湖南省精液常规检验室间质量评价体系的初步建立

摘要:目的通过初步建 立湖南省精液常规检验室间质量评价(质评)体系，了解湖南地区不同生殖男科实验室精液常规检验结果的差异,从而提高湖南地区整体精液常规检验水平。方法分 2次制备并发放2个不同水平的精子浓度及精子活力质控 品,发放给湖南地区20家生殖男科实验室，回收检验结果并采用Robust稳健统计法及实验室能力比对分析(PT)评价实验室的检验能力。结果70%( 14/20)的实验室采用计算机辅助精子分析(CASA).30% ( 6/20)使用Makler 计数板手工计数分析 精子浓度;50%( 10/20)的实验室采用CASA、50%( 10/20)采用手工方式分析精子活力。4个精子浓度质控品的实验室间变异系数(CV)范围为13.47%~21.79% ;4个活力质控品CV范围，前向运动精子率(PR)为5.65%~ 20.76%,非前向运动精子率. (NP)为31.36% ~ 59.30% ,不活动精子率(IM)为5.50%~8.80%。 20家参评实验室精子浓度项目评价结果显示, 65%( 13/20)合格,10%(2/20)可疑,25%(5/20)离群;20家参评实验室精子活力项目评价结果显示，30%(6/20)合格,35% (7/20)可疑， 30%(6/20)离群,1家5%( 1/20)未回报第一次活力结果。PT合格率(PT≥80%)为55%(11/20),不合格率(PT<80%)为45%(9/20)。结论通过 Robust稳健统计法评价生殖男科实验室的精液常规检验能力可行;亟需对实验室技术人员进行标准化培训和质量控制,以提高湖南地区各生殖男科实验室精液常规分析水平。     

Youden图在精子浓度室间质量评价中的应用

目的 根据精子浓度室间质量评价（EQA）数据绘制Youden图,以通过EQA回报结果获取更多有效信息,发现系统误差,改进实验室检测质量。方法 收集2019和2020年山东省精子浓度EQA数据,绘制Youden图,分析2019和2020年EQA回报结果。结果 Youden图显示,2020年低浓度水平质控品变异系数（CV）为31%,显著低于2019年（19%）(P<0.05);高浓度水平质控品CV差异无统计学意义（P=0.097）。结论 Youden图可以反映精液分析项目实验室系统误差的趋势,帮助临床实验室更直观地发现系统误差。     

精子分析室内质控方法的探讨

精子分析是预测男性生育能力、寻找男性不育病因、提供辅助生殖技术（ART）治疗方案、评价治疗效果的重要手段,其检测包括精液量、颜色、气味、精液液化时间、精液 pH 值、黏稠度、精子浓度、精子活力、精子存活率、精子形态分析等项目,检测复杂,操作难以标准化;且各实验室精子分析结果差异巨大,使得提高其检测结果的可比性,加强精子分析的质量控制迫在眉睫［1］。     

载玻片代替MACRO精子计数板可行性分析

目的探讨计算机辅助精液分析（CASA）中以普通载玻片代替MACRO精子计数板的可行性。方法对前来就诊的患者按要求留取精液,液化后分别取适量标本放在MACRO精子计数板和普通载玻片上采用WLJY-9000伟力彩色精子质量检测系统分别测得其密度、活率及活力等参数。结果在少精组（精子密度每毫升小于20×10^6）、弱精组（精子活率小于50％）、少弱精组（精子密度每毫升小于20×10^6,且精子活率小于50％）和正常组（精子密度每毫升大于20×10^6,且精子活率大于50％）间分别用MACRO精子计数板和普通载玻片测得其密度、活率及活力各参数间差异无统计学意义。结论CASA中以普通载玻片代替MACRO精子计数板操作简便、结果可靠、经济实用。     

