血清miR-18a-5p、miR-21在老年胃癌临床诊断及预后评估中的应用

目的 探讨血清微小RNA-18a-5p(miR-18a-5p)、微小RNA-21(miR-21)在老年胃癌临床诊断及预后评估中的价值。方法 收集85例胃癌患者(胃癌组)术前和术后血清,以及45例非胃癌对照者(对照组)血清,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组受试者血清样本中miR-18a-5p和miR-21的表达水平,分析其在不同临床病理特征老年胃癌患者中的表达,探讨其表达水平在临床诊断及预后评估中的价值。结果 胃癌组血清miR-18a-5p、miR-21、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原199(CA199)水平均高于对照组(P<0.05);血清miR-18a-5p、miR-21、CEA及CA199诊断胃癌的曲线下面积(AUC)分别为0.750、0.807、0.656、0.690,4项联合诊断的AUC为0.879,明显高于各单一指标(P<0.05);不同TNM分期、肿瘤最大径、肿瘤浸润深度、组织分化程度及淋巴结转移情况的胃癌患者miR-18a-5p、miR-21表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与术前比较,术后患者miR-18a-5p、miR-21、CEA...     

miR-181a-5p在宫颈癌组织及患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨miR-181a-5p在宫颈癌组织及患者血清中的表达及临床意义.方法 选取2018年6月至2020年10月该院收治的宫颈癌患者110例为宫颈癌组,另选取该院体检健康女性100例为对照组.收集宫颈癌患者癌组织、对应癌旁组织及血清标本,采用PCR技术分别检测组织标本及血清标本中miR-181 a-5 p的表达,对比分析miR-181a-5p在不同标本中的表达及其与患者临床特征的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-181a-5p诊断宫颈癌的临床价值.结果 宫颈癌患者癌组织中miR-181a-5p的相对表达水平为9.41±2.38,明显低于癌旁组织的17.62±3.54,差异有统计学意义(t=20.198,P<0.05);宫颈癌组血清中miR-181a-5p的相对表达水平为11.03±2.76,明显低于对照组的18.96±4.13,差异有统计学意义(t=16.492,P<0.05);不同分化程度、有无淋巴结转移、不同国际妇产科联盟分期的宫颈癌患者癌组织标本及血清标本中miR-181a-5p的相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05);癌组织中miR-181a-5p诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)为0.871(95％CI 0.745～0.983,P<0.05),灵敏度为94.42％,特异度为85.39％;血清中miR-181a-5p诊断宫颈癌的AUC为0.752(95％CI 0.703～0.914,P<0.05),灵敏度为89.19％,特异度为79.82％.结论 miR-181a-5p在宫颈癌组织及患者血清中均呈低表达,且其表达与宫颈癌发生、发展有关,可作为宫颈癌临床诊断的评价指标.     

食管癌患者血清miR-3653-3p和miR-330-3p的作用及临床意义

目的观察血清miR-3653-3p和miR-330-3p表达水平对食管癌诊断和预后预测的临床价值。方法选取2015年1月至2017年6月在该院行手术治疗的食管癌患者109例作为食管癌组,同期在该院行手术治疗的食管良性病变患者(65例)和体检健康者(30例)分别作为食管良性病变组和对照组。采用实时荧光定量PCR检测血清miR-3653-3p和miR-330-3p水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-3653-3p和miR-330-3p水平对食管癌的诊断效能和预后预测价值。结果食管癌组患者血清miR-3653-3p水平低于食管良性病变组和对照组(P<0.01),食管良性病变组血清miR-3653-3p水平低于对照组(P<0.01);食管癌组患者血清miR-330-3p水平高于食管良性病变组和对照组(P<0.01),食管良性病变组miR-330-3p水平高于对照组(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清miR-3653-3p和miR-330-3p水平对食管癌有较高的诊断效能,联合检测的曲线下面积(AUC)高于miR-365403-13p、miR-330-...     

