钙调素的环核苷酸磷酸二酯酶检测法

从牛脑中提取钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶和钙调素,利用钙调素对磷酸二酯酶的激活作用和孔雀石绿定磷法测定生物样品中具有生理活性的钙调素含量,灵敏度达到２０ｎｇ,检测范围２０￣４０ｎｇ。此法操作简便,不需特殊仪器,较适合一般研究室使用。     

二氢吡啶类钙拮抗剂对钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶的抑制机理

用单克隆抗体纯化的60kd为亚基的牛脑钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶的动力学研究表明,二氢吡啶类钙拮抗剂Nicardipine和Felodipine是该酶的“部分”竞争性抑制剂。因为近饱和浓度的药物抑制该酶活性仅能达到某限定值,且Dixon作图法不呈直线关系。该酶被一定浓度Felo-dipine抑制时,增加Nicardipine浓度可逆转酶的抑制而达到Nicardipine的最大抑制水平,Nicardipine不影响典型的竞争性抑制剂甲基异丁基黄嘌呤对该酶的抑制作用,说明该酶活性中心以外存在和二氢吡啶结合的部位。     

钙调素－环核苷酸磷酸二酯酶测定体系的建立

用热处理，ＤＥＡＥ－ＳｃｐｈａｄｅｘＡ－２５层折，电泳和电渗析等方法，从牛睾丸组织中分离和纯化钙调素（ＣａＭ）；用（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀和ＤＥＡＥ－ｃｃｌｌｕｌｏｓｅ层析等方法，从牛心肌中分离和纯化ＣａＭ依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ），从而建立了ＣａＭ－ＰＤＥ测定体系。这对筛选ＣａＭ的拮抗剂和激活剂提供快速可靠的研究方法。     

钙调素－环核苷酸磷酸二酯酶测定体系的建立

用热处理，ＤＥＡＥ－ＳｃｐｈａｄｅｘＡ－２５层折，电泳和电渗析等方法，从牛睾丸组织中分离和纯化钙调素（ＣａＭ）；用（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀和ＤＥＡＥ－ｃｃｌｌｕｌｏｓｅ层析等方法，从牛心肌中分离和纯化ＣａＭ依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ），从而建立了ＣａＭ－ＰＤＥ测定体系。这对筛选ＣａＭ的拮抗剂和激活剂提供快速可靠的研究方法。     

六种中草药有效成分对钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶的作用

用正交设计观察了6种中草药有效成分和三氟啦嗪（TFP）对钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶（CaM-PDE）激活活性的影响，结果表明：a）两面针碱（Nit）、槲皮素（Que）和TFP对CaM－PDE激活活性具有明显抑制作用（P＜0．01），其抑制强度：Qne＞TFP＞Nit；小檗碱（Ber）、麻黄碱（Eph）和鱼腥草素（Hou）对CaM－PDE无明显作用（P＞0．05），青藤碱（Sin）对酶的作用可疑；c）Qne与TFP、Nit与TFP之间有协同作用。结果提示Nit和Que可能是CaM拮抗剂，两者的作用位点似乎不同于TFP。     

大黄蒽醌衍生物与环核苷酸磷酸二酯酶、钙调素相互作用的研究

为了进行氯硝基安定栓剂家兔直肠吸收的研究,作者利用国产高效液相色谱仪建立了家兔血药浓度测定的方法。色谱柱5mm×150mm不锈钢内填充     

大黄蒽醌衍生物与环核苷酸磷酸二酯酶、钙调素相互作用的研究

大黄蒽醌衍生物与钙调素(CaM)依赖的磷酸二酯酶(PDE)的相互作用表明它们可作用于钙调素。其中大黄酸结合CaM并抑制CaM依赖的磷酸二酯酶(CaM-PDE);而大黄素、大黄酚和芦荟大黄素     

香茶菜甲素酯对依赖钙调素的环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

香茶菜甲素酯是香茶菜甲素的一种新的衍生物。研究发现该化合物能明显抑制CaM激活的PDE活性,其IC_(50)为75μmol/L。抑制动力学测定表明它以非竞争方式拮抗CaM对PDE的活化。CaM荧光测定显示,香茶菜甲素酯可以降低ca~(2+)诱导的CaM酪氨酸荧光强度,提示它可能通过改变Ca~(2+)—CaM构象而抑制CaM—PDE。     

蝙蝠葛苏林碱衍生物抑制钙调素刺激的环核苷酸磷酸二酯酶的活力

本文研究了蝙蝠葛苏林碱衍生物(DD)对钙调素(CaM)活化的环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)活力的削弱作用,发现DD是一类新的CaM拮抗剂。这些化合物不     

