洛拉曲克对胸苷酸合成酶蛋白质表达水平的动态影响

目的研究洛拉曲克作用后不同细胞胸苷酸合成酶(TS)蛋白质表达水平的动态变化有无差异。方法时间曲线中,LoVo、Lo2细胞分别用浓度为10、75μmol/L(接近各自的IC90值)的洛拉曲克处理0~60h。剂量曲线中,洛拉曲克作用时间36h,LoVo细胞剂量范围0~40μmol/L。Lo2细胞剂量范围0~125μmol/L。分别以流式细胞术法、Westernblot法检测两种细胞TS蛋白表达水平。结果两种细胞在经过洛拉曲克处理后,TS表达的时间和剂量曲线具有显著不同的动态规律。在时间曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平与对照相比呈持续升高的趋势,Lo2细胞TS蛋白的表达水平与对照相比先降低,24h后TS蛋白表达水平逐渐回升,但至60h尚未恢复至对照水平。在剂量曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平的变化呈峰形,以IC90值附近为最高,Lo2细胞TS蛋白的表达水平,在低于IC90值的剂量点TS蛋白水平降低程度相似,高于IC90值的剂量处理后TS水平随剂量的升高而下降。结论洛拉曲克可以产生TS诱导现象,不同细胞在洛拉曲克作用后TS动态表达的差异是细胞耐药性不同的原因之一。     

胸苷酸合成酶的表达对结直肠癌患者预后的影响

目的　探讨结直肠癌组织中胸苷酸合成酶 (TS)的表达对患者预后的影响及与 5氟脲嘧啶 (5 Fu)类药物的相关性。方法　采用免疫组织化学染色的方法 (ABC法 )检测了 134例原发性结直肠癌患者 (ⅠB～Ⅳ期 )石蜡标本中的TS基因的表达情况。结果　 134例标本中TS基因表达的阳性率为 6 1 2 % (82 / 134) ,TS的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移与否及Dukes分期密切相关 (P <0 0 5 ) ,且TS表达阴性患者的 5年生存率 (5 7 6 9% )明显高于TS表达阳性者 (2 1 95 % ,P <0 0 0 1)。多因素分析显示 ,肿瘤的病理类型、浸润深度和TS表达状态 3者与生存率有相关性(P <0 0 5 ) ,其中TS的表达状态与患者 5年生存率关系最为密切 (P <0 0 0 0 1) ,相对危险系数为1 2 4 1。结论　TS表达水平的高低可能是判断结直肠癌患者预后的一个有效指标 ,同时对预测 5 Fu化疗效果具有一定的指导意义。     

胸苷酸合成酶基因多态性对5-氟尿嘧啶治疗效果的临床研究

目的分析胸苷酸合成酶基因多态性对5-氟尿嘧啶临床疗效的影响。方法选取我院服用5-氟尿嘧啶进行治疗的50名食管癌患者,对患者胸苷酸合成酶进行基因分型,其中,将编码基因启动子区域包含两重串连28bp重复片断的纯合子基因型定义为S/S型,将编码基因启动子区域包含三重串连28bp重复片断的纯合子基因型定义为R/R型。杂合子基因型定义为R/S型。通过RT-PCR对mRNA含量进行相对定量。根据患者基因型测定结果,分析遗传学机制对5-氟尿嘧啶临床药物疗效的影响。结果50名患者中,发现R/R型患者20名,总有效率10%,R/S型患者22名,总有效率13.6%,S/S型患者8名,总有效率50%,R/R组与S/S比较以及R/S组与S/S组比较差异有统计学意义(P<0.05)。S/S型患者药物治疗平均生存时间20.3个月,较R/S组平均生存时间8.1个月以及R/R组平均生存时间7.9个月差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸苷酸合成酶基因多态性是一个潜在的影响5-氟尿嘧啶的影响因素。     

胸苷酸合成酶在大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶表达的差异

目的:研究是否存在大肠原发癌与相应淋巴结转移灶胸苷酸合成酶(TS)表达水平的差异.方法:收集石蜡包埋的大肠癌组织51例,淋巴结转移组织21例,正常大肠组织15例,大肠腺瘤组织8例,应用免疫组化方法研究了TS在正常大肠粘膜、大肠腺瘤,原发大肠癌和淋巴结转移癌中的表达规律.结果:(1)正常大肠粘膜组织及腺瘤组织均不表达TS,51例大肠癌组织中30例呈阳性表达,阳性率为58.8%.大肠癌组织TS表达水平与正常大肠粘膜组织及腺瘤组织相比有显著升高(P＜0.01);(2)淋巴结转移灶TS的表达在表达水平、染色范围和染色深度三个方面均高于原发灶,二者TS表达水平存在显著差异(P＜0.05).结论:大肠癌原发灶和淋巴结转移灶之间的TS表达水平存在显著差异,原发灶TS蛋白表达水平不能预测转移灶对以5-FU为基础的化疗的反应,应根据转移灶本身的TS表达水平选择化疗方案.     

