口腔癌TIL的表型及细胞毒活性测定

作者在成功地建立了口腔癌TIL的分离、培养方法的基础上,采用单抗致敏的红细胞花环试验和H~3-TDR释放法,对10例口腔癌TIL的表型及功能特征进行了动态分析。结果发现新分离TIL中CD_3~ 、CD_4~ 、CD_8~ 较低,体外培养后,TIL中各亚群均有增加,但以CD_3~ 、CD_8~ 增加为主;新分离TIL的NK和LAK活性分别为10％和10.5％,随体外培养时间延长,其细胞毒活性增强,在4周时达高峰。NK和LAK活性分别为50％和44.8％。4周后,其活性开始降低。提示口腔癌TIL的临床应用时机为培养4周左右。     

经皮下埋植泵诱导化疗治疗口腔癌TIL表型研究

目的 :通过观察诱导化疗前后N0期口腔癌局部肿瘤浸润淋巴细胞表型的改变 ,初步探讨经皮下埋植泵诱导化疗对口腔癌局部免疫功能的影响。方法 :47例N0期口腔癌术前分别经皮下埋植泵、静脉给予甲氨喋呤 卡铂 平阳霉素。采用免疫组化方法对诱导化疗前后癌灶TIL进行识别观察。结果 :免疫组化检测表明 ,经皮下埋植泵诱导化疗后TIL中CD3、CD4 、CD8、CD4 /CD8比值无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,6例治疗无效者CD3、CD4 阳性细胞显著下降 ,CD8阳性细胞无变化。而单纯静脉诱导化疗后 ,TIL中CD4 、CD4 /CD8比值显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 :通过皮下埋植泵诱导化疗 ,可以减轻化疗药物对口腔癌肿瘤微环境免疫状态的抑制作用 ,治疗无效者局部细胞免疫功能处于抑制状态 ,其中主要是CD4 细胞亚群的形成受到抑制 ,说明局部免疫状况是影响化疗疗效的重要因素     

口腔癌TIL的制备,检测及临床初步应用

运用Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ方法从１０例口腔癌原发灶瘤体中分离出ＴＩＬ，在ＲＰＭＩ１６４０中培养扩增，用肉汤培养基，沙保培养基，支原体检测药盒及家兔发热试验对ＴＩＬ进行细菌、真菌、支原体及热源质检测。同时，对３例晚期口腔癌患者，配合环磷酰胺进行自身ＴＩＬ回输治疗。结果表明，利用有限的口腔癌原发灶标本，能获得具有较强抗瘤活性的ＴＩＬ。经严格检测，未发现病源微生物及热源质。初步临床应用，无严重并发症；近期临床观察，有一例复发。研究提示，口腔癌ＴＩＬ的临床应用是安全可行的，其效果尚待进一步观察     

静脉回输入舌癌TIL在荷瘤裸鼠体内的动态分布

目的：为研究舌癌ＴＩＬ在荷瘤裸鼠体内的动态分布情况。方法：应用Ｈ３－ＴｄＲ标记体外培养４周的人舌癌ＴＩＬ,在建立人舌癌裸鼠移植瘤模型的基础上,进行ＴＩＬ的尾静脉注射;分别在注射后１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ和１６８ｈ等不同时间取肿瘤组织,瘤周组织,心,肝,脾,肺,肾及颊、舌、颈等正常组织,以每克组织中的放射活性来间接反映ＴＩＬ静脉注射后的体内动态分布。结果：人舌癌ＴＩＬ具有较强的靶向聚集作用,在肿瘤组织中的聚集量较正常组织更多,聚集速度更快。结论：舌癌ＴＩＬ具有较强的抗癌疗效。     

免疫化疗与TIL得率及其杀瘤活性测定

通过收集经S－PVP免疫化疗及PVP化疗的口腔鳞癌原发灶内的肿瘤浸润淋巴细胞，计算其每克肿瘤组织中TIL得率；以Tca8113为靶细胞，测定TIL体外的杀癌活性。结果为S-PVP治疗者，每克肿瘤组织中TIL细胞数为7．5×105；PVP治疗者则为2．45×105；前者TIL的得率是后者的3倍。当放靶比为5:1时，S－PVP组TIL的杀后活性为38％，PVP组为32％，两者无显著性差异（P＞0.05）。结果提示，S－PVP方案治疗口腔鳞癌，除了化疗药物对肿瘤细胞的直接杀伤，还存在通过生物反应调节剂增加了TIL的数量而达到免疫抗癌作用。     