类风湿关节炎患者血清miR-125a-5p、miR-132的表达及意义

摘要:目的探究类风湿关节 炎(RA)患者血清miR-125a-5p. miR-132 的表达水平及临床应用价值。方法选取2021年1月至2022年1月湖北省十堰市太和医院收治的92例RA患者作为RA组,同期体检健康者80例为健康人对照组,采集各研究对象的空腹静脉血标本，实时荧光定量PCR( qRT-PCR)检测miR- 125a-5p和miR-132的表达水平;Pearson法分析miR- 125a-5p与miR-132的相关性以及二者与红细胞沉降率( ESR)、类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)和28个关节疾病活动度评分( DAS28)的相关性;ROC曲线评估miR-125a-5p、miR-132 对RA的临床筛查价值。结果与健康人 对照组相比,RA组ESR、RF和CRP的含量以及miR-125a-5p的表达水平均显著升高,而miR-132 的表达水平显著降低，差异有统计学意义(P均<0.05)。高活动组miR-125a-5p的表达水平和DAS28评分显著高于中活动组和低活动组,且中活动组显著高于低活动组(P均<0.05);高活动组miR-132的表达水平显著低于中活动组和低活动组,且中活动组显著低于低活动组(P均<0.05)。RA患者血清miR-125a-5p 的表达与DAS28 评分、ESR、RF CRP呈正相关(P<0.05),而miR-132 的表达与miR-125a-5p 、DAS28评分、ESR、RF .CRP呈负相关( P<0.05)。miR-125a-5p. miR-132 联合检测筛查RA发生的ROC曲线下面积( AUCROC )为0.986(95%CI:0.973~0.998),显著高于二者单独筛查的0.948( 95% CI:0.919~ 0.976)和0. 884( 95%CI:0.834~0.934),差异有统计学意义( Z= 3.638, P<0.001;Z=3.184,P=0.023)。结论RA 患者血清miR-125a-5p表达水平升高,miR-132表达水平降低,二者联合对RA具有一定的临床筛查价值。     

胃癌组织中miR-133a-3p、miR-4317的表达及临床意义

目的检测胃癌组织中微小RNA(miR)-133a-3p和miR-4317表达情况,并探究二者的临床意义。方法收集60例胃癌患者的癌组织及其相对应的癌旁组织,采用实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)技术检测组织样品中miR-133a-3p和miR-4317表达水平,同时分析miR-133a-3p和miR-4317表达与患者临床特征之间的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-133a-3p和miR-4317表达与患者预后的关系。结果RTqPCR试验结果显示,胃癌组织中miR-133a-3p、miR-4317相对表达量均低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中miR-133a-3p表达水平与肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);miR-4317表达水平与淋巴结转移、远处转移及肿瘤TNM分期有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,miR-133a-3p高表达胃癌患者的5年生存率高于低表达者,术后生存时间长于低表达者(P<0.05);miR-4317低表达胃癌患者的5年生存率低于高表达者,术后生存时间短于高表达者(P<0.05)。结论胃癌组织中miR-133a-3p和miR-4317均表现为低表达,二者有可能作为胃癌预测和预后判定的潜在标志物,为胃癌患者的预测和预后判定提供一定的参考价值。     

结直肠癌患者血清miR-92a-3p表达水平及其临床意义

目的分析miR-92a-3p在体检健康者、结直肠腺瘤息肉患者以及结直肠癌(CRC)患者手术前后血清中的相对表达水平,探讨其在CRC临床诊断中的应用价值。方法用Trizol法分别对30例体检健康者、25例结直肠腺瘤息肉患者和40例CRC患者术前及术后的血清进行总RNA提取,用实时荧光定量PCR检测miR-92a-3p的相对表达水平,分析其在各组中的表达差异及其与CRC临床病理参数的关系,以受试者工作曲线确定血清miR-92a-3p的CRC诊断效能。结果 CRC术前组血清miR-92a-3p的表达水平高于结直肠腺瘤息肉组(Z=4.75,P0.01)、CRC术后组(Z=4.28,P0.01)和健康人对照组(Z=8.00,P0.01);健康人对照组血清miR-92a-3p的表达水平低于CRC术后组(Z=4.08,P0.01)和结直肠腺瘤息肉组(Z=2.70,P=0.01);结直肠腺瘤息肉组和CRC术后组的血清miR-92a-3p的表达水平差异无统计学意义(Z=0.99,P=0.32);血清miR-92a-3p鉴别CRC的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.899(95%CI:0.840~0.959),当cut off值为2.75时,敏感性和特异性均为80%;血清miR-92a-3p的高低与CRC的浸润深度(Z=2.14,P=0.03)、淋巴结转移(Z=2.86,P=0.04)、TNM分期(Z=2.93,P0.01)等临床病理参数关系密切。结论血清miR-92a-3p可能为临床上CRC的筛查、病情监测等方面提供实验室依据。     

