性者48人,占ELISA法检测阳性的96%。结论在大批量的血吸虫抗体检测[1-3]中,可先用胶体染料法作筛查,检出阳性者再用ELISA法检测。这样既可以排除肺吸虫、肝吸虫及姜片虫等引起的交叉反应,降低假阳性率。又可以节约成本,节省时间。     

集卵孵化法与免疫学检测联合应用诊断血吸虫病的临床研究

目的探讨集卵孵化法联合免疫学方法的三种诊断试剂检测对血吸虫病诊断的研究。方法对1192名疫区患者,以尼龙绢集卵孵化法进行病原学检测,再同时使用酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫渗滤斑点法(DIGFA)、胶体染料法(DDIA)进行血吸虫循环抗原、IgG抗体及虫卵抗体检测,将结果进行比较分析。结果集卵孵化法、ELISA、DDIA和DIGFA的阳性率分别为24.2%、23.7%、71.2%和68.3%,ELISA+DDIA+DIGFA联合检测敏感性达到96.9%,集卵孵化法+ELISA+DDIA+DIGFA联合检测敏感性达到99.1%。结论集卵孵化法漏检率较高,集卵孵化法+ELISA+DDIA+DIGFA四种方法联合检测敏感性明显高于单项检测,对提高血吸虫的检出率有重有意义。     

免疫胶体金渗滤斑点试验对抗精子抗体的检测

目的 :建立一种快速鉴定抗精子抗体的新方法。方法 :用化学试剂提纯精子抗原 ,将其结合于硝酸纤维素膜上 ;以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体 ,建立检测人血清抗精子抗体的免疫胶体金渗滤斑点试验。结果 :抗原抗体通过渗滤在膜上反应 ,10min肉眼即可观察到结果 ,10 0例临床血清标本的检测结果 ,本法与ELISA法基本相符。结论 :免疫胶体金渗滤斑点试验可快速测定抗精子抗体 ,具有推广使用的价值     

免疫胶体金渗滤斑点试验对抗精子抗体的检测

目的：建立一种快速鉴定抗精子抗体的新方法。方法：用化学试剂提纯精子抗原，将其结合于硝酸纤维素膜上；以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体，建立检测人血抗精子抗体的免疫胶体金渗滤斑点试验。结果：抗原抗体通过渗滤在膜上反应，10min肉眼即可观察结果，100例临床血清标本的检测结果，本法与ELISA法基本相符.结论：免疫胶体金渗滤斑点试验可快速测定抗精子抗体，具有推广使用的价值。     

快速检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立和应用

目的 :建立一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的快速、敏感和特异的新方法。方法 :以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为上样抗原 ,胶体金标记羊抗人IgG为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以ELISA作平行对照。结果 :DIGFA和ELISA分别检测 83例斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 95 .2 % (79/ 83)和 91 .6 % (76 / 83) ,两法差异无显著性 (P >0 .0 5 )。DIGFA分别检测正常人血清32例、华支睾吸虫病患者血清 2 3例和日本血吸虫病患者血清 36例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4 .3% (1 / 2 3)和 8.3% (3/ 36 ) ;DIGFA和ELISA两法的总符合率达 92 .3% (36 / 39)。结论 :DIGFA的特异性和敏感性与ELISA相近 ,但方法快速、试剂稳定 ,且不需特殊设备 ,适用于各级医疗单位和血清流行病学调查     

斑点免疫金渗滤技术检测抗心磷脂抗体

目的建立斑点免疫金渗滤技术检测抗心磷脂抗体(Ac Ab)的新方法。方法采用牛心磷脂抗原,以胶体金颗粒结合的羊抗人Ig G为标记抗体,根据斑点免疫金渗滤技术原理,建立斑点免疫金渗滤技术法检测人血清抗心磷脂抗体。分别检测78份抗心磷脂抗体阳性血清和80份正常体检女性血清,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)的结果对比分析。结果与酶联免疫吸附试验的结果对比,其符合率为91.77%,特异性为95.00%,敏感性为88.46%,交叉试验与重复试验结果显示,斑点免疫金渗滤技术测定抗心磷脂抗体具有较好的稳定性和特异性。结论斑点免疫金渗滤技术可以快速准确地测定血清抗心磷脂抗体,便于推广普及。     