胸苷酸合酶、胸苷磷酸化酶在消化道肿瘤中的表达及其意义

目的　 (1)检测胃肠道癌组织及正常组织中胸苷酸合酶(TS)、胸苷磷酸化酶 (TP)的表达水平 ;观察 TS、TP在胃肠道癌组织中的表达情况及临床病理意义。通过对 TS、TP的表达与 5 -氟尿嘧啶 (5 - FU )化疗患者预后关系的研究 ,评估TS、TP作为 5 - FU化疗敏感性的判定指标的可行性。 (2 )研究胃肠道癌组织中 TP的表达与肿瘤血管生成的关系。 (3)比较免疫组织化学法与蛋白免疫印迹法对癌组织中 TS蛋白表达水平的测定结果。　方法　 (1)免疫组织化学 SP法检测 70例胃癌、5 0例结直肠癌组织及正常对照组中 TS、TP的表达情况。用 CD34 免疫组织化学染色检测胃肠道癌组织中的微血管密度。 (2 )蛋白免疫印迹法和免疫组织化学 SP法测定 2 1例胃癌组织、13例结直肠癌组织及 12例正常胃肠道组织中 TS的表达情况。 (3)应用图像分析技术对结果进行分析。　结果　 (1)正常胃肠道粘膜组织的 TS表达水平高于胃肠道癌组织 ;结直肠癌组织的 TS水平高于胃癌组织 ;高分化组癌组织的 TS水平高于中低分化组 ;胃肠道癌组织 TS表达水平与 5 - FU化疗患者的预后呈负相关 ,与患者的年龄、性别及有无淋巴结转移无关。(2 )胃肠道癌组织的TP表达水平高于正常胃肠道粘膜组织 ;有淋巴结转移的癌组织 (胃癌或结直肠癌 )的 TP表达水平高于无淋     

胸苷酸合成酶、胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶及二氟嘧啶脱氢酶的表达与乳腺癌预后的相关性

目的通过检测乳腺癌标本中胸苷酸合成酶（TS）、胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶（TP）、二氟嘧啶脱氢酶（DPD）表达情况,探讨乳腺癌的生物学行为与上述3个指标之间的相关性.方法采用免疫组织化学（ABC法）检测228例乳腺癌组织中TS、TP和DPD的表达情况.结果 TS、TP与患者的肿瘤大小、淋巴结状态、组织学分级及MVC有明显的相关性,与患者的年龄、激素受体状态（ER,PR）无关;DPD的表达与患者的年龄,肿瘤大小,淋巴结状态,激素受体状态（ER,PR）、组织学分级及MVC等诸多临床病理因素均无相关性;TS、TP表达阳性患者的10年无病生存率和总生存率明显低于表达阴性者（0、0、3.9%、0.9%和25%、25.4%、58.8%、61.8%）,具有显著的统计学差异（均P〈0.01）;DPD表达阳性和阴性患者的10年无病生存率和总生存率为8.8%、16.2%、23.3%、39.5%,均无显著性差异（均P〉0.05）.多因素分析发现：组织学分级、淋巴结状态、TS和TP的表达与患者的总生存率都有十分明显的相关性,而且TS和TP的危险系数分别为0.379、0.219,均小于1,这同样说明这两者对于总生存率来说都是非常强烈的保护因素.结论 TS、TP表达水平的高低有可能是乳腺癌患者一个重要的预后指标;DPD的表达与临床病理因素、10年无病生存和总生存率之间无任何相关性.     

