低密度脂蛋白对肾小珠系膜细胞,TGF—β和FN mRNA表达的影响

目的：观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭＳＣ）生长及转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和纤维连接蛋白（ＦＮ）基因表达的影响。方法：体外培养的ＭＳＣ培养液中加入ＬＤＬ共同孵育,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入法检测ＭＳＣ增殖情况,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＴＧＦ－β ｍＲＮＡ、ＦＮ ｍＲＮＡ的表达,应用斑点杂交法检测抗ＴＧＦ－抗体对ＦＮ ｍＲＮＡ表达的影响。结果（１）ＬＤＬ刺激ＭＳ     

一氧化氮对慢性缺氧大鼠肺动脉内皮素基因表达的影响

目的探讨一氧化氮对慢性缺氧大鼠肺动脉内皮细胞及平滑肌细胞内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ表达的影响，全面了解缺氧性肺动脉高压的发病机制。方法对经Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及Ｎω－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理的慢性缺氧大鼠（４０只）肺组织，以ＥＴ－１ｃＲＮＡ探针进行原位杂交。结果缺氧１周及缺氧２周大鼠大部分肺动脉（７５％±３％及７１％±６％）其１％～５０％的内皮细胞显示ＥＴ－１ｍＲＮＡ杂交阳性信号。Ｌ－Ａｒｇ使大鼠肺动脉内皮细胞ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显抑制，而Ｌ－ＮＡＭＥ使其表达明显增强。缺氧１周及缺氧２周大鼠大部分肺动脉（８５％±６％及９８％±２％）的平滑肌细胞无ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达，但Ｌ－ＮＡＭＥ使其表达增强。结论一氧化氮对慢性缺氧大鼠肺动脉内皮细胞及平滑肌细胞ＥＴ－１－ｍＲＮＡ表达均有抑制作用。     

氧化修饰的低密度和极低密度脂蛋白对巨噬细胞单核趋化蛋白表达的影响

探讨氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）是否能诱导巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ和蛋白，以阐明二者在动脉粥样硬化发生中的作用。方法在巨噬细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）、ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ，３７℃下温育２４小时，收集巨噬细胞的条件培养基，同时用异硫氰酸胍法提取巨噬细胞总ＲＮＡ。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析的方法检测巨噬细胞ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达，用夹心ＥＬＩＳＡ检测其条件培养基中ＭＣＰ－１蛋白的含量。用微孔滤膜法进行单核细胞的趋化试验。结果当巨噬细胞分别暴露于ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ２４小时后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达明显增加，同时单核细胞迁移距离的明显增加。而当巨噬细胞分别暴露于ＬＤＬ和ＶＬＤＬ２４小时，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达只有轻微的增加，单核细胞迁移距离亦无明显的增加。结论巨噬细胞能表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白，ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ能诱导该细胞更强地表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白     

氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用

单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种强的单核细胞趋化因子，在体外可由多种细胞分泌，包括血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的作用。结果表明，培养的ＳＭＣ可表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ，而且ＳＭＣ暴露于ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平明显增高，分别增高约１１倍、６倍和２０倍。因此我们认为ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ可以刺激培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达。     

无症状心肌缺血患者血脂及载脂蛋白的变化

测定１４８例无症状心肌缺血（ＳＭＩ）患者及３０名健康人血脂及载脂蛋白。结果表明：各型ＳＭＩ血脂及载脂蛋白均有异常，以Ⅱ和Ⅲ型更为显著。患者ＳＴ段下移程度与血清ＴＧ，ＴＣ，ＬＤＬ，ＡｐｏＢ１００，ＡｐｏＢ１００／ＡｐｏＡⅠ，Ｌｐ（ａ）呈正相关，与ＡｐｏＡＩ，ＨＤＬ－Ｃ，ＨＤＬ２－Ｃ，ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ呈负相关。提示血清ＴＧ，ＬＤＬ－Ｃ浓度以及ＡｐｏＢ１００／ＡｐｏＡⅠ值升高和ＨＤＬ２－Ｃ浓度降低是ＳＭＩ的独立危险因素     