胃癌环核苷酸磷酸二酯酶的组织化学研究

本文应用环核苷酸磷酸二酯酶(CPDE)组织化学方法,对43例胃癌组织细胞内cAMP-PDE和cGMP-PDE的活性和分布进行了观察,并对两种CPDE与胃癌的关系作了初步探讨。资料表明,胃癌时两种CPDE阳性率均较“正常”胃粘膜显著降低(P<0.01),且其活性和分布的异常与胃癌的恶性程度密切相关。本文结果提示,CPDE可能通过调节细胞内环核苷酸的含量进而调控细胞在形态学上的分化,而cGMP-PDE活性的降低在减少细胞内cGMP的降解,提升细胞内cGMP水平,使cAMP/cGMP比值降低,进而导致细胞去分化和恶性生长以及最终引起癌变等方面可能起着更为重要的作用。     

葡甲胺-cAMP对环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

葡甲胺环磷酸腺苷(MGM-cAMP)可被依赖钙媒介蛋白的环核苷酸磷酸二酯酶(CaM-PDE)所水解,其降解速度仅及天然底物cAMP的75％。原因在于葡甲胺配基对PDE本身有抑制作用,抑制率约25％。MGM—cAMP对PDE的抑制作用可减慢分解,有利于其在体内发挥治疗作用。     

磷酸二酯酶及其活性调节

磷酸二酯酶(Phosphodiesterase,PDE)通过水解环核苷酸的3’磷酸酯键灭活cAMP/cGMP来控制细胞内cAMP/cGMP信使分子的浓度,参与调控哺乳类动物的记忆与学习、视觉、嗅觉、血小板聚集、醛固酮合成、胰岛素分泌、T细胞活化、阴茎勃起、生殖及生长等生理过程。本文就PDEs的分类、结构、组织分布、亚细胞定位及其活性调节研究进展综     

川芎嗪对环核苷酸磷酸二酯酶活性的影响

<正> 川芎嗪是治疗冠心病的中药合剂冠心灵中的分剂川芎的一种有效的提纯成份。据报告它在治疗冠心病及急性闭塞性脑血管疾病等方面有肯定的疗效。根据我们不久前的报告,川芎嗪具有引起体内cAMP水平升高的作用。cAMP可以促进血管平滑肌舒张及抑制血小板聚集,从而引起血管扩张及抑制血栓的形成,这有利于促进和改善血液循环,     

两面针碱对钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

以钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＣａＭ－ＰＤＥ）为分子模型，应用正文试验证实两面针碱（Ｎｉ－ｔｉｄｉｎｅ，Ｎｉｔ）是一种新的ＣａＭ拮抗剂。实验结果表明：①：Ｎｉｔ抑制ＣａＭ－ＰＤＥ活性ＩＣ５０为８６μｍｏｌ／Ｌ。②７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对０～８０ｎｇ／ｍｌＣａＭ存在下，ＣａＭ－ＰＤＥＶｍａｘ基本不变，半激活浓度（ＡＣ５０）增大，抑制常数（Ｋｉ）为６６μｍｏｌ／Ｌ。提示Ｎｉｔ以竞争方式拮抗ＣａＭ对其靶酶（ＰＤＥ）的活化。③７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ抑制动力学研究：改变底物（ｃＡＭＦ）浓度，ＣａＭ－ＰＤＥ的Ｖｍａｘ减少，米氏常数（Ｋｍ）值增大，Ｋｉ为６４μｍｏｌ／Ｌ，α＞１。提示Ｎｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ的抑制作用是非竞争一竞争性混合型抑制。由此推测Ｎｉｔ可能通过与ＣａＭ竞争酶分子上的ＣａＭ结合位点从而抑制ＣａＭ－ＰＤＥ的激活活性。     

苄基异喹啉类化合物对钙调素和磷酸二酯酶相互作用的研究

钙调素(CaM)拮抗剂是研究CaM生理功能的良好工具,也是探讨药物作用机理和开发新药的重要监察器。已报道粉防己碱是一种CaM拮抗剂。我们合成并测定了一些苄基异喹     

胰岛素介体对烫伤大鼠cAMP磷酸二酯酶的调节

由经胰岛素诱导的大鼠肝细胞质膜分离出一种分子量为３－３．５ｋＤ的胰岛素化学介体，可以刺激激大鼠脂肪细胞的ｃＡＭＰ依赖的磷酸二酯酶。刺激作用呈剂量依赖关系。这种胰岛素介体刺激正常大鼠ｃＡＭＰ－ＰＤＥ活性升高６倍，但对烫伤大鼠ｃＡＤＥ－ＰＤＥ活性只增加１．２４倍，两者差异明显，表明烫伤大鼠ｃＡＭＰ－ＰＤＥ对胰岛素介体刺激的反应性降低可能涉及胰岛素抵抗的受体后信号传递缺陷。     

胃癌组织环核苷酸磷酸二酯酶与小肠吸收细胞标志酶的比较研究

本文对50例胃癌组织中环核苷酸磷酸二酯酶的活性和分布与小肠吸收细胞标志酶AKP、LAP的表达进行了比较研究。结果显示:环核苷酸磷酸二酯酶与胃癌细胞AKP和LAP的表达呈正相关。并对环核苷酸磷酸二酯酶与胃癌细胞吸收功能分化的关系及其生物学意义作了初步探讨。