人胶质瘤细胞U251逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨

目的 探讨人神经胶质瘤细胞U251逃逸同种异体NK细胞免疫杀伤的机制。方法以K562细胞为对照,应用LDH释放法检测不同效靶比时NK细胞体外杀伤U251细胞的活性。用RT-PCR检测K562和U251细胞MHC-I类链相关分子A和B（MICA／B）、人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白（ULBP1～3）基因,用流式细胞仪检测两细胞MICA／B、ULBP1～3和HLA-I分子的表达情况。效靶比20：1时用单抗分别阻断K562和U251细胞表面MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3和HLA—I类分子,观察NK细胞对其杀伤活性的变化。结果同一效靶比时NK细胞杀伤U251细胞的活性明显低于杀伤K562细胞的活性,两者之间差异有统计学意义（P〈0．05）;K562和U251细胞均表达基因MICA／B和ULBP1～3,但U251细胞仅低表达ULBP2分子。用单抗封闭MICA／B和ULBP1～3分子后,NK细胞对K562细胞的杀伤活性明显降低,对U251细胞的杀伤活性无明显改变。封闭HLA-I类分子后NK细胞对U251细胞的杀伤活性明显上升,对K562细胞的杀伤活性无明显改变。结论U251细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制可能是由于U251细胞高表达HLA-I类分子,不表达NKG2D的配体MICA／B和ULBP1～3。     

NKG2D介导NK 细胞对鼻咽癌细胞杀伤作用的体外研究

 目的 探讨鼻咽癌CNE2细胞表面HLA-Ⅰ类分子表型和NKG2D配体的表达情况，进一步了解其对同种异体NK细胞杀伤活性的影响。方法 流式细胞仪检测NKG2D的配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3在K562、CNE2细胞的表达情况。PCR-SSP法分析CNE2细胞HLA-A、B、Cw分型和NK细胞KIR分型。LDH释放法测定5例健康者NK细胞在不同效靶比时对K562、CNE2细胞的杀伤活性，效靶比20：1时观察抗NKG2D配体的单抗对NK细胞杀伤K562、CNE2细胞活性的影响。结果 CNE2细胞表达MICA、MICB、ULBP2，不表达ULBP1、ULBP3。K562细胞表面表达MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3。5例健康者NK细胞抑制性KIR与CNE2细胞表面的HLA-Ⅰ类分子之间存在错配。效靶比5：1、10：1、20：1、30：1时NK细胞对K562、CNE2细胞的杀伤活性分别为（29．02±0．45）％、（10．50±2．17）％；（44．43±1．36）％、（27．68±1．47）％；（57．82±1．35）％、（36．99±3．13）％：（71．24±2．36）％、（55．00±2．20）％，在各效靶比时NK细胞对K562细胞的杀伤活性较CNE2细胞明显增强（P=0．000）；在效靶比20：1时anti-MICA、anti-MICB、anti-ULBP1、anti—ULBP2、anti-ULBP3可明显抑制NK细胞对K562细胞的杀伤活性，与阻断前相比有显著性差异（P=0．000）；anti—MICA、anti—MICB、anti—ULBP2可明显抑制NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性，与阻断前相比有显著性差异（P〈0．01），但anti—ULBP1、anti—ULBP3不能阻断NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结论 NKG2D配体影响NK细胞对靶细胞的杀伤活性，提高NKG2D配体的表达有可能提高NK细胞的抗肿瘤活性。     

GPC3基因转染的树突状细胞对人肝癌HepG2细胞杀伤作用的观察

目的:以GPC3基因转染人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(DCs),诱导CTL产生特异性抗肝癌免疫.方法:从HLA-A2正常健康成人外周血分离单个核细胞,经GM-CSF和IL-4诱导产生DCs;通过脂质体转染法将携带人GPC3基因的质粒pEF-hGPC3转染DCs,蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3表达,流式细胞仪检测DCs表型的变化;MTT法检测DC诱导CTL对人肝癌细胞HepG2的特异性杀伤.结果:经细胞因子诱导产生了具有典型形态学的DCs,经肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激成熟后可高表达CD80、CD86及CD83,而转染GPC3基因对协同刺激因子在DCs中的表达的影响并不显著.转染GPC3基因后,DCs可促进CTL特异性杀伤HepG2细胞,在不同效靶比的杀伤率:100∶1为(38.90±0.95)%,50∶1为(30.83±1.24)%,10∶1为(20.84±0.65)%,明显高于空载体组和对照组,P＜0.05.结论:GPC3基因转染人外周血单个核细胞来源的DCs可诱导和促进CTL特异性杀伤肝癌细胞HepG2作用,为治疗肝癌提供了新的免疫靶点.     

