斑点杂交试检测血清HBV—DNA的临床意义

用斑点杂交试验直接检测202例不同类型肝炎及携带者的血清H-BV-DNA,总阳性率为51.47％,除肝炎后肝硬化外,各型肝炎及携带者间均无差异。在202例中,HBsAg阳性185例,HBsAg阴性17例,其HBV-DNA阳性率分别为55.1％和12.6％。在HBsAg、HBeAg和抗-HBC阳性的89例中,HBV-DNA阳性率为93.26％;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性34例及抗-HBe、抗-HB-c阳性17例中,HBV-DNA阳性率为23.53％;HBsAg、抗-HBe阳性、e系统阴性62例中,HBV-DNA阳性率11.29％。20例正常人血清阴性。6例携带者在抗病毒药物治疗中,全部HBV-DNA转阴,其中5例HBeAg继HBV-DNA转阴后阴转。检测结果表明本法高度特异、敏感,是判断乙肝病毒复制及血清传染性的可靠指标。     

斑点杂交试验检测血清中HBV—DNA的临床应用及其意义

本文用地高辛探针和生物素探针做斑点杂交平行检测了160例乙型肝炎患者,其符合率为96.25％;HBeAg阳性者HBV-DNA检出率为88.41％;而HBeAg及抗HBe均阴性者的阴性率为95.95％。用地高辛探针对21例正常人,28例非乙肝患者中均未检出HBV DNA。实验表明,地高辛探针做斑点杂交具有较好的敏感性特导性和实用性。     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV－DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７例临床各类型乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６６％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．１７％（１７／２０８）；抗－ＨＢｓ阳性者为１２．５％（５／４０）。２３例非乙型肝炎患者均未检出血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。检测结果表明本方法是一种快速、简便、特异、敏感、无同位素污染的方法。     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV—DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７临床各类乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６５％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．     

HBV DNA与HBVM的检测及临床应用评价

HBVDNA是乙型肝炎（乙肝）病毒复制最直接的指标，为探讨其在临床应用上的价值，通过5974例甲、乙型肝炎血清标志检测结果分析，对HBeAg阳性的含义有进一步的认识。发现它与HBeAg相关密切，在判断乙肝病毒复制时不能单凭HBeAg阳性，而应结合HBVDNA是否阳性；在判断乙肝病毒停止复制的康复期时也不能单凭HBeAg阴转、抗-HBe阳转，还应结合HBVDNA是否也阴转；同时还发现HBSAg阳性的合并甲型肝炎（甲肝）的感染率低（2．95％），而HBsAg阴性的合并甲肝的感染率高（15．36％）。     

地高辛标记探针与生物素标记探针用于斑点杂交检测HBV DNA的初步研究

为研究地高辛标记和生物素标记核酸探针斑点杂交检测ＨＢＶ ＤＮＡ的敏感性、特异性和稳定性，用两种探针和＾３２Ｐ标记探针进行平行检测对照。结果表明，地高辛探针检测灵敏度为０．１Ｐｇ，已达到＾３２Ｐ标记探针水平。生物素探针为１￣１０Ｐｇ。两种探针与＾３２Ｐ标记探针相比。符合率分别９６．６５％和８９．１３％；敏感性分别为９４．４４％和８３．３３％；特异性分别为９６．４３％和９２．８６％。两种探针在－２０℃     

聚合酶链反应结合生物素探针杂交检测HBV DNA的应用

本研究将聚合酶链反应和生物素探针点杂交相结合,可直接从5μl 血清中检测到10fgHBV DNA。应用此方法检测20例 HBsAg 和 HBeAg 阳性病例,HBVDNA 均阳性;20例 HBsAg 阳性、HBeAg 阴性病例中,有8例阳性;20例健康献血员中,亦有1例检出 HBV DNA。结果表明这是一种灵敏可靠,适合于基础及临床广泛使用的 HBV DNA 非同位素检测法。     

HBV 感染者胃十二指肠粘膜HBV DNA地高辛原位分子杂交研究

目的：探讨HBV在胃十二指肠粘膜的分布,复制,表达及其意义。方法：应用地高辛原位分子杂交法检测62例HBV感染者胃十二指肠粘膜HBVDNA的分布状态,并与血清HBVM,胃十二指肠粘膜HBsAg,HBcAg,肝炎病情程度进行相关分析。结果：62例HBV感染者,27例（43．55％）胃肠粘膜检出HBV DNA,检出率与肝炎病情程度,血清HBsAg,HBeAg无明显相关,与血清HBVDNA,胃肠粘膜HBsAg,HBcAg密切相关,胃肠粘膜HBVDNA的表达表现为4种模式。结论：HBVDNA可在胃肠组织原位复制,其不同的表达模式反映了病毒复制或整合的状态。     

