青海省布氏菌菌株的分布和特点

随着布病防治工作的深入,为了解我省布氏菌菌株的分布和特点,对多年来分离的113株布氏菌作了种的鉴定。这些菌株包括有:1954年以来由我省畜牧兽医部门从畜间分离的67株布氏菌;1958年以来由布防工作组在人间分离的41株布氏菌,以及在1978年和1981年由海西州地方病防治所从野生岩羊和黄羊中分离的5株布氏菌。并对其中的59株作了生物型的鉴定。鉴定用的对照菌株有羊种布氏菌16M、牛种布氏菌544A 和猪种布氏菌1330S。鉴定试验选用国内外常用的布氏菌的种和生物型鉴定     

薄层层析技术鉴别标准布氏菌株的研究

布鲁氏菌的氧化代谢国内外多用气压计法测定菌株呼吸商来确定,以此鉴别布氏菌种型,该法费力又危险。国外有关学者应用薄层层析法研究布氏菌的氧化代谢特点,但用该技术鉴别布氏菌种型在国内外未见公开报道。作者用7种氨基酸5种糖做为基质,用薄层层析法对国际6株标准布氏菌的氧化代谢特性进行了研究,结果比Balke描述的改良方法能快速有效的鉴别布氏菌种,结果如下。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 标准菌株:16M、544A、1330S、RM6/66及63/290和5K33均由中国药品生物制品检定所购之     

抗粗糙型布氏菌血清的研究：两种不同的抗绵羊附睾种血清的研制

作者用绵羊附睾种布氏菌国际株及地方株各一,进行生物型特性鉴定。发现国际株必须在含有5～10%CO_2条件下才能生长,而地方株在无CO_2条件下亦可生长。二菌株分别注射家兔腘窝淋巴结获得高效价血清,与犬种菌相互间有共同的交叉凝集反应。经犬种布氏菌吸收后,能突出单相特异性,但地方株抗血清对犬种布氏菌交叉反应明显低于国际株。初步看来二菌株不但生物型特性有别,在抗原结构上亦有异。该血清可用于绵羊附睾种布氏菌的鉴定。     

应用PCR技术对L型布氏菌的检测

近２０年来，随着分子生物学技术的发展，多聚酶链反应（PCR）技术已广泛应用于各种传染病病原因子的检测犤１犦，而对布氏菌的抗原的检测亦有报道犤２，３犦，但对布氏菌L型DNA的检测未见报道，研究布氏菌L型的生物学特性，对于慢性潜伏型布氏菌病（简称布病）的临床诊断及布病的流行病学都具有很重要的意义。我们应用PCR方法对布氏菌L型提取的DNA进行了检测。实践证明，该方法对于检测布氏菌L型是有效的，图１牛种布氏菌１０４M，１０４M诱变２２代L型及牛种布氏菌非典型株８５００７诱变１０代L型的DNA基因扩增后电泳图１材料…     

1980～1989年内蒙古检出布氏菌分析

内蒙古自治区1980～1989年从8盟2市35个旗(县)检出352株布氏菌。按常规法鉴定有羊种菌114株、牛种菌227株、猪种菌3株、犬种菌1株及不能按当前常规法分类归属的非典型布氏菌7株。现将菌株特点分析如下。     

从野生动物岩羊体中分离到的布鲁氏菌的鉴定报告

本文介绍了从青海省野生动物岩羊体内分离到的8株布氏菌,经噬菌体裂解试验、氧化代谢试验和常规分型鉴定,结果定为羊种布氏菌1生物型的有4株、3生物型的有2株,猪种布氏菌1生物型1株,另有1株为难以定种非典型株。     

非典型鼠疫耶尔森氏菌及其流行病学意义的研究

通过抗生素疫血清，鼠疫噬菌体，抗鼠疫噬体血清及吖啶黄的人工培养基对鼠疫强毒菌株诱变，获得了９株非典型鼠疫菌株，对其进行了生物学特性研究，采用部分非典型鼠疫菌株做了动物（豚鼠）试验，通过动物模型对带菌时间，部位及突变和返祖过程进行了研究。本文建立了诱变方法及非典型鼠疫菌的检测方法，提出了非典型鼠疫菌的流行病学意义和鼠疫监测对策以及以非典型鼠疫菌作为一种形式在自然界长期保存循环的可能性，并为根除鼠疫自     

从北京某地分离的2株犬种布氏菌的鉴定报告

目的对从北京某地分离的2株布氏菌进行鉴定。方法布氏菌常规鉴定分型方法,布氏菌噬菌体裂解试验,同时辅以脉冲场电泳基因分型方法。结果2株待测菌株均为犬种布氏菌,2株待测菌的脉冲场电泳图谱与国际标准犬种布氏菌RM6/66株的图谱完全一致。结论采用传统布氏菌分型方法同时辅以脉冲场电泳基因分型方法对布氏菌进行分型鉴定,可以增加鉴定工作的稳定性与正确性。     