骨髓瘤RPMI 8226细胞体外逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步研究

目的:探讨骨髓瘤细胞RPMI 8266逃逸NK细胞免疫杀伤的机制。方法:流式细胞仪检测K562和8266细胞表面MICA/B、ULBP1～3和HLA-Ⅰ类分子的表达。4hLDH释放法测定效靶比20∶1时阻断前后NK细胞对2种细胞杀伤活性变化。观察效靶比20∶1时NK细胞对药物处理后RPMI 8226细胞杀伤活性变化、RPMI 8226细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子的表达及NK细胞对RPMI 8266细胞的克隆形成率的影响。结果:K562细胞高表达MICA/B和ULBP 1～3分子;RPMI 8266细胞表达HLA-Ⅰ类分子,2株细胞NKG2D配体表达差异有统计学意义,P<0.001。单抗分别阻断MICA/B、ULBP 1～3分子后,效靶比为20∶1时NK细胞对K562细胞的杀伤活性明显降低,P值均<0.05;对RPMI 8266细胞的杀伤活性基本无变化,P值均>0.05。抗W6/32单抗封闭8266细胞表面HLA-Ⅰ类分子后,NK细胞对K562细胞的杀伤活性无上升(P=0.721),而对RPMI 8266细胞的杀伤活性上升,P=0.000。1/2IC50的三氧化二砷处理后RPMI8226细胞ULBP...     

沉默HIG2促进NK细胞对喉癌细胞杀伤敏感性的机制探讨

目的:探讨缺氧诱导基因2（HIG2）在喉癌细胞逃逸NK细胞免疫杀伤中的作用机制。方法:免疫组织化学法检测喉癌组织和癌旁组织中HIG2的表达;Western blot检测HIG2、NKG2D配体（MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3）的蛋白表达;Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭;流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡、CD3-CD56+的NK细胞纯度、NKG2D受体表达及Hep-2细胞NKG2D配体的表达;乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,NK细胞对Hep-2细胞的杀伤活性。结果:HIG2在喉癌组织中高表达。CD3-CD56+的NK细胞纯度大于90%。沉默HIG2抑制Hep-2细胞侵袭,促进细胞凋亡,提高NKG2D配体的表达,增强NK细胞对Hep-2细胞的杀伤敏感性。NKG2D抗体抑制NK细胞NKG2D受体表达,减弱NK细胞对沉默HIG2 的Hep-2细胞的杀伤活性。结论:沉默HIG2可抑制喉癌细胞侵袭,促进细胞凋亡,上调NKG2D配体表达,增强NK细胞对喉癌细胞的杀伤敏感性。     

一种经济高效的人外周血NK细胞纯化方法的建立

目的：建立一种经济并且纯化率高的人外周血NK细胞分离方法。方法：对用RosetteSep法直接从全血分离NK细胞的方法进行改进,先从全血中获得单个核细胞（PBMC）,与红细胞按比例混合后再进行分离,利用流式细胞仪检测纯度,并且用CCK-8法检测NK细胞对K562细胞的杀伤活性。结果：改进后分离每毫升血所需RosetteSep抗体复合物用量仅为直接分离法的1／50;NK细胞的纯度由纯化前的（11．02±3．15）％提高到（96．52±2．42）％,细胞回收率为（70．24±10．51）％;纯化的NK对靶细胞K562有较强的杀伤作用,与直接分离法比较杀伤活性差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：改进后的方法可以获得高纯度的NK细胞,该分离方法不影响NK的杀伤活性,同时极大的降低了分离成本。初步建立了一种经济高效,快速简便,并且纯化率高的人外周血NK细胞纯化方法。     