胸苷酸合成酶与结直肠癌患者FOLFOX方案化疗预后的相关性分析

目的 探讨生物标志物胸苷酸合成酶(TS)基因表达与FOLFOX方案化疗后结直肠癌患者短中期预后的关系。方法 纳入本院收治的116例结直肠癌患者,使用改良FOLFOX6(mFOLFOX6)或改良FOLFOX7(mFOLFOX7)方案治疗12疗程后随访1~3年,比较TS的阳性、阴性表达患者的疗效、安全性和3年总生存率。结果 TS+和TS-患者的疗效分布间差异有显著性(χ²=10.510,P=0.015);TS+和TS-患者的恶心呕吐(χ²=18.644,P<0.001)、腹泻(χ²=16.518,P<0.001)和口腔黏膜炎(χ²=23.344,P<0.001)发生的严重程度分布差异有统计学意义;TS+患者的3年总生存率为38.3%,而TS-为31.4%(Log rank χ²=6.417,P=0.011,HR=1.784,5%CI:1.084～2.936)。结论 TS基因表达情况对结直肠癌患者接受FOLFOX方案化疗的疗效和安全性具有一定预测作用,其中TS还可预测患者中期生存情况。     

胸苷酸合成酶和二氢嘧啶脱氢酶的表达与乳腺癌临床病理特征及预后的相关性

目的: 探讨胸苷酸合成酶（thymidylate synthase, TS）和二氢嘧啶脱氢酶（dihydropyrimidine dehydrogenase, DPD）在南疆地区乳腺癌患者肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法: 免疫组织化学染色法检测60例乳腺癌患者癌组织及其配对的癌旁组织中TS和DPD的蛋白表达;分析TS和DPD表达与临床病理特征的关系;Kaplan Meier法分析TS和DPD蛋白表达与患者生存时间的关系。结果： 乳腺癌组织中TS和DPD阳性表达率分别为56.67%（34/60）、46.67%（28/60）,均显著高于癌旁组织［36.67%（33/60）、26.67%（16/60）,均P＜0.05］;癌组织TS的表达与临床分期、组织分化程度和淋巴结转移显著相关（P＜0.01或P＜0.05）,而DPD表达仅与淋巴结转移显著相关（P＜0.05）。TS阳性表达患者生存时间显著低于阴性患者（P＜0.05）,而DPD表达与生存期无明显相关（P>0.05）。 结论： 乳腺癌组织中TS和DPD异常高表达,TS表达与部分临床病理特征以及患者生存时间相关。     

晚期肺腺癌胸苷酸合成酶和培美曲塞疗效分析

目的 探讨ⅢB/Ⅳ期肺腺癌胸苷酸合成酶(TS)与培美曲塞化疗疗效的关系.方法 回顾性分析38例接受以培美曲塞化疗的ⅢB/Ⅳ期肺腺癌,RT-PCR法检测肿瘤标本TS表达.并对化疗疗效进行分析.结果 TS高表达(+)26.32(10/38),TS表达与患者的性别、临床分期、PS评分无关.化疗客观缓解率(CR+PR)为34.21(13/38),其中TS低表达患者客观缓解率为39.29%(11/28).而TS高表达患者客观缓解率为20.00%(2/10),差异无统计学意义(P=0.087);TS低表达患者疾病控制率为89.29%(25/28),TS高表达患者疾病控制率为40.00%(4/10),差异有统计学意义(P=0.002).结论 推测TS可作为NSCLC对培美曲塞的敏感性预测指标之一.     

胸苷酸合成酶基因多态性与不同种族乳腺癌FEC方案化疗不良反应相关性研究

目的 了解胸苷酸合成酶基因（TYMS）多态性在乳腺癌患者中的分布及其基因型与化疗不良反应的关系。方法 选取雌激素受体基因5′端非编码区的28 bp串联重复序列（VNTR）作为遗传标记,运用PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析法对50例白种人和23例亚裔乳腺癌患者进行基因分型,结合患者临床病理特征、FEC化疗不良反应和生存数据进行分析。结果 TYMS 28 bp VNTR 基因型在白种人群2R/2R、2R/3R和3R/3R的基因型频率分别为12.0%、62.0%和26.0%,在亚裔人群分别为4.4%、30.4%和65.2%,差异有统计学意义（P〈0.05）。TYMS 28 bp VNTR位点的等位基因及基因型与患者组织学类型、组织学分级、淋巴结转移、临床分期、雌激素受体、孕激素受体和人类表皮生长因子受体-2表达等无关。所有患者平均随访时间43.21个月,复发5例,死亡5例;单因素及多因素分析提示TYMS基因型不是影响预后因素。亚裔人群化疗后3-4级白细胞减少症发生率显著高于白种人群（86.96% vs 60.00%,P=0.021）;TYMS 28 bp VNTR 3R/3R基因型中,3-4级白细胞减少症发生率高于2R/3R、2R/2R,但差异无统计学意义（75.00% vs 65.79%,57.14%,P=0.578）。结论 白种人与亚裔乳腺癌患者FEC化疗耐受性存在差异,可能与两者TYMS基因28 bp VNTR多态性差异有关。     

