疏肝健脾祛湿中药体内抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的：观察由疏肝健脾祛湿中药组成的加味四逆散醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的作用。方法：采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型，以斑点杂交法检测用药前后鸭血清DHBV—DNAOD值的变化，并以拉米夫定作阳性对照。结果：加味四逆散大剂量组用药第5天和第10天，血清DHBV—DNAOD值明显下降，与病毒对照组比较，差异有显著性（P〈0．05，P〈0．01），与自身用药前比较，差异有显著性（P〈0．05，P〈0．01）；加味四逆散中剂量组在用药第5和第10天，血清DHBV—DNAOD值明显下降，与病毒对照组比较差异有显著性（P〈0．05，P〈0．05）；与自身用药前比较，用药第10天，血清DHBV—DNAOD值明显下降，差异有显著性（P〈0．05）。结论：加味四逆散大、中剂量在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用。     

清肝排毒饮抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的观察清肝排毒饮抗鸭乙型肝炎（DHBV）作用。方法用Dot—BLOT法筛选出DHBsAg强阳性1d龄华南麻鸭。随机分为5组，分别为模型组、拉米夫定（ACV）组和清肝排毒饮大、中、小剂量组。除模型组外，其他各组均灌胃口服治疗10d，于用药前（T0）、用药第5d（T5）、第10d（T10）厦停药后第3d（P3）分别采血，采用斑点杂交方法检测用药前后鸭血清乙肝病毒脱氧核糖核酸（DHBV DNA）的动态变化。结果清肝排毒饮中剂量治疗组第5、10d鸭血清DHBV DNA OD值明显低于培药前，差异有显著性（P〈0．05），但与拉米夫定组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。停药3d后无反跳。结论清肝排毒饮有一定的抑制DHBV DNA复制作用。     

叶下珠复方Ⅱ号体内抗鸭乙肝病毒的实验研究

【目的】观察叶下珠复方Ⅱ号体内抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的作用。【方法】采用聚合酶链反应（PCR）法筛选DHBV—DNA阳性的先天感染鸭30只,随机分为5组：病毒对照组,叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组（剂量分别为33．6、18．6、8．4g·kg^-1·d^-1）、拉米夫定组（剂量为20mg·kg^-1·d^-1）。各组于用药前后分别采用荧光定量PCR法检测血清DHBV—DNA含量变化。【结果】在给药第7、14、21、28天及停药后第5天叶下珠复方Ⅱ号高、中剂量组鸭血清DHBV—DNA含量显著降低,与给药前和病毒对照组比较差异均有显著性意义（P〈0．05或P〈0．01）。【结论】叶下珠复方Ⅱ号具有一定的抑制DHBV复制作用。     

茅莓提取物体内抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的：观察茅莓提取物（乙酸乙酯部位）体内抗乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）的作用。方法：采用聚合酶链反应（polymerasechain—reaction,PCR）法筛选3日龄鸭乙型肝炎病毒（duck hepatitisBvirus,DHBV）阳性麻鸭50只,将麻鸭随机分为盐水对照组、茅莓提取物高、中、低剂量组和拉米夫定组,于用药前、用药第7、14、21天及停药后第3、7天,取各组麻鸭静脉血,作鸭血清DNA斑点杂交,计算鸭血清DHBV—DNA密度,最后一次取血后取肝脏组织进行病理组织学观察。结果：体内实验显示,盐水对照组动物血清DHBV—DNA水平与用药前比较未见变化（P〉0．05）,拉米夫定组血清DHBV—DNA于用药第14天和第21天与用药前比较明显减低（P〈0．01）,与盐水对照组用药第7天、第14天和第21天血清DHBV-DNA比较明显降低（P〈0．05和0．01）。与盐水对照组比较,茅莓提取物各剂量组21d疗程各时点血清DHBV—DNA未见变化（P〉0．05）。肝脏病理检查示各组差异无显著性。结论：茅莓提取物抗HBV作用主要是通过其原形发挥作用,该原形在麻鸭体内经过代谢后,失去抗HBV的作用。     

疏肝健脾祛湿中药体内抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的：观察由疏肝健脾袪湿中药组成的加味四逆散醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的作用。方法：采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型,以斑点杂交法检测用药前后鸭血清DHBV-DNAOD值的变化,并以拉米夫定作阳性对照。结果：加味四逆散大剂量组用药第5天和第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,与病毒对照组比较,差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）,与自身用药前比较,差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）;加味四逆散中剂量组在用药第5和第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,与病毒对照组比较差异有显著性（P〈0.05,P〈0.05）;与自身用药前比较,用药第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,差异有显著性（P〈0.05）。结论：加味四逆散大、中剂量在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用。     