分子杂交检测人血清中乙肝病毒DNA

作者采用放射性同位素~(32)P标记的HBV-DNA探针,与固定在硝酸纤维膜上的乙肝病杂交,然后经过放射自显影测人血清中的乙病肝毒,取得了满意的结果,可在临床检验中推广应用。     

聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HBVDNA

采用ＰＣＲ法检测４８例重型肝炎患者血清中ＢＨＶＤＮＡ存在情况，并与斑点杂交检测进行比较，结果表明：ＰＣＲ检测３９例阳性，检出率为８１．３％（３９／４８）．ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）组ＰＣＲ检测均阳性（８／８），ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（－）组阳性率为８８．０％（２２／２５），抗体阳性组检出率为７２．７％（８／１１），检测灵敏度为１．０ｆｇ；斑点杂交检测１５例阳性，阳性率３０．２％（１５／４８），各组斑点杂交阳性率均低于ＰＣＲ法．提示：（１）大多数重型肝炎患者血清中存在低滴度的病毒颗粒，对重肝发病有一定作用；（２）大部分ＨＢｅＡｇ阴性，抗体阳性的重型肝炎患者血清仍有传染性，应考虑抗病毒治疗．     

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果。这一技术用以检测经常规DNA提取的127例HBsAg阳性血清,结果HBV DNA检出率达88％,其中HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为97％,抗HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为82％。     

应用cDNA-RNA分子杂交法检测临床粪便标本中的甲型肝炎病毒

应用cDNA-RNA分子杂交技术从1988年初上海市甲型肝炎(甲肝)流行期临床病人早期粪便标本中检测出甲肝病毒RNA,证实是一起由甲肝病毒引起的甲肝流行。采用酚-氯仿提取法和乙醇沉淀法提取标本中的RNA,cDNA探针以缺口翻译法标记~(32)P同位素,在42℃条件下进行cDNA-RNA分子杂交。另以兔抗HAIgG包板,黑猩猩抗HAIgG-Biotin结合物和Avidin-HRP系统的酶标法直接检测病人粪便悬液的甲肝病毒抗原。30份病人粪便标本中,核酸分子杂交检出22份阳性,酶标检出18份阳性。     

快速检测乙型肝炎病毒前核心区基因变异株方法的建立与初步应用

用聚合酶链反应（ＰＯＲ）选择性地扩增血清标本中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因前Ｃ区（Ｐｒｅ－Ｃ）后，以三种寡核苷酸探针Ｍ０（野毒株基因序列）、Ｍ１（ｎｔ．１８９８位点突变株基因序列）、Ｍ２（ｎｔ．１９９８位及ｎｔ．１９０１位上双点突变株基因序列）在极其严谨的条件下分别杂交，检测ＥＢＶＰｒｅ－Ｃ的最常见变异，结果本法具有根高的特异性。应用上述方法检测了３１份乙肝病人的血清标本，结果７份ＨＢｅＡｇ阳性标本中，有４份ＰＣＲ阳性，均与Ｍ０探针杂交，未出现变异；２４份抗－ＨＢｅ阳性标本中，有１０份ＰＣＲ阳性，其中８份表现为Ｍ０伴Ｍ１和（或）Ｍ２阳性，一份为野毒株，另一份与三种探针均不杂交。     

慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞HBV DNA的PCR检测

①目的 探讨慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ和血清ＨＢＶＤＮＡ的感染情况及其临床意义。②方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１２８例慢性乙型肝炎病人和２０例健康人进行了ＰＢＭＣ及血清中ＨＢＶＤＮＡ检测。③结果 慢性乙型肝炎病人ＰＢＭＣ中ＨＢＶ ＤＮＡ的感染率为６４．２％,和血清ＨＢＶＤＮＡ的感染率具有一致性倾向（Ｘ＾２－０．６３,Ｐ〉０．０５）,慢性肝病病     

聚合酶链反应检测132例乙肝感染者HBVDNA

本文运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）．可检出极微量的ＨＢＶ感染者，它对乙肝发病机理的研究、判断患者病变活动和传染性以及判定抗病毒药物疗效均具有重要意义。     

ALT正常HBeAg阳性HBV感染者28例血清HBVDNA水平与肝脏病理关系的分析

目的探讨ALT正常的HBeAg阳性HBV感染者血清HBVDNA水平与肝脏病理的关系,为临床抗病毒治疗提供最佳时机。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应法（PCR）对28例ALT正常的HBeAg阳性HBV感染者进行定量检测,并与同期肝脏活检病理结果进行对比分析。结果ALT正常的HBeAg阳性HBV感染者血清HBVDNA水平与肝脏病理炎症活动度分级（G）及纤维化程度分期（s）无明显相关性。结论对ALT正常的HBeAg阳性HBV感染者应尽可能早行肝脏活组织病理检查,并依据其炎症活动度分级（G）及纤维化程度分期（S）,而不应根据其血清HBVDNA水平的高低决定治疗时机。