熊果酸对蛋白质体外非酶糖基化反应的影响

目的 研究熊果酸(ursolic acid,UA)对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响.方法 采用L16(45)正交设计,以牛血清白蛋白(BSA)浓度,d-葡萄糖浓度和孵育时间3因素4水平正交试验,筛选出体外蛋白质非酶糖基化的最佳反应条件.并以此条件用荧光分光光度法观察UA对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)形成的影响.同时,采用NBT法测定UA在体外对AGEs中间产物果糖胺(Amadori产物之一)形成的影响.结果 正交试验结果显示,5 g/LBSA,50 mM d-葡萄糖及40 d的孵育时间是蛋白质非酶糖基化反应的最佳条件,荧光分光光度法结果表明,UA(10、20、40μM)对AGEs的形成有明显的抑制作用((P<0.05 or 0.01 vs模型组),且呈剂量依赖性.但UA在体外不能抑制果糖胺的形成.结论 UA可通过干扰早期糖基化产物-Amadori产物的深度糖基化来抑制AGEs形成,这可能是UA减轻糖尿病血管损伤的重要机制之一.     

非酶糖基化终末产物所致疾病的中药干预

非酶糖基化终末产物(AGEs)是蛋白质、脂质和核酸等大分子的游离氨基与还原性单糖的醛基反应所生成的稳定的共价化合物,在体内的积累是导致糖尿病等多种疾病及其并发症的关键因素。AGEs可直接或间接地对机体产生致病作用。目前AGEs抑制剂特别是某些中药在治疗AGEs引起的疾病方面研究进展迅速,主要通过降低体内AGEs水平、减少AGEs交联、抗氧化、阻断与相关受体的结合等途径来干预AGEs的合成、代谢和受体后效应。简述AGEs的致病机制,并探讨中药对AGEs所致疾病的干预及其可能机制。     

苦荞麦对糖尿病大鼠血糖 蛋白非酶糖基化反应的影响

目的:研究苦荞麦提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、蛋白非酶糖基化反应的影响。方法:用链脲左菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,并于第3周开始给予苦荞麦高、中、低(200,100,50mg/kg·d)剂量和氨基胍(100mg/kg·d)剂量处理12周。上述动物于第12周末尾部取血,用血糖仪测定大鼠即时血糖。用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定糖化血红蛋白含量。用荧光分光光度法测定晚期糖基化终末产物含量。计量资料采用SPSS14.0进行方差分析。结果:苦荞麦高、中剂量明显降低糖尿病大鼠血糖、抑制糖基化产物的形成(P<0.01),并且苦荞麦高剂量组的治疗效果优于氨基胍组。结论:中药苦荞麦的提取物具有降低血糖、抑制大鼠体内蛋白非酶糖基化反应的作用。     

复方中药组分对糖尿病大鼠非酶糖基化的影响

目的:证实复方中药组分防治糖尿病及糖尿病肾病、糖尿病心肌病的有效性以及探讨其作用机制。方法:应用链尿菌素复制大鼠糖尿病模型,对复方中药组分进行了药效学实验观察,并对各组动物的血液及某些组织作了一系列相关的指标测定。结果:复方中药组分具有一定的降血糖作用,并可降低血红蛋白、心肌、肾脏的糖化值。结论:复方中药组分通过抑制糖尿病大鼠的非酶糖基化,可防治糖尿病肾病和糖尿病心肌病。     

