携反义基质金属蛋白酶-2的重组腺病毒对肝癌生长的影响

目的探讨携带反义二型基质金属蛋白酶（MMP2）基因的重组腺病毒（Ad-MMP2^AS）对人肝癌细胞株（Bel-7402）体外侵袭性和人肝癌动物模型生长的抑制作用。方法用已构建的Ad-MMP2^AS感染人肝癌细胞株（Bel-7402）,用侵袭小室模型检测Ad-MMP2^AS对Bel-7402细胞降解人工基底膜的抑制作用;用Western Blot和明胶酶谱检测Ad-MMP2^AS对Bel-7402细胞分泌MMP2的影响;用感染了Ad-MMP2^AS的Bel-7402细胞接种于裸鼠皮下,使其在裸鼠体内成瘤,以观察其成瘤能力;用Ad-MMP2^AS瘤内注射,以观察它对肝癌生长的抑制作用。结果Ad-MMP2^AS感染的Bel-7402细胞分泌MMP2被抑制、穿过人工基底膜Matrigel的Bel-7402细胞数下降52％、感染Ad-MMP2^AS的Bel-7402细胞的成瘤量下降4．3倍,Ad-MMP2^AS瘤内注射后瘤体生长减少63％。结论Ad-MMP2^AS能明显抑制肝癌的生长,对肝癌有治疗潜力。     

贻贝水溶性多糖MP-Ⅰ的分离纯化及体外抗肿瘤活性研究

目的：分离纯化贻贝多糖MP—I，并进行体外抗肿瘤活性的研究。方法：采用热水提取，Sevage法除蛋白分离得粗多糖，DEAE-Sepharose、SepharoseCL-6B柱层析纯化的方法从东海厚壳贻贝中得到贻贝多糖纯品MP—I。用GC及TLC法进行单糖组分的分析，用MTT法进行体外抗肿瘤活性的研究。结果：得到贻贝多糖纯品MP—I，多糖的得率为2．14％。单糖组分分析显示MP—I主要由葡萄糖组成，MP—I（0．5，0．1，0．02mg／m1）对体外HO-8910、MCF-7、K562、SMMC-7721肿瘤细胞均有不同程度抑制作用（P〈0．01），其中高浓度组对HO-8910、MCF-7肿瘤细胞的抑制率分别达到30．55％和36．38％。结论：贻贝多糖MP—I主要由葡萄糖组成，对HO-8910、MCF-7、K562、SMMC-7721肿瘤细胞有体外抑制作用。     

TOFA协同柔红霉素诱导肠癌细胞株HCT-8细胞凋亡

目的研究TOFA及柔红霉素（DNR）联合应用对肠癌细胞株HCT-8的作用,探讨其联合应用于临床的可能性。方法将1×10^4个HCT-8细胞种植于96孔板,采用MTT比色法测定不同浓度TOFA或／和DNR对同步化处理后的HCT-8细胞的生长抑制效果;DNA降解分析法（DNA Fragmemation）检测TOFA与DNR联合使用对HCT-8细胞DNA的损伤。Westernh10t检测TOFA与DNR联合使用对凋亡蛋白p53以及PARP的水解作用。结果单用TOFA或DNR均可呈浓度依赖性抑制肠癌细胞HCT-8的生长,其IC50值分别为7．5μg／mL和0．18μmoL／L;当用20μg/mLTOFA或0．6μmol／LDNR处理时,活性细胞只有正常对照组（无药物处理组）的26．2％±5．1％或22．3％±4．5％。当用20μg/mLTOFA和0．6μmol/LDNR两药联合应用时,活性细胞只有正常值的10．4％±3．0％。同时联合应用可显著增加肿瘤细胞DNA的降解;并显著诱导凋亡蛋白p53表达,促进PARP的水解。结论TOFA与DNR联合应用可协同抑制肠癌细胞株HCT-8细胞的生长,其效应与药物诱导细胞凋亡有关。     