苦参碱诱导自然杀伤细胞对白血病K562细胞杀伤的实验研究

目的 探讨中药苦参碱对人自然杀伤（NK）细胞体外杀伤白血病细胞的作用及可能的分子机制.方法 以人慢性粒细胞白血病K562细胞为靶细胞,采用CFSE/PI双染色法流式细胞术检测不同质量浓度（02、0.5、0.8 mg/ml）苦参碱处理后,人NK细胞在不同效靶比下对K562细胞的体外杀伤活性.流式细胞术分析不同浓度苦参碱处理24 h对NK细胞主要活化性受体NKG2D和抑制性受体CD158a、CD158b表达的影响及K562细胞膜上NKG2D配体MICA/B、ULBP1、ULBP 2、ULBP 3表达的改变.结果 效靶比为5∶1时,NK细胞对0.2、0.5和0.8 mg/ml苦参碱处理后的K562细胞杀伤率分别为32.8％、38.1％和40.5％,较处理前均有不同程度增高（29.2％）;但进一步增加效靶比（10：1）后,NK细胞杀伤活性改变差异无统计学意义（P＞0.05）.苦参碱处理24 h,NK细胞抑制性受体CD158a、CD158b的表达均较处理前降低,而活化受体NKG2D的表达则增高.K562细胞表面NKG2D配体ULBP1和ULBP2分子的表达也较处理前增高（平均荧光强度分别为174.33±39.93比275.67±32.88,517.6±47.97比1368.6±49.43,P＜0.05）.结论 苦参碱可增强NK细胞对白血病K562细胞的体外杀伤活性,其机制可能与NK细胞受体及配体表达调节作用有关.     

一种经济高效的人外周血NK细胞纯化方法的建立

目的:建立一种经济并且纯化率高的人外周血NK细胞分离方法.方法:对用RosetteSepR法直接从全血分离NK细胞的方法进行改进,先从全血中获得单个核细胞(PBMC),与红细胞按比例混合后再进行分离,利用流式细胞仪检测纯度,并且用CCK-8法检测NK细胞对K562细胞的杀伤活性.结果:改进后分离每毫升血所需RosetteSep抗体复合物用量仅为直接分离法的1/50;NK细胞的纯度由纯化前的(11.02±3.15)%提高到(96.52±2.42)%,细胞回收率为(70.24±10.51)%;纯化的NK对靶细胞K562有较强的杀伤作用,与直接分离法比较杀伤活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论:改进后的方法可以获得高纯度的NK细胞,该分离方法不影响NK的杀伤活性,同时极大的降低了分离成本.初步建立了一种经济高效,快速简便,并且纯化率高的人外周血NK细胞纯化方法.     

转染MUC1基因树突状细胞活化的淋巴细胞对BIU-87细胞的体外杀伤作用

目的观察转染MUC1基因的树突状细胞(DCs)活化的淋巴细胞对BIU-87细胞的体外杀伤作用,确定MUC1-DCs作为膀胱肿瘤免疫治疗疫苗的可能性。方法应用脂质体将人MUC1基因转染体外培养的外周血来源的DCs,并活化T细胞,以流式细胞术和MTT法检测其转染率和免疫活性,以不同效靶细胞的比例对BIU-87细胞和膀胱正常上皮细胞进行体外杀伤实验,MTT法测定杀伤率。结果转染MUC1基因后的DCs活化的T细胞对BIU-87细胞和正常膀胱上皮细胞均有杀伤作用,但是,对BIU-87的杀伤作用明显增强(P<0.05);转染后的DCs活化的T细胞对BIU-87细胞的杀伤作用明显大于未转染DCs活化的T细胞(P<0.01)。结论转染MUC1基因的DCs活化的淋巴细胞对BIU-87细胞有明显的杀伤作用,MUC1基因可作为免疫治疗膀胱肿瘤的攻击靶点。     

