中药猫眼草抑癌作用的动物实验

目的：探讨中药猫眼草对Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长、免疫调节、血液系统的影响，及其对肿瘤细胞周期的作用。方法：①实验于2004—11／2005—01在青岛海洋大学食品与药物研究所实验室（山东省重点实验室）完成。选用C57BL／6J纯系小鼠70只。将70只小鼠随机分为7组：空白对照组，模型组，猫眼草水提物7．5，15，30，60g／kg组及顺铂1mg／kg组，每组lO只。②除空白对照组外，其他各组小鼠均于右腋部皮下注射传代后14d的Lewis肺癌瘤源小鼠瘤细胞悬液0．2mL以建立荷瘤小鼠模型。③从接种肿瘤次日开始猫眼草水提物[猫眼草全草：购自青岛同仁卷大药房，产地江苏．产品批号：040901；北京京兴中药饮片厂生产（生产许可证号：冀Y20040006）；猫眼草水提物：猫眼草生药500g加水煮沸，过滤，浓缩，制成口服液，每1mL含生药1．0g]7.5，15，30，60g／kg组按每H7,5，15，30，60g／kg灌胃给予猫眼草水提物，连续12d；顺铂1mg／kg组每日按1mg／kg剂量腹腔注射给药1次，连续7d。每天观察小鼠饮食及肿瘤生长情况。④末次灌胃给药后24h，小鼠称重，处死，剥取瘤块称重，并计算抑瘤率[（模型组平均瘤重-治疗组瘤重）／模型组平均瘤重&;#215;100％]。小鼠连续灌胃给药12d后，处死，取胸腺及脾脏称重，计算脾指数[脾质量／休质量（mg／g）]及胸腺指数[胸腺重量／体质量（mg／g）（体质量为小鼠体质境减去肿瘤质量后的差值）]。⑤小鼠连续灌胃给药12d后，取眼球血，应用血细胞分析仪进行血细胞分析。⑥采用流式细胞仪FACSort检测瘤组织细胞周期及凋亡率。⑦组内计量资料差异比较采用方差分析，组间差异比较采用配对t检验。结果；小鼠70只均进入结果分析。①结果显示猫跟草水提物30和60g／kg组及顺铂1mg／kg组瘤重明显小于模型组（P〈0．05-0．01），目猫眼草水提物7．5，15，30，60g／kg组抑瘤率分别为0．608％，16．93l％，32．806％和58．255％，即随药物剂量的增加而增加。②猫眼草水提物各剂量组对荷瘤小鼠胸腺指数无明显影响，猫眼草水提物30和60g/kg组荷瘤小鼠脾指数明显低于模型组（P〈0．05）。③猫眼草水提物各剂量组白细胞数、红细胞数、血小板数、血红蛋白与模型组比较，差异不明显（P〉0．05）；顺铂1mg／kg组白细胞数明显低于模型组（P〈0．01）。④猫眼草30和60异／kg组和顺铂组的细胞在DNA合成期的比例高于模型组，静止期-DNA合成前期的比例低于模型组，猫眼草30和60g／kg组和顺铂1mg／kg组细胞凋亡率明显高于模型组（P〈0．05）。结论：猫眼草水提物对Lewis肺癌有明显的抑制作用，且该种作用随剂量的增加而增高，有一定的免疫调节作用，并对小鼠血液系统无明显毒副作用．其抗肿瘤作用与诱导细朐凋亡有关。     

银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤的保护作用

目的:探讨以黄酮类和内酯类化合物为主要成分的具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、减少炎性介质生成和保护脑缺血再灌注损伤等多种药理作用的银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤模型的保护作用。方法:实验于2004-10/2005-06在潍坊医学院麻醉学研究室进行,选取健康家兔36只,随机分为对照组、模型组、银杏叶提取物干预组,每组12只。除对照组外,其余动物以“Wiggers改良法”制备家兔急性失血性休克肺损伤模型:模型组,低血压60min后,经静脉回输失血和等量乳酸林格氏液,在30min内进行复苏;银杏叶提取物组,建立休克模型后,由静脉回输失血和等量林格氏液(内含银杏叶提取物25mg/kg,银杏叶提取物由潍坊医学院应用药理学实验室提取,加生理盐水配制成25g/L的乳剂)进行复苏;对照组,仅分离股动静脉,静脉输入等量乳酸林格氏液。分别于休克前、复苏成功时、治疗1h、2h取动脉血1.0mL,放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α含量。复苏2h末,迅速处死各组动物取肺组织,计算肺组织的含水率[(湿质量-干质量)/湿质量×100%]。免疫组化法检测缺血肺组织核因子κB阳性细胞率并进行光镜病理观察。结果:实验动物健康家兔36只全部进入结果分析。①模型组、银杏叶提取物组急性失血性休克复苏成功率分别为66.7%(8/12只)、75.0%(9/12只),无明显差异(P>0.05)。对照组无死亡病例。②复苏后,模型组与银杏叶提取物组肺组织的含水率均较对照组升高,且模型组升高程度明显高于银杏叶提取物组[(83.59±3.09),(76.37±3.45),(72.26±3.14);F=31.52,P<0.01]。③在休克复苏时、复苏1h、复苏2h模型组和银杏叶提取物组家兔血清肿瘤坏死因子α的含量均较对照组升高,且同一时间模型组升高程度较银杏叶提取物组明显[(162.38±22.33),(163.46±21.83),(74.64±14.29);(280.63±23.29),(259.72±17.22),(75.41±14.46);(512.44±23.56),(338.99±20.26),(75.98±14.26)μg/L;q=3.538～69.923,P<0.01]。④复苏2h末,组与银杏叶提取物组家兔肺组织中核因子κB阳性细胞率均升高(F=3615.20,P<0.01),模型组升高的程度尤为明显(q=62.721,P<0.01)。⑤苏木精-伊红染色和免疫组化光镜病理检查显示肺组织、肺间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞浸润。应用银杏叶提取物组家兔肺组织损伤和炎性细胞浸润较轻。结论:银杏叶提取物对家兔失血性休克肺损伤具有一定的保护作用,机制可能与减少肿瘤坏死因子α的生成,抑制缺血肺组织核因子κB活性有关。     

