雌孕激素对乳腺癌MCF-7细胞热休克蛋白mRNA水平的影响

目的：研究一定浓度雌、孕激素作用于MCF-7细胞一定时间后,细胞中VEGF、Hsp70、Hsp90和NF-κBp50 mRNA水平上的变化,进而揭示雌、孕激素对乳腺癌MCF-7细胞株作用的分子生物学机制.方法：体外培养人乳腺癌MCF-7细胞株,分4组给予不同处理因素,分别为对照组、雌激素组、孕激素组和雌孕激素混合组.给药72 h后MTT法测细胞570 nm分光光度值.RT-PCR法观察各组Hsp70、Hsp90、VEGF和NF-κBp50 mRNA表达水平.结果：与对照组相比,10^-9mol/L雌激素促进细胞生长作用最明显,10-7mol/L孕激素本身对MCF^-7细胞生长无明显影响,但在雌、孕激素混合组孕激素部分抑制雌激素促细胞增殖作用,具有统计学意义.与对照组相比,雌激素上调细胞中Hsp70、Hsp90、VEGF和NF-κBp50 mRNA水平;孕激素组Hsp70、Hsp90、VEGF和NF-κBp50 mRNA水平与对照组差异无统计学意义.孕激素可以部分抑制雌激素对MCF-7细胞Hsp70、Hsp90、VEGF和NF-κBp50 mRNA的上调作用.结论：雌激素促进乳腺癌细胞生长,可能是雌激素与癌细胞受体结合后通过某种途径刺激Hsp70、Hsp90、NF-κBp50及VEGF的表达,进而抑制癌细胞的凋亡,促进细胞增殖.孕激素通过抑制雌激素对Hsp70、Hsp90、NF-κBp50和 VEGF mRNA的上调作用,进而抑制其促进细胞增殖作用.雌、孕激素促进或抑制细胞增殖,与其对Hsp70、Hsp90、NF-κBp50及VEGF基因的调控是密切相关的.     

热休克蛋白27在胃癌中的表达

目的:探讨热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)在胃癌、癌旁正常胃黏膜组织和慢性胃炎中的蛋白及其mRNA的表达情况,为HSP27应用于临床胃良恶性病变的鉴别诊断提供实验依据.方法:采用组织芯片技术检测病理诊断明确的34例胃癌患者的胃癌组织标本及相对应的距胃癌组织边缘1.5 cm处的组织、距胃癌组织边缘5 cm以上的正常组织以及胃炎组织中HSP27的表达,RT-PCR法对8例患者的胃癌组织及其对应的正常胃黏膜组织、胃溃疡组织和慢性胃炎组织的HSP27 mRNA表达情况进行检测.比较组织芯片中胃癌与癌旁以及胃癌与正常胃黏膜组织之间HSP27蛋白的表达差异,并比较HSP27 mRNA的表达情况.结果:HSP27蛋白主要表达于细胞质中,少量表达于细胞核及细胞膜;HSP27蛋白在胃癌、癌旁、正常胃黏膜组织及胃炎中的表达阳性率分别为52.94%、11.78%、14.71%和5.88%,过表达率分别为38.24%、11.77%、11.77%和5.88%.HSP 27蛋白在胃癌中的表达量明显高于胃癌旁组织、胃炎组织及正常胃黏膜组织(P<0.01).在mRNA水平,胃癌组织的HSP27表达也明显高于其余3组(P<0.01).结论:胃癌中HSP 27的表达水平明显高于胃癌旁组织,胃炎组织和正常胃黏膜组织,HSP27有可能成为一种潜在性的用于鉴别良恶性胃黏膜病变的标志物.     