新疆光果甘草黄酮对人肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制活性研究

目的探讨新疆光果甘草（Glycyrrhiza glabraL）总黄酮及单体成分光甘草定（glabridin,Gb）对人肝癌Bel一7402细胞增殖的抑制活性。方法采用乙醇提取法从光果甘草制备总黄酮提取物（G卜A）;经聚酰胺富集法精制而制备黄酮含量高于50％的标准化提取物（GF—B）;从GF-B中纯化制备单体成分光甘草定（Gb）;以人肝癌Bel-7402细胞株作为体外模型,用MTT法测定各样品对肝癌细胞增殖的抑制活性。结果制备和鉴定3种提取物：GF—A（总黄酮含量31．18％）、GF—B（含量52．5％）和Glabridin单体;3种物质对人肝癌Bel-7402细胞的增殖显示明显的抑制活性,其浓度在25～250btg／mL范围内对肿瘤细胞的最高抑制率分别达67．92％、84．28％和90．11％。结论人肝癌Bel-7402细胞对光果甘草总黄酮的抗癌活性具有一定的敏感性;单体Gtabridin可能是光果甘草总黄酮中抗癌活性较高的有效成分之一。     

超声联合紫杉醇对卵巢癌细胞HO-8910PM的体外作用

目的：观察超声（Ultrasound,US）联合紫杉醇（Taxol）对高转移性人卵巢癌细胞HO-8910PM的体外抑制作用。方法：筛选1个对细胞抑制率约10％的超声剂量。观察此剂量时超声辐照与药物联合应用（6μg／ml或18μg／m1）对肿瘤细胞的抑制率。结果：紫杉醇浓度为6μg／ml时Taxol、Taxol＋US组细胞抑制率分别为12．4％和11．7％（P〉0．05）,浓度为18μg／ml时抑制率分别为27．8％和42．0％（P〈0．05）结论：超声可增强紫杉醇对卵巢癌细胞的抑制效应,这种协同作用只有当药物浓度高于临界值时才存在。     

Ad-PUMA联合SU5416对裸鼠胰腺癌生长和转移的抑制作用

目的：研究重组腺病毒（Ad）-PUMA联合SU5416对裸鼠胰腺癌生长和转移的抑制作用。方法：建立裸鼠胰腺癌AsPC-1细胞株原位移植瘤模型,将胰腺癌裸鼠随机分为4组,于模型的第14天,分别自腹腔注射生理盐水100μL（对照组,n=8）、Ad—PUMA3×10^8pfu／100μL（PUMA组,n=10）、SU5416制剂16mg／kg（SU5416组,n=9）和Ad—PUMA＋SU54163×10^8pfu／100μL＋SU541616mg／kg（联合组,n=10）。治疗2周后处死裸鼠,剖腹测量原位肿瘤瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、胰腺癌细胞凋亡指数,同时观察腹膜、肝脏及毗邻脏器转移和腹水情况。结果：对照组、PUMA组、SU5416组、联合组诱发肿瘤瘤重分别为（0．72±0．08）、（0．48±0．06）、（0．52±0．07）、（0．21±0．04）g,抑瘤率分别为0、28％、34％、71％,肿瘤微血管密度分别为21．4±2．7、20．2±2．5、8．3±1．6、3．8±1．0,凋亡指数分别为（2．7±1．8）、（13．7±3．4）、（5．5±3．7）、（20．6±8．6）％,腹膜转移率分别为87％、70％、33％、10％,肝转移率分别为75％、50％、22％、0,联合组与对照组比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论：AdPUMA联合SU5416具有协同抗胰腺癌作用。     