银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤的保护作用

目的：探讨以黄酮类和内酯类化合物为主要成分的具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、减少炎性介质生成和保护脑缺血再灌注损伤等多种药理作用的银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤模型的保护作用。 方法：实验于2004-10／2005-06在潍坊医学院麻醉学研究室进行，选取健康家兔36只，随机分为对照组、模型组、银杏叶提取物干预组，每组12只。除对照组外，其余动物以“Wiggers改良法”制备家兔急性失血性休克肺损伤模型：模型组，低血压60min后，经静脉回输失血和等量乳酸林格氏液，在30min内进行复苏；银杏叶提取物组，建立休克模型后，由静脉回输失血和等量林格氏液（内含银杏叶提取物25mg／kg，银杏叶提取物由潍坊医学院应用药理学实验室提取，加生理盐水配制成25g/L的乳剂）进行复苏；对照组，仅分离股动静脉，静脉输入等量乳酸林格氏液。分别于休克前、复苏成功时、治疗1h、2h取动脉血1．0mL，放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α含量。复苏2h末，迅速处死各组动物取肺组织，计算肺组织的含水率[（湿质量-干质量）／湿质量&;#215;100％]。免疫组化法检测缺血肺组织核因子κB阳性细胞率并进行光镜病理观察。 结果：实验动物健康家兔36只全部进入结果分析。①模型组、银杏叶提取物组急性失血性休克复苏成功率分别为66．7％（8／12只）、75．0％（9／12只），无明显差异（P〉0．05）。对照组无死亡病例。②复苏后，模型组与银杏叶提取物组肺组织的含水率均较对照组升高，且模型组升高程度明显高于银杏叶提取物组[（83．59&;#177;3．09），（76．37&;#177;3．45），（72．26&;#177;3．14）；F=31.52，P〈0．01]。③在休克复苏时、复苏1h、复苏2h模型组和银杏叶提取物组家兔血清肿瘤坏死因子α的含量均较对照组升高，且同一时间模型组升高程度较银杏叶提取物组明显[（162．38&;#177;22．33），（163．46&;#177;21．83），（74．64&;#177;14．29）；（280．63&;#177;23．29），（259.1&;#177;7．22），（75．41&;#177;14．46）；（512．44&;#177;23．56），（338．99&;#177;20．26），（75．98&;#177;14．26）m；q=3．538-69．923，P〈0．01]。④复苏2h末，组与银杏叶提取物组家兔肺组织中核因子κB阳性细胞率均升高（F=3615．20，P〈0．01），模型组升高的程度尤为明显（q=62．721，P〈0．01）。⑤苏木精-伊红染色和免疫组化光镜病理检查显示肺组织、肺间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞浸润。应用银杏叶提取物组家兔肺组织损伤和炎性细胞浸润较轻。 结论：银杏叶提取物对家兔失血性休克肺损伤具有一定的保护作用，机制可能与减少肿瘤坏死因子α的生成，抑制缺血肺组织核因子κB活性有关。     