江苏省三起甲型副伤寒爆发菌株与散发菌株的基因型及药物敏感 …

目的 比较江苏省三地区连续发生的甲型副伤寒爆发与散发菌株在分子水平的联系，及其药物敏感性。方法 采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析方法，对爆发及散发菌株进行基因分型，采用Ｋ－Ｂ法对两类菌株进行药敏测定。结果 ３１株菌呈四个基因型图谱，爆发与散发菌株中基因Ⅰ型皆占优势，爆发株对链霉素、氨苄西林、头孢拉啶的耐药率从４．６％～２５．９％，结论 ＲＡＰＤ基因Ⅰ型皆占优势，爆发株对链霉素、氨苄西林、头     

两株非典型羊种布鲁氏菌的鉴定报告

<正> 近年来由于临床上广泛应用抗生素和其它因素的影响,使分离到的布氏菌非典型株日趋增多,正确地鉴定其种、型可为布氏菌病的防治提供可靠依据。本文着重介绍两株非典型布氏菌用六群噬菌体裂解试验及氧化代谢试验等手段参考常规鉴定方法,给以正确的分类。     

不同种布鲁氏菌过氧化氢酶的测定

本文报道了通过对布鲁氏菌属不同种细菌的过氧化氢酶活性的测定,证实了所有种的布鲁氏菌均有过氧化氢酶活性,除犬种布鲁氏菌外,其他种的活性差别不大,而犬布鲁氏菌的过氧化氢酶活性高于其他种布鲁氏菌4倍。这一特性可作为犬种布鲁氏菌鉴定的辅助手段之一。     

布鲁氏菌外膜蛋白的研究——Ⅲ.牛种、羊种布鲁氏菌非典型株外膜蛋白SDS—PAGE图谱的特点

牛种、羊种布鲁氏菌非典型株的菌细胞经机械方法破碎、酶解后用两性离子去污剂提取其外膜蛋白并与光滑型菌株的相应成分进行SDS-PAGE图谱比较,发现两种类型的菌株外膜蛋白图谱有极大的相似之处(即布鲁氏菌光滑型菌株所共有的谱带,非典型株也全具备),但非典型株与光滑型菌株不同的是分子量大于97.4kD的热修饰蛋白电泳谱带发生丢失现象:即这一组的谱带除一条明显变宽外,其余着色变浅或基本消失,当热修饰蛋白在高温SDS系统解聚成单体后,其电泳谱带牛种菌两种类型的菌株基本一致,但对羊种菌非典型株的单体却明显增加了两条谱带,以此显示与光滑型菌株的不同。     

内蒙古乌兰察布布氏菌分离株种型鉴定及流行病学特征分析

目的 鉴定临床分离布氏菌种型,并分析患者的流行病学特征。方法 以牛种、羊种、猪种标准参考菌株为试验对照,采用经典方法和VITEK2.0进行初步鉴定,用AMOS-PCR进行确证,并分析患者的流行病学特征。结果 经典鉴定115株均为羊种菌,羊3型93株,羊1型22株;115株菌ProA、TyrA、URE和GlyA全部阳性;91株ELLM阳性、14株APPA阳性,提示均为布氏菌,其中羊种菌91株,猪种菌14株。与经典实验的鉴定符合率比较鉴定布氏菌属100%,鉴定布氏菌种为79%(91/115);AMOS-PCR均获得了约731 bp的特异性扩增条带,证实全部为羊种菌。初诊患者84例,构成比为73%;临床表现以疼痛、发热、乏力、多汗居多;88例患者就诊前无用药史,2例有布病治疗史。结论 VITEK2.0是一种高效的布氏菌鉴定方法,但不能替代经典方法;羊种3型菌为该地区的主要流行菌种,再感染可能是慢性患者或有布病治疗史患者分离到布氏菌的主要因素,初诊、未用抗生素且症状典型是分离布氏菌的重要指标。     

PCR-HRM方法快速鉴定布鲁氏菌的初步应用

目的 本研究旨在建立准确、快速地鉴定布鲁氏菌菌种及生物分型的PCR-HRM(高分辨率熔解曲线)方法。方法 根据目的基因序列,参考文献合成6对基因扩增引物(1对布鲁氏菌属特异引物,5对种间特异引物),应用PCR-HRM方法鉴定布鲁氏菌属6个种19个生物型的标准菌株,并初步应用到临床分离的35株布鲁氏菌中。结果 采用布鲁氏菌属特异引物(Bspp),6个种19个生物型的标准菌株均扩增出同样形状的溶解曲线,与其它对照菌株的曲线不同;采用5对种特异引物,6个种的标准菌株均有特征性PCR-HRM曲线;临床分离的35株布鲁氏菌的PCR-HRM曲线与羊种布鲁氏菌标准菌株的一致。结论 该研究采用的PCR-HRM分析方法,获得了布鲁氏菌属及6个种标准菌株的不同曲线图,可准确鉴定临床分离的羊种布鲁氏菌,可用于临床微生物实验室疑似布鲁氏菌感染的初步鉴定。     