不同ROS激发体系对蛋白质非酶糖基化的影响

目的 研究不同的活性氧(ROS)激发体系对蛋白质非酶糖基化反应的影响. 方法 以Horinchi法建立蛋白非酶糖基化反应体系,并将反应液分成对照组和不同的ROS激发组,分别向各组中加入不同浓度的H2O2,CHP和Vc/Fe2+等ROS激发剂,37℃孵育60 d,以荧光光谱扫描进行AGEs产物鉴定,并以激发波长(EX) 370 nm/发射波长(EM) 440 nm测定各组荧光值. 结果 荧光扫描显示,各组主峰均在EM 440～450 nm波谱范围内. 各ROS激发组荧光值明显低于对照组(P<0.05). 不同H2O2浓度下测定的荧光值两两比较显示,除20 μmol/L和80 μmol/L浓度下无显著性差别(P>0.05)外,各浓度组之间均有显著性差别(P＜0.05);过氧基异丙苯(CHP)和Vc/Fe2+ ROS激发体系所测定的荧光值之间也存在显著差别(P＜0.05). 结论 在本研究的给定条件下,H2O2及CHP和Vc/Fe2+ ROS激发体系对体外蛋白质非酶糖基化反应具有明显的抑制作用;H2O2对蛋白非酶糖基化的影响具有一定的剂量效应关系;不同种类的ROS激发体系对蛋白质非酶糖基化反应有明显差异.     

玉竹乙醇提取物和分离部位对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的探讨玉竹乙醇提取物和分离部位对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法单次ip链脲佐菌素(STZ)60mg/kg建立实验性糖尿病大鼠模型,分别ig给予玉竹乙醇提取物和三氯甲烷、正丁醇分离部位。给药80d后测定血清肌酐(Cr)、尿素(Ur)、糖化血红蛋白(GHb)、肾皮质蛋白质非酶糖基化终末产物(AGEs)、尿白蛋白(UAL)排泄率,并观察肾组织病理学改变。结果玉竹乙醇提取物和三氯甲烷分离部位降低糖尿病大鼠血中GHb水平和UAL排泄率,抑制肾皮质AGEs的形成,同时改善肾脏病理改变;正丁醇分离部位降低UAL排泄率。结论玉竹乙醇提取物和三氯甲烷分离部位对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制可能与抑制AGEs形成有关。     

金钗石斛水提物对糖尿病大鼠肾组织非酶糖基化及氧化的影响

目的 观察金钗石斛(Dendrobium nobil Lindl, DNL)水提物对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾组织非酶糖基化和氧化应激的影响,探讨DNL对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法 采用链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导DM大鼠模型,分为正常对照组(N组),糖尿病对照组(DM组),金钗石斛低(DNLL)、中(DNLM)、高(DNLH)剂量组和氨基胍(aminoguanidine, AG)对照组(AG组),给药12周。分别检测血糖、血尿素、肌酐、糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)、尿肌酐、24h尿白蛋白、血清及肾组织AGEs、肾组织总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。透射电镜观察肾组织超微结构变化。结果 DM组大鼠血糖、血尿素、24h尿白蛋白、血清及肾组织AGEs、肾组织MDA含量显著高于N组(P＜0.05);肌酐清除率、肾组织总SOD活性显著低于N组(P＜0.05);DM组大鼠系膜扩张明显异常,基底膜明显增厚。DNL明显降低DM大鼠血糖、血尿素、24h尿白蛋白、血清及肾组织AGEs、肾组织MDA含量(P＜0.05),明显增加肌酐清除率(P＜0.05)、增强肾组织总SOD活性(P＜0.05)、减轻肾系膜的扩张和基底膜的增厚。结论 DNL能降低血糖、抑制AGEs的形成、抑制氧化应激的发生,从而阻止或延缓糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)的发生发展。     