佛甲草抗疲劳作用的动物实验

目的观察佛甲草提取液对小鼠综合体能及其小鼠血清、肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶的影响,从而探讨该提取液的抗疲劳作用。方法①实验于2005-04/05在赣南医学院机能实验室完成。选用昆明种小鼠100只,雌雄不拘,体质量(20±2)g。②观察佛甲草提取液(由佛甲草提取所得)对小鼠耐寒能力的影响取雄性小鼠20只,随机分成2组空白对照组和佛甲草实验组,每组10只。空白对照组腹腔注射生理盐水10m L/kg;佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g/kg。给药后1h,将小鼠置于-20°C低温冰箱中,记录小鼠存活时间。③观察佛甲草提取液对小鼠耐热能力的影响取雌性小鼠20只,随机分为2组,每组10只。空白对照组腹腔注射空白对照10m L/kg;佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g/kg。给药后1h,将小鼠置于50℃恒温箱中,记录小鼠存活时间。④观察佛甲草提取液对小鼠负重游泳时间的影响取雄性小鼠20只,随机分为2组空白对照组和佛甲草组,每组10只。空白对照组腹腔注射空白对照10m L/kg;佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g/kg。给药后1h,小鼠按体质量的5%尾根铜丝负重,置25℃恒温水箱中,记录小鼠从入水至沉入水中不再浮出水面为止所需时间,即为小鼠游泳时间。⑤观察佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性的影响将其余40只小鼠随机分为4组空白对照对照组、维生素E对照组,佛甲草低剂量组和佛甲草高剂量组,每组10只。空白对照组小鼠灌胃空白对照10m L/(kg·d);维生素E对照组灌胃维生素E2.5g/(kg·d);佛甲草低剂量组灌胃佛甲草提取液5g/(kg·d);佛甲草高剂量组灌胃佛甲草提取液10g/(kg·d),连续14d。末次给药后2h,将各组小鼠断头取血,1500r/m in,离心5m in,取血清;取适量肝组织,用冰冷空白对照在冰浴中制成10%组织匀浆,4℃,3500r/m in,离心10min,取上清液。均采用硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化酶法分别测定血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶的活性。⑥组间计量资料差异比较采用双侧t检验。结果小鼠100只均进入结果分析。①耐寒存活时间佛甲草组明显长于空白对照组[(58.30±6.88),(48.40±7.93)m in,t=2.9819,P<0.01]。②耐热存活时间佛甲草组明显长于空白对照组[(35.60±6.38),(22.80±6.30)m in,t=4.507,P<0.01]。③负重游泳时间佛甲草组明显长于空白对照组[(74.10±15.47),(43.60±13.62)m in,t=4.6779,P<0.01]。④血清、肝组织丙二醛含量佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显低于空白对照组[血清(8.41±1.45),(7.65±1.32),(10.05±1.59)μm ol/L;肝组织(334.12±58.48),(315.13±55.65),(407.82±60.29)nm ol/g,t=2.41,3.6923,2.7748,3.5719,P<0.05～0.01];与维生素E的作用效果基本一致。⑤血清、肝组织超氧化物歧化酶活性佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显高于空白对照组[血清(287.63±23.33),(300.86±26.35),(262.52±29.47)kNU/L;肝组织(783.59±27.07),(810.30±38.72),(741.04±45.92)kNU/g,t=2.112,3.0672,2.5237,3.6472,P<0.05～0.01];与维生素E的作用效果基本一致。结论佛甲草提取液具有增强机体活力和适应能力及对抗机体疲劳的作用。     

决明子不同部位提取物的调血脂作用

目的:决明子不同部位提取物对高血脂动物总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平的调节作用。方法:实验于2003-05/2006-04在兰州大学生命科学学院和甘肃政法学院公安分院实验中心完成。①选用普通级20周龄大耳白兔50只,雌雄不拘,体质量1.8～2.0kg。按随机数字表法将动物分为5组,每组10只:水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、对照组和模型组。对照组动物喂基础饲料50g/(kg·d),其余各组均喂等量由质量分数0.8基础饲料,质量分数0.15蛋黄粉,质量分数0.005胆固醇,质量分数0.05猪油组成的高脂饲料进行建模。建模成功后,水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组灌胃相应决明子提取物5.4g/(kg·d),由兰州大学生命科学学院完成决明子提取,将决明子(购自甘肃省医药材公司),加蒸馏水回流煮沸,过滤,滤液浓缩后,分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取。分成乙酸乙酯层、正丁醇层和水层3个部分,即为相应的提取物;对照组和模型组灌胃等量蒸馏水。连续给药28d。②于建模前、建模后、给药后14,28d用日立7020全自动生化分析仪测定总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平。③采用DUNNETT单因素方差分析对数据进行统计处理。结果:日本大耳白兔50只均进入结果分析。①建模后,动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇比建模前显著升高(P<0.01),建模成功。②给药14d后,水提取物组动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇含量比建模后分别降低了42.5%,58.3%,42.5%(P<0.01);乙酸乙脂提取物组分别降低了45.8%,66.7%,45.0%(P<0.01);正丁醇提取物组分别降低了56.7%,75.0%,52.9%(P<0.01)。给药组之间,正丁醇提取物组血总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇含量比水提取物组分别降低了24.6%,40.0%,28.3%(P<0.01);比乙酸乙酯提取物组分别降低了20.0%,25.0%,25.0%(P<0.01)。③给药28d后,水提取物组血总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平比建模后分别降低了68.3%,69.2%,75.0%(P<0.01);乙酸乙脂提取物组分别降低了77.5%,85.0%,78.8%(P<0.01);正丁醇提取物组分别降低了85.8%,90.8%,80.7%(P<0.01)。给药组之间,正丁醇提取物组血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平比水提取物组分别降低了55.3%,70.1%,50.0%;比乙酸乙酯提取物组分别降低了37.0%,39.0%,41.2%(P<0.01)。结论:决明子提取物具有降低高脂血症模型兔血脂水平的作用,且正丁醇提取物的降血脂作用优于水提取物和乙酸乙脂提取物。     

8种中药醇提取液对两种自由基抑制能力的测定方法

目的：探讨中药的醇提取液对两种自由基的抑制作用，为研制抗衰老药物奠定基础。方法：用邻苯三酚法测定8种中药醇提取液对超氧阴离子自由基（O2^-）的抑制作用，用Fonten反应检测8种中药醇提取液对羟自由基（HO）的抑制作用。结果：8种中药醇提取液对O2^-的抑制能力为：五味子〉绿茶〉甘草〉黄芪〉川芎〉熟地〉党参〉丹参；对HO的抑制能力为：绿茶〉五味子〉甘草〉川芎〉熟地〉党参〉丹参〉黄芪。结论：8种中药醇提取液对O2^-和HO均有清除作用。     