口腔鳞癌TIL和MLNL的增殖能力及表型特征的比较研究

目的：比较口腔鳞癌同一患者的肿瘤浸润淋巴细胞（ｔｕｍｊｏｒ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ＴＩＬ）和转移性淋巴细胞（ｍｅｔｅｓｔａｔｉｃ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ＭＬＮＬ）的增殖能力及表型特征。方法：从７例口腔癌原发性灶及其转移灶中分离ＴＩＬ和ＭＬＮＬ,与ｒＩＬ－２共培养,观察两种来源的淋巴细胞的增殖能力,用ＦＡＣＳ检测细胞表型。结果：６０％的淋巴细胞在培养的     

口腔鳞癌术前放化疗和未治疗患者TIL增殖及特异性杀伤活性的比较

目的 探讨术前做过放化疗口腔鳞癌患者肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte,TIL）在体外能否继续增殖及恢复特异性杀伤活性。方法 从15例口腔鳞癌原发灶中分离TIL，比较术前放化疗和未治疗患者TIL体外增殖能力及对自体肿瘤细胞的杀伤活性。结果 术未治疗组比治疗组提前一周达增殖高峰，但4周以后术前治疗组也显示出继续扩增的趋势。培养3周时治疗组TIL对自体肿瘤的杀伤活性＜未治疗组（P＜0.05），分别为26％和35％；5周时治疗组TIL对自体肿瘤的杀伤活性与未治疗组无显著性差异（P＞0.05），分别为41％和45％。结论 从术前放化疗患者肿瘤组织中分离的TIL在体外扩增后转输体内是可行的。     

口腔癌肿瘤浸润淋巴细胞对人舌癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的探讨在体外具有强大细胞毒活性的口腔癌浸润淋巴细胞在体内的抑瘤效果以及化疗药物环磷酰胺（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，Ｃｙ）与肿瘤浸润淋巴细胞（ｔｕｍｏｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＴＩＬ）联合应用治疗口腔癌的可能性。方法将舌鳞癌细胞系Ｔｃａ８１１３注入裸鼠背部皮下建立移植瘤模型，取培养４周的ＴＩＬ联合低剂量Ｃｙ局部注射，观察肿瘤体积变化及肿瘤生长情况。结果①ＴＩＬ＋ｒＩＬ２和ＴＩＬ＋ｒＩＬ２＋Ｃｙ组在３周内抑瘤率较高（分别为：８６１％±０４％和９７７％±０６％），３周后抑瘤作用减弱；②ＴＩＬ＋ｒＩＬ２＋Ｃｙ组抑瘤率较ＴＩＬ＋ｒＩＬ２组高（第８周抑瘤率分别为：２００％±１４％和７５５％±２５％，Ｐ＜００１）。结论口腔癌ＴＩＬ在应用后３周内具较强抑瘤作用，３周后减弱；联合应用Ｃｙ可获得更佳抑瘤效果     

口腔鳞癌TIL和TDLNL杀伤活性的比较研究

目的　比较口腔鳞癌肿瘤浸润淋巴细胞 (tum or infiltrating lym phocyte,TIL)和肿瘤引流淋巴结细胞(tum or draining lym ph node lymphocyte,TDL NL)体外杀伤活性。方法　从 5例口腔癌原发灶及其转移灶中分离TIL和 TDL NL ,用 3H - Td R4h释放法对 TDL NL和 TIL对自体肿瘤的杀伤活性进行比较研究。结果　 3周时 TIL对自体肿瘤的杀伤活性较 TDL NL强 (P<0 .0 2 ) ,分别为 35 %和 2 3% ;4周时 TDL NL对自体肿瘤的杀伤活性大于TIL (P<0 .0 2 ) ,分别为 5 3%和 40 % ;5周时 TDL NL对自体肿瘤的杀伤活性仍显著强于 TIL (P<0 .0 2 ) ,分别为6 2 %和 44 %。结论　在口腔鳞癌过继免疫治疗中 ,TDL NL可能较 TIL具有更大的优势     

28例口腔癌患者术后早期胃肠内营养的观察

目的：评价高能要素合剂改善口腔癌患者术后营养状况的价值。方法：两组口腔癌术后患者早期分别应用高能要素合剂胃肠内营养与常规普通鼻饲流质,检测营养支持前后的体重、上臂肌围、白蛋白、血红蛋白、总淋巴细胞计数、血尿素氮、细胞免疫功能Ｔ３、Ｔ４、伤口愈合情况。结果：两组术前各项指标的平均值无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,术后有差异或显著性差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。伤口愈合情况,研究组明显好于对照组。结论：本研究表明,胃肠内高能要素合剂有助于改善患者营养不良,提高免疫功能,促进伤口愈合,减少并发症,有助于及时系统地完成肿瘤综合治疗。     