不同计数板对计算机辅助精子分析系统检测影响探讨

目的 探讨不同精子计数板对计算机辅助精子分析结果的影响.方法 采用计算机辅助分析对2013年2月10日～4月30日,48份门诊和住院患者标本分别用三块计数板进行精子浓度和精子活力检测,并对结果进行F检验;对这三块计数板用Filmetrics F20激光间隙测量仪进行多位点深度检测,根据平均浓度判断是否合格.结果 用A型（金属板）、B型（玻璃板）和C型（Macro板）计数板测得的平均精子浓度分别为：（50.3±27.1）×106/ml,（76.5±30.5）×106/ml,（65.5±24.2）×106/ml,三者之间差异有统计学意义（F=22.10,P＜0.05）;三块计数板所测得的平均精子活力无差异;A型、B型计数板平均深度分别是7.74 μm,13.01 μm,均不合格,C型10.01 μm判为合格.结论 计算机辅助精子分析配套用的精子计数板严格按照《人类精液检查与处理实验室手册》第5版的要求进行验收和定期复检,可确保精子分析质量.建立精子计数的室内质量控制可监测计数板的深度变化.     

四川地区精液常规分析现状的调查

目的了解四川地区精液分析的现状,为该地区实现精液分析标准化和进行质量控制提供参考。方法设计精液分析调查表,包含27个问题,其中包括3个关于医院概况的问题,5个关于实验室精液分析人员数量及水平的问题,13个关于精液分析方法及标准化操作的问题,6个关于精液分析质量控制的问题。该调查表由各实验室从事精液分析相关的专业人员通过扫描微信二维码后现场在线回答问题。该地区内共回收25家实验室的精液分析调查表。结果调查显示,68%(17/25)的实验室每日平均精液标本不超过10例,专门从事精液分析的技术人员较少且未进行规范化的培训。精液分析最基本的检测项目黏稠度、外观、液化也有少数实验室未进行检测。44%(11/25)的实验室精液体积使用肉眼观察法。对于精液浓度和活力检测,72%(18/25)的实验室使用普通显微镜检测,44%(11/25)的实验室使用计算机辅助精子分析系统(CASA),48%(12/25)的实验室计数板使用Makler计数板。抗精子抗体检测使用最多的方法为酶联免疫吸附测定(ELISA)。精子形态学染色、存活率、精液白细胞评估超过一半实验室未开展。绝大多数实验室生精细胞评估未开展。在参与调查的实验室中只有极少数实验室开展室内质量控制,无一家实验室参加室间质量评价。结论四川省大部分实验室精液分析还面临很多问题,许多实验室还不足够重视精液分析质量,没有意识到精液分析结果准确的重要性。     

4项目混合酶联免疫吸附试验室内质控品的应用探讨

目的探讨4项混合酶联免疫吸附试验(ELISA)质控品的应用可行性及优势。方法 ELISA每板加入一孔室内质控品,对4项混合质控品与单项浓度质控品检测的结果进行比较和分析,以选择更适合该实验室的质控品类别。结果 4项混合质控品的每个项目检测结果变异系数(CV)值浮动范围均低于单项浓度质控品检测的CV值浮动范围,4项混合质控品比单项浓度质控品检测的结果更稳定。结论选择4项混合质控品更适合该实验室血液筛查4项的室内质量控制。     

精子形态和精子活力分析在男性不育诊断中的应用

目的 探讨精子活力和精子形态分析的关系,两者联合检测在男性不育诊断中的应用价值.方法 采用Diff-Quik精子快速染色法对245例男性不育症患者进行精子形态分析和精液常规分析,分析其精子活力、正常精子百分率和畸形精子症百分率,并与对照组进行比较.结果 男性不育患者形态正常精子百分率明显低于对照组;精子活力正常的男性不育患者中,畸形精子症的发生率很高(占35.2%).结论 精子形态是影响男性生育力的重要因素,精液常规和精子形态联合分析,有利于提高男性不育或生育力低下的诊断.     