华蟾素注射液配伍复方斑蝥胶囊对膀胱癌荷瘤小鼠瘤体的生长抑制作用

目的：探讨华蟾素注射液配伍复方斑蝥胶囊对膀胱癌荷瘤小鼠瘤体的生长抑制作用。方法建立膀胱癌荷瘤小鼠模型,随机分为空白对照组、对照组及实验组,肿瘤生长1周时开始给药,实验组给予华蟾素注射液及复方斑蝥胶囊,对照组给予注射用吡柔比星,并设空白对照（仅用生理盐水）,给药量均以临床常用量为标准,给药4周后处死裸鼠,分别测量、记录瘤体重量。结果空白对照组、对照组、实验组的平均瘤重（6.82±1.034 g、4.79±0.973 g、3.08±1.129 g ）,对照组、实验组抑制率分别为31.89％、50.47％,对照组、实验组抑制率差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论对照组、实验组对膀胱癌均具有抑制作用,且实验组较对照组对膀胱癌荷瘤小鼠瘤体生长抑制作用更明显。     

氧化苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究氧化苦参碱诱导人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用机制。方法：制备人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤模型,将其随机分为阴性对照组、阳性对照组及氧化苦参碱小、中、大剂量组,观察氧化苦参碱对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用。流式细胞仪检测移植瘤细胞Bd-2、Bax的表达。结果：氧化苦参碱能有效抑制裸鼠移植瘤的生长,与阴性对照组比较,其大剂量组肿瘤抑制作用明显,平均抑制率为43．20％;流式细胞仪检测显示氧化苦参碱组裸鼠移植瘤细胞Bcl-2表达降低,而Bax表达升高,以中剂量氧化苦参碱诱导细胞凋亡最明显,移植瘤细胞Bel-2表达为（339．19±42．34）,与阴性对照组（492．31±36．19）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;Bax表达为（554．74±26．13）,与阴性对照组（397．48±18．36）比较,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论：氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤生长有一定的抑制作用。且其机制与下调细胞Bel-2的表达、上调Bax的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

MTT法指导分离壁虎抗肿瘤活性成分的实验研究

目的 采用四氮唑盐（MTT）法指导壁虎抗肿瘤活性成分的分离,寻找壁虎抗肿瘤活性单体化合物,并初步观察其抗肿瘤作用.方法 常规培养人肝癌Bel-7402细胞、人肺癌Bel-95C细胞,在倒置显微镜下观察细胞形态及数量,采用MTT法检测多批次壁虎活性成分提取物对体外培养的肿瘤细胞株的生长抑制作用,计算肿瘤抑制率.结果 经过11批次重复药筛实验,逐步分梯次指导分离纯化,得到壁虎抗肿瘤活性单体化合物＂守宫咪唑衍生物＂.该化合物可明显抑制人肝癌Bel-7402细胞的生长,用药后前3d的抑瘤率分别为71.24%,91.37%,94.45%,在显微镜下发现肿瘤细胞变圆、体积变小.结论 用MTT法结合倒置显微镜观察细胞状态,指导中药壁虎抗肿瘤活性成分的提取分离,得到抗肿瘤作用明显的壁虎单体化合物.     

UbcH10基因沉默联合多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞体内成瘤实验

目的 观察UbcH10基因沉默对多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响.方法 采用慢病毒系统在MCF-7/ADR细胞中进行UbcH10基因沉默.将基因沉默后的肿瘤细胞及对照肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,通过裸鼠尾静脉连续给予多柔比星或生理盐水2周并停药1周,测量肿瘤体积,分析UbcH10沉默对多柔比星抑制MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响.采用蛋白质印迹分析检测瘤体中的UbcH10及BCL-2蛋白含量,分析UbcH10与肿瘤细胞化疗敏感性之间的调控关系.结果 通过慢病毒实验系统成功建立UbcH10基因沉默细胞株MCF-7/ADR UbcH10-RNAi.经过3周给药处理,多柔比星组肿瘤体积与对照组比较差异无统计学意义,肿瘤抑制率为4.16％;基因沉默+多柔比星组肿瘤体积与对照组差异有统计学意义(P＜0.05),肿瘤抑制率为41.8％.瘤体内蛋白含量检测结果显示,对照组、多柔比星组、基因沉默+多柔比星组UbcH10蛋白表达量分别为0.81±0.16、0.78±0.12、0.18±0.04,基因沉默+多柔比星组其余两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);BCL-2蛋白表达量组间差异与UbcH10一致,二者之间具有正相关性.结论 UbcH10基因沉默可以显著增强多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR的体内成瘤作用.     