口腔癌免疫化学治疗的病理学及肿瘤细胞周期时相

目的 研究术前高聚金葡素（HAS）联合化疗后口腔癌病理学及细胞周期的改变,探讨HAS联合化疗的病理特点及作用机制。方法20例晚期口腔癌进行颞浅动脉逆行插管,分别进行化疗、HAS联合化疗,6例早期口腔癌采用局部HAS治疗。观察疗效和病理改变,结合流式细胞周期分析法,比较治疗前后变化。结果 临床及病理分析表明HAS可通过局部免疫反应杀伤肿瘤细胞。流式细胞仪检测表明HAS治疗后肿瘤异倍体细胞减少,肿瘤 G0/G1期细胞及凋亡细胞显著增加,而 PI值显著降低（P<0.05）。结论 术前HAS联合化疗可协同杀伤二倍体及异倍体肿瘤细胞,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

术前IL-2局部注射治疗口腔癌的临床初步观察

本文对6例口腔癌患者手术前应用白细胞介素2（IL-2）进行治疗,并结合全身VM化疗,结果肿瘤缩小50～75％4例;25～50％1例;10～25％1例。总有效率66％。这与单一VM化疗相比,近期疗效较为理想。术后病检中我们发现原发灶中有大量淋巴细胞浸润,巨细胞反应,以及肿瘤细胞变性坏死。这种结合口腔癌特点,在全身应用化疗的基础上,局部注射免疫制剂,为某些晚期肿瘤患者争取手术切除肿瘤创造了条件。     

607例老年口腔颌面外科手术分析

本文对６０７例６０岁以上老年患者口腔颌面部疾病手术治疗的情况进行分析，提出只要充分作好术前准备，加强术中观察和处理，完善术后管理，老年人是可以耐受口腔颌面部的各种手术；但大型手术有较大的危险性（死亡率为３．２％：９／２８３）和较多的术后并发症（发生率为１５％：４３／２８３）     

前臂皮瓣即刻整复口腔癌术后缺损方法的改进

目的 探讨前臂皮瓣即刻整复口腔癌术后缺损方法的改进。方法 收集本院1989年8月～2000年8月间用前臂游离皮瓣即刻整复口腔癌术后软组织缺损的患者47例。对该手术方法的改进进行分析和总结。结果 手术成功率100％。应用前臂桡侧皮瓣30例,尺侧（肌）皮瓣17例;吻合动静脉比例为1∶2.55。结论 口内缺损采用前臂真皮瓣修复;血管吻合尽量采用套接法;可只吻合皮瓣浅静脉;尽量保持颈外静脉主干完整性,采用侧支吻合;尽量缩短皮瓣缺血时间;尽量减少皮瓣及血管损伤;血管危象应尽早发现处理。     

口腔癌原代培养细胞MTT法药敏试验方法的建立

目的　建立口腔癌原代培养细胞 MTT药敏试验的方法。方法　采用 MTT法对 2 8例口腔癌新鲜组织和 TCa8113系、ACC- 2细胞株进行药物敏感性检测 ,比较分析各操作步骤对检测结果的影响。结果　 MTT法能准确检测口腔癌肿瘤细胞系 (株 )和新鲜口腔癌组织的药物敏感性。但在后者的检测中应特别注意肿瘤组织的取材、肿瘤细胞悬液的制备、肿瘤细胞的培养、MTT的温育时间以及甲浮液的离心等操作过程。结论　 MTT法能准确检测新鲜口腔癌组织的药物敏感性 ,且重复性好 ,检测周期较短 ,适合大批量样本或大批量药物的筛选 ,同时无放射性污染。     

51例高龄口腔癌患者的围手术期处理

目的　回顾总结 5 1例 70岁以上高龄口腔癌患者围手术期处理的经验和教训。方法　分析 1992年1月～ 1999年 6月经孙逸仙纪念医院治疗的 5 1例高龄口腔癌患者的住院记录。结果　 49例顺利完成手术治疗 ,康复出院 ,2例分别于术后当晚和第 4天死亡。结论　通过完善的围手术期处理 ,可以成功为高龄口腔癌患者施行手术 ,提高其生存率和生存质量 ;高龄并不是口腔癌手术禁忌