肺癌组织中胸苷酸合酶与细胞增生核抗原蛋白的表达

目的研究胸苷酸合酶(TS)、细胞增生核抗原(Ki-67)在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的表达及临床意义;观察TS、Ki-67在NSCLC癌组织表达水平的相关性。方法应用免疫组化SP染色法检测了51例不同临床特征的NSCLC癌组织标本的TS和Ki-67的表达水平。结果TS与Ki-67蛋白总阳性率分别为68.6%(35/51)、72.5%(37/51),在不同组织类型癌组织的表达差异均无显著性;TS与癌组织分化程度差异有显著性(P<0.05),与TNM分期、淋巴结转移差异无显著性(P>0.05);Ki-67与分化、TNM分期、淋巴结转移差异有显著性(P<0.05);TS与Ki-67两者之间的表达水平呈显著正相关(r=0.84),TS各组别的Ki-67表达具有显著差异性。结论TS、Ki-67是判断NSCLC分化及增殖程度有价值的指标。     

胰腺癌细胞胸苷酸合成酶基因多态性与其蛋白表达及5-FU化疗敏感性的关系

Background  Thymidylate synthase (TS) is a key regulatory enzyme for de novo DNA synthesis. TS activity is also an important determinant of the response to chemotherapy with fluoropyrimidine prodrugs, and its expression may be affected by gene polymorphisms. In this study, we investigated the associations between polymorphisms of the TS gene and its protein expression, and the implications on the efficacy of 5-fluorouracil (5-FU) in pancreatic cancer cells.

Methods  Genotypes based on the 28-bp TS tandem repeat for pancreatic cell lines were determined by electrophoretic analysis of PCR products. A single nucleotide polymorphism (SNP) at nucleotide 12 of the second 28-bp repeat of the 3R allele was determined by nucleotide sequencing. The chemosensitivity of pancreatic carcinoma cells to 5-FU in vitro was evaluated using Cell Counting Kit-8 (CCK-8). TS protein expression was analyzed by Western blotting.

Results  Seven pancreatic carcinoma cell lines had different genotypes in terms of the 28-bp TS tandem repeat, as follows: homozygous 2R/2R (T3M4 and BxPC-3 cells), heterozygous 2R/3R (AsPC-1, Capan-1, and SU86.86), and homozygous 3R/3R (PANC-1 and COLO357). The optical density ratio of genotypes 3R/3R, 2R/2R and 2R/3R was 1.393±0.374, 0.568±0.032 and 0.561±0.056, respectively. Cells with the 2R/3R or 3R/3R genotypes were further analyzed for the G to C SNP at nucleotide 12 of the second 28-bp repeat of the 3R allele, yielding heterozygous 2R/3Rc (AsPC-1, Capan-1, and SU86.86), homozygous 3Rg/3Rg (COLO357) and homozygous 3Rc/3Rc (PANC-1). The optical density ratio of homozygous 3Rg/3Rg cells and homozygous 3Rc/3Rc cells was 1.723±0.062 and 1.063±0.134, respectively, and this difference was statistically significant (P <0.05). Cells with the 2R/2R and 2R/3R genotypes of TS were hypersensitive to 5-FU in vitro as compared with those with the 3R/3R cells.

Conclusions  Polymorphisms in the TS gene influenced its protein expression and affected sensitivity of 5-FU in seven pancreatic cancer cell lines. Cells with the 3R/3R genotype had higher TS protein expression than the 2R/2R or 2R/3R genotypes. Cells of the 3R/3R genotype with high TS protein expression were shown lower 5-FU sensitivity than cells with the 2R/2R or 2R/3R genotypes. These data warrant large-scale clinical studies to assess the role of polymorphisms in the TS gene on its protein expression and chemosensitivity to 5-FU in pancreatic cancer.

     

TS 蛋白表达在培美曲塞治疗晚期肺腺癌患者疗效的意义

目的：探讨胸苷酸合成酶（ TS）表达水平在培美曲塞治疗晚期肺腺癌患者疗效的意义。方法：回顾性分析30例接受培美曲塞联合顺铂化疗的ⅢB/Ⅳ期肺腺癌患者,运用免疫组织化学方法检测患者癌组织中 TS 蛋白表达,并随访1年,对化疗疗效进行分析。结果：30例患者中,TS 阳性表达率为23.33％,TS 表达与患者的性别、年龄及临床分期无关（P﹥0.05）。TS 表达阴性患者客观缓解率（RR）为43.48％,而 TS 表达阳性患者 RR 为14.29％,差异无统计学意义（P=0.215﹥0.05）;TS 蛋白表达阴性患者疾病控制率（DCR）为91.30％,TS 蛋白表达阳性患者 DCR 为42.86％,差异有统计学意义（P =0.016﹤0.05）。Kaplan-Meier 生存曲线显示：TS 蛋白阴性表达者1年 DFS 高于阳性表达者,差异有统计学意义（P =0.047﹤0.05）。结论：TS 可作为预测肺腺癌患者对培美曲塞的敏感性的指标,TS 表达阴性肺腺癌患者可以从含培美曲塞的化疗方案中获益。     