PBMC对B7-2基因修饰的肝癌细胞Bel-7402体外杀伤作用的研究

目的研究B7-2基因修饰肿瘤后对T细胞活化的影响,探索B7-2在肿瘤免疫治疗中的作用。方法构建B7-2基因的表达载体,转染Bel-7402细胞,与外周血单核细胞（PBMC）共孵育,利用流式细胞术（FCM）检测Bel-7402细胞的凋亡。结果 B7-2基因修饰的Bel-7402细胞和PBMC细胞共培养4 h后,凋亡率为12.7%,与对照组（7.5%）比较,细胞凋亡率显著增加（P〈0.01）。结论 B7-2基因修饰能够增强肿瘤细胞对淋巴细胞的活化作用,为基于B7-2的抗肿瘤治疗奠定了基础。     

白花丹醌一单壁碳纳米管偶联物的制备及其对人肝癌Bel-7402细胞的抑制作用

目的：制备白花丹醌单壁碳纳米管（plumbagin-singlewalledcarbonnanotubesconjugate,PLB-SWNT）偶联物,考察其在水溶液中的分散性和体外对人肝癌Bel一7402细胞的抑制活性。方法：以聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）作为偶联剂,通过酰胺化和酯化反应将PLB与SWNT偶联,制备PLB-SWNT偶联物,并利用傅里叶转换红外光谱仪和透射电子显微镜（TEM）考察和分析所制备得到的偶联物的组成、结构和形貌,以紫外可见分光光度法（uV—Vis）测定PLB-SWNT偶联物PLB含量,并以MTT比色法、HE染色法和TEM等方法对该偶联物体外抑制Bel-7402活性进行初步研究。结果：①制备得到在水溶液中分散性较好的PLB-SWNT偶联物;②PLB-SWNT偶联物能够抑制人肝癌Bel-7402细胞的增殖。结论：①以PEG和PLB对SWNT进行共价修饰,可以制备分散性良好的PLB—SWNT偶联物;②PLB-SWNT偶联物在体外对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制效果显著。     

蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4的提纯及抑瘤活性观察

目的：分离纯化东亚钳蝎原毒,提取活性多肽成分SVⅡ—A4,并观察其抑瘤活性。方法：（1）分离纯化,采用分子筛凝胶柱层析和离子交换柱层析分离纯化蝎毒;（2）纯度分析,用SDS—PAGE电泳和HPLC色谱法对SVⅡ—A4进行纯度分析;（3）活性观察,用MTF法（酶反应比色法）观察比较不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其成分与SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞（A549、HL-60、K562／S及K562／ADR）的抑制作用。结果：经过两步的分离纯化获得5个蝎毒多肽成分,其中的蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞的抑制作用与阳性对照组相当。结论：经过优化提纯方法,两步即可从东亚钳蝎原毒中获得色谱纯度达96．73％的抑瘤活性单体成分SVⅡ-A4,初步观察,SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞均显示出明显的抑制作用及一定的剂量-效应关系,而且它对布耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用较阳性对照组强有进一步开发利用的价值。     

嗜酸粒细胞促淋巴细胞活性及抗肿瘤的作用机制

目的：探讨嗜酸粒细胞（EOS）体外抗肿瘤及对淋巴细胞活性的影响,研究EOS在肿瘤免疫中的作用.方法：建立豚鼠I型超敏反应模型,应用Percoll液不连续密度梯度法分离豚鼠血液、腹腔液中EOS.放射免疫法检测豚鼠血清及EOS与淋巴细胞共同培养的上清液（SELC）中TNF-α,IL-4含量;MTT法分别测定EOS,SELC,EOS裂解液（LLE）对白血病K562细胞,乳腺癌MCF-7细胞增殖活性的影响.结果：豚鼠血液、腹腔液EOS（1×10^6,1×107,1×10^8/L）能够促进脾淋巴细胞增殖,刺激指数最高分别可达1.92,2.58.血清,SELC中IL-4,TNF-α含量明显增高（P〈0.05）;腹腔液SELC48hIL-4,TNF-α含量最高分别为（3.94±0.16）,（8.93±0.15）g/L;腹腔液EOS,SELC,LLE与K562,MCF-7细胞共同培养,能够抑制K562,MCF-7细胞的增殖,尤其SELC对K562增殖的抑制率最高可达59.28%.结论：EOS可以促进淋巴细胞的增殖活性,提高SELC中IL-4,TNF-α的含量.腹腔液EOS,SELC,LLE能够抑制肿瘤细胞的增殖.     