2009～2010年广西临床肿瘤标志物检验室间质量评价结果分析

目的 通过开展肿瘤标志物检验室间质量评价,提高广西临床肿瘤标志物检验质量,实现实验室间检验结果可比.方法 分析2009～2010年肿瘤标志物检验室间质量评价结果,比较不同方法学、不同检测系统组结果的差异.结果 ①各方法学组的CV值从小到大依次为电化学发光＜微粒子酶免疫分析＜化学发光＜时间分辨荧光免疫分析＜放射免疫分析;②进口检测系统组内变异系数(CV)较满意,CV值在3.71％～13.05％;国产检测系统组内CV值不够满意,CV值在16.92％～54.38％;③各批号不同检测系统靶值差距很大,不同检测系统间结果可比性差;④项目年度合格率较低,2009年、2010年度各项目合格率分别为52.63％～69.05％和30.43％～61.02％.结论 我区临床肿瘤标志物检验总体质量不高,实验室应选择符合临床需要的仪器设备,使用优质的试剂和室内质控品,做好室内质量控制工作,提高肿瘤标志物检验质量,实现实验室间检验结果的可比.     

对精液分析的规范化和质量控制探讨

目的:建立一种规范化和可行的精液分析质量控制方法.方法:每日用质控珠对计算机辅助精液分析(computer-aided semen analysis,CASA)进行密度质控;每周随机抽取实验室1% ～ 5%的样本进行重复精子密度测定﹑活力评估及形态学分类;每月分析D级精子百分率的月均值.结果:每日质控珠密度、D级精子百分率的月均值均在控,每周随机标本精子密度和活力的差异为随机误差,正常精子形态计数的质控中有一个结果超出2.5个标准误.结论:实验室应定期采用规范的质量控制对CASA和技术员进行评估,有效的质量控制才能保证报告的准确性.     

计算机辅助精子分析用精液样本的稀释条件及标准化研究*

摘要:目的探讨计 算机辅助精子分析( CASA)系统检测高浓度精液样本的稀释条件及标准。方法当精子浓度<50x10*/mL时不稀释;当≥50x10*/mL时,按1:[n/ (50x10*)]的比例[n为精子浓度,n/(50x10*)向下取整]用生理盐水稀释至50x 10/mL 以下。采用CASA系统和10 μm深度一次性计数板检测精液样本,分为未稀释组(组1:精子浓度<50x 10/mL) .50x 10*/mL≤精子浓度< 100x 10*/mL组(组2)、精子浓度≥100x 10*/mL组(组3),稀释前后分析各组精子浓度、前向运动精子百分率 (PR)、非前向运动精子百分率(NP)精子活动率(PR+NP)和不活动精子百分率(IM)等,比较稀释前后结果的一致性。采用ROC曲线预测最佳稀释阈值。结果随着精子浓度的增加 ,稀释前后各参数差异逐渐增大。ROC曲线分析结果显示,分别用精子浓度、PR+NP、PR、NP、IM預測时,精液标本的最佳稀释阈值分别为133.05 x 10*/mL.101.75x 10*/ml.118.60x 10*/mL.90.90x10/m111.83x10*/mL.结合高浓度精液样本未稀释检测时对精子浓度和NP的影响最大,确定最佳稀释固值为125.08x10/ml。结论建议 当精子浓度>125x 10/mL时,应对精液样本进行生理盐水稀释。     

不同方法学及实验室间精子密度检测结果比较

目的：分析清华同方计算机辅助精液分析（CASA ）系统与血细胞计数板法精子密度检测结果的一致性,以及不同实验室检测结果的一致性。方法选择2013年4～7月于本院接受精子密度检测的男性受试者100例,由本院检验科进行CASA 和血细胞计数板法精子密度检测,同时由沈阳市生殖医学中心精液检测中心进行CASA精子密度检测,分析不同方法及不同实验室的检测结果。结果血细胞计数板法、CASA（本院检验科）、CA-SA （沈阳市生殖医学中心精液检测中心）精子密度检测结果分别为（101．52±75．56）、（104．45±73．57）、（101．60±73．71）·10^9/L ,不同方法及不同实验室检测结果比较差异均无统计学意义（ P＞0．05）。不同方法检测结果相关系数为0．944。结论 CASA检测精子密度具有较好的结果准确性和一致性,适用于精子密度检测。     