热休克蛋白在骨肉瘤中的表达

目的：观察热休克蛋白在骨肉瘤中的表达,并探讨其意义。方法：35例骨肉瘤病例为观察对象,以10例骨软骨瘤切除病例肿瘤基底部周围正常骨组织为对照组。SP法免疫组织化学标记HSP70,HSP90α,HSP90β和C－erB2基因,增殖细胞核抗原（PCNA）,结果：各组织学类型的骨肉瘤细胞均有HSP70,HSP90α,HSP90β阳性,骨肉瘤组与对照组比较,HSP70,HSP90β,PCNA,C－erbB2表达差异有显著性,分化较差的骨肉瘤HSP70,HSP90α,HSP90β的表达强度明显高于分化较好者。结论：HSP70,HSP90α和HSP90β在骨肉瘤的增殖过程中起重要作用。     

热休克蛋白90抑制剂研究进展

热休克蛋白90(HSP90)抑制剂能够抑制HSP90，促使在肿瘤生长信号通路中起重要作用的HSP90效应蛋白通过泛素化降解，从而阻断肿瘤增殖生长信号通路的多个靶点，有效阻止肿瘤的生长。现综述近年来有关HSP90抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展。     

细胞表面热休克蛋白90与肿瘤转移

热休克蛋白90(Hsp90)调控其多种底物蛋白的稳定及功能,是抗肿瘤治疗的独特靶蛋白.Hsp90不仅位于细胞表面,甚至分泌至细胞外发挥一定功能,且与肿瘤高侵袭性及转移密切相关.     

热休克蛋白在肿瘤发生发展中的作用

热休克蛋白(HSP)在一系列肿瘤中呈高表达,其家族各成员不仅促进了肿瘤细胞的增殖,而且抑制了其死亡途径,对于肿瘤的发生发展十分重要,并与肿瘤免疫、耐药和不良预后关系密切.因而,HSP已成为新抗癌策略的靶向.     

细胞表面热休克蛋白90与肿瘤转移

热休克蛋白90(Hsp90)调控其多种底物蛋白的稳定及功能,是抗肿瘤治疗的独特靶蛋白.Hsp90不仅位于细胞表面,甚至分泌至细胞外发挥一定功能,且与肿瘤高侵袭性及转移密切相关.     

细胞表面热休克蛋白90与肿瘤转移

热休克蛋白90(Hsp90)调控其多种底物蛋白的稳定及功能,是抗肿瘤治疗的独特靶蛋白.Hsp90不仅位于细胞表面,甚至分泌至细胞外发挥一定功能,且与肿瘤高侵袭性及转移密切相关.     

热休克蛋白在骨肉瘤中的表达

目的 :观察热休克蛋白在骨肉瘤中的表达 ,并探讨其意义。方法 :35例骨肉瘤病例为观察对象 ,以 10例骨软骨瘤切除病例肿瘤基底部周围正常骨组织为对照组。SP法免疫组织化学标记HSP70、HSP90α、HSP90 β及C erbB2基因、增殖细胞核抗原 (PCNA)。 结果 :各组织学类型的骨肉瘤细胞均有HSP70、HSP90α、HSP90 β阳性表达。骨肉瘤组与对照组比较 ,HSP70、HSP90 β、PCNA、C erbB2表达差异有显著性。分化较差的骨肉瘤HSP70、HSP90α、HSP90 β的表达强度明显高于分化较好者。 结论 :HSP70、HSP90α和HSP90 β在骨肉瘤的增殖过程中起重要作用     

热休克蛋白90抑制剂研究进展

热休克蛋白90(HSP90)抑制剂能够抑制HSP90,促使在肿瘤生长信号通路中起重要作用的HSP90效应蛋白通过泛素化降解,从而阻断肿瘤增殖生长信号通路的多个靶点,有效阻止肿瘤的生长.现综述近年来有关HSP90抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展.     

人肾癌中HSP70的量子点标记检测及意义

Objective: To detect the expression of heat shock protein 70 (HSP70) in human renal carcinoma tissues and cultured ACHN cells by using quantum dots-tagged fluorescence technology and its significance. Methods: Using the fluo rescence property of quantum dots, indirect immunofluorescence method and immunocytochemical method were used to detect the expression of HSP70 tagged by quantum dots in renal carcinoma tissues and ACHN cells cultured in vitro. Results:Confocal fluorescence microscopy showed that HSP70 were significantly expressed in renal carcinoma tissues and ACHN cells cultured in vitro characterized by homogeneous distribution of intensive salmon pink fluorescence. Compared with FITC tagging, quantum dots tagged fluorescence had good specificity and signal to background. There was no notable quenching after excitation by quantum dots for 30 min. Conclusion: Quantum dots can be used to label subcellular proteins and have obvious advantages compared with the traditional fluorescence methods. The quantum dots-tagged fluorescence could be applied as a new method for clinical labeling detection.     