银杏提取物对2型糖尿病大鼠胰腺移植的保护作用

背景:银杏提取物具有抗氧化、清除自由基和抗血小板激活因子的药理作用,并且可以减轻多种器官的缺血再灌注损伤。目的:观察银杏叶提取物能否减轻2型糖尿病大鼠接受的移植胰的缺血再灌注损伤。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:解放军第四军医大学西京医院胃肠外科和麻醉科。材料:选用SD雄性大鼠128只,3～6月龄,体质量250～320g。银杏叶提取物(德国威玛舒培大药厂,5mL/支,含有银杏提取物17.5mg,其中银杏黄酮苷4.2mg,生产批号:1511102)。方法:实验于2001-09/2004-04在胃肠外科实验室完成。①取80只大鼠自阴茎静脉注射链脲佐菌素65mg/kg,其中60只空腹血糖持续2周超过17.4mmol/L者视为2型糖尿病大鼠。其余48只正常大鼠为供体。②将60只糖尿病大鼠随机分为2组:缺血再灌注组和银杏叶提取物组,每组30只。2组均行胰腺移植。缺血再灌注组于获取供胰前以4℃肝素冰平衡盐液(1.5×105U/L)灌洗20min;银杏叶提取物组于移植前1d及术前30min经静脉分别予受体注射银杏叶提取物1.5mL/kg,缺血再灌注组经静脉注射同等容积生理盐水。供胰均置入4℃肝素冰平衡盐液(1.5×105U/L)中保存,各组控制冷缺血时间为180min,热缺血时间为15min。③两组移植前2d,移植后3和7d随机各处死6只大鼠,取血查空腹血糖,并按由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒说明检测血淀粉酶活性;同时取胰腺组织行苏木精-伊红染色;6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠移植术后1个月内存活率。④计量资料差异比较采用配对t检验。主要观察指标:①两组受体大鼠移植胰腺前后空腹血糖水平、代谢指标、血淀粉酶活性变化。②两组受体大鼠移植术后3和7d移植胰腺的病理形态。结果:受体大鼠60只均完成血糖、饮水量、进食量、排尿量、血淀粉酶测定。①银杏叶提取物组移植术后1个月内存活率明显高于缺血再灌注组(83%,33%,P<0.01)。②缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d空腹血糖、饮水量、进食量、排尿量均明显较移植前2d下降(P<0.05～0.01),银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d明显低于缺血再灌注组(P<0.05～0.01)。③缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植后3d血淀粉酶活性较移植前明显升高(P<0.01,0.05);缺血再灌注组移植后7d血淀粉酶活性仍明显高于移植前2d(P<0.01),银杏叶提取物组已基本恢复正常;移植后3和7d银杏叶提取物组血淀粉酶活性均明显低于缺血再灌注组(P<0.01)。④病理观察结果显示,胰腺移植术后,缺血再灌注组胰腺的损伤程度大于银杏叶提取物组。结论:银杏叶提取物预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率,降低血淀粉酶活性,改善代谢,减轻了胰腺的再灌注损伤程度,对大鼠的胰腺移植具有保护作用。     

双氢青蒿素对人肺腺癌细胞株A549抑制作用的实验研究

目的观察双氢青蒿素对人肺腺癌细胞株A549的作用。方法采用四唑氮蓝（MTT）法测定不同浓度和时间双氢青蒿素对A549细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术检测双氢青蒿素对A549细胞增殖和细胞周期的影响;应用透射电镜分析法检测双氢青蒿素对A549细胞凋亡的影响。结果双氢青蒿素对A549细胞有明显的体外增殖抑制作用,72 h的IC50值为580 nmol/L,且有明显的时间和剂量依赖关系;双氢青蒿素作用后G0/G1期细胞数增加;双氢青蒿素作用A549细胞后可以出现凋亡的形态学改变。结论双氢青蒿素对人肺腺癌A549细胞有生长抑制作用,其机制可能与诱导A549细胞周期阻滞和凋亡有关。     

银杏叶提取物后处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

[目的]探讨银杏叶提取物(EGb761)后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用.[方法]24只兔随机分为假手术组(C组,开胸后仅行左冠脉套线而不阻断160 min)、缺血-再灌注组(IR组,行左冠状动脉前降支阻断40 min,再灌注120 min)和EGb761后处理组(E组,开放左冠状动脉即刻1 min内予以静推EGb761 100 mg/kg,再灌注120 min).各组分别于左冠前降支阻断前20 min(T1)、阻断后20 min(T2)、阻断后40 min(T3)、再灌注1 h(T4)、再灌注2 h(T5)五个时点取颈内动脉血测定血清中肌钙蛋白(cTnI)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.再灌注结束后用伊文思蓝和TTC双染色法测心梗面积并进行比较.[结果]与C组比,IR组与E组cTnI、IL-10和TNF-α含量均升高,且差异有显著性( P <0.05),但与IR组比,E组IL-10 升高( P <0.05),心肌梗死面积减少( P <0.05),cTnI和TNF-α降低,且差异有显著性( P <0.05).[结论]银杏叶提取物后处理有心肌保护作用,其机制可能与调控炎症细胞因子平衡有关.     