沉默GPC-3基因转录对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用

目的：研究沉默磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（glypican-3,GPC-3）基因转录抑制肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤生长与机制。方法：以人GPC-3基因序列设计并合成miRNA,构建GPC-3-miRNA干扰质粒。将其导入HepG2细胞,通过杀稻瘟菌素筛选出稳定株,移植裸鼠皮下成瘤。根据体积的均数值绘制肿瘤生长曲线,免疫组化法检测瘤组织内GPC-3、β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1表达。结果：肝癌HepG2、Hep3B 和 MHCC-97H 细胞 GPC-3表达较强（50%～80%）, SMMC-7721和Bel-7402细胞中等（18%～25%）,PLC/PRF/5和Bel-7404细胞较弱（8%～10%）。以特异miRNA干预GPC-3基因转录,明显抑制 HepG2细胞增殖,呈时间依赖性;沉默 GPC-3能明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长,且瘤组织β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1等关键信号分子表达降低。结论：沉默GPC-3影响Wnt/β-catenin通路关键信号分子表达可能是抑制HepG2增殖的分子机制。     

靶向抑制肝癌耐药细胞多药耐药基因表达的实验研究

目的：构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA（shorthairp in RNA,shRNA）表达质粒,并观察其对肝癌耐药细胞Bel-7402/R的MDR1 mRNA的抑制作用。方法：利用分子克隆技术,将含MDR1的双链DNA,与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株BEL-7402/R,RT-PCR分析MDR1mRNA的表达,流式细胞仪检测细胞P-gp的表达。结果：PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制MDR1mRNA的表达;P-gp的表达阳性率降低了57.3%,P〈0.05。结论：构建的pshRNA-MDR1表达质粒能靶向抵制肝癌耐药细胞MDR1mRNA和P-gp的表达。     

Survivin siRNA对肝癌细胞BEL-7402的增殖与对Survivin基因及蛋白表达的作用

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)对BEL-7402细胞的生长抑制与生存素(Survivin)基因及蛋白表达的影响。方法:合成Survivin siRNA,以不同浓度转染BEL-7402细胞,MTT法测定细胞生长抑制率,RT-PCR、Western-Blot检测BEL-7402细胞Survivin mRNA及蛋白的表达差异。结果:BEL-7402细胞转染FAM荧光标记的siRNA后,细胞内有绿色荧光表达。分别以10、30、50nmol/LSurvivin siRNA转染细胞后,MTT测得的细胞生长抑制率分别为(38.80±1.71)%,(54.50±1.16)%,(66.79±1.10)%,RT-PCR测得的Survivin mRNA表达分别为0.42±0.02,0.28±0.01,0.12±0.01,Western-Blot测得Survivin蛋白表达分别为0.55±0.04,0.32±0.02,0.21±0.02,三项指标与空白对照组、阴性对照组、脂质体对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。随着Survivin siRNA浓度的增加,细胞抑制率呈上升趋势,Survivin mRNA及Survivin蛋白的表达逐渐降低,呈浓度-效应关系。结论:Survivin siRNA能抑制BEL-7402细胞的增殖与Survivin基因和蛋白表达。     