米非司酮逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR耐多柔比星机制的探讨

目的 探讨米非司酮对乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR的逆转耐药作用.方法 以亲本乳腺癌细胞MCF-7和耐多柔比星(阿霉素)乳腺癌细胞MCF-7/ADR为研究对象,分别应用MIF进行干预后,流式细胞仪检测MIF作用前后瘤细胞P-gp的表达、细胞内阿霉素蓄积量的变化以及细胞周期的分布.结果 (1)10 μmol/L MIF作用72小时后,MCF-7/ADR细胞P-gp表达率[(23.21±1.80)％]明显高于MCF-7细胞[(19.37±2.37)％,P＜0.05].(2)5 μmol/L ADR处理后,MCF-7/ADR细胞内ADR蓄积量为(47.13±4.11)％,低于MCF-7细胞[(60.24±2.61)％,P＜0.05].(3) 10 μmol/L MIF联合5 μmol/L ADR处理细胞,MCF-7/ADR和MCF-7细胞内ADR的蓄积量分别为(82.72±2.42)％及(88.63±2.75)％ (P ＞0.05);但均较单用ADR时升高(均P＜0.01).(4) MIF作用前,MCF-7/ADR细胞G0/G1期比例[(77.21±3.10)％]高于MCF-7细胞G0/G1期比例[(59.05±2.16)％,P＜0.05];MCF-7/ADR细胞S期比例明显低于MCF-7细胞(P＜0.05).经10 μmol/L MIF作用后,MCF-7细胞G0/G1期比例(75.28±2.53)％较MIF作用前明显升高(P＜0.05);S期比例则较MIF作用前显著降低(P＜0.05);MCF-7/ADR细胞G0/G1期比例和S期比例分别为(80.13±2.72)％及(13.52±1.03)％,与MIF作用前比较差异均无统计学意义(均P＞0.05);两种瘤细胞的G2/M期比例与MIF作用无关(P＞0.05).结论 (1)MIF可以逆转MCF-7/ADR的耐药性,其作用机制与降低细胞P-gp含量、增加细胞内ADR蓄积量有关.(2) 10 μmol/L浓度的MIF对MCF-7/ADR细胞周期分布影响不大.     

热休克蛋白70在乳腺癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨热休克蛋白70(heat shock protein70，HSP70)在乳腺癌中的表达，评估其在乳腺癌预后中的作用。方法 用免疫组化方法检测62例手术切除的乳腺癌组织中HSP70的表达，研究其与临床病理特征的关系及对预后的影响。结果 (1)HSP70在乳腺癌组织中的阳性表达率为56．5％(35／62)。(2)HSP70表达与肿瘤大小(P=0．021)及腋窝淋巴结转移(P=0．015)存在相关性，而与月经状况、组织学分级之间均无相关性。(3)HSP70阴性表达组的无病生存期(DFS)及总生存期(OS)均明显优于阳性表达组。(4)(20x回归单因素分析显示腋窝淋巴结转移个数、组织学分级、肿瘤大小、TNM分期及HSP70阳性表达与DFS及OS明显相关；Cox回归多因素分析表明仅有腋窝淋巴结转移个数、组织学分级及肿瘤大小与DFS及OS明显相关，而TNM分期及HSP70阳性表达进入Cox回归模型。结论 HSP70在乳腺癌组织中有一定程度的表达，HSP70阳性表达与乳腺癌患者生存期的缩短有关，由于多因素回归分析未能显示HSP70表达与DFS和OS相关，因此HSP70不能作为乳腺癌的独立的预后因素。     