银杏叶提取物对脑组织及脑神经细胞活性的保护作用

目的:银杏叶提取物主要成分黄酮苷、萜烯内酯和单体内酯等对心血管系统,脑循环,血液及神经等方面作用机制和疗效已基本肯定,现就银杏叶提取物对脑组织及神经损伤保护作用的研究进行综述。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1994-01/2004-12期间的相关文章,检索词为“Ginkgobilobaextract”,限定文章语言种类为英文;同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1995-01/2003-12期间的相关文章,检索词为″银杏叶提取物″,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,纳入银杏叶提取物作用于脑细胞及神经细胞的相关药理机制,临床运用及其有效成分,对脑缺血缺氧,水肿的保护以及大脑皮质层的记忆功能丧失和脑部病变引起的帕金森病的防治相关的文献。排除标准:综述类文献和重复研究。资料提炼:共收集到44篇关于银杏叶提取物对脑组织及神经损伤保护作用的文献,纳入为银杏叶提取物作用于脑细胞及神经细胞的相关药理机制,临床运用及其有效成分,对脑缺血缺氧,水肿的保护以及大脑皮质的记忆功能丧失和脑部病变引起的帕金森病的防治相关的文献19篇。排除综述类文献和重复研究25篇。资料综合:①银杏叶提取物对脑血栓的保护性作用:银杏叶提取物可明显抑制缺血再灌注损伤所致的组织纤溶酶原激活因子抑制因子Ⅰ的升高,调节纤维蛋白溶酶过程,防止血栓形成。②银杏叶提取物对脑缺血缺氧、水肿的保护作用:银杏叶提取物中黄酮苷、萜烯内脂和单体具有多种药理活性,对脑缺血缺氧、水肿保护作用与抗血小板活化因子、抗自由基和改善脑血管循环的作用密切相关。③银杏叶提取物对大脑记忆力的影响:银杏叶提取物主要是通过促进大脑海马胆碱的再摄取,减少M型胆碱受体和α2肾上腺素受体及递质的丢失,从而发挥改善学习和记忆能力的功能。④银杏叶提取物对帕金森病的防治作用:其机制是通过保护残存的损伤侧黑质神经元,使得纹状体多巴胺的减少得以控制,并保持在一定的水平;银杏内脂抑制纹状体多巴胺的代谢,从而升高多巴胺的水平。⑤银杏叶提取物对脑神经的保护作用:银杏叶提取物可能通过抑制神经细胞一氧化氮的产生、抑制嗜中性粒细胞所介导的炎症反应、直接对抗谷氨酸受体等保护脑神经。结论:银杏叶提取物和单体的研究在动物实验和心血管疾病的运用性研究上取得了广泛的成果,对于激活脑组织及神经损伤的细胞,改善脑血管循环,治疗和预防脑部某些疾病有一定的作用。     

碳质股骨头生物相容性的动物实验

背景:已有大量的临床和体外实验研究表明,低温热解各向同性碳具有优良的生物学性能,但作为人工关节假体涂层,置入髋关节内的研究还鲜见报道,其在人工半髋关节假体置换中的生物学性能还没有得到验证.目的:通过动物假体置入实验,观察经低温热解各向同性碳(含硅)喷涂后碳质股骨头假体的组织相容性及表面摩擦磨损特性.设计、时间及地点:动物体内进行碳质人工半髋关节替换,随机对照动物实验,于2008-10/2009-04在解放军第二军医大学动物实验中心完成.材料:碳质人工半髋关节由吉林市中心医院提供.股骨头以碳石墨材料为基体,沉积含硅的低温热解各向同性碳为涂层.方法:对16只成年新西兰大白兔进行右侧半髋关节置换术,置入碳质股骨头假体.按照观察时间点随机分为术后6周组4只,术后11周组6只,术后21周组6只,其中21周组从18周开始在动物实验中心草坪上进行诱导性运动,2 h/d.主要观察指标:通过大体、X射线片、组织切片观察假体置入后的组织相容性及界面摩擦磨损现象.结果:碳质股骨头假体在动物体内无毒副作用,无明显炎症反应和异物反应,在碳质假体周围发现有新生软骨组织,运动实验后碳质股骨头表面没有明显磨损和碳颗粒游离现象.结论:涂膜碳质材料作为人工股骨头具有优良的生物相容性和耐磨特能,是一种极具应用前景的人工假体材料.     