miR-181b-3p在胃癌患者血清中的表达及其靶基因预测

目的 研究血清miR-181 b-3 p检测在胃癌诊断中的价值.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测35例胃癌患者(研究组)和45例健康志愿者(对照组)血清中miR-181b-3p的相对表达水平,并比较不同年龄、性别、临床及病理学特征胃癌患者血清中的miR-181b-3p相对表达水平.绘制受试者工作特征(ROC)曲线计算曲线下面积,评价miR-181b-3p对胃癌的诊断效能.结合miRDB、miRWalk、TargetScan和DIANA TOOLS数据库预测miR-181b-3p的靶基因,并绘制蛋白互作网络图.结果 与对照组比较,研究组血清中miR-181b-3p的相对表达水平明显升高,差异有统计学意义(t=7.943,P<0.05).未/低分化程度、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者血清中miR-181 b-3 p相对表达水平明显高于中/高分化程度、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者,差异有统计学意义(t=3.509、P<0.001,t=3.080、P=0.004,t=2.641、P=0.013).血清miR-181b-3p检测诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.886(95％CI:0.815～0.956),灵敏度为68.8％,特异度为91.1％.miR-181b-3p预测靶基因所编码蛋白质间相互作用关系较复杂.结论 血清miR-181b-3p在胃癌患者中表达上调,且能够有效区分胃癌患者和健康人群,有望作为诊断胃癌的生物标志物.     

男性不育患者精浆miR-135a-5p 和miR-135b-5p水平检测的价值*

摘要:目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR( RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p 和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUCROC);相关性分析精浆miR-135a-5p . miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5 种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88 ,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14, P<0.01;H=21.37 ,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低( U= 687 ,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U= 779, P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC 分别为0.764(95%CI:0.675~ 0.854) ,0.711( 95%CI:0.612~0.810)和0.782( 95%C1:0.695 ~0.869) ,0.733(95% CI:0.637-0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p 和miR-135b-5p 为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。     

miR-146a-3p在胃癌患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨miR-146a-3p在胃癌患者血清中的表达及临床意义.方法 选取该院2015年3月至2017年9月收治的64例胃癌患者作为胃癌组,另选取同期该院体检健康者28例作为健康组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清中miR-146a-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中糖类抗原72-4(CA72-4)水平.对患者进行电话随访,根据3年内患者预后情况,将患者分为存活组(n=14)和死亡组(n=50).比较胃癌组和健康组血清miR-146a-3p、CA72-4水平;比较不同特征胃癌患者血清miR-146a-3p、CA72-4水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-146a-3p、CA72-4对胃癌患者预后的预测价值.结果 胃癌组血清miR-146a-3p水平低于健康组,CA72-4水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);不同TNM分期、淋巴结转移情况、局部浸润深度、肿瘤最大径、分化程度胃癌患者的miR-146a-3p、CA72-4水平比较,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关分析结果显示,胃癌组血清miR-146a-3p水平与CA72-4水平呈负相关(r=—0.474,P<0.001);死亡组血清miR-146a-3p水平低于存活组,血清CA72-4水平高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-146a-3p、CA72-4预测胃癌患者预后的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.864(0.764～0.963)、0.769(0.652～0.885);miR-146a-3p的AUC大于CA72-4,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-146a-3p水平在胃癌患者血清中下调,可作为评估胃癌患者预后的标志物,特异度和灵敏度较高.     

