ELISA法检测HIV抗体的室内质控分析及处理

目的:分析ELISA法检测HIV抗体的室内质控,总结失控原因,加强实验室管理,保证检验结果准确可靠。方法:运用L-J质控图,结合Westgard多规则质控法,进行室内质控及分析。结果:2013-01-2014-10共检测2 033批次,其中警告57次,失控29次,分别占质控总数的2.80%和1.42%。其中随机误差10次,系统误差19次,分别占质控总数的0.49%和0.93%。22个RCV处于9.72%~22.85%,其中21个均处于20.00%以内,1次是22.85%。结论:ELISA法影响因素较多,要严格按照操作规程,加强室内质控,以保证检验结果的准确性。     

尿液HIV-1抗体检测实验室能力验证质控品的制备及应用

目的研发制备尿液1型艾滋病病毒(HIV-1)抗体检测实验室能力验证质控品,并应用于艾滋病检测实验室的尿液HIV-1抗体检测能力的验证工作,提高艾滋病检测实验室对尿液HIV-1抗体的检测水平。方法对20份HIV-1抗体阳性和8份HIV-1抗体阴性的尿液样本,用酶联免疫吸附试验筛选后,选择3份阳性样本和2份阴性样本,制备能力验证质控品,并对能力验证质控品进行稳定性、均一性评价。将能力验证质控品分发给参加尿液HIV-1抗体检测的实验室,对其检测结果进行分析,评价各实验室的尿液HIV-1抗体检测能力。结果能力验证质控品均一性试验中,5份样本的变异系数(CV)分别为5.40%、27.96%、12.04%、20.24%、5.77%。能力验证质控品稳定性试验中,尿液质控品在37℃放置时,5份样本的CV值分别为5.62%、9.19%、7.98%、57.81%、7.43%;在20℃放置时,5份样本的CV值分别为18.57%、3.41%、5.21%、43.93%、5.58%;在4℃放置时,5份样本的CV值分别为7.67%、14.35%、9.61%、6.35%、9.43%;在-20℃放置时,5份样本的CV值分别为25.83%、17.29%、35.97%、20.73%、22.22%。共12家艾滋病检测实验室参加本次尿液HIV-1抗体检测能力验证,得分情况:11家实验室得分为100分,1家实验室对两份样本检测错误,得分为60分;检测数值(S/CO)偏离情况:4家实验室对阳性质控检测结果有偏离,3家实验室分别对3份阳性样本(164 101、164 103和164 105)检测结果有偏离。结论尿液HIV-1抗体能力验证质控品具有较好的稳定性、均一性,可以用于实验室能力验证。参加此次尿液HIV-1抗体能力验证的实验室结果判定大都正确,但是个别实验室在检测数值(S/CO)方面存在偏离。     

间接免疫荧光法检测抗核抗体室内质控品制备和性能验证

目的 建立抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)室内质控品自制和性能验证规范化程序,以有效监测实验室间接免疫荧光法检测ANA的质量,保证其检测一致性和准确性.方法 收集ANA高滴度强荧光(滴度1:3200～1:10000)单一荧光核型(均质型)临床血清样本,将其与混合阴性ANA血清按1:30比例混...     

HIV-1 DNA定量检测干血斑室内质控品的制备及应用

目的研制用于艾滋病病毒(HIV)脱氧核糖核酸(DNA)(HIV-1 DNA)定量检测的室内质控品,通过室内质控品的使用,保证HIV-1 DNA定量检测的实验室质量。方法用HIV阴性全血倍比稀释8E5细胞,滴加到滤纸片上,制备成干血斑(DBS)。评价其均一性与稳定性。在日常HIV-1 DNA定量检测过程中,同时检测DBS室内质控品,并建立Levey-Jennings(L-J)质控图进行分析。结果 1×10~6个/mL的8E5细胞经过1 000倍稀释后制备成本实验室HIV-1 DNA定量检测的DBS室内质控品,其均一性与稳定性均符合要求。建立的L-J质控图,HIV-1 DNA log的均值为2.99,标准差为0.13,精密度为4.24%。当样本的加样量、检测人员等发生变化时,均发生失控状态。结论自制的DBS室内质控品用于本实验室HIV-1 DNA检测的质量控制是可行的,可以满足实验室常规检测内部质控需求。     