HIV(1+2)抗体/P24抗原联合法与胶体硒法在临床检测HIV中的应用研究

目的比较第4代酶联免疫吸附测定(ELISA)[HIV(1+2)抗体与P24抗原联合检测]和胶体硒法在临床检测HIV中的特点。方法分别用第4代ELISA检测试剂和胶体硒试剂检测HIV抗体,初筛阳性样本送重庆市疾病预防控制中心进行Western blot确证试验。结果第4代ELISA试剂检测、胶体硒检测及Western blot检测HIV的阳性率分别为0.34%、0.29%及0.27%。第4代ELISA的HIV漏检率(1.3%)低于胶体硒法(4.9%),而其检测HIV的假阳性率(0.03%)高于胶体硒试剂(0.01%)。结论第4代ELISA和胶体硒法联合应用可提高HIV检测的准确性。     

胶体金渗滤法与快速ELISA法定量检测D-二聚体对比分析

目的对比分析胶体金免疫渗滤法和快速ELISA法定量检测D二聚体(D-Dimer,DD)探讨临床应用价值。方法分别用胶体金免疫渗滤法和快速ELISA法检测质控物及2011年12月—2012年10月在我院住院病人107份标本的DD含量,对比两种方法的重复性、稳定性、特异性和敏感性。结果快速ELISA法检测DD的重复性、稳定性、特异度、敏感度优于胶体金免疫渗滤法;两种方法测定结果的相关系数r=0.693,相关性不理想。结论胶体金免疫渗滤法和快速ELISA法检测DD均具有较高的重复性、稳定性、敏感性,二者特异性不高,两种方法相比较有各自特点,实验室可根据自身具体情况进行选择D二聚体检测方法。     

肺炎支原体抗体测定血清学方法的临床价值比较

目的:比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、颗粒间接凝集试验、胶体金渗滤试验及冷凝集试验等四种方法检测肺炎支原体抗体的临床价值。方法:分别用酶联免疫吸附试验、颗粒间接凝集试验、胶体金渗滤试验、冷凝集试验来检测临床已确诊的47例肺炎支原体感染小儿患者血清中的肺炎支原体抗体。结果:47例小儿患者血清酶联免疫吸附法阳性13例,阳性率27.66%;颗粒间接凝集试验阳性23例,阳性率48.94%;胶体金渗滤试验阳性5例,阳性率10.64%;冷凝集试验阳性9例,阳性率19.15%。结论:颗粒间接凝集试验测定肺炎支原体IgM抗体可提高肺炎支原体感染的早期诊断率,且操作简便、敏感度高,易于推广。     

两类梅毒试剂的检测结果比较

目的:探讨高血清中梅毒抗体的检出率,阻断梅毒经血液传播的途径。方法:用TRUST法和ELISA对抗原夹心法检测血清特异性梅毒(TP)抗体。结果:ELISA双抗原夹心法检测血清中梅毒抗体特异性强、灵敏度高,与确诊试剂TPHA差异无显著性。结论:建议用ELISA双抗原夹心法对献血者做血液梅毒抗体筛选。     

IEST和快速ELISA诊断华支睾吸虫病的效果比较

应用成虫石蜡切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)和快速酶联免疫吸附试验(Q—ELISA)对比检测了52份华支睾吸虫病患者和50份健康人血清,两法的阳性率分别为96％和94％,假阳性率分别为4％和6％。应用IEST和Q—ELISA检测50份血吸虫病患者和20份卫氏并殖吸虫病患者血清,其交叉反应率分别为6％、8％和5％、5％。结果表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性。Q—ELISA更适台于现场应用。     