膀胱癌患者血清miR-17-5p和miR-20a的表达及意义

目的检测miR-17-5p和miR-20a在膀胱癌患者血清中的表达水平并探讨其临床意义。方法采集156例膀胱移行细胞癌患者术前以及术后1周、1月、3月和100例体检健康者静脉血标本,用荧光定量RT-PCR检测血清miR-17-5p和miR-20a的表达。结果 miR-17-5p和miR-20a在膀胱癌患者术后血清中的表达水平进行性下降(P<0.05);膀胱癌患者血清中miR-17-5p和miR-20a显著高表达,且随病理分级的升高而升高(P<0.01)。肌层浸润性膀胱癌患者血清miR-17-5p及miR-20a的表达显著高于非肌层浸润性膀胱癌(P<0.01)。结论膀胱癌患者血清miR-17-5p和miR-20a高表达,有望作为膀胱癌早期诊断及预后评价的检测指标。     

胃癌患者血清miR-135与miR-601水平变化及临床意义

目的探讨胃癌患者血清miR-135与miR-601水平变化及临床意义。方法选择2019-2020年唐山市第三医院收治的90例胃癌患者作为观察组,另选择同期84例体检健康者作为对照组,检测并比较2组血清miR-135、miR-601、糖类抗原72-4(CA72-4)、糖类抗原19-9(CA19-9)水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-135、miR-601、CA72-4、CA19-9对胃癌的早期诊断及预后评估效能。结果观察组血清miR-135、miR-601、CA72-4、CA19-9水平高于对照组(P<0.05),进展期胃癌患者血清miR-135、miR-601、CA72-4、CA19-9水平高于早期胃癌患者(P<0.05)。血清miR-135、miR-601水平与胃癌临床分期及肿瘤分化程度有关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤最大径、组织学类型以及肿瘤位置无关(P>0.05)。ROC曲线结果显示,miR-135、miR-601、CA72-4、CA19-9联合检测诊断早期胃癌的曲线下面积(AUC)为0.961,灵敏度为0.872,特异度为0.835,优于单独检测的AUC(0.952、0.943、0.557、0.677)、灵敏度(0.820、0.845、0.799、0.812)和特异度(0.796、0.803、0.748、0.790);miR-135、miR-601、CA72-4、CA19-9联合检测评估胃癌预后的AUC为0.953,灵敏度为0.890,特异度为0.843,优于单独检测的AUC(0.948、0.675、0.566、0.625)、灵敏度(0.834、0.825、0.785、0.811)和特异度(0.810、0.832、0.767、0.807)。结论血清miR-135和miR-601水平在胃癌患者中明显升高,二者联合CA72-4、CA19-9水平检测对胃癌的早期诊断和预后评估具有较高价值,有望成为胃癌早期诊断和预后评估的新型血清标志物。     

Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p在前列腺癌患者尿液中的表达及意义

目的探究exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p在前列腺癌患者尿液中的表达及在前列腺癌诊断和预后评估中的价值。方法回顾性选择2014年5月至2017年3月中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院收治的45例前列腺癌患者、31例前列腺增生患者及26例健康对照者作为研究对象。收集3组受试者尿液,检测exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p表达量。分析exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p与前列腺癌患者临床病理资料的关系及在前列腺癌患者诊断和预后评估中的价值。结果3组受试者尿液中exosomal miR-501-5p、miR-501-3p的表达量比较,差异有统计学意义(P<0.001)。前列腺癌组exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p表达量(0.14±0.06、0.08±0.03)低于前列腺增生组(0.31±0.13、0.14±0.05)和健康对照组(0.30±0.09、0.17±0.04),差异均有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌患者尿液中exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p相对表达量与临床分期和骨转移有关(P<0.05),与年龄、Gleason评分和前列腺特异抗原水平无关(P>0.05)。Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p联合检测诊断前列腺癌的效能高于exosomal miR-501-3p单独诊断(P<0.05),与exosomal miR-196a-5p诊断效能比较,差异无统计学意义(P>0.05)。45例前列腺癌患者2年内共死亡14例,生存患者31例。前列腺癌组生存患者中exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p的表达量(0.17±0.04和0.09±0.02)均高于死亡患者(0.10±0.06和0.06±0.03),差异均有统计学意义(P<0.05)。Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p联合检测诊断前列腺癌患者预后的效能高于exosomal miR-501-3p单独诊断(P<0.05),与exosomal miR-196a-5p诊断效能比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p联合检测有助于前列腺癌患者的诊断及预后评估。     