增损甘露消毒丹对肝纤维化大鼠血清PCⅢ、Ⅳ—C影响的实验研究

目的观察增损甘露消毒丹对肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ—C）及肝组织病理变化的影响,探讨增损甘露消毒丹抗肝纤维化的疗效及作用机理。方法采用四氯化碳（CCL4）皮下注射和乙醇灌胃等制备肝纤维化大鼠模型;设正常对照组,病理模型组,增损甘露消毒丹小、中、大剂量组和复方鳖甲软肝片对照组。造模成功后进行药物灌胃治疗,疗程结束后采用放射免疫法检测大鼠血清PCⅢ、Ⅳ—C的含量。采用HE染色法、胶原纤维染色法及网状纤维染色,观察肝纤维化程度。结果增损甘露消毒丹大、中剂量组、复方鳖甲软肝片组与病理模型组比较,血清PCⅢ、Ⅳ—C含量均降低,差异有显著性意义（P〈0．05）;增损甘露消毒丹大、中剂量组、复方鳖甲软肝片组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论增损甘露消毒丹可以抑制细胞外间质中胶原的生成,降低肝纤维化大鼠血清PCⅢ、Ⅳ—C的含量,并能明显减轻大鼠的肝纤维化程度、减少胶原纤维与网状纤维．对肝纤维化大鼠有良好的治疗作用。     

利巴韦林联合甘露消毒丹治疗小儿手足口病疗效观察

目的观察利巴韦林雾化吸入联合甘露消毒丹中西医结合治疗手足口病的临床疗效。方法73例患儿随机分为对照组及治疗组，其中对照组予利巴韦林雾化吸入治疗，治疗组予利巴韦林雾化吸入联合甘露消毒丹加减治疗，比较两组患儿的发热持续时间、皮疹持续时间及住院时间。结果治疗组患儿的发热持续时间、皮疹持续时间及住院时间明显短于对照组（P〈0．05），差异具有统计学意义。结论利巴韦林雾化吸入联合甘露消毒丹加减治疗小儿手足口病疗效确切，有较好的临床推广价值。     

增损甘露消毒丹对肝纤维化大鼠血清PCIII、IV-C影响的实验研究

目的探讨增损甘露消毒丹抗肝纤维化的疗效及作用机理。方法采用四氯化碳皮下注射和酒精灌胃等复合因素建立大鼠肝纤维化模型,设6组,各组用药8周。治疗结束后采用放射免疫法检测大鼠血清III型前胶原（PCIII）、IV型胶原（IV-C）的含量。采用胶原纤维（Van-Gieson）染色法和网状纤维（Gomori）染色法光镜下观察并进行肝纤维化病理分级;网状纤维增生程度采用计算机图像分析系统进行分析。结果病理模型组大鼠血清PCIII、IV-C含量均较正常组明显升高（P＆lt;0.05）;经用药治疗后,增损甘露消毒丹大剂量组、中剂量组、复方鳖甲软肝片组血清PCIII、IV-C含量与病理模型组比较明显降低（P＆lt;0.05）;增损甘露消毒丹大剂量组、中剂量组血清PCIII、IV-C含量与增损甘露消毒丹小剂量组比较有明显差异（P＆lt;0.05）。结论增损甘露消毒丹可以抑制细胞外间质中胶原的生成,降低肝纤维化大鼠血清PCIII、IV-C的含量并能明显减轻大鼠的肝纤维化程度、减少胶原纤维与网状纤维,对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有良好的治疗作用。     

甘露消毒丹加味治疗慢性咽炎36例疗效观察

目的 探计甘露消毒丹作为"湿温温疫之主方"治疗慢性咽炎的疗效观察.方法 从临床病例中辨证选取36例证属湿热蕴结,上攻咽喉的病例,给予甘露消毒丹加减方治疗,2周为一个疗程.结果 治愈28例,好转5例,无效3例.总有效率为92.1%.结论 甘露消毒丹作为清热利湿的常用方,针对湿热上攻咽喉的慢性咽炎有着显著疗效.     