两种特异抗体检测与B超诊断在包虫病流行病学调查中的应用

目的应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和滴金免疫渗滤法(DIGFA)检测人群包虫病流行情况,评价两种抗包虫特异抗体检测结果与B超诊断的一致性,探讨二者在包虫病流调中的应用。方法用粗纯化的人源型细粒棘球蚴囊液抗原(CE抗原)和鼠源型的泡球蚴组织抗原(AE抗原)做常规ELISA,检测-80℃存放8年的1999份滤纸血的包虫病特异性抗体,其结果与流调现场应用的DIGFA法检测结果进行比较,并将两种方法的血清学检查结果分别与现场B超诊断比较。用Kappa一致性检验,确定检查结果的一致性。结果用ELISA法检测-80℃存放8年的血清结果和现场用DIGFA法检测包虫阳性率分别为6.70%(134/1999)、7.15%(143/1999);以≥60岁组为最高(24.44%和17.78%);各年龄组间差异有统计学意义(P均<0.01)。女性感染率(7.96%和9.45%)高于男性(5.58%和5.11%),性别间差异有统计学意义(P均<0.05)。包虫病诊断中ELISA法检测结果敏感性与特异性均高于DIGFA法,与B超诊断结果一致良好(Kappa=0.41);反之亦然,DIGFA检测结果与B超诊断结果不完全一致(Kappa=0.26)。结论包虫病感染率与年龄和性别有关。DIGFA方法操作简单,检查用时短,所需设备简单,适合于流动性现场调查用;而ELISA法用时较长,检查要求有相当的实验室设备和一定培训技能的人员进行操作,用于现场流调有一定困难,但特异性和敏感性相对比前者高,尤其是用较为新鲜的血样标本更为理想。     

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立及临床应用

目的　建立检测肺炎支原体抗原的双抗体夹心ELISA ,探讨其临床应用的可行性。方法　采用不同株Mp单抗 ,用双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原 ,优化该方法检测Mp抗原的最佳实验条件。对Mp标准株及 14 7份临床标本进行测定 ,观察双抗体夹心ELISA方法的敏感度和特异度 ,以及该方法与聚合酶链反应 (PCR)检测法的符合率。结果　包被单抗量为 2 0 μg·ml-1,酶标记单抗 1∶2 0 0稀释时 ,阳性对照与阴性对照吸光度之比 (P/N值 )最大 ;检测Mp抗原敏感度达 2 μg·ml-1,和其它支原体没有交叉反应。 14 7份临床标本PCR检测阳性率为 13 .6% (2 0 /14 7) ;双抗体夹心ELISA法检测阳性率为 12 .2 % (18/14 7) ,两者符合率达 95 .9%。结论　建立的双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。     

斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体

目的：建立一种快速测定抗子宫内膜抗体（antiendometrial antibody,EMAb）的新方法。方法：采用经抗人血清抗体－Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（endometrium antigen ,EMAg)，以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫渗滤原理，建立斑点金免疫渗滤法（Dot-immunogold filtration assay,DIGFA）检测人血清 EMAb。共检测586份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果：纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应，8min内即可直接观察结果。在586份血清的检测中，阳性率为36．8％，与ELISA的结果基本一致（x^2＝3．45，P＞0．05），符合率95．0％。特异性为94．7％，敏感性为95．6％。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论：DIGFA可测定EMAb，具有推广使用的价值。     

金标抗rsjc26GST多然隆抗体斑点免疫金渗滤法检测血吸虫？…

目的;探索一种简捷的检测吸血虫循环抗原的方法,方法：应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶的多克隆抗体标记胶体金,建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法（Ｓ－ＤＩＧＦＡ）并以Ｓ－ＥＬＩＳＡ作对比。结果：用Ｓ－ＤＩＧＦＡ和Ｓ－ＥＬＩＳＡ平行检测９５例慢性血吸虫病患者,阳性检出率分别为８１．０５％和８２．１１％,正常人血清１８０份,两者的假阳性率分别为６．６７％和７．７８％     

金标渗滤法测定囊虫特异性抗体试剂盒的研制

目的 研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒，并对其诊断价值进行考核评价。方法 以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原，以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）为探针，采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法（DIGFA）检测试剂盒。检测不同病人血清中囊虫特异性IgG抗体，并以囊虫IgG抗体ELISA检测试剂盒考核其敏感性和特异性。结果 用金标试剂盒检测58人份囊虫病患者血清和100人份健康者血清，其敏感性为98.3％（57/58）；特异性为100％（100/100）。用该试剂盒检测25人份包虫病患者血清，6份呈弱阳性，交叉反应率为24％；检测30人份血吸虫病人血清，10人份肺吸虫病人血清，10人份肠道线虫病人血清，均无交叉反应。与ELISA试剂盒检测结果比较，符合率为98．7％，无显著性差异（χ^2=0．0545，P〉0．05）。结论 金标渗滤法快速检测囊虫特异性抗体试剂盒敏感性高、特异性强，可与ELISA法相媲美，且操作更为简便、快速，结果判读容易，特别适合临床检测和现场查病。     