骨肉瘤患者外周血淋巴细胞体外相关瘤细胞致敏和rIL-2诱导的杀伤细胞

本实验对骨肉瘤患外周血淋巴细胞(PBL)采用2种培养方法；(1)PBL在体外用患肿瘤组织学相关传代骨肉瘤细胞(灭活处理)刺激5天再经rIL-2诱导12天；(2)单独rIL-2激活培养PBL3～5天；分别获取rIL-2诱导体外刺激细胞毒淋巴细胞(rIL-2-CL)和LAK细胞。借助^51Cr释放试验对2种效应细胞形成及体外抗瘤能力进行比较性研究。结论：rIL-2-CL主要是一种特异性较高，杀伤活性强烈CTL细胞群，对抗LAK细胞的骨肉瘤细胞具有明显杀伤效应。     

ULBP3胞外段基因的克隆与表达

目的 为了研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能，首先需构建、表达ULBP3胞外段重组蛋白。方法 用RT-PCR方法从人结肠癌组织中钓取ULBP3胞外段基因，构建pET32a原核表达载体，转化大肠杆菌BL21，以IPTG诱导表达，Western blot鉴定。结果 经测序证实，所获得的cDNA克隆为ULBP3胞外段基因，其序列与genebank中已经发表的序列完全一致，pET32a原核表达载体转化大肠杆菌BL21后，经筛选获得的阳性重组菌稳定表达ULBP3胞外段重组蛋白。结论 成功表达了ULBP3胞外段重组蛋白，可用于进一步研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能。     

基因转染法建立bcl-2稳定表达的肝癌细胞株

目的与方法：为了建立稳定表达 bcl-2蛋白的肝细胞癌（简称肝癌）细胞株,用脂质体介导的基因转染法将含有人 bcl-2,CDNA的逆转录病毒表达载体pDOR-SB质粒导入bcl-2蛋白阴性的肝癌细胞系HCC－9204细胞中,经G－418筛选后获得转 bcl-2基因的细胞克隆。细胞扩大培养后用免疫细胞化学法检测bcl-2表达情况,有限稀释法连续克隆化直至获得100％稳定表达bcl-2蛋白的单克隆细胞株,并进行流式细胞仪检测,结果：转染了pDOR-SB的HCC－9204细胞大部分为bcl-2蛋白表阳性,而转染了pDOR空载体或未转染的HCC－9204细胞均为bcl-2蛋白阴性,经过连续3次克隆化后,流式细胞仪检测表明所获得的单克隆细胞 100％表达bcl-2蛋白,结论：用基因转染法成功地建立了稳定表达bcl-2蛋白的肝癌细胞株。     

顺铂对鼻咽癌细胞NKG2D配体表达和NK细胞杀伤活性的增强作用

 目的 研究顺铂(Cisplatin, DDP)作用前后人鼻咽癌细胞CNE2 NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子表达的改变及NK细胞杀伤活性的变化。 方法 MTT法测定DDP对CNE2细胞的50%抑制量（IC₅₀）;以此浓度DDP作用CNE2细胞24h,乳酸脱氢酶释放法检测效靶比20∶1时,NK细胞对DDP作用前后的CNE2细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测DDP作用前后的CNE2细胞表面NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2、 ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子表达的变化。 结果 DDP对CNE2细胞的IC₅₀为5mg/L。效靶比20∶1时,NK细胞对5mg/L DDP作用前后的CNE2细胞的杀伤活性分别为 （38.11±1.41）%,（47.71±1.53）%,差异有统计学意义（P＜0.05）,DDP作用后CNE2细胞表面MICA/B、ULBP1、 ULBP3表达显著升高,与作用前相比差异有统计学意义（P＜0.05）。ULBP2、HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P＞0.05)。 结论 DDP能提高CNE2细胞NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP3)的表达,从而增强CNE2细胞对NK细胞杀伤的敏感度。     

DNAX accessory molecule-1 mediated recognition of freshly isolated ovarian carcinoma by resting natural killer cells