HIV抗体质控血清的稳定性研究

目的：研究配制的质控血清的稳定性和影响因素。方法：将配制的HIV抗体质控血清进行不同的处理，然后统一用3种试剂进行检测：（1）在37℃，室温和4℃保存不同时间；（2）加入0．1％的叠氮钠和0．01％的硫柳汞保存不同时间；（3）室温和－20℃之间反复冻融。结果：人工配制的质控血清在4℃条件下6个月内可以保持稳定，在室温条件下1个月内保持稳定。反复冻融及加入0．1％的叠氮钠或0．01％的硫柳汞对检测结果没有影响。双抗原夹心法试剂检测的S／CO值显著高于间接法试剂。结论：在常规条件下血清中的HIV抗体能够在较长时间内保持稳定。     

HIV抗体质控血清的稳定性研究

目的 研究配制的质控血清的稳定性和影响因素。方法 将配制的HIV抗体质控血清进行不同的处理,然后统一用 3种试剂进行检测:（1）在 37℃,室温和 4℃保存不同时间;（2）加入 0.1％的叠氮钠和 0.01％的硫柳汞保存不同时间;（3）室温和-20℃之间反复冻融。结果 人工配制的质控血清在4℃条件下6个月内可以保持稳定,在室温条件下1个月内保持稳定。反复冻融及加入0.1％的叠氮钠或0.01％的硫柳汞对检测结果没有影响。双抗原夹心法试剂检测的S/CO值显著高于间接法试剂。结论 在常规条件下血清中的HIV抗体能够在较长时间内保持稳定。     

HIV抗体快速诊断试剂的研究及应用进展

艾滋病病毒(HIV1)抗体快速诊断方法是目前常用的HIV抗体检测方法之一。有免疫斑点、免疫层析及凝集试验，主要包括硒标记法、金标记法和凝集(明胶颗粒凝集、乳胶凝集和自身红细胞凝集)法。     

HIV初筛检测的室内质控结果分析

目的对联合应用＂即刻法＂和Levery-Jenning（L-J）质控图进行HIV初筛检测室内质控及其影响因素研究。方法利用检测数据做＂即刻法＂和L-J质控图,对质控结果进行分析。结果通过应用＂即刻法＂和L-J质控图质控方式,发现检测失控;仪器设备、检测试剂、实验室操作、环境温湿度、质控品等各种因素,均可引起HIV初筛检测失控。将这些影响因素控制在正常范围内,则检测结果在控制范围内。结论联合应用＂即刻法＂和L-J质控图,是一种较好的HIV初筛检测室内质控方法。     

HIV抗体快速诊断试剂的评估

目的 通过对艾滋病病毒(HIV)抗体快速诊断试剂的质量评估，筛选检测性能好的试剂，为艾滋病自愿咨询检测(VCT)提供依据。方法 用国家艾滋病参比实验室提供的50份参比样品、来自不同人群的400份样品、两套BBI(BOSTON BIOMEDICA，INC)抗体阳转血清盘(包括10份样品)，对8个厂家的HIv抗体快速诊断试剂的敏感性、特异性进行了评估。结果 被评价的各种快速诊断试剂的敏感性为97．71％～100％，特异性为81．78％～99．63％；阳性预示值为72．78％～99．22％，阴性预示值为98.89％～100％；用BBI血清盘检测时的试剂敏感性及特异性均为100％。结论 HIV抗体快速诊断试剂有较好的检测性能，有些试剂的敏感性及特异性均在95％以上，适合在发展中国家的VCT场所、仪器设备缺乏的实验室、偏远地区的血液筛查及职业暴露后的快速诊断中使用。     

抗-A、抗-B效价质控品的制备及初步应用

目的:制备抗-A、抗-B效价检测质控品并进行初步应用。方法:倍比稀释抗-D单克隆抗体,确定抗体最佳稀释度,实验组取质控品1.56μL加入200μL血清中,对照组取1.56μL NS加入200μL血清中,根据凝集强度判断实验是否在控,并比较2组抗体效价差异。取不同时间点冷藏保存的质控品,检测其IgM、IgG抗-D抗体效价,评估质控品性质是否稳定。结果:质控品IgM抗体效价为1∶512,最佳稀释度为1∶256,实验组、对照组抗-A、抗-B效价差异无统计学意义,不同时间点保存的质控品抗体效价差异无统计学意义。结论:自制抗体效价质控品具有良好稳定性与可靠性,可有效发现IgM抗体破坏不完全、稀释度误差、凝集度判断标准不同造成的效价检测失控问题。     