低密度脂蛋白对静脉内皮细胞抗凝功能的影响

作者通过不同浓度的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）与培养的新生小牛腔静脉内细胞（ＥＣ）孵育后，应用凝血酶、蛋白Ｃ和Ｓ－２２３８的发色底物显色法，检测单层ＥＣ膜上血栓调节蛋白（ＴＭ）辅助激活产生活化蛋白Ｃ（ＡＰＣ）的量，以此观察ＴＭ功能的变化。结果显示：ＬＤＬ孵育浓度≥２５μｇ／ｍｌ后，ＡＰＣ生成受抑；两者间呈负相关（ｒ＝－０．８７，ｎ＝２８６，Ｐ＜０．００１）；随着ＬＤＬ孵育时间延长，ＴＭ受抑加重，６ｈ孵育后受抑较２ｈ为著；动力学分析表明ＬＤＬ预处理使ＡＰＣ整个生成过程受抑；降低了ＡＰＣ生成率，早期尤甚，使生成率－反应时间曲线的曲率半径增大；ＡＰＣ生成反应速率出现前期减慢、后期加速的变化等。这些变化提示高脂可以通过抑制血管壁ＴＭ功能来影响机体局部抗凝功能。     

血小板生成素突变体融合蛋白表达及纯化研究

目的：用大肠杆菌融合蛋白表达载体ｐＭＡＬ－ｃ２构建人血小板生成素突变体融合蛋白表达质粒ｐＭＡＬ－ＴＯＰＭ，方法：采用基因重组和表达，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺胶电泳和蛋白纯化技术。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，ＩＰＴＧ诱导５ｈ后大肠杆菌ＪＭ１０９表达到最高水平，约占大肠杆菌菌体总体蛋白的３６．６％，除了大肠杆菌ＲＲ１不表达以外，大肠杆菌ＤＨ５αＨ１０１均有较高水平的表达，表达产物血小板生成素突变体融合蛋     

狭缝印迹杂交分析癌转移抑制基因nm23在人肺癌中的表达

为探讨癌转移抑制基因在人肺癌发生、发展中的作用，采用狭缝印迹杂交技术检测了不同部位、不同性质人肺组织中的ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的ｍＲＮＡ表达。结果发现，ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ＡＤＬＤＲ ＭｒｎａＧＥ ＤＰ ，ＦＴＪＢ     

糖皮质激素对哮喘豚鼠支气管粘膜ICAM—1,E—选择素表达的影响

目的：研究糖皮质激素对哮喘豚鼠支气管组织中的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）ｍＲＮＡ，Ｅ－选择素ｍＲＮＡ表达的影响。方法：实验豚鼠被随机分为正常对照缚，地塞米松（Ｄｅｘ）治疗组和哮喘组，用原位杂交方法显示ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ及Ｅ－选择素ｍＲＮＡ的表达变化，结果：原位杂交结果显示，ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ，Ｅ－选择素ｍＲＮＡ在正常豚鼠支气管粘膜下的小血管，毛细血管内皮细胞及（或）支气管上皮细胞有基础表达     

天然及氧化型低密度和检低密度脂蛋白诱导培养的内皮细胞 …

为探讨天然及氧化修饰脂蛋白对培养的内皮细胞ＭＩＰ－１α及ＶＤＭ－１ｍＲＮＡ表达的作用，取正常人新鲜血液，用超速梯度离心法分离出ＬＤＬ和ＶＬＤＬ后，加Ｃｕ＾２＋使之氧化，成为ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ。培养人脐静脉内皮细胞（ＥＣ），待其汇合后分别加放ＬＤＬ、ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＯＸ－ＶＬＤＬ，使其终浓度为２５ｕｇ／ｍｌ，对照组不加脂蛋白。培养２４ｈ后，收集ＥＣ，用异硫氰酸胍法提取其总ＲＮＡ，用     

Protective effects of apolipoprotein CII on endothelial cell injury induced by low density lipoprotein]

Human umbilical vein endothelial cells (EC) were cultured. The protective effects of high density lipoprotein (HDL) and apolipoprotein CII (apoCII) on the morphology and function of EC injured by low density lipoprotein (LDL) were studied by observing the morphological changes with phase-contrast and transmission electron microscopy, measuring the release of lactate dehydrogenase (LDH) and secretion of 6-Keto-prostaglandin F1 alpha. The EC injured by LDL showed cell contraction, membrane damage, increased release of LDH and decreased secretion of PGI2. When HDL or apoCII was added to culture media before LDL addition, the EC showed normal morphology, normal LDH release and PGI2 synthesis. The results indicated that both HDL and apoCII can resist the injurious effect of LDL on cultured EC and that apoCII as well as HDL may play an important role in combating atherogenesis.     