蝎毒多肽有效组分对辐射后M-NFS-60细胞的促增殖作用

目的：观察蝎毒多肽（SVP）及IL-3对M—CSF依赖细胞株M—NFS-60促增殖作用以及对辐射后M—NFS-60细胞增殖的影响。方法：采用Alamar Blue摄入法检测细胞的增殖情况。①选择10个细胞浓度．分别于0h、2h、4h、5．5h和20h,检测细胞的增殖情况,确定M—NFS-60细胞对Alamar Blue反应所需的最佳细胞密度和孵育时间;②采用最佳细胞密度和孵育时间,观察10个SVP组分促进M—NFS-60细胞的增殖作用,筛选出SVP的有效组分;⑧M—NFS-60细胞经60Coγ-射线照射后分别给予生理盐水、SVP、IL-3、SVP＋IL-3处理48h,测定细胞增殖情况。结果：①M—NFS-60细胞的接种密度为5×10^4cells／mL时,对AlamarBlue的还原能力最强,孵育时间8h后,M—NFS-60细胞对Alamar Blue的还原率开始增强,72h达最高;②从10个SVP组分中筛选出Ⅱ3、Ⅳ能明显促进M—NFS-60细胞的增殖;③SVPⅡ3、Ⅲ3、Ⅳ或IL-3处理辐射后的细胞48h,细胞的增殖率（％）分别为121．58±2．62（113）、123．39±4．45（Ⅲ3）、123．51±5．04（Ⅳ）、140．12±1．68（IL-3）,与空白对照组（100．00±0．01）相比差异有显著性（P〈0．01）;113、Ⅲ3、Ⅳ分别与IL-3联用处理细胞48h后的增殖率分别为163．98±9．20（113±IL3）、159．89±8．31（Ⅳ-IL3）、148．92±9．74（Ⅲ3±IL3）,与SVP处理组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：蝎毒中存在促进M—NFS-60增殖的有效多肽组分,这些多肽组分能明显促进辐射后M—NFS-60细胞的增殖,并与IL-3对辐射后M—NFS-60细胞的增殖具有协同作用。     

3～10岁儿童注意缺陷多动症状的发生状况及其与睡眠的关系

目的 调查儿童注意缺陷多动症状的发生状况及其与睡眠的关系.方法 在全国6个地区,以性别、年级（幼儿园小班～小学三年级）和区域（城镇和农村）作为分层变量,随机分层整群抽取儿童1 535名,年龄为3～10岁.采用注意缺陷多动障碍诊断量表父母版和匹兹堡睡眠质量指数进行调查.结果 全样本儿童注意缺陷多动症状阳性率为24.95％.在各项得分上,男性[注意缺陷（Inattention,IA）分量表：（9.21±3.75）分,多动冲动（Hyperactivity-Impulsivity,HI）分量表：（8.62±3.87）分,总分（Total）：（17.82±7.01）分]均高于女性[IA：（8.16±3.77）分,HI：（7.32±3.76）分,Total：（15.48±6.98）分],差异有统计学意义（P＜0.001）,而女性的阳性率（IA：16.19％,HI：27.02％,Total：32.51％）则高于男性（IA：11.70％,HI：8.19％,Total：17.43％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.7～9岁是ADHD症状的高发期（7岁组IA：18.22％,HI：21.93％,Total：38.66％;8岁组IA：20.66％,HI：23.25％,Total：38.01％;9岁组IA：18.22％,HI：33.78％,Total：32.00％）.农村儿童阳性率（IA：18.37％,HI：18.37％,Total：29.48％）高于城市儿童（IA：10.47％,HI：15.12％,Total：21.40％）,差异有统计学意义（P＜0.01）.Logistic回归分析表明睡眠质量、睡眠障碍和日间功能障碍等睡眠因子对注意缺陷多动症状有一定的预测力度.结论 父母评定方法用于一般儿童人群时可能会出现较高的注意缺陷多动症状发生率;女性儿童和农村儿童的注意缺陷多动问题需要更多的关注;7～9岁阶段是注意缺陷多动症状最为明显的阶段;儿童在日间功能障碍、睡眠障碍和入睡时间上的问题越大,则注意缺陷多动症状越明显.