血清miR-107在结直肠癌患者中的表达及其诊断价值分析

目的 探究血清微小RNA(miR)-107在结直肠癌患者中的表达及其对疾病的诊断价值。方法选取2016年1月至2019年1月该院收治的结直肠癌患者60例作为结直肠癌组,并选取同期在该院接受治疗的60例结直肠息肉患者作为息肉对照组,另选取同期在本院体检的健康志愿者60例作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR法检测miR-107的相对表达量,比较3组研究对象血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)、miR-107的水平,分析血清miR-107与结直肠癌患者临床病理特征的关系,受试者操作特征曲线(ROC)分析血清miR-107、CEA、CA199对直结肠癌的诊断价值。结果 结直肠癌组的血清miR-107相对表达量以及血清CEA、CA199水平高于息肉对照组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌患者血清miR-107的水平与性别、年龄、肿瘤最大径无关,差异无统计学意义(P>0.05),而与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05);miR-107所得ROC曲线下面积为0.882(95%CI:0.814~0.950),灵敏度和特异度分别为85.0%和82.9%。若和CEA及CA199进行联合应用,则灵敏度和特异度可提高至91.7%和86.7%。结论 miR-107在结直肠癌患者血清中呈高水平,而且其水平与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,且对结直肠癌有较高的诊断价值。     

原发免疫性血小板减少症miRNA181a-5p表达与Treg/Th17失衡关系的研究

目的:研究miRNA181a-5p表达与Treg/Th17失衡关系在原发免疫性血小板减少症(ITP)发病中的作用,有助于阐明ITP患者T细胞免疫失衡的机制。方法:收集37例ITP患者(包括21例未治疗患者和16例治疗有效患者)及19例健康对照者的外周血;分离外周血单个核细胞,qRT-PCR分析miRNA181a-5p和Notch1的表达情况;流式细胞术检测ITP患者和健康对照者外周血Th17亚群和Treg细胞比例;收集ITP组的临床数据,包括患者年龄、血小板计数及病程。结果:ITP组miR-181a-5p表达明显低于对照组(P<0.01),而经治疗有效后其表达水平明显升高(P<0.05),但仍明显低于对照组(P<0.01);ITP组和治疗有效组Notch1表达明显高于对照组(P<0.01)。3组之间两两比较,Treg细胞比例均未见明显差异(P>0.05);ITP组Th17亚群比例明显高于对照组(P<0.05),而Treg/Th17比值明显降低(P<0.05);ITP组miR-181a-5p表达和Treg/Th17比值呈正相关关系(r=0.555...     

miR-218-5p在胃癌细胞和胃癌组织中表达的临床意义及生物信息学分析

目的分析miR-218-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,采用生物信息学方法,预测其靶基因并对其信号通路进行富集分析,并利用OncomiR数据库对miR-218-5p在胃癌中的表达与预后关系进行生存分析。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在不同分化程度的胃癌细胞和正常细胞、胃癌组织和癌旁组织中的表达,分析其临床意义。在miRecords网站数据库选择3个以上软件在线预测其靶基因,取其交集,运用DAVID6.7数据库,对其靶基因参与的信号通路进行富集分析。采用OncomiR数据库分析miR-218-5p在胃癌组织相对于癌旁组织中的表达,并利用OncomiR和cBioportal数据库分别进行miR-218-5p在胃癌组织中的表达与预后生存期的分析。结果miR-218-5p在不同分化程度的胃癌细胞中表达下调。相对于癌旁组织,miR-218-5p在胃癌组织中也明显下调,miR-218-5p的下调与胃癌淋巴结转移(P<0.001)及TNM分期(P<0.001)具有相关性。生物信息学分析显示,miR-218-5p的靶基因富集在与肿瘤相关的多个信号通路中,且其在胃癌中的表达与胃癌患者预后具有一定相关性(P=0.01632)。结论miR-218-5p在胃癌中表达下调,起到潜在的抑癌作用,可能成为新的治疗靶点和预后标志物。     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