金标免疫渗滤法快速检测日本血吸虫IgM抗体的研究

目的探讨金标免疫渗滤法（DIGFA）快速检测日本血吸虫特异性IgM抗体的诊断价值。方法以可溶性虫卵抗原（SEA）为检测抗原，胶体标记羊抗人IgM为检测抗体，建立IgM金标免疫渗滤法（IgM—DIGFA），快速检测不同病期血吸虫病人血清，并以IgG金标免疫渗滤法fig—DIGFA）检测作平行对照。结果IgM—DIGFA和IgG—DIGFA检测25例急性血吸虫病敏感性均为100％；检测72例慢性血吸虫病的敏感性分别为95．8％（69／72）和97．2％（70／72）。检测健康人血清100人份，特异性分别为99％和97％；IgM—DIGFA检测135例其它蠕虫病人血清，除1例出现阳性反应外，其余均为阴性。检测治后6个月病人血清23例，IgM—DIGFA检出8例阳性，抗体阴转率为65．2％（15／23），IgG—DIGFA检出18例阳性，抗体的阴转率为21．7％（5／23），两者差异有显著性意义（P〈0．05）；两法检测治后12个月病人血清25例，阴转率分别为88％（22／25）和64％（16／25），两者差异有显著性意义（P〈0．05）。结论IgM—DIGFA不仅简易快速、不需特殊仪器设备，对急性、慢性血吸虫病诊断的敏感性和特异性与IgG-DIGFA相近，且有更好的疗效考核价值，非常适合当前血吸虫病防治工作需要。     

ELISA法与胶体金吸附法检测丙肝抗体特异性比较

目的 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与胶体金吸附试验检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体的特异性.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测480例临床手术前患者血清.如酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测为阳性者,再采用肢体金吸附试验方法重新检测抗HCV.结果 480例样本中,抗HCV酶联免疫吸附试验法(ELISA)阳性10例,阳性率2.10%.胶体金吸附试验法阳性6例,阳性率1.25%.结论 酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测抗HCV检出率高出肢体金检测法0.85%.     

如何做好血液标本ELISA试验

ELISA是酶联免疫吸附测定的总称，是继荧光免疫和放射免疫技术之后发展的一种免疫技术。它是将抗原或抗体结合到固相载体表面，将抗原或抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合，洗涤多余的游离反应物，保证试验结果的特异性与稳定性。根据检测的对象和要求不同，ELISA试验又分为：双抗体夹心法，双位点一步法，间接法，竞争法，捕获法以及应用亲和素和生物素的ELISA法等。     

重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白用于检测特异抗体的研究

目的 评价重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白(rCs26GST)在华支睾吸虫病血清学诊断上的价值。方法使用rCs26GST抗原,以酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫增强化学发光法(immuno-enhanced chemilmninescence,immuno-ECL)检测华支睾吸虫病者、其它寄生虫感染者及健康人血清特异性IgG和IgE抗体,分析rCs26GST抗原用于检测的敏感性和特异性。结果使用rCs26GST抗原,ELISA法检测了30份华支睾吸虫感染者血清、肺吸虫病人血清15份、日本血吸虫病人血清20份、无寄生虫感染的健康人血清40份,华支睾吸虫感染者血清IgG的阳性检出率为73．3％(22／30),健康人、肺吸虫病和日本血吸虫病人的阴性率分别为92．5％(37／40)、80．0％(12／15)、85．0％(17／20)。hnmuno-ECL法检测华支睾吸虫感染者血清rCs26GST-特异性IgE的阳性检出率为867％(26／30),肺吸虫病为26．7％(4／15),日本血吸虫病人和阴性对照组的血清未测出,此法的特异度是95．5%。结论 rCs26GST蛋白用于血清特异性IgG和IgE抗体的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于华支睾吸虫病的血清学诊断,组合成“鸡尾酒”式的复合诊断抗原之一。