高脂血症小鼠心脏和肺组织中eNOS及HO-1的表达

 目的 观察高脂饲料喂养的小鼠心脏和肺组织中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric-oxide synthase, eNOS）及血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）的含量变化，探讨高脂血症对eNOS和HO-1表达的影响。方法 高脂饮食组（n=8）和普通饮食组（n=8）C57BL/6小鼠分别经高脂饲料和普通饲料喂养18周后，测血清总胆固醇（total cholesterol, TC）、甘油三酯（triglyceride, TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）和低密度脂蛋白（low density lipoprotein, LDL）含量，采用Real-Time PCR检测心脏和肺组织中eNOS及HO-1的mRNA水平，以免疫组化方法检测其蛋白表达。结果 高脂饮食组TC、TG和LDL明显高于普通饮食组，HDL则低于普通饮食组；高脂饮食组心脏和肺组织中eNOS的mRNA和蛋白水平低于普通饮食组，HO-1的mRNA和蛋白水平高于普通饮食组。结论 高脂饲料喂养能使小鼠形成高脂血症，并引起心脏和肺组织中eNOS的表达降低，同时HO-1的表达升高。     

心脉神口服液对氧化型低密度脂蛋白介导的内皮细胞ICAM-1表达变化的影响

目的：探讨中成药制剂心脉神口服液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)致血管内皮细胞（VEC）表面ICAM－1表达升高的保护作用。方法：以原代培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为研究对象，采用细胞培养，免疫荧光染色，中药血清药理学方法，免疫荧光细胞化学染色法等技术，观察ox-LDL对培养的VEC细胞间粘附分子－1（ICAM－1）表达的影响并研究心脉神口服液的保护作用。结果：培养液中加有ox-LDL的内皮细胞ICAM－1表达明显升高，预先或同时加入心脉神口服液可使ICAM－1表达降低，结论：心脉神口服液能浓度依赖性地拮抗ox-LDL致内皮细胞ICAM－1表达升高。     

脂蛋白对人血管内皮细胞间隙连接通讯功能的影响

The effects of HDL, LDL and ascorbic acid on cultured human vascular endothelial gap junctional intercellular communication (GJIC) were observed using fluorescence recovery after photobleaching assay under confocal laser scanning microscopy in this study. The results showed that in culture, human vascular endothelial cells could produce functional gap junctions. The fluorescence recovery rates of the LDL group were 6.691 +/- 2.634, 4.153 +/- 2.125 and 2.441 +/- 0.720 respectively; when these rates were compared with the control and with each other, significant differences were found(P < 0.05). When the fluorescence recovery rates of the HDL group and Vitamin C group were compared with the control, no significant differences were found(P > 0.05). The fluorescence recovery rates of the LDL + HDL group were 3.500 +/- 0.890, 4.339 +/- 1.126 and 5.243 +/- 1.278(n = 15) respectively, when these rates were compared with the control and with each other, significant differences were found (P < 0.05). These suggested that LDL should be able to inhibit GJIC in human vascular endothelial cells, and the inhibition could be diminished by HDL or ascorbic acid. Inhibition of vascular endothelial GJIC may be one of the atherosclerogenic mechanisms of LDL, whereas HDL and ascorbic acid may be conducive to the improvement of endothelial GJIC. But it may also be only a compensatory behavior of endothelial cells to injuries.     

Protective effect of apolipoprotein A I, A II, C I and C II on endothelial cells injury induced by low density lipoprotein.

OBJECTIVE To investigate the protective effect of apo-lipoprotein (apo) A I, A II, C I and C II, the main proteins in high density lipoprotein (HDL), on the morphology and function of human umbilical vein endothelial cells injured with low density lipoprotein (LDL) in vitro.

METHODS Cultured human endothelial cells derived from umbilical veins were exposed to LDL, HDL, and apoA I, A II, C I and C II. The morphology of endothelial cells was examined with phase contrast and transmission electron microscope. The released amount of lactate dehydrogenase (LDH) and 6-keto-prostaglandin F1 alpha (PGF1 alpha) was also measured.

RESULTS Endothelial cells after being injured by LDL showed cell contraction, increased release of LDH and decreased secrection of prostacyclin (PGI2). However, the addition of HDL, and apoA I, A II, C I and C II before incubation with LDL inhibited the cellular injury induced by LDL as demonstrated by lowered LDH release, increased level of PGF1 alpha and prevention of morphological changes.