复方鬼辣椒根液对鸭乙型肝炎治疗作用的研究

目的研究复方鬼辣椒根口服液(复辣液)对幼年感染雏鸭病毒性乙型肝炎(DHBV)的治疗作用。方法取1日龄广西麻鸭经鸭腿胫静脉注射0.4 ml/只人体“大三阳”乙型病毒性肝炎血清,第2天重复注射一次,饲养15 d,取血1 ml检验乙肝定性5项。将感染的鸭分4组,即3个治疗组(拉米夫定组、复辣液大剂量组、复辣液小剂量组)和1个模型对照组,每组12只,均灌胃给药,用药10 d,取血检乙肝5项定性,观察各组疗效。结果模型对照组12只无效,拉米夫定组7只有效,复辣液大小剂量均5只有效,拉米夫定组与模型对照组比较,P<0.01,复辣液大小、剂量组与模型对照组疗效比较,P均<0.05,均具显著性意义。结论复辣液对鸭乙型病毒性肝炎有一定疗效。     

The Effect of Gankang Suppository on Duck Hepatitis B Virus, Serum Biochemistry and Liver Histology in Ducklings

To examine the effect of Gankang Suppository on duck hepatitis B virus （DHBV）, the serum biochemistry and hepatic histology in an animal model of DHBV infection, a model of DHBV infection was established by infecting 1-day-old Yingtaogu ducklings with DHBV-positive serum. The successful model was confirmed by PCR assay and 48 ducklings infected with DHBV were randomly divided into 3 groups： a Gankang Suppository treatment group, an acyclovir （ACV） group and a DHBV model group （control）, with each group having 16 animals. All the animals were given the medicines for 4 weeks in a row. The serum of the animals was taken 14 and 28 days after the medica- tion and 7 days after drug discontinuation. Real-time PCR was performed to detect the copy numbers of DHBV DNA in the serum. ALT and AST were dynamically monitored. The ducklings were sacrificed on the 7th day after the discontinuation of the treatment and livers were harvested and examined for inflammation and degeneration of liver cells by using HE staining. The results showed that on day 14, 28 after the treatment and day 7 after the withdrawal, the logarithmic values （log） of DHBV DNA copy numbers in ducklings of Gankang Suppository treatment group were significantly lower than that before the treatment （P=0.0092, P=0.0070, P=0.0080, respectively）. Compared with DHBV model control group, the ALT level was significantly decreased （P=0.0020, P=0.0019, respectively） on day 28 after the treatment and on day 7 after the withdrawal. The AST level was also reduced on day 14 after the treatment （P=0.0298）. Compared with the ACV control group, the level of ALT was lower on day 7 after the withdrawal （P=0.0016）. Histologically, the hepatocyte swelling, vacuolous degeneration and acidophilic degeneration in Gankang Suppository treatment group were alleviated 7 days after the withdrawal as compared with model control group （P=0.0282, P=0.0084, P=0.0195, respectively）. It is concluded that Gankang Suppository can effectively suppress DHBV     

乙型肝炎病毒在宿主内不受核苷类药物影响的机理探讨

目的 探讨乙型肝炎病毒在宿主中不受药物影响而得以长期与宿主共存的机理。方法 以核苷类药物拉米夫定（3TC）和无环鸟苷（ACV）对鸭乙肝病毒（DHBV）感染一日龄广州麻鸭模型进行治疗，以斑点杂交法检测治疗前后和停药后鸭血清中鸭乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（DHBV－DNA）的变化，并取提鸭的肝，肾，脾，肺，心组织中的DNA，用聚合酶链反应（PCR）方法检测DHBV－DNA在各脏器组织中存在的情况。结果 以斑点杂交法检测鸭血清DHBV－DNA，3TC和ACV两个治疗组在治疗后5－10d内血清DHBV－DNA含量持续下降（与模型组比较均P＜0．05），但停药后有回升倾向；用PCR方法检测各组的肝，肾，脾，肺，心组织，显示治疗后DHBV－DNA在各脏器组织中存在的情况与模型组比无显著性差异（P＞0．05）。进一步比较了斑点杂交法和PCR法检测的结果，显示斑点杂交法检测组织中病毒远不如PCR法敏感，并提示可能组织中病毒复制量很低，以致用斑点杂交法检测出现很多假阴性。结论 乙型肝炎病毒感染宿主后，药物治疗只对宿主血清DHBV－DNA含量有影响，但未发现对肝和肝外脏器组织中DHBV－DNA有影响，乙肝病毒不受药物影响而长期在宿主中存在并低水平持续复制，可导致宿主机体对其无法识别和清除而形成慢性感染。建议使用较敏感的PCR法监控组织中DHBV－DNA含量，作为评价药物长期疗效的指标之一。     