乳癌组织中TP、TS mRNA及蛋白的表达

目的：探讨乳癌组织中TP、TS mRNA及蛋白表达水平及其与临床病理特征、预后的关系。方法：采用定量PCR及免疫组化技术检测经“微选”的9例正常乳腺组织和86例乳癌组织TP、TS的mRNA和蛋白表达水平。结果：TP、TS mRNA在乳癌及正常组织中的表达水平存在明显的个体差异。TP、TS的mRNA与蛋白表达无相关性(r=0．147,P=0．114和r=0．111,P=0．114)。TP、TS mRNA或蛋白表达与肿瘤体积、淋巴结转移、组织学分级、临床分期均无关。10a随访结果显示TP表达与预后无关,而高TS mRNA或蛋白表达患者总生存期短于低表达者,显示较差的临床预后。结论：乳癌和正常组织巾TP、TS的mRNA、蛋白表达水平变化较大,TS检测可作为判断乳癌预后的指标之一。     

胸苷酸合酶与5-氟尿嘧啶耐药的关系

氟尿嘧啶类药物是治疗恶性肿瘤的常用药 ,特别是 5 -氟尿嘧啶 (5 - fluorouracil,5 - FU)被广泛地用于癌症尤其是胃肠道癌症的化疗。但是 ,一些胃肠道癌症病例对以 5 - FU为主的化疗并不敏感 ,只有部分胃肠道癌症病例对化疗完全或部分敏感 ,其中胃癌的有效率为 35 %～ 6 0 % ,而结直肠癌的有效率仅为 2 0 %～ 4 0 % [1 ]。部分敏感病例在化疗过程中产生了继发性耐药。为提高对 5 - FU原发性或继发性耐药患者的治疗效果 ,有必要阐明癌症患者对 5 - FU耐药的机制 ,找出能用于评价 5 - FU化疗敏感性的指标 ,以利于调整化疗方案以克服癌症患…     

胸苷酸合成酶基因多态性与肿瘤化疗敏感性的关系

胸苷酸合成酶（thymidylate synthase,TS）在嘧啶代谢中发挥重要作用,是DNA合成的关键酶.它能与甲基辅基将一磷酸脱氧尿苷（deoxy uridine monophosphate, dUMP）甲基化成脱氧胸苷三磷酸（deoxythymidine triphosphated,dTMP）作为嘧啶的类似物,5-FU代谢物氟脲嘧啶脱氧核苷酸（5-fluoro-2-deoxyuridylate,FdUMP）与TS及甲基辅基形成三聚物,阻断dTMP形成,     

TS表达与MMR状态联合检测在结直肠癌预后中的研究进展

胸苷酸合成酶(thymidylate synthetase, TS)是5-Fu(5-fluorouraci)发挥抗代谢作用治疗胃肠道恶性肿瘤的重要作用靶点,TS mRNA及蛋白表达与5-FU类药物的敏感性和抗药性密切相关。DNA错配修复MMR蛋白缺乏可以引起微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)。MSI亚型与5-FU类药物的疗效及结直肠癌患者预后相关。目前,将TS表达或MMR状态单独作为结直肠癌预后因子仍存在争议,因此联合检测TS表达与MMR状态 来判断结直肠癌患者预后的研究受到越来越多的关注。     

Relationship between the expression of thymidylate synthase,thymidine phosphorylase and dihydropyrimidine dehydrogenase and survival in epithelial ovarian cancer

The mRNA and protein expression of thymidylate synthase (TS), thymidine phosphorylase (TP) and dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD) and their relationship with prognosis were investigated. Real-time quantitative RT-PCR (Taqman) was used to detect the mRNA expression of TS, TP and DPD in formalin-fixed and paraffin-embedded 106 samples of epithelial ovarian cancer and 29 normal ovaries. A TATA box-binding protein (TBP) was used as an endogenous reference gene. A relationship between TS, TP, DPD expression a...