外源性非酶糖基化终末产物对大鼠视网膜血管短期作用观察

目的观察外源性非酶糖基化终末产物(AGEs)在视网膜中对血管内皮生长因子(VEGF)受体(Flt-1)的表达和对视网膜血管的影响。方法应用鼠血清白蛋白(RSA)体外孵育AGEs,并于尾静脉注射至健康大鼠体内,每日1次,连续2周,随机分为AGEs组和RSA对照组。通过眼底荧光血管造影(FFA)观察视网膜血管有、无渗漏,采用Envision系统免疫组织化学法检测视网膜Flt-1的表达,通过视网膜超薄切片和透射电镜观察视网膜血管超微结构改变。结果2周后FFA显示大鼠视网膜均未出现荧光渗漏、积聚现象,未发现有毛细血管无灌注区。视网膜内核层中出现棕黄色Flt-1阳性染色细胞,AGEs组的阳性细胞[(25.18±3.44)个]较RSA对照组多50%[(18.74±4.11)个,P<0.05]。AGEs组大鼠视网膜毛细血管基底膜电子密度轻度增高,周细胞、内皮细胞胞浆内线粒体发生肿胀、膜破裂;RSA对照组未发生超微结构的改变。结论AGEs可作为独立因素参与视网膜血管及其细胞的损害过程,并与VEGF有一定的联系。     

关于晚期糖基化终末产物的研究进展

1984年Vlassara等人首次提出晚期糖基化终末产物(AGE)这一概念,近年来对于AGE的研究备受关注.研究发现AGE参与了氧化应激、炎症反应等病理变化,同时,AGE还参与了慢性肾脏病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化等疾病的发生及进展过程.本文就AGE的结构、与疾病的关系、药物干预等方面作一综述.     

晚期糖基化终末产物对骨髓内皮祖细胞功能的影响及意义

目的 观察体外培养的骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)在晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)作用后功能的改变,探讨AGEs影响EPCs功能的可能机制及在动脉粥样硬化发生、发展中的作用. 方法 使用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养.对贴壁细胞进行细胞化学分析,以激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素Ⅰ(FITC-UEA-Ⅰ)和DiI-标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPCs.培养细胞中加入不同浓度AGEs,测定AGEs作用后EPCs的迁移、黏附、增殖能力,同时分析细胞内活性氧浓度及细胞的凋亡情况.结果 AGEs作用后EPCs生物学功能明显减退,细胞内氧化应激增强,凋亡率增加;同时这种改变可以被AGEs蛋白交联阻断剂ALT711削弱. 结论 AGEs增加骨髓EPCs内活件氧生成,增强氧化应激,破坏细胞内环境稳定性,使细胞生物学功能受损,最终导致细胞凋亡.这种变化与AGEs浓度成剂量依赖性.     

五味子、山茱萸等对蛋白质非酶糖化的抑制作用

目的 糖尿病慢性并发症与蛋白质非酶糖化作用有关,因此通过体外建立非酶糖化系统并进行有关中药的筛选,以期寻找有效的抑制蛋白质非酶糖化反应的中药。方法 200mmol/L葡萄糖与40g/L牛血清白蛋白在37℃条件下反应1周,用氯化硝基四氮唑兰（NBT）作显色剂,观察五味子、山茱萸等中药对该反应的抑制作用,结果 五味子、山茱萸对蛋白质早期糖化产物（果糖胺）的生成有一定的抑制作用。结论 五味子、山茱萸可能对糖尿病慢性并发症有改善作用。     

睡眠剥夺对大鼠抗氧化应激的影响及中药的干预作用

[目的]观察睡眠剥夺对大鼠饮食行为、能量消耗、体温和抗氧化能力的影响,探讨中药的干预作用及其抗氧化应激的机制。[方法]将雌性SD大鼠32只随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组8只,利用"小平台水环境法"建立大鼠睡眠剥夺模型,分别进行体温、体重、进食量和饮水量的监测,并计算日能耗,同时检测机体血清SOD活性和MDA含量。[结果]72h睡眠剥夺后,模型对照组大鼠体重、进食量和饮水量均明显低于正常对照组(P<0.05,P<0.01),日消耗能量和体温明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),且机体血清SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01);进行抗衰老片和六味地黄丸干预后,均能有效预防睡眠剥夺后大鼠的体重、进食量、饮水量的降低,并能降低日消耗能量和体温,显著提高机体SOD活性(P<0.05,P<0.01),降低MDA含量(P<0.05,P<0.01)。[结论]睡眠剥夺可引起大鼠饮食行为的改变、耗能增加、体温升高,抗氧化应激能力下降。而抗衰老片和六味地黄丸等中药具有抗睡眠剥夺引起的氧化应激的作用,其机制可能与提高机体的抗氧化能力有关。     