艾溃灵合剂抗炎效应的动物实验

目的:艾溃灵合剂为临床用于口腔溃疡疗效确切的中药制剂,采用动物实验,观察其抗炎效应。方法:实验于2005-02/10在河南中医学院动物实验中心完成。艾溃灵合剂主要由黄连、连翘、黄芪、生地、车前草、甘草等药组成。①将50只昆明小鼠按随机数字表分为5组:大、中、小剂量艾溃灵合剂组(20,10,5g原生药/mL),口炎清颗粒组(3.3g成品)及同体积的生理盐水组,每组10只。灌服1次/d,连续给药3d,于最后1次给药后1h,每鼠右耳涂二甲苯,脱颈椎处死小鼠,剪下双耳,用打孔器打下双耳耳片,迅速用电子天平称质量,并计算肿胀度。肿胀度=右耳质量-左耳质量。②将40只wistar大鼠按随机数字表分为5组:大、中、小剂量的艾溃灵合剂组(20,10,5g原生药/mL),口炎清颗粒组(3.3g成品)及同体积的生理盐水组,每组8只。灌服给药1次/d,连续给药3d,于最后1次给药后30min,于每鼠左、右后足跖皮下注射新配制的10%新鲜鸡蛋清液,分别于给蛋清后30min、60min、120min、240min、360min在足跖测定仪再次测大鼠左右后足跖体积,并计算足跖肿胀率。结果:90只大小鼠均进入结果分析。①与生理盐水组相比,大、中、小剂量艾溃灵合剂组和口炎清颗粒组均可显著抑制小鼠耳壳二甲苯致肿,使耳壳肿胀度显著降低[(7.0±1.6),(2.3±1.5),(3.5±1.5),(4.7±1.4),(3.6±1.5)mg,P<0.01]。②与生理盐水组比,大、小剂量艾溃灵合剂组在给药后30～360min均可显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组:0.73±0.12,0.67±0.12,0.54±0.12,0.40±0.14,0.23±0.12;大剂量艾溃灵合剂组:0.56±0.11,0.49±0.09,0.36±0.10,0.27±0.13,0.07±0.07;小剂量艾溃灵合剂组:0.63±0.13,0.54±0.14,0.44±0.13,0.27±0.15,0.12±0.13,P<0.01,P<0.05),中剂量艾溃灵合剂组在给药后30min、120min、240min可明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀,在给药后60min和360min可显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组:0.73±0.12,0.54±0.12,0.40±0.14,0.67±0.12,0.23±0.12;中剂量艾溃灵合剂组:0.59±0.16,0.43±0.16,0.27±0.13,0.52±0.13,0.11±0.11,P<0.05,P<0.01),口炎清颗粒组在给药后30～360min均可明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组:0.73±0.12,0.67±0.12,0.54±0.12,0.40±0.14,0.23±0.12;口炎清颗粒组:0.64±0.07,0.56±0.11,0.43±0.10,0.30±0.08,0.12±0.10,P<0.05]。结论:艾溃灵合剂可显著抑制小鼠耳壳二甲苯致肿,显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀,具有明显的抗炎作用。给药后不同时间足跖体积-同侧正常跖体积足跖肿胀率=同侧正常足跖体积     

佛甲草抗疲劳作用的动物实验

目的：观察佛甲草提取液对小鼠综合体能及其小鼠血清、肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶的影响，从而探讨该提取液的抗疲劳作用。方法：①实验于2005—04／05在赣南医学院机能实验室完成。选用昆明种小鼠100只，雌雄不拘，体质量（20&;#177;2）g。②观察佛甲草提取液（由佛甲草提取所得）对小鼠耐寒能力的影响：取雄性小鼠20只，随机分成2组：空白对照组和佛甲草实验组，每组10只。空白对照组腹腔注射生理盐水10mL／kg；佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g／kg。给药后1h，将小鼠置于-20℃低温冰箱中，记录小鼠存活时间。（④观察佛甲草提取液对小鼠耐热能力的影响：取雌性小鼠20只，随机分为2组，每组10只。空白对照组腹腔注射空白对照10mL／kg；佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g／kg。给药后1h，将小鼠置于50℃恒温箱中，记录小鼠存活时间。④观察佛甲草提取液对小鼠负重游泳时间的影响：取雄性小鼠20只，随机分为2组：空白对照组和佛甲草组，每组lO只。空白对照组腹腔注射空白对照10mL／kg；佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g／kg。给药后1h，小鼠按体质量的5％尾根铜丝负重，置25℃恒温水箱中，记录小鼠从入水至沉入水中不再浮出水面为止所需时间，即为小鼠游泳时间。⑤观察佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性的影响：将其余40只小鼠随机分为4组：空白对照对照组、维生素E对照组，佛甲草低剂量组和佛甲草高剂量组，每组10只。空白对照组小鼠灌胃空白对照10mL／（kg&;#183;d）；维生素E对照组灌胃维生素E2．5g/（kg&;#183;d）；佛甲草低剂量组：灌胃佛甲草提取液5g/（kg&;#183;d）；佛甲草高剂量组：灌胃佛甲草提取液10g／（kg&;#183;d），连续14d。末次给药后2h，将各组小鼠断头取血，1500r／min，离心5min，取血清；取适量肝组织，用冰冷空白对照在冰浴中制成10％组织匀浆，4℃，3500r／min，离心10min，取上清液。均采用硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化酶法分别测定血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶的活性。⑥组间计量资料差异比较采用双侧t检验。结果：小鼠100只均进入结果分析。①耐寒存活时间：佛甲草组明显长于空白对照组【（58．30&;#177;6．88），（48．40&;#177;7．93）min，t=2．9819，P〈0．Ol】。②耐热存活时间：佛甲草组明显长于空白对照组[（35．60&;#177;6．38），（22．80&;#177;6．30）min，t=4．507，P〈0．011。③负重游泳时间：佛甲草组明显长于空白对照组【（74．10&;#177;15．47），（43．60&;#177;13．62）min，t=4．6779，P〈0．Ol】。④血清、肝组织丙二醛含量：佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显低于空白对照组【血清：（8．41&;#177;1．45），（7．65&;#177;1．32），（10．05&;#177;1．59）μmol／L；肝组织：（334．12a&;#177;58．48），（315．13a&;#177;55．65）。（407．82&;#177;60．29）nmol／g．t=2．41,3．6923，2．7748，3．5719，P〈0．05-0．011；与维生素E的作用效果基本一致。⑤血清、肝组织超氧化物歧化酶活性：佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显高于空白对照组【血清：（287．63&;#177;23．33），（300．86&;#177;26．35），（262．52&;#177;29．47）kNU／L；肝组织：（783．59&;#177;27．07），（810．30&;#177;38．72），（741．04&;#177;45．92）kNU／g，t=2．112，3．0672，2．5237，3．6472，P〈0．05～0．011；与维生素E的作用效果基本一致。结论：佛甲草提取液具有增强机体活力和适应能力及对抗机体疲劳的作用。     