Therapeutic effect of Styela plicata on duck hepatitis B virus in vivo

Objective： To evaluate the antiviral activity of the alcohol extract of Styela plicata on DHBV （duck hepatitis B virus） in vivo. Methods： Guangzhou-Sheldrake ducklings congenitally infected with DHBV were assigned to receive the alcohol extract of Styela plicata or lamivudine for 30 consecutive days. The DHBV DNA of sera was detected by RT-PCR, and the histological analysis of duckling liver was evaluated. Results： Thirty days after therapy, histological analysis of duckling liver showed that the ducklings receiving the alcohol extract of Styela plicata or lamivudine exhibited catabatic status in the degree of liver cell degeneration and inflammation compared with the ducklings receiving normal diet. DHBV DNA of sera from alcohol extract of Styela plicata-treated ducklings and lamivudine-treated ducklings all produced significantly lower levels compared with ducklings receiving normal diet （P〈0.01）. Although these treatment groups all exhibited a rebound phenomenon 10 d after withdrawal of medication, they still exhibited a significant lower level of serum DHBV DNA compared with the control group responded to normal diet （P〈0.05, P〈0.01）. Conclusion： Styela plicata may be an effective antiviral medicine in treating chronic hepatitis B. The data of this experiment will be valuable in studying the therapeutic role and the potential therapeutic mechanism of Styela plicata.     

α-2b干扰素对乙型肝炎模型鸭肝组织炎症和肝纤维化的治疗作用

目的：通过鸭乙型肝炎病毒（DHBV）阳性血清注射建立鸭乙型肝炎模型,探讨α-2b干扰素治疗DHBV所致鸭肝炎症及肝纤维化的作用,为干扰素的临床应用提供依据。方法：10日龄北京麻鸭40只随机分为对照组（6只）和感染组（34只）,感染组使用DHBV阳性血清1周内3次注射的方法,制备鸭乙型肝炎模型。2周后,采用斑点杂交法检测DHBV-DNA水平确认感染鸭共32只,随机将感染动物分为模型对照组（10只）、低剂量及高剂量α-2b干扰素组（各11只）,α-2b干扰素组鸭分别肌肉注射低剂量（1×10⁵ U·100 g^-1）和高剂量（5×10⁵ U·100 g^-1）α-2b干扰素治疗。30 d治疗结束后,采用斑点杂交法检测各组鸭血清DHBV-DNA水平,检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酸氨基转移酶（ALT）和肝纤维化指标层黏蛋白（LN）及Ⅲ型前胶原肽（PCⅢ）水平,取肝组织检测白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素12（IL-12）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,观察组织病理形态表现。结果：与造模前比较,造模后鸭血清DHBV-DNA水平明显升高,表明造模成功。α-2b干扰素治疗结束后,与模型组比较,低和高剂量α-2b干扰素组鸭血清DHBV-DNA水平明显下降（P<0.05）,血清中AST和ALT水平降低（P<0.05）,其中高剂量α-2b干扰素组LN及PCⅢ型水平明显降低（P<0.05）,肝组织中IL-6和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,IL-12水平无明显变化（P>0.05）。组织病理形态表现,与模型组比较,低和高剂量α-2b干扰素组鸭肝组织中纤维化明显减轻。结论：α-2b干扰素可以减轻DHBV所致的鸭肝组织炎症和肝纤维化,本研究为干扰素的进一步开发和临床应用提供了理论依据。     

用PCR法筛选先天感染鸭乙肝模型及与后天感染模型的比较

[目的]采用聚合酶链反应法（PCR法）检测1日龄雏鸭血清中的局肝病毒DNA,以确立先天感染鸭乙肝模型,并探讨这种方法及其所建模型的优越性。[方法]1日龄雏鸭取血后,用PCR法检测其血清中的乙肝病毒DNA,并与Dot-blot法检测比较其相对敏感性与特异性。PCR检测为阴性的雏鸭,一胫静脉接种阳性血清,制成后天感染模型,将模型进行比较,探讨先天感染模型的优越性。[结果]PCR检测的敏感性较Dot-blot法高,京有较高的特异性。先天感染鸭乙肝模型较后天感染模型血清病毒滴度高,带毒时间长,其肝脏病理改变也较符合慢性乙型肝炎的特点。[结论]PCR检测筛选出的先天感染鸭乙肝模型更适合于慢性肝炎的药理和药效学研究。