肝纤维化发病机制与治疗进展

细胞外基质(ECM)的合成增加和降解减少是肝纤维化形成的主要机制,肝星形细胞(HSC)活化是肝纤维化形成的细胞学基础.去除病因,抗炎,抑制HSC活性与增殖,刺激活化HSC凋亡,促进ECM降解均为抗肝纤维化治疗的标靶.间充质干细胞移植抗纤维化尚有争议.基质金属蛋白酶(MMP)基因转导系统因可调控性及安全性问题,用于临床尚需时日.该文就肝纤维化发病机制与治疗进展作了综述.     

星状细胞活化及其作用研究进展

肝星状细胞（HSC）是启动肝纤维化（HF）整个事件的开端，在HF过程中扮演着重要的角色。活化的HSC在肝损伤部位移行、增殖，表达各种细胞外信号转导通路蛋白，产生大量细胞外基质（ECM）成分和细胞因子（CK），是HF形成的中心环节；在HF的恢复期，有与肝脏疤痕降解一致的广泛性的HSC凋亡。因此，诱导活化HSC的凋亡可使HF发生逆转。目前，活化HSC已被看作抗HF治疗的主要靶点。现就HSC活化与HF的关系作一综述。     

抗氧化剂对大鼠肝星形细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的　了解膳食维生素E和硒对大鼠肝纤维化恢复期肝星形细胞 (HSC)增殖和凋亡的影响。方法　采用腹腔内注射 5 0 %CCl4 制备大鼠肝纤维化模型 ,在饲料中添加适量维生素E(2 5 0mg kg饲料 )和Se(0 . 2mg kg饲料 )进行营养干预 ,在最后一次注射后 3、7、14、2 8天 (恢复期 )各处死 3只大鼠取其肝组织 ,用HE和Siriusred染色结合图象分析检测肝纤维化指标 ,用α SMA免疫组化方法检测激活的HSC细胞 ,用原位凋亡 (TUNEL)技术和α SMA免疫组化双标染色检测HSC凋亡。结果　在恢复期各时间点 ,病理对照组和抗氧化干预组激活的HSC数量呈逐步下降趋势 ,同时 ,从恢复期第 7d开始 ,HSC凋亡细胞数以及肝组织内的胶原量亦同步下降 ;在同一时间点 ,干预组激活的HSC数量低于病理对照组 ,而HSC凋亡数和凋亡率均高于病理对照组。结论　饲料中添加适量维生素E和硒能减轻肝纤维化的程度 ,并可能使恢复期HSC凋亡增加 ,激活HSC数量减少。     

Smad蛋白与肝纤维化

肝星形细胞(HSC)是肝纤维化发生发展的关键细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)是促进HSC活化、细胞外基质(ECM)的合成主要因子。在肝纤维化的过程中,TGF-β1-Smad信号转导对HSC的作用非常重要。本文就TGF-β1-Smad信号转导及其调控、Smad与肝纤维化的关系进行阐述。     

TGF-β1/Smads信号通路与肝纤维化

肝纤维化是肝脏对各种刺激的创伤性愈合,主要表现为细胞外基质的过量沉积.肝星形细胞(HSC)被认为是引起肝纤维化的主要细胞,它的活化受到多种细胞因子的调节.TGF-β1在启动和促进HSC向肌成纤维细胞转化的过程中有着重要作用,是目前已知最重要的敛肝纤维化细胞因子之一.此文就TGF-β1/Smads信号通路在肝纤维化发病机制及其治疗方面的作用进行综述.     

凋亡与肝纤维化

肝细胞和肝星形细胞(hepatic stellate cell,HSC)的凋亡与肝纤维化的形成、发展和减退有关。肝细胞凋亡产生的凋亡小体被吞噬细胞吞噬,且肝细胞凋亡本身可引起或加重炎症,均导致肝纤维化发生;HCS则通过细胞凋亡来减退肝纤维化。因此,肝细胞和肝星形细胞凋亡对肝纤维化有重要作用。     

丝裂原诱导基因6在砷致人肝星状细胞活化及细胞外基质沉积中的作用

[背景]砷是一种环境毒物,长期或过量砷暴露可致机体肝纤维化损伤,其具体机制尚不清楚;丝裂原诱导基因6(Mig-6)在多种疾病或癌症中具有保护作用,但其在砷致肝纤维化损伤过程的作用尚不清楚.[目的]探讨Mig-6在亚砷酸钠(NaAsO2)致人肝星状细胞(HSC)活化及细胞外基质(ECM)沉积中的作用及机制.[方法]采用0...     