丁酸钠对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖及p27^kip1蛋白表达影响的研究

目的：通过观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histon—deacetylase inhibitors，HDACIs）丁酸钠（sodium butyrate，NaB）对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖影响以及p27^kip1蛋白表达改变，探讨NaB调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法：乳腺癌MCF-7细胞经不同浓度NaB作用后，相差显微镜观察细胞形态变化和细胞增殖情况，流式细胞仪分析细胞周期分布，免疫组化检测p27^kip1蛋白表达。结果：NaB对MCF-7细胞有显著的增殖抑制作用，呈时间剂量依赖性，处理后的MCF-7细胞出现凋亡形态变化；细胞周期阻滞于（G0／G1期，NaB2 mmol／L组G0／G1，期达（62．2±2．2）％，4mmol／L组G0/G1，期达（78．1±3．8）％，空白组G0／C0期达（53．1±2．4）％，P〈0．05；p27蛋白表达水平上调。结论：NaB可抑制乳腺癌细胞的生长，该作用可能与p27蛋白表达增加有关。     

热激蛋白在乳腺癌细胞中的表达及其意义

目的：探讨热激蛋白（heat shock protein，HSP）90、70、27在高转移性乳腺癌细胞株MDA—MB-435s和MDA—MB-231中的表达情况及其意义。方法：MTT法检测HSP90抑制剂geldanamycin（GA）对2株乳腺癌细胞株粘附基质胶能力的影响；侵袭小室重组人工基底膜侵袭实验检测HSP90抑制剂GA对2株细胞的侵袭能力的影响；RT—PCR和Western blot实验检测2株细胞中HSP90、HSP70和HSP27mRNA及其蛋白质水平的表达差异。结果：GA能够明显抑制MDA—MB435s和MDA-MB-231细胞粘附基质胶的能力（P〈0．01）；2株高转移性乳腺癌细胞株的侵袭能力比较无显著性差异（P〉0．05），GA能够明显抑制2株乳腺癌细胞的侵袭能力，与对照组相比，MDA—MB-231细胞侵袭能力下降（P〈0．05），MDA-MB-435s细胞的侵袭能力下降更为明显（P〈0．01）。MDA—MB-435s细胞中HSP90蛋白质和HSP90αmRNA表达水平都明显高于MDA-MB-231细胞（P〈0．01），MDA-MB-435s和MDA—MB-231细胞中HSP90βmRNA表达水平没有显著差异（P〉0．05）；MDA-MB-231细胞中HSP27的mRNA和蛋白质的表达水平均明显高于MDA—MB-435s细胞（P〈0．01）；MDA-MB-435s细胞中HSP70蛋白质的表达水平与MDA-MB-231细胞没有显著性差异（P〉0．05），HSP70mRNA表达水平低于MDA—MB-231细胞（P〈0．05）。结论：HSP表达特性与乳腺癌细胞的粘附、侵袭能力相关；MDA—MB-435s细胞中HSP90较高水平表达，MDA-MB-231细胞中HSP27表达水平较高。     

毛蕊异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞作用的体外研究

目的:观察毛蕊异黄酮在体外对雌激素受体阳性细胞人乳腺癌MCF-7细胞的作用及其机制。方法:用不同浓度毛蕊异黄酮作用MCF-7细胞,并设未处理阴性对照组及17-雌二醇(17-estradiol,E2)阳性对照组。MTT法测定细胞增殖抑制的情况,FCM检测细胞凋亡率影响,并通过RT-PCR和免疫细胞化学法分别测定细胞中Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白水平变化。结果:低浓度的毛蕊异黄酮(2、4和8μmol/L)促进MCF-7细胞增殖,而高浓度毛蕊异黄酮(16和32μmol/L)抑制MCF-7细胞增殖,并且呈剂量依赖性。同时,低浓度的毛蕊异黄酮能减少MCF-7细胞凋亡率(P<0.05),并且显著降低Bax表达水平,增加Bcl-2表达水平(P<0.05)。结论:毛蕊异黄酮在低浓度时能促进MCF-7细胞增殖,减少细胞凋亡,其机制可能与毛蕊异黄酮的雌激素作用有关。     

人乳头状瘤病毒16，18型感染及MCM蛋白表达调控与人乳腺癌

高危型人乳头状瘤病毒16、18型E6、E7蛋白导致p53、Rb抑癌基因功能的失活以及E6、E7可分别直接或间接调控细胞周期DNA复制起始调节准许因子一微小染色体维持蛋白7的异常表达从而导致细胞周期复制异常涉及了HPV16型和HPV18型感染后人乳腺癌的发生、发展过程,本文就其相关机制及临床意义作一综述。