湖南地区凝血常规指标检测准确性的研究和探讨

目的：调查分析2002～2006年度湖南地区临床实验室凝血指标PT、PT-INR、APTT、FIB检测结果的准确性并探讨影响实验室间可比性的因素。方法：通过每年1次或2次定期向全省参加室间质量评价活动的临床血液学实验室寄发质控样本,并对回报的数据进行整理和统计分析,作出实验室检验水平的评价。结果：全省实验室间PT、PT-INR、APTT、FIB检测结果的CV值尽管有逐渐下降的趋势,但室间变异仍相当高。同一批号样本凝血活酶检测结果的PT-INR的CV值明显大于PT的CV值。异常浓度水平样本的CV值明显高于正常浓度水平样本。APTT、FIB检测结果的合格率有明显上升趋势,但PT、PT-INR异常浓度水平的合格率基本没有改变,仍在较低水平（39．86％和45．73％）。结论：凝血活酶试剂选用不合适、敏感度指数（ISI）值标定的不准确、INR计算的不正确以及室内质控开展的广度及频度不够是造成湖南省临床实验室室间凝血指标检测不准确及室间变异大的原因。     

不育男性精浆果糖含量与精子参数的关系

目的:探讨不育男性精浆果糖含量与精子密度、活力及形态的关系.方法:分析260例不育男性患者(不育组)、90例正常生育后男性(生育组)的精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精子密度、活力参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,精浆果糖含量采用分光光度比色法测定.结果:不育组精浆果糖含量显著低于生育组(P<0.01);精浆果糖含量异常组精子密度显著高于果糖含量正常组,两组比较差异有显著性(P<0.05),而精子活力、精子形态与果糖含量正常组相比较,差异无显著性(P>0.05);精浆果糖与精子密度有显著负相关性(r=-0.17,P<0.01),而精子活力、精子形态与精浆果糖含量之间无显著相关性.结论:精浆果糖含量与精子密度关系密切,但与精子活力和形态没有显著关系.     

广西地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症检测实验室室间质量评价分析

目的分析评价广西地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的实验室检测情况,以提高G6PD检测质量。方法 2015年3月和10月向广西地区197家开展G6PD检测的实验室发放两批冻干品和新鲜血质控品,分别用于定量与定性试剂检测。所有数据通过Clinet EQA网络回报,并按照规定格式上报定量结果,根据各实验室建立的参考范围上报定性结果及方法学、试剂、仪器等相关信息。按照试剂分组,采用Clinet EQA程序、Microsoft Excel 2007软件对各参评实验室检测结果进行统计分析。结果目前该地区G6PD定量试剂盒检测内容、检测单位及同种方法学的参考范围不一致。定量试剂检测G6PD缺乏质控品及正常质控品符合率均为100.0%,定性试剂检测缺乏质控品平均符合率为77.1%。各定量试剂组检测缺乏质控品变异系数(CV)较大,平均CV为17.06%,检测正常质控品CV较小,平均CV为10.10%。第2次室间质量评价各试剂组平均CV(10.81%)均低于第1次(14.89%)。结论通过参加广西地区G6PD室间质量评价计划,能帮助实验室减少误差、改进质量,更好地为G6PD缺乏症高发区的临床诊断服务。     

精子凋亡与精子密度、活力、形态关系探讨

目的 探讨精子凋亡与精子密度、活力、形态关系。方法 分析69例男性不育患者精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精液参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果 精子凋亡率与精子密度之间没有显著相关性（P〉0.05）,精子凋亡率与精子活力、正常形态精子百分率之间有显著负相关性（P〈0.01,P〈0.05）;活力异常组精子凋亡率高于活力正常组,两组比较差异有显著性（P〈0.05）;严格标准下,形态异常组精子凋亡率高于形态正常组,两组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论 精子凋亡率与精子活力和正常形态精子有相关性,精子凋亡率增加可能是弱精子症和畸形精子症患者不育的原因之一。     

精子形态与男性不育关系的研究

目的比较正常男性与不育症患者精液的检测指标,探讨男性不育与精子形态以及功能之间的关联性。方法收集215例男性不育患者的精液(实验组)和100例健康已生育男性的精液(健康对照组),分别检测2组精液的精子形态以及精子功能。检测项目包括精液的颜色、精液量、酸碱度、液化时间、精子数量、显微镜观察精子形态以及精子的活动度。结果实验组和健康对照组比较,精液颜色、精液量、液化时间以及酸碱度差异无统计学意义(P0.05)。但在精子活力方面,实验组精子头部、体部以及尾部畸形的比例均显著高于健康对照组(20.8%和9.5%;15.7%和7.4%;27.3%和11.6%),差异有统计学意义(P0.05)。实验组A级和A+B级精子活力(13.1±5.21)%,(27.5±4.86)%,明显低于健康对照组(33.5±5.34)%,(62.4±4.57)%,差异有统计学意义(P0.05)。结论精子的形态和活力是影响男性不育的重要原因。     