神经生长因子诱导肝星状细胞凋亡及其相关机制的研究

目的观察神经生长因子（nerve growthfactor,NGF）对大鼠肝星状细胞（hepatic stellatecell,HSC）凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6,将HSC—T6与100ng／mlNGF孵育24h后,流式细胞术检测细胞凋亡;细胞免疫化学法检测HSC中凋亡相关基因P^53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的情况;免疫荧光法检测NGF、神经生长因子低亲和力受体p75NTR表达的情况。结果NGF作用HSC后凋亡率较对照组明显增高[（22．364±9．51）％VS（5．88±1．36）％,P〈0．05]。凋亡相关蛋白P^53、Caspase-3的阳性细胞百分率与对照组比较明显增高[（78．41±4．00）％、（39．26±1．57）％VS（34．96±3．84）％、（9．27±1．01）％,P〈0．05],而Bcl-2表达实验组阳性细胞百分率较对照组降低[（18．12±1．38）％vs（91．53±2．98）％,P〈0．05]。NGF作用HSC后NGF表达增多（6．53±1．40vs1．77±0．17,P〈0．05）,而p75NTR表达无明显变化（3．52±0．36VS4．24±0．38,P〉0．05）。结论NGF可能通过使凋亡相关基因p、Caspase-3表达上调、Bcl-2表达下调,而诱导HSC凋亡。NGF作用HSC后可作为始动因子和效应因子增加NGF的表达,而对p75NTR表达无影响。     

Smad蛋白与肝纤维化研究新进展

肝星形细胞(HSCs)是产生细胞外基质(ECM)的主要细胞,ECM堆积可导致肝结构改变和肝功能异常.转化生长因子-β(TGF-β)是促进HSC活化、增殖,合成ECM的关键分子,而Smad蛋白是TGF-β重要的胞内效应蛋白,在肝纤维化信号转导中起着重要作用.此文就Smad与肝纤维化关系及以Smad为靶点的肝纤维化潜在的治疗价值方面进行综述.     

Smad蛋白——肝纤维化时TGF-β1信号转导的关键物质

肝纤维化的发生是由于细胞外基质的合成与降解的失衡造成的,而细胞外基质(ECM)的主要来源就是肝星形细胞(HSC),HSC的活化、增殖、数量增加,从而使细胞外基质的合成增加、降解减少、平衡破坏,是肝纤维化发生发展的关键因素。TGF-β1正是促进HSC活化、ECM合成的主要起始因子,而Smads蛋白是TGF-β超家族最重要的胞内效应分子。在肝纤维化的过程中,TGF-β1/Smad信号转导对HSC的作用非常重要,它在ECM表达调节中的作用是研究肝纤维化的关键。本文就TGF-β1/Smad信号转导与调控、及其在肝纤维化发生发展过程中的作用进行阐述。     

转录因子FoxO1与肝纤维化

肝纤维化是各种肝细胞毒性物质对肝脏慢性或重复性损伤所引起的肝脏病理改变,肝星形细胞(HSC)激活是肝纤维化的关键因素.研究发现,转录因子FoxO1是调节HSC激活、增殖和迁移的重要因子之一.     

苦参碱对血小板衍生生长因子介导的大鼠肝星状细胞迁移、增殖和凋亡的影响

目的研究苦参碱对体外培养的肝星状细胞（HSC）迁移、增殖与凋亡的影响,探讨苦参碱抗肝纤维化的作用机制。方法用0.25、0.5mg/ml的苦参碱分别处理肝星状细胞-BB型（HSC-T6）和由血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）干预的HSC-T6,观察HSC的生长情况,采用Transwell小室检测细胞迁移,用MTT法测定细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡。结果苦参碱0.25mg/ml组和0.5mg/ml组细胞迁移数、吸光度值均低于空白对照组,细胞凋亡率则明显增高;在有PDGF-BB参与的3组中,苦参碱0.25mg/ml组和0.5mg/ml组的细胞迁移率和吸光度值降低,但是细胞凋亡率在3组之间差别无统计学意义。结论苦参碱对单纯激活状态下的HSC迁移、增殖均有较强的抑制作用,并能促进HSC凋亡的发生;苦参碱对PDGF作用下HSC的迁移、增殖有一定的抑制作用,但对此状态下的HSC的凋亡则无明显促进作用。     

肝纤维化病程中Kupffer细胞与HSC的相互关系（综述）

肝纤维化（HF）是诸多慢性肝病共同的病理过程,也是各种慢性肝病向肝硬化转归的中转站。肝星状细胞（HSC）是细胞外基质（ECM）的主要来源,在肝纤维化形成中起关键性作用。枯否细胞（KC）是肝脏内重要的非实质细胞,KC通过分泌一系列细胞因子参与HSC的活化。参与肝纤维化的发生与发展。在肝纤维化的恢复阶段,KC可抑制HSC活性,促进其凋亡从而发挥抗纤维化作用。因此,深入研究Kupffer细胞与HSC的Cross-talk在肝纤维化的发生与发展中的作用和机制,对于临床工作中防治肝脏损伤,提高患者生存率具有实际意义。     