CONCLUSIONS The results indicate that apoA I, A II, C I and C II, as well as HDL, may play an important role in combating atherogenesis by protecting endothelial cells from damages induced by LDL.

     

LDL和HDL对培养的人血管内皮细胞的影响

本文以不同胆固醇浓度的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白或将其混合,施加于培养呈融合状态的人脐带静脉血管内皮细胞。通过相差显微镜、扫描电镜和透射电镜观察,发现LDL对内皮细胞有损伤作用,并随所含胆固醇浓度的增高,其损伤程度加重,损伤机制可能与脂质过氧化物的增加有关。HDL对内皮细胞有保护作用,可使其免遭LDL的损伤,可能与HDL可阻止LDL所引起内皮细胞膜中胆固醇的过多或毒性堆积等有关。     

补肾方对去势高脂血症兔血脂及ox-LDL mRNA表达的作用

目的　观察补肾方药对去势高脂血症兔血脂、氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)水平以及ox LDLmRNA表达的影响。方法　纯种新西兰雌兔去势术 0 .5 %胆固醇饲料 静注牛血清白蛋白造模 ,模型动物连续使用雌激素和补肾方药治疗 12周后检测相关指标。结果　与模型组相比 ,补肾方药不但有较好的调脂作用 ,又能降低ox LDL含量 (P <0 .0 5 ) ,并降低ox LDLmRNA的表达 (P <0 .0 5 )。结论　补肾方可改善去势高脂血症模型兔血脂、ox LDL水平 ,减少ox LDLmRNA的表达 ,减少LDL的氧化修饰 ,进而保护内皮细胞功能 ,防治绝经后动脉粥样硬化的作用     

白内障伴青光眼血脂比、胰岛素敏感性、眼内压和角膜内皮细胞的相互关系

目的 探讨白内障伴青光眼超声乳化围术期血脂比、胰岛素敏感性、眼内压和角膜内皮细胞的变化及其相互关系.方法 以白内障伴青光眼患者48例为研究对象,患者行超声乳化联合小梁切除术进行治疗.检测比较患者术前、术后3 d、术后1、3个月的最佳矫正视力、血脂比、胰岛素敏感性、眼内压和角膜内皮细胞等,并采用Pearson线性相关分析法分析其血脂比、胰岛素敏感性与最佳矫正视力、眼内压和角膜内皮细胞等的关系.结果 与术前比较,患者术后1、3个月的低密度脂蛋白(LDL)/高密度脂蛋白(HDL)、三酰甘油(TG)/HDL、总胆固醇(TC)/HDL等血脂比值、眼内压和内皮细胞密度均降低,最佳矫正视力、胰岛素敏感指数、平均细胞面积和面积变异系数均升高(P<0.05).Pearson线性相关分析结果显示,患者LDL/HDL、TG/HDL、TC/HDL等血脂比值与其眼内压和内皮细胞密度均呈正相关(P<0.05),与其最佳矫正视力、平均细胞面积和面积变异系数则均呈负相关(P<0.05);患者胰岛素敏感指数与其眼内压和内皮细胞密度均呈负相关(P<0.05),与其最佳矫正视力、平均细胞面积和面积变异系数则均呈正相关(P<0.05).结论 白内障伴青光眼超声乳化联合小梁切除术治疗可有效控制患者眼压,改善视力和角膜内皮细胞完整性,且其血脂比和胰岛素敏感性与其眼内压、视力和角膜内皮细胞等疗效相关指标均相关,可能用于其疗效的辅助评估.     

雌激素对去势高脂血症兔血脂及氧化型低密度脂蛋白mRNA表达作用的实验研究

目的　观察雌激素对去势高脂血症兔血脂、氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)水平及ox LDLmRNA表达的影响。方法　采用纯种新西兰雌兔去势术 +0 .5 %胆固醇饲料 +静脉注射牛血清白蛋白造模 ,模型动物连续使用雌激素 12周后检测相关指标。结果　与模型组相比 ,雌激素组ox LDL含量及ox LDLmRNA的表达均明显降低 (P值均 <0 .0 5 )。结论　雌激素可改善去势高脂血症模型兔血脂水平 ,调控ox LDLmRNA的表达 ,减少LDL的氧化修饰 ,保护内皮细胞功能 ,防治绝经后动脉粥样硬化。