非酶糖化抑制剂对糖尿病大鼠心肌超微结构的作用

目的 观察STZ糖尿病大鼠心肌超微结构的病理改变及非酶糖化抑制剂一氨基胍对其的影响。方法 制备STZ糖尿病大鼠模型，随机分为糖尿病(DM)组、氨基胍(AG)组，同时设正常对照组。12周时处死，取大鼠左室心肌行透射电镜观察。结果 DM组心肌肌纤维排列紊乱，线粒体肿胀变性，间质纤维增生，微血管基底膜增厚：AG组上述损害明显轻于DM组。结论 氨基胍能改善STZ糖尿病大鼠心肌超微结构的损害。     

非酶糖化抑制剂对STZ大鼠视网膜毛细血管重建的影响

目的　研究糖尿病大鼠视网膜毛细血管重建及非酶糖化抑制剂对其影响。方法　用链脲佐菌素 (STZ)诱导SD大鼠建立糖尿病动物模型 ,随机分为糖尿病组 (DM )及氨基胍组 (AG) ,分别饲养 3月和 6月 ,运用视网膜消化铺片和图像分析方法 ,观测糖尿病大鼠视网膜微血管结构改变及非酶糖化抑制剂对其影响。结果　DM组视网膜毛细血管周细胞数目较 12周明显减少 (P <0 0 5 ) ,内皮细胞数目无明显变化 ,核染色深 ,形态异常 ,毛细血管闭塞。AG组病变减轻。结论　非酶糖化抑制剂对糖尿病视网膜毛细血管重建有一定的防治作用     

止消通脉宁对糖尿病大鼠肾脏胶原非酶糖化的影响

采用STZ糖尿病大鼠模型 ,在 6 ,12周分别观察肾脏组织发生非酶糖基化的情况 ,并观察止消通脉宁及氨基胍的作用。结果发现不同病程STZ糖尿病大鼠肾脏组织的胶原含量和非酶糖基化早期产物 (5 HMF)及胶原相联荧光值均明显高于正常对照组 ,并随病程的延长而增高。止消通脉宁有阻断肾脏组织非酶糖基化的作用 ,而对 5 HMF的作用优于氨基胍。说明高糖环境下肾脏组织可发生非酶糖基化 ,止消通脉宁有抑制肾脏组织非酶糖基化的作用 ,是其防治糖尿病肾病的作用机理之一     

AGEs平台筛选中药及中药有效成分

目的 寻找抑制AGEs形成的中药及中药有效成分。方法 通过分析现有国内报道抑制AGEs形成的化合物的结构特点和作用机制，利用体外AGEs形成的模型，进行中药及中药有效成分的筛选。结果川芎素、复方丹参注射液等中药及中药有效成分对体外AGEs形成有很好的抑制作用，大蒜素、维生素C等对体外AGEs的形成未见抑制作用，而维生素B1、维生素B6、维生素B12对体外AGEs的形成有一定的促进作用。结论具有能和AGEs的前体羰基化合物反应的中药及中药有效成分可以抑制体外AGEs的形成。     

血液透析对血管内皮功能的影响及氟伐他汀的作用

目的：探讨血液透析对血管内皮功能有无损伤及氟伐他汀对该类病人的内皮功能有无保护作用和可能的机制。方法：以16名维持性血透患者为对象，分别在应用和不用氟伐他汀的情况下，单次血透前后测量上臂动脉扩张度、血浆氧化应激标志物丙二醛（MDA）、脂质过氧化物（LPO）、血浆抗活性氧基标志酶--谷光甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、血脂，比较血透前后和用药前后各指标的差异。结果：维持性血透病人血透后血管内皮功能较血透前降低，体内氧化应激性增强。在应用氟伐他汀后患者透析后体内氧化应激活性减低，因血透所致的内皮功能损害也减轻。结论：血液透析加重血管内皮功能损害，其机制可能与其引起氧化活性产物增加有关，而氟伐他汀对这种损害发挥保护作用。     