脐血有核细胞移植治疗脑卒中的动物实验

目的:脐血有核细胞中富含多系前体细胞,具备改善受损神经系统功能的潜能。为此建立阻塞性脑卒中动物模型,探讨脐血有核细胞移植对其治疗的可行性。方法:实验于2004-09/2005-05在深圳市宝安区人民医院动物实验室完成。①实验材料:脐带血取自足月新生儿,由深圳宝安血站研究室提供,产妇及其家属均签署知情同意书。SD清洁级成年大鼠80只,随机取20只作为正常对照组,另60只以电凝法建立阻塞性脑卒中模型。剔除运动功能障碍不典型鼠后,随机取5只作为模型观察,余鼠按1∶1随机分为细胞移植组和模型对照组,当出现单只为尾数时,将其分配在细胞移植组。②实验方法:无菌抽取脐血20mL,加入乙二胺四乙酸抗凝,Ficoll法分离脐血有核细胞。造模后第10天,细胞移植组大鼠将头部固定,按前囟尾侧3.0mm,中线旁1.5mm,深度1.2mm注入1011L-1脐血有核细胞悬液5μL,1μL/min。模型对照组注射等量无细胞脐血清,正常对照组不给予任何干预。③实验评估:造模后4周,5只模型观察大鼠制作脑切片,行苏木精-伊红染色镜检。各组分别于细胞移植前、细胞移植后2,6周进行横木行走实验和触觉刺激试验,检测其运动和触觉功能的恢复。处死各组大鼠制作病理切片,免疫荧光检测脐血有核细胞在脑内生存和分化情况。结果:正常对照组、细胞移植组、模型对照组各20只、24只、24只进入结果分析。①阻塞性脑卒中模型大鼠病理特征:造模大鼠出现行为障碍,缺血部位出现中风囊,病理切片可见缺血坏死区等阻塞性脑卒中所致脑组织病理损伤。②运动和触觉功能测试:细胞移植前,细胞移植组与模型对照组大鼠的横木行走能力、撕胶纸能力均基本相似(P=0.05),且明显低于正常对照组(P<0.01)。移植后第2周,细胞移植组大鼠两项能力均明显强于模型对照组(P<0.05),但仍低于正常对照组(P<0.01)。移植后第6周,细胞移植组大鼠的横木行走能力明显改善,与正常对照组基本相似(P>0.05);撕胶纸能力仍低于正常对照组(P<0.01)。③阳性细胞免疫荧光检测:细胞移植组进针注射部位存在大量抗人RNP/CD45双阳性完整细胞,并向大脑中线、皮层梗死部位迁移。所植入的细胞约2.95%表达胶质纤维酸性蛋白,3.41%表达神经特异性烯醇化酶。结论:移植人脐血有核细胞能有效改善阻塞性脑卒中大鼠的运动和触觉功能缺陷。     

自血光量子疗法治疗颈椎病的动物实验

目的:观察自血光量子疗法对颈椎病实验动物模型的治疗效果,为临床应用自血光量子疗法治疗颈椎病提供理论依据。方法:实验于2004-03/09在武汉大学人民医院骨科完成。实验动物为健康成年雄性家兔36只,随机分为3组,对照组,颈椎病组和自血光量子组,每组12只。对照组不实施手术造模,颈椎病组及自血光量子组通过手术制备颈椎病实验动物模型。采用自血光量子疗法对自血光量子组动物予以干预,对照组及颈椎病组不予处理。自血光量子组动物按3.5mL/kg体质量自股静脉采血,并与预计采血量1/4的复方枸橼酸钠抗凝液混匀后,置入光量子血疗仪的石英瓶内进行处理。血液处理完毕后自采血静脉快速回输,整个过程严格遵守无菌原则。6个月后,行Rivlin斜板实验(受试家兔分正、反两个方向置于可调节橡胶面斜板上,测定动物在斜板上停留10s的最大倾斜角度,两个方向的角度平均后即为该动物斜板实验的功能角度)观察动物功能恢复。麻醉后处死动物,迅速取出C3～7整段颈椎标本,于冰盐水中剥去硬脊膜和凝血块,经处理后采用可见光分光光度计分别测定血液及颈髓组织中超氧化物歧化酶。结果:所有实验动物均良好存活,全部进入结果分析。①实施手术6个月后,颈椎病组实验动物斜板实验功能角度显著低于对照组及自血光量子组,差异具有显著性。对照组动物同自血光量子组动物接近无差异。②颈椎病组动物血液及颈髓组织中超氧化物歧化酶含量较正常组动物降低[血液:(50.68±9.12)×103,(108.79±8.01)×103NU/L,P<0.05;脊髓:(68.99±7.26)×103,(137.22±10.10)×103NU/L,P<0.05]。经自血光量子疗法治疗后,血液及颈髓组织中超氧化物歧化酶回升至正常水平,与对照组接近[血液(101.07±9.75)×103NU/L,脊髓(124.73±11.21)×103NU/L,P>0.05]。结论:自血光量子疗法可有效提高颈椎病实验动物血液和脊髓超氧化物歧化酶含量、改善机体运动功能,有望应用于临床。     