精子质量与形态学分析及其关系

目的:探讨精子质量与形态学的临床应用价值及其关系.方法:248份精液标本按WHO标准进行精液常规分析,应用计算机辅助精液分析(CASA)分析精子密度、活力、活率以及动态参数:采用WHO推荐的DiffQuik快速染色方法对精子形态进行染色;采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果:248份精子质量分析中,精子活力不足占74.6%,精子活力正常占25.4%,少精症占5.6%,少弱精症占4.8%,正常精液占24.6%;248份精子形态学分析中,形态正常精液占73.4%,畸形精子症占26.6%.精子活力和活率与形态正常精子百分率呈显著性正相关(r=0.52,r=0.53,P＜0.01);各运动参数和精子密度也与形态正常精子百分率呈显著性正相关(P＜0.01).精子活力正常组形态正常精子百分率明显高于精子活力低下组(P＜0.01).结论:精子活力不足和畸形精子症是导致男性不育的主要原因,精子形态与精子活力、活率、密度和运动参数有密切关系,精子质量和形态学分析在临床男性不育的诊断中具有重要作用.     

现场调查EQA质控品选择及靶值确定的探讨

目的确认使用国际知名厂家定值质控品进行现场调查EQA（External Quality Assessment）及靶值确定的可行性，对地市级特剐是各个医院检验科设备、技术、人员素质相差太大的地区尤有重要指导意义。结果国际知名厂家定值质控品的给定靶值与参加卫生部或省临床检验中心室间质量控制连续多次获得优秀成绩的24家单位（包括两家参比实验室）所测结果的靶值相比对，都相接近；不同检测系统检测人血清与质控品各调查项目的统计结果表明：人血清的CV与质控品的CV均接近；全市近40家单位用相同方法检测同一批号质控品的结果与此24家单位检测同一批号质控品结果相接近；且后者比前者更接近于厂家的定值；而CV值前者却明显大于后者且有很大的差别；依CLIA’88标准使用厂家定值为靶值及使用优秀实验室测定结果均值为靶值对优秀实验室来说合格率几乎相同；而使用所有参评实验室的结果均值作为靶值对优秀实验室来说合格率相对降低，而对所有参评实验室来说合格率相对偏高。结论国际知名厂家定值质控品与人的混合血清具有互通性；使用国际知名厂家定值质控品进行现场调查EQA是可行的；使用参加现场调查的优秀实验室（包括参比实验室）所测定的数据的统计学结果的均值比使用所有参加现场调查的实验室所测定的数据的统计学结果的均值来确定靶值准确性更高些；国际知名厂家定值质控血清本身定值可作为重要参考；小量现场调查可以直接作为靶值使用。     

男性不育患者精液pH值与精液参数相关性分析

目的探讨不育患者精液pH值与精液参数的相关性,为男性不育症的诊断与治疗提供临床依据。方法将2014年4~9月就诊的122例男性不育患者予pH计检测精液pH值、计算机辅助的精液分析系统(CASA)分析精液常规参数、流式细胞仪分析精子DNA碎片指数(DFI)、ELISA检测精浆弹性蛋白酶,分析精液pH值与精液参数、DFI及精浆弹性蛋白酶等的相关性。结果不育患者精液pH值5.5~8.2,精液pH值与精子浓度呈正相关(r=0.244,P0.05),与精浆弹性蛋白酶也呈正相关(r=0.190,P0.05),而与精液量、前向运动精子百分率、精子活动率、DFI及正常形态精子百分率均无相关性(P均0.05)。结论不育患者精液pH值和精子浓度及精浆弹性蛋白酶均呈相关性,提示精液pH值的准确测定可能对男性不育的诊断和治疗有一定临床意义。