氨基胍和导升明联合用药对糖尿病视网膜病变患者AGEs、NO和视力的影响

目的观察氨基胍和导升明联合用药对单纯型糖尿病视网膜病变的AGEs、NO和视力的影响。方法选择单纯型糖尿病视网膜病变病人120例,随机分为对照组和治疗组各60例,两组同时给予常规综合治疗。对照组给予尿激酶治疗,治疗组加用氨基胍和导升明常规剂量治疗,8周后测定两组病人AGEs、NO和视力的变化。结果治疗组NO和视力明显高于对照组,AGEs显著低于对照组。结论氨基胍和导升明可以有效地改善单纯型糖尿病视网膜病变病情。     

肼苯哒嗪联合硝酸异山梨酯对心力衰竭大鼠内皮功能及氧化应激水平的影响

 目的探讨肼苯哒嗪（HYD）联合硝酸异山梨酯（ISDN）对心力衰竭大鼠内皮功能及氧化应激水平的影响。方法利用阿霉素诱导大鼠心力衰竭模型,成模后分为安慰剂对照组（给予生理盐水）、培哚普利（2 mg·kg-1·d-1）+比索洛尔（5 mg·kg-1·d-1）组及培哚普利（2 mg·kg-1·d-1）+比索洛尔（5 mg·kg-1·d-1）+HYD（7.2 mg·kg-1·d-1）+ISDN（6 mg·kg-1·d-1）组。药物干预6 周后,取心肌组织测定心肌组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和内皮素1（ET-1）的表达,同时测定丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果HYD+ISDN并不能增加心肌组织eNOS 含量,对心肌组织内eNOS及ET-1 的表达均无显著响;HYD+ISDN 可显著降低心肌组织MDA含量,同时使心肌组织SOD 活性增高。结论HYD+ISDN 可改善心力衰竭大鼠体内氧化应激状态。     

肥胖对慢性肾小球肾炎患者氧化应激系统的影响

目的探讨慢性肾小球肾炎慢性肾功能不全(CKD2-4期)患者肥胖与氧化应激系统的关系。方法选择慢性肾小球肾炎CKD2-4期的患者43例及正常对照组40例,分别按体质量指数(body mass index,BMI)分为正常组(BMI<24 kg/m2)、超重组(24≤BMI<28 kg/m2)和肥胖组(BMI≥28 kg/m2),应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中脂质过氧化产物前列腺素F2α水平(8-isoprostane F 2α,PGF2α)及用分光光度法测定血清中蛋白的晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)及抗氧化应激指标维生素E(Vitamin E,VitE)的含量。结果慢性肾小球肾炎超重组患者体内AOPP及PGF2α含量明显高于体质量正常组(P<0.05),肥胖组体内AOPP及PGF2αt含量高于超重组,但差异无统计学意义(P<0.05)。超重组患者体内VitE含量明显低于体质量正常组(P<0.05),肥胖组患者体内VitE含量低于超重组,但差异无统计学意义(P>0.05)。相同BMI指数分组的慢性肾小球肾炎患者体内AOPP及PGF2α含量明显高于健康对照组(P<0.05),VitE含量明显低于健康对照组(P<0.05)。结论慢性肾小球肾炎患者体内存在氧化应激状态,且随着BMI指数升高,慢性肾小球肾炎患者体内氧化应激水平升高,抗氧化应激能力下降,提示肥胖通过氧化应激途径影响慢性肾小球肾炎患者。