血清miR-135、miR-601、CA72-4及CA19-9的表达水平与胃癌诊断的相关性

目的 探究血清miR-135、miR-601、糖类抗原72-4(CA72-4)及糖类抗原19-9(CA19-9)的表达水平与胃癌(GC)诊断的相关性.方法 选取2015年1月至2020年10月本院106例GC患者作为观察组,健康人群45例作为对照组,检测并比较两组血清miR-135、miR-601、CA72-4及CA1...     

Identification of plasma miR-106a-5p and miR-30a-5p as potential biomarkers for mesangial proliferative glomerulonephritis

BackgroundAlthough stable microRNAs (miRNAs) are present in human peripheral blood and have been considered as novel biomarkers for various diseases. But there is little research about miRNAs as biomarkers of mesangial proliferative glomerulonephritis (MsPGN). This study aimed to identify whether there exist disordered circulating miRNAs that can function as biomarkers for MsPGN disease activity.MethodsThe candidate miRNAs were validated in 70 MsPGN patients and 70 healthy controls by quantitative real-time PCR (RT-qPCR). The specificity and sensitivity of the miRNA panel was assessed by receiver operating characteristic (ROC) curves. In addition, the candidate miRNA levels were measured in the different MsPGN progression and in the membranous nephropathy (MN) patients and the hypothetical role of the candidate miRNA on mesangial cell proliferation was analysed. Situ hybridization was performed to examine the candidate miRNA levels in the glomerulus.ResultsThese results showed that miR-106a-5p and miR-30a-5p were highly expressed in MsPGN patients compared with healthy controls and could discriminate MsPGN from healthy controls with an area under the ROC curve (AUC) of 0.93. In addition, the two miRNAs were not only higher in moderate and severe MsPGN patients, but could distinguish MsPGN from MN. We also observed a decreased expression in MsPGN regression group after treatment. Plasma miR-106a-5p level was positively correlated with estimated glomerular filtration rate (eGFR). Furthermore, the two miRNAs were highly expressed in MsPGN glomerulus and their overexpression could prompt mesangial cell proliferation.ConclusionPlasma miR-30a-5p and miR-106a-5p can serve as novel and potential diagnostic biomarkers for MsPGN.     

肾透明细胞癌患者血清miR-193a-3p水平增加及早期诊断价值

目的 检测肾透明细胞癌患者血清中miR-193a-3p的表达水平,探讨其作为肾透明细胞癌分子诊断指标的可能性。方法 收集南京军区南京总医院2010～2014年期间107例住院肾透明细胞癌患者(TNM分期Ⅰ期76例、Ⅱ期16例、Ⅲ期2例、Ⅳ期8例和未知5例)未经治疗前血清样本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测miR-193a-3p含量,并以107例年龄、性别匹配的非癌健康人作对照。ROC曲线分析血清miR-193a-3p水平对肾透明细胞癌的早期诊断价值。结果 qRT-PCR检测证实,miR-193a-3p在总体患者血清中的含量显著高于对照组(3.294 ± 1.526 vs 1.944±0.600,P=0.000)。TNM Ⅰ期(3.411±1.676 vs 1.944±0.600,P=0.000)、Ⅱ期(2.926±0.927 vs 1.944±0.600,P=0.001)和Ⅳ期患者(2.926±0.894 vs 1.944±0.600,P= 0.000)血清中miR-193a-3p的表达水平均明显高于对照组。用于诊断肾透明细胞癌早期(Ⅰ期)的血清miR-193a-3p ROC曲线下面积(AUCROC)为0.820(95% CI,0.756～0.883),敏感度为80.3%,特异度为93.5%。结论 miR-193a-3p在肾透明细胞癌患者血清中的水平显著升高,并有较高的早期诊断准确性,有望作为该病早期诊断的血清学指标。