2018年江苏省人感染布鲁氏菌分离株分子特征分析

目的 掌握江苏省2018年人感染布鲁氏菌主要流行株的种型和基因型。方法 运用普通PCR及AMOS多重PCR确认分离株的生物种型;采用多位点序列分型(Multilocus sequence analysis, MLSA)和多位点串联重复序列分析(Multiple-locus variable number tandem repeat analysis, MLVA)鉴定基因型,并与国内外流行株进行聚类分析。结果 2018年共分离到56株布鲁氏菌,MLSA分型显示一株菌为猪种布鲁氏菌ST (Sequence type)17型,其他均为羊种布鲁氏菌ST8型。MLVA将56株菌分为47个基因亚型(46个羊种,1个猪种),聚类显示羊种布鲁氏菌全部为“东地中海簇”。结论 2018年江苏省人感染布病主要为“东地中海簇”的ST8型羊种布鲁氏菌,并首次发现一例人感染ST17型猪种布鲁氏菌。     

贵州省首次从山羊分离到布鲁氏菌及其种型鉴定

目的从贵州布鲁氏菌抗体阳性的山羊血液分离布鲁氏菌病原体并对其进行种型鉴定。方法采用血培养法对经试管凝集试验检测为布鲁氏菌抗体阳性的山羊血血液进行细菌分离培养,并应用传统方法和和分子生物学方法对可疑菌落进行种型鉴定。结果11份（GZB 01—11）抗体阳性的山羊血标本中有4份（GZB03、GZB04、GZB09、GZB11）经血培养瓶培养出布鲁氏菌可疑菌落,可疑菌落经传统方法鉴定为羊种生物3型布鲁氏菌,4株菌进一步采用布鲁氏菌属特异性PCR（BCSP31-PCR）鉴定为布鲁氏菌属细菌,GZB03,GZB04,GZB11经种／型特异性PCR（AMOS-PCR）将其定为羊种布鲁氏菌,而GZB09采用该方法不能定种。结论从11份贵州省布鲁氏菌抗体阳性山羊血样中分离到4株羊种布鲁氏菌,首次证实贵州省存在羊种布鲁氏菌。     

福建省布鲁氏菌分离株的分子生物学鉴定

目的利用分子生物学方法鉴定福建省布鲁氏菌分离株。方法对布鲁氏菌分离株进行AMOS-PCR和MLVA分型。结果3株福建省分离株经AMOS-PCR鉴定为羊种,与传统生物学分型一致;MLVA分型将其分为3个基因型,聚类分析鉴定为羊种。结论AMOS-PCR、MLVA分型可以作为我省布鲁氏菌分离株鉴定的辅助手段。     

2009-2012年宁夏人群感染布鲁氏菌种型分布特征

目的鉴定2009—2012年宁夏分离的布鲁氏菌,掌握感染人群的主要布鲁氏菌种型。方法采用血培养瓶从试管凝集试验（SAT）抗体阳性的病人血液中分离布鲁氏菌,利用传统生物学特性鉴定方法结合聚合酶链式反应（PCR）和A,M,O,S-聚合酶链式反应（AMOS-PCR）方法进行种型鉴定。结果从目标人群中共分离22株菌,PCR检测均扩增出223bp的特异性条带,鉴定为布鲁氏菌。AMOS-PCR中均扩增出178bp和731bp的特异性条带,鉴定为羊种布鲁氏菌,结合染料抑菌试验、噬菌体裂解和特异性血清凝集试验结果,22株菌均为羊种3型布鲁氏菌。结论2009—2012年宁夏人群感染布鲁氏菌主要为羊种3型布鲁氏菌,PCR和AMOS-PCR可作为布鲁氏菌分离鉴定的辅助方法推广使用。     

Phylogeny of Brucella abortus strains isolated in the Russian Federation

Objective: To study Brucella(B.) abortus strains isolated in the Russian Federation, in order to identify their detailed position in the phylogenetic structure of the species global population as well as to determine genetic relationships for isolates from different geographical areas.Methods: Based on Bayesian method, the whole genome singlenucleotide polymorphism(SNP) analysis of 258 B. abortus strains from different geographical areas of the world including 20 B. abortus strains isolated in Russia was carried out. Results: The core genome SNP analysis of the B. abortus isolates allowed describing the main genetic lineages. The Russian strains entered two separate clades, including the basal branch and the C1 branch that is widely spread in Eurasia. The data on the isolation time was used for the dating of phylogenetic tree, and also the estimated time frame for the B. abortus genotype diversification was determined. There were sets of specific SNPs identified, which defined each of the genotypes and sub-genotypes.Conclusions: A significant genetic diversity of the brucellosis pathogen strains from Russia has been proven. The sets of unique specific SNPs described in our study may become one of the elements within a bio-informational analysis algorithm to be used for epidemiological study of brucellosis outbreaks, including those caused by new(atypical) genetic variants of B. abortus.