Although natural killer (NK) cells are well known for their ability to kill tumors, few studies have addressed the interactions between resting (nonactivated) NK cells and freshly isolated human tumors. Here, we show that human leukocyte antigen class I(low) tumor cells isolated directly from patients with advanced ovarian carcinoma trigger degranulation by resting allogeneic NK cells. This was paralleled by induction of granzyme B and caspase-6 activities in the tumor cells and significant tumor cell lysis. Ovarian carcinoma cells displayed ubiquitous expression of the DNAX accessory molecule-1 (DNAM-1) ligand PVR and sparse/heterogeneous expression of the NKG2D ligands MICA/MICB and ULBP1, ULBP2, and ULBP3. In line with the NK receptor ligand expression profiles, antibody-mediated blockade of activating receptor pathways revealed a dominant role for DNAM-1 and a complementary contribution of NKG2D signaling in tumor cell recognition. These results show that resting NK cells are capable of directly recognizing freshly isolated human tumor cells and identify ovarian carcinoma as a potential target for adoptive NK cell-based immunotherapy.     

Valproic Acid Upregulates NKG2D Ligand Expression through an ERK-dependent Mechanism and Potentially Enhances NK Cell-mediated Lysis of Myeloma

Modulation of the antitumor immune response through the engagement of NKG2D receptors with their ligands (L) on targets represents a promising therapeutic approach against cancer. In this study, we tested the effect of valproic acid (VPA), a histone deacetylase (HDAC) inhibitor, on the expression of NKG2D ligands in myeloma cells. We demonstrated that VPA was able to upregulate both protein and mRNA expression of major histocompatibility complex class I-related chain (MIC) A/B and UL16-binding protein (ULBP) 2 without any significant effect on the expression of ULBP1, ULBP3, and ULBP4 or induction of other natural killer (NK) cell ligands, such as NKp30-L, NKp44-L, and NKp46-L in myeloma cells. A ⁵¹Cr release assay and degranulation assay indicated that the induction of MICA/B and ULBP2 augmented NK cell-mediated lysis of myeloma cells, which was abolished by the addition of a blocking NKG2D antibody. Activation of constitutively phosphorylated extracellular signal-regulated kinase (ERK) by VPA is essential for the up-regulation of MICA/B and ULBP2 expressions. Inhibition of ERK using ERK inhibitor PD98059 decreased both MICA/B and ULBP2 expressions and NK cell cytotoxicity. Furthermore, overexpression of constitutively active ERK in ARK resulted in increased MICA/B and ULBP2 expressions and enhanced NK cell lysis. These data indicate that increased sensitivity of VPA-treated myeloma cells to NK cell lysis is caused by higher NKG2D ligand expression, resulting from more active ERK signaling pathway. Our results provide evidence that targeting ERK signaling pathway may be an additional mechanism supporting the antimyeloma activity of HDAC inhibitors and suggest its possible immunotherapeutic value for myeloma treatment.     

Differentiation-promoting drugs up-regulate NKG2D ligand expression and enhance the susceptibility of acute myeloid leukemia cells to natural killer cell-mediated lysis

Natural killer (NK) cells are potent effectors of innate antitumor defense and are currently exploited for immune-based therapy of human leukemia. However, malignant blood cells in acute myeloid leukemia (AML) display low levels of ligands for the activating immunoreceptor NKG2D and can thus evade NK immunosurveillance. We examined the possibility of up-regulating NKG2D-specific UL16-binding protein (ULBP) ligands using anti-neoplastic compounds with myeloid differentiation potential. Combinations of 5-aza-2'-deoxycytidine, trichostatin A, vitamin D3, bryostatin-1, and all-trans-retinoic acid, used together with myeloid growth factors and interferon-gamma, increased cell surface ULBP expression up to 10-fold in the AML cell line HL60 and in primary AML blasts. Up-regulation of ULBP ligands was associated with induction of myelomonocytic differentiation of AML cells. Higher ULBP expression increased NKG2D-dependent sensitivity of HL60 cells to NK-mediated killing. These findings identify NKG2D ligands as targets of leukemia differentiation therapy and suggest a clinical benefit in combining a pharmacological approach with NK cell-based immunotherapy in AML.     

