同种异体血液输注对创伤性失血患者血浆外泌体miRNA表达的影响

目的 通过观察异体输血对创伤性失血患者外泌体miRNA的差异表达,筛选出差异表达的外泌体miRNA,为后续靶基因和通路的研究奠定基础。方法 分别采集外伤患者在输异体血前和输血后外周血标本各3例,通过对血浆标本分离收获后的外泌体miRNA高通量测序,分析比较输血前后两组外泌体miRNA差异表达情况,同时以荧光定量PCR法进一步验证差异基因表达情况。结果 通过高通量测序分析,共测序到1570个miRNA存在差异表达,实验组比较对照组,上调的有1189个,下调的有381个,以倍数变化Foldchange≥2.0,P-value≤0.05作为差异miRNA筛选的阈值,筛选出显著变化的差异表达miRNA有14个,其中显著上调的miRNA有5个,分别为miR-499a-5p、miR-200a-3p、miR-372-3p、miR-novelchr12＿5583、miR-novel-chr22＿24253;显著下调的miRNA有9个,分别为miR-6852-5p、miR-452-5p、miR-1287-5p、miR-204-3p、miR-375-3p、miR-502-3p、miR-345-5p、miR...     

非酒精性脂肪肝患者血清脂类变化

目的探讨非酒精性脂肪肝患者血脂变化的特点。方法检测81例25～65岁非酒精性脂肪肝患者的血脂水平并与健康对照组相比较,进行配对t检验。结果非酒精性脂肪肝患者血清三酰甘油（TG）、血清总胆固醇（Tch）、载脂蛋白B（apoB）明显高于对照组,差异有统计学意义,而高密度脂蛋白（HDL）、载脂蛋白A1（apoA1）、脂蛋白Lp（a）两组间差异无统计学意义。结论非酒精性脂肪肝与血清三酰甘油、血清总胆固醇、载脂蛋白B有密切关系,与高密度脂蛋白、载脂蛋白A1、脂蛋白（a）关系不明显。     

胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。     

外泌体miRNA与心血管疾病研究进展

心血管疾病主要发生在中老年人群中,它的发生率和病死率较高,目前中国每年约300万的人死于心血管疾病[1]。因而,对疾病做出早期诊断,有利于对患者进行早期治疗,促进患者早期康复。同时,了解疾病的病理过程和发病机制,有利于对疾病的进展以及预后作出判断。     

背根神经节持续受压大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNAs及其功能分析

目的：探究背根神经节持续受压致神经病理性疼痛大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNAs及其功能。方法：采用超速离心法提取并纯化健康对照大鼠及背根神经节持续受压大鼠血浆外泌体,通过透射电镜获取外泌体形态,采用Western Blot法进行外泌体标记蛋白鉴定;提取外泌体总RNA,Illumina HiSeq高通量测序检测miRNAs表达谱;生物信息学分析背根神经节持续受压后外泌体miRNAs的差异表达,预测其靶基因并分析其靶基因的潜在功能。结果：透射电镜、纳米粒径分析及Western Blot的结果均显示外泌体提取成功,电镜下形态为典型茶托样,平均粒径为136.2±1.56nm,标记蛋白TSG101、CD9均为阳性;高通量测序分析显示,实验组有152个血浆外泌体来源miRNAs表达显著改变,其中104个表达显著上调,48个表达显著下调。GO分析显示靶基因功能富集细胞器、细胞质上,与离子结合、ATP结合、催化活性等功能相关,参与系统的发展、细胞器物质代谢过程等。差异表达miRNA靶基因的KEGG通路分类统计显示在细胞间紧密连接、RAP1信号通路、PI3K-AKt信号通路及轴突导向、突触囊泡周期等...     

外泌体miRNA在产前诊断中的研究进展

外泌体是由活细胞分泌的一种微小囊泡,包含着蛋白质,mRNA和microRNA等多种生物活性物质,通过调控受体细胞各种生理病理功能,参与一系列的生物过程,如参与细胞免疫应答、炎症反应、细胞凋亡、指导肿瘤细胞生长发育等。外泌体miRNA作为外泌体生物活性物质在疾病的早期诊断、临床治疗及其预后发挥着重要作用,其在各领域的应用也成为研究热点。产前诊断主要针对胎儿出生前,对胎儿是否患有某种疾病的诊断,从而防止严重遗传病,先天性疾病或智力障碍患儿的出生。外泌体miRNA存在于血清和多种细胞外液中,也存在于羊水、胎盘和乳汁中。外泌体miRNA在产期诊断中的临床作用也引起越来越多研究者的关注。本文就外泌体miRNA在产前诊断中的应用前景做一综述。     

血清外泌体源性长链非编码RNA H19在骨肉瘤中的表达及其临床意义

摘要:目的?检测骨肉瘤患者血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA) H19的表达水平，分析其与患者临床病理参数的关系，探讨其在骨肉瘤诊断中的价值。方法?采用实时荧光定量RT-PCR分别检测46例骨肉瘤患者及50例体检健康者血清外泌体LncRNA H19的表达水平；采用ELISA法检测各组血清中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子2(IGF-2)的表达水平；分析