姜黄素对肝星状细胞增殖能力影响

目的探讨姜黄素对体外培养大鼠肝星状细胞细胞株(CSFSC-2G)增殖能力及细胞外基质分泌的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度姜黄素(5,10,15,20,40μmol/L)在不同培养时间作用下肝星状细胞(HSC)的增殖能力;酶联免疫吸附实验法检测不同浓度姜黄素作用下HSCI型胶原(CollagenI,ColI)和Ⅲ型胶原(CollagenⅢ,ColⅢ)合成及分泌能力;流式细胞术检测姜黄素对HSC凋亡的影响。结果不同浓度的姜黄素(5,10,15,20,40μmol/L)均可抑制HSC增殖,并呈现明显剂量依赖关系;含20μmol/L姜黄素培养基培养24h后,HSC-ColI、ColⅢ吸光度(A)值分别为(0.418±0.019),(0.554±0.043),均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);含20μmol/L姜黄素培养基培养48h后,HSC处于G0/G1期的HSC细胞占(39.98±8.07)%,S期细胞占(55.79±9.13)%,G2/M期细胞占(4.23±0.12)%;凋亡率为(20.31±2.55)%,高于阴性对照组凋亡率(0.22±0.11)%,低于秋水仙素阳性药物对照组凋亡率(29.75±2.64)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素可抑制HSC细胞的增殖并促进其凋亡,有可能成为防治肝纤维化的理想药物。     

Protective effect of sodium ferulate on acetaldehyde-treated precision-cut rat liver slices

Activated hepatic stellate cells (HSCs) play a key role in hepatic fibrogenesis, and inhibition of HSC activation may prevent liver fibrosis. Acetaldehyde, the most deleterious metabolite of alcohol, triggers HSC activation in alcoholic liver injury. In the present study, we investigated the protective effect of sodium ferulate (SF), a sodium salt of ferulic acid that is rich in fruits and vegetables, on acetaldehyde-stimulated HSC activation using precision-cut liver slices (PCLSs). Rat PCLSs were co-incubated with 350?μM acetaldehyde and different concentrations of SF. Hepatotoxicity was assessed by measuring enzyme leakage and malondialdehyde content in tissue. α-Smooth muscle actin, transforming growth factor-β(1), and hydroxyproline were determined to assess the activation of HSCs. In addition, matrix metalloproteinase (MMP)-1 and the tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP-1) were determined to evaluate collagen degradation. SF prominently prevented the enzyme leakage in acetaldehyde-treated slices and also inhibited HSC activation and collagen production stimulated by acetaldehyde. In addition, SF increased MMP-1 expression and decreased TIMP-1 expression. These results showed that SF protected PCLSs from acetaldehyde-stimulated HSC activation and liver injury, which may be associated with the attenuation of oxidative injury and acceleration of collagen degradation.     

Fucoxanthin Attenuates the Reprogramming of Energy Metabolism during the Activation of Hepatic Stellate Cells

Hepatic stellate cells (HSC) play a major role in developing liver fibrosis. Upon activation during liver injury, activated HSC (aHSC) increase cell proliferation, fibrogenesis, contractility, chemotaxis, and cytokine release. We previously showed that aHSC have increased mitochondrial respiration but decreased glycolysis compared to quiescent HSC (qHSC). We also demonstrated that fucoxanthin (FCX), a xanthophyll carotenoid, has an anti-fibrogenic effect in HSC. The objective of this study was to investigate whether FCX attenuates metabolic reprogramming occurring during HSC activation. Mouse primary HSC were activated in the presence or absence of FCX for seven days. aHSC displayed significantly decreased glycolysis and increased mitochondrial respiration compared to qHSC, which was ameliorated by FCX present during activation. In addition, FCX partially attenuated the changes in the expression of genes involved in glycolysis and mitochondrial respiration, including hexokinase 1 (Hk1), Hk2, peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator 1β, and pyruvate dehydrogenase kinase 3. Our data suggest that FCX may prevent HSC activation by modulating the expression of genes crucial for metabolic reprogramming in HSC.     

胰高糖素样肽-1受体激动剂通过JNK信号通路促进肝星形细胞凋亡的机制研究

目的 探讨胰高糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RA)通过JNK信号通路促进肝星形细胞(HSC)凋亡的机制.方法 体外培养人HSC并进行形态学鉴定,将HSC样本随机分成对照组(20份)、GLP-1RA组(20份)和JNK阻断组(20份).对照组HSC在常规培养基础上加入高糖(终浓度25 mmol/L),GLP-1RA组在对照组基础上加入GLP-1RA利拉鲁肽(终浓度10 mmol/L),JNK阻断组在GLP-1RA组基础上加入JNK信号通路阻断剂SP600125(终浓度20 μmol/L)进行培养;培养120 h后用流式细胞术检测各组的HSC凋亡情况.同时采用Western印迹法检测各组的p-JNK蛋白表达水平.结果 三组的平均凋亡率和平均p-JNK的表达水平差异均有统计学意义(F=19.412和66.451,P均＜0.01).GLP-1RA组的凋亡率和p-JNK蛋白表达水平分别为(30.61±4.07)％和(22.79±3.80)％,均高于对照组,差异均具有统计学意义(t=0.530和9.854,P均＜0.01);JNK阻断组的细胞凋亡率和p-JNK蛋白表达水平分别为(23.48±4.41)％和(10.66±4.15)％,均低于GLP-1RA组,差异有统计学意义(t=-5.428和-8.757,P均＜0.01).结论 JNK信号通路在GLP-1RA介导的HSC凋亡中起着关键作用,GLP-1RA可以通过JNK信号通路促成经高糖诱导活化的HSC发生凋亡.