电离辐射对肿瘤细胞SCC25表面NKG2D配体表达的影响及对肿瘤细胞的杀伤作用

目的 探讨电离辐射对口腔鳞状细胞癌细胞SCC25表面NKG2D配体表达的影响及其对肿瘤细胞的杀伤作用.方法 SCC25细胞培养至对数生长期时,通过抽签的方式完全随机设计为对照组(未作处理)和实验组(2Gy电离辐射处理).对照组和实验组细胞培养24 h后,流式细胞术检测SCC25表面NKG2D配体主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关分子(MIC)A、MICB、UL16结合蛋白(ULBP)1的表达量.实验组和对照组细胞培养24 h后,实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测SCC25细胞表面NKG2D配体mRNA表达的变化;制备细胞,将细胞分为空白对照组(NC)、2Gy电离辐射(R)组、NK1组(效靶比为5∶1)、NK2组(效靶比为20∶1)、NK1+R组(效靶比5∶1,2Gy电离辐射)、NK2+R组(效靶比20∶1,2Gy电离辐射),各组细胞培养24 h后,细胞增殖-毒性试验(CCK8)法检测电离辐射和自然杀伤(NK)细胞对口腔鳞状细胞癌SCC25细胞的杀伤能力.结果 流式细胞术结果显示,NKG2D配体MICA对照组和实验组的荧光值分别为21.04±0.39、22.90±0.40(江2.465,P=0.069),MICB荧光值分别为27.58±0.50、29.83±1.05(t=1.936,P=0.125),ULBP1的荧光值分别为21.04±0.40、21.78±0.50(t=1.154,P=0.313),表明SCC25经过电离辐射后,其表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1的表达量稍有上升,但差异无统计学意义.RT-PCR显示,MICB、ULBP1 mRNA表达对照组和实验组差异均有统计学意义(t=18.334,P=0.000;t=6.381,P=0.008),实验组的表达量分别是对照组的6.49、1.64倍;CCK8结果显示,NK1、NK2组和NC组相比,细胞杀伤能力的差异有统计学意义(F=344.600,P=0.000),表明NK细胞可以明显杀死肿瘤细胞,且提高NK细胞与SCC25的比例后杀伤作用更强.R组和NC组相比,细胞杀伤能力差异无统计学意义(P =0.567),NK1+R组和NK1组相相比,差异无统计学意义(P=0.915),NK2+R组和NK2组相比,差异亦无统计学意义(P =0.678),表明电离辐射杀伤作用不明显.结论 电离辐射可以使NKG2D配体MICB、ULBP1的mRNA表达增强,可能为肿瘤的免疫治疗提供新的途径.电离辐射对细胞的杀伤作用不明显,可能与辐射剂量低且细胞仅培养24h有关.     

外源型P14ARF基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响

目的：研究Ｐ１４ＡＲＦ基因对人脑胶质瘤细胞株（Ｕ－２５１）生长的影响。方法：用脂质体介导携带Ｐ１４ＡＰＦ的真核表达载体转染Ｕ－２５１细胞,观察其对该细胞株的生长、增殖周期等生物学行为的影响。结果：导入Ｐ１４ＡＰＦ胶质瘤细胞Ｕ－２５１的生长有明显的抑制作用。     

CDX2基因通过NF-κB信号通路抑制结肠癌细胞增殖

目的 观察过表达CDX2基因对人结肠癌细胞株增殖影响,并初步探讨其作用机制。方法 通过基因转染技术将CDX2基因转染入结肠癌HT-29细胞株,经G418筛选后获得稳定转染细胞株,RT-PCR和Western blot检测CDX2基因表达。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪分析转染细胞的生物学行为。Western blot检测CDX2过表达对HT-29细胞内Cyclin D1和NF-κB磷酸化水平的影响。结果 经脂质体转染和筛选,建立了稳定过表达CDX2人结肠癌HT-29细胞株。转染CDX2组与未转染组和空白质粒组相比,细胞的生长速度减慢(P＜0.05),细胞周期中G₁/G₀期比例增加(P＜0.05),而S期比例则减少(P＜0.05);与未转染组和空白质粒组比较,转染CDX2基因组HT-29细胞的Cyclin D1和p-NF-κB活性明显降低。结论 CDX2基因可能通过抑制NF-κB通路抑制Cyclin D1活性,从而抑制人结肠癌HT-29细胞增殖。