自血光量子疗法治疗颈椎病的动物实验

目的：观察自血光量子疗法对颈椎病实验动物模型的治疗效果，为临床应用自血光量子疗法治疗颈椎病提供理论依据。方法：实验于2004—03／09在武汉大学人民医院骨科完成。实验动物为健康成年雄性家兔36只，随机分为3组，对照组，颈椎病组和自血光量子组，每组12只。对照组不实施手术造模，颈椎病组及自血光量子组通过手术制备颈椎病实验动物模型。采用自血光量子疗法对自血光量子组动物予以干预，对照组及颈椎病组不予处理。自血光量子组动物按3．5mL／kg体质量自股静脉采血，并与预计采血量1／4的复方枸橼酸钠抗凝液混匀后，置入光量子血疗仪的石英瓶内进行处理。血液处理完毕后自采血静脉快速回输，整个过程严格遵守无菌原则。6个月后，行Rivlin斜板实验（受试家兔分正、反两个方向置于可调节橡胶面斜板上，测定动物在斜板上停留10s的最大倾斜角度，两个方向的角度平均后即为该动物斜板实验的功能角度）观察动物功能恢复。麻醉后处死动物，迅速取出C3-7整段颈椎标本，于冰盐水中剥去硬脊膜和凝血块，经处理后采用可见光分光光度计分别测定血液及颈髓组织中超氧化物歧化酶。结果：所有实验动物均良好存活，全部进入结果分析。①实施手术6个月后，颈椎病组实验动物斜板实验功能角度显著低于对照组及自血光量子组，差异具有显著性。对照组动物同自血光量子组动物接近无差异。②颈椎病组动物血液及颈髓组织中超氧化物歧化酶含量较正常组动物降低[血液：（50．68&;#177;9．12）&;#215;10^3，（108．79&;#177;8.01）&;#215;10^3NU／L，P〈0．05；脊髓：（68．99&;#177;7．26）&;#215;10^3，（137．22&;#177;10．10）&;#215;10^3NU／L，P〈0．05]。经自血光量子疗法治疗后，血液及颈髓组织中超氧化物歧化酶回升至正常水平，与对照组接近[血液（101．07&;#177;9．75）&;#215;10^3NU／L，脊髓（124.73&;#177;11．21）&;#215;10^3NU／L，P〉0．05]。结论：自血光量子疗法可有效提高颈椎病实验动物血液和脊髓超氧化物歧化酶含量、改善机体运动功能，有望应用于临床。     

接骨七厘片、辛伐他汀对促进骨折愈合的动物实验研究

目的探讨接骨七厘片和辛伐他汀对促进骨折愈合的机制,并分析联合应用接骨七厘片和辛伐他汀与单独应用接骨七厘片或辛伐他汀对促进骨折愈合的差异。方法用蒸馏水将接骨七厘片和辛伐他汀片分别溶解,配成一定浓度的溶解液。将实验大鼠随机分成4组,将双侧尺桡骨中1/3段徒手折断,造成闭合性完全性骨折,不给予外固定。术后接骨七厘片组给予接骨七厘片溶液,1次/d,连续28 d;辛伐他汀片组给予辛伐他汀溶液,1次/d,连续28 d;联合应用组同时给予接骨七厘片溶液及辛伐他汀溶液,1次/d,连续28 d;对照组灌胃给予生理盐水1 mL,1次/d,连续28 d。结果在一般行为表现、X线表现、组织形态学、骨痂干重等方面,接骨七厘片组和(或)辛伐他汀组与联合应用接骨七厘片和辛伐他汀组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本实验研究发现接骨七厘片及辛伐他汀在骨折愈合的过程中,均能增加成骨细胞的活性,使成骨细胞大量增生,促进骨痂的形成,提高骨痂的质量,而联合应用接骨七厘片及辛伐他汀比单纯使用接骨七厘片或辛伐他汀片作用更明显,骨折愈合较快。     

抗肿瘤坏死因子单克隆抗体治疗脓毒症的用药时机实验研究

目的：通过对脓毒症小鼠的治疗过程，探讨抗肿瘤坏死因子单克隆抗体（Ｚ１２）在脓毒症治疗中的作用和用药时机。方法：脓毒症模型采用ＮＨ１雄性小鼠，腹腔注射Ｏ１１１Ｂ４大肠杆菌１／２ＬＤ９０，共２次，间隔１２小时。给药分早期和晚期２组，分别于第１、２次细菌攻击时每鼠注射０．１ｍｇＺ１２。结果：早期使用抗Ｚ１２虽然可以降低血ＴＮＦ活性，但不能改善动物生存率，甚至有加速死亡的危险；晚期应用时生存率较早期用药时明显提高，与早期用药组有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；白细胞计数Ｚ１２早期组和晚期组均低于生理盐水组，其中，晚期用药组有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。Ｚ１２能够降低ＴＮＦ的活性水平，与生理盐水组比较，有显著性差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。早期用Ｚ１２组血ＴＮＦ和ＩＬ６低于晚期用Ｚ１２组，有显著性差异（Ｐ均＜０．０５）；ＩＬ１则相反，早期组高于晚期组（Ｐ＜０．０５）。结论：Ｚ１２可以成为脓毒症治疗的辅助药物，关键是用药时间，其应用时机可能在感染的中后期，而不是早期