HIV抗体快速检测在自愿咨询检测中的应用

目的在AIDS自愿咨询检测(voluntary counselling and testing,VCT)中应用快速检测,并与免疫印迹试验(western blotting,WB)结果比较,探讨进一步缩短确证时间及提高HIV感染者CD4+T淋巴细胞检测率的措施。方法用2种快速试剂进行筛查,对一阴一阳或双阳性样本进行WB确证检测,并比较和评价检测结果,同时采集患者血样行CD4+T淋巴细胞检测。结果 1435份样本中,1种或2种快速试剂检测结果为阳性有398份,经WB检测确证377份阳性,符合率94.7%;2种快速试剂检测结果均为阳性的有379份,WB检测确证376份阳性,符合率99.2%;2种快速试剂检测结果为阴性的有1037份,经PCR检测未发现HIV RNA阳性样本。结论在VCT及各种应急检测时,可用快速试剂进行筛查,然后WB确证,以缩短等待时间,提高CD4+T淋巴细胞检测率。同时为保证检测质量,以防漏检,推荐使用2种质量优良的快速试剂同时筛查。     

应加强HIV抗体的床旁快速检测

HIV筛查是AIDS预防与控制的重要措施之一,通过HIV筛查可以做到早检测、早发现、早治疗,尽早采取干预措施,为HIV感染者提供咨询和关怀,预防与控制HIV的传播.     

一种HIV抗体快速确证试剂的评价

目的 评价一种HIV抗体快速确证试剂在临床应用中的价值和质量性能.方法 按照检测流程进行HIV抗体筛查和确证检测,对评价试剂和对比试剂的符合性进行分析,分析评价试剂在HIV感染诊断中的敏感性和特异性.结果 本次评价共收集到云南省3个地区4个不同人群的500份样本,经抗体、核酸和随访后检测,314份(62.80％)确定为...     

HIV抗体快速检测替代策略的初步探究

目的 通过比较分析4种不同艾滋病病毒(HIV)抗体快速检测试剂组合下的检测结果,探讨云南省快速检测替代策略替代常规策略进行HIV感染诊断的可行性.方法 将医疗机构经一种快速检测试剂初筛为HIV阳性的135份样本送至建水县疾病预防控制中心,平行使用常规检测策略与快速替代检测策略,进行初筛复检和确证检测.结果 135份快速...     

HIV抗体快速检测法在术前与乡镇医疗单位中的诊断价值探讨

为研究艾滋病病毒(HIV)抗体快速检测在急诊术前、乡镇医疗单位、家庭自我HIV抗体检测中的实用性和优越性,采用硒标快速法和酶联免疫吸附试验(ELISA)平行检测1 896例受检者血清HIV抗体(抗-HIV1/2),并对检测结果作分析,对DIGFA技术参数进行评估.现将结果报告如下.     

某国产HIV抗体快速检测试剂漏检报告

2006年2月中旬，永川市疾病预防控制中心（CDC）艾滋病筛查实验室发现某国产艾滋病病毒（HIV）金标检测试剂存在漏检现象。经重庆市CDC艾滋病确证实验室验证及中国CDC性病艾滋病预防控制中心艾滋病参比实验室专家现场调查检测证实，该产品的确存在严重漏检。     

HIV抗体检测结果不确定时应用核酸诊断的可行性研究

目的探讨艾滋病病毒(HIV)核酸检测用于HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)诊断的可行性,为制定新的检测策略提供依据。方法 2009年10月至2013年10月,对云南省德宏州疾病预防控制中心蛋白免疫印迹(WB)试验确证结果为不确定、背景资料齐全、初次血浆留样大于1000μL的样本进行核酸检测,并与抗体随访检测结果进行比较。结果 49例WB不确定的样本,有22例检出HIV核酸。其中成功随访18例,随访过程中17例HIV抗体阳转,1例带型有进展但不满足诊断标准。被访者WB条带在2周随访时均出现明显变化。核酸阴性的27例,7例成功随访,WB条带无进展或阴性。结论有条件开展HIV核酸检测的地区,对HIV抗体不确定者宜采用核酸检测尽早诊断;无核酸检测条件的地区,对HIV抗体不确定人群的随访间隔宜缩短至2周。     

肺炎衣原体抗体的制备及应用

目前检测肺炎衣原体(Cpn)抗原所用单抗主要依赖进口,价格昂贵.近期,笔者尝试用家兔自制抗Cpn抗体并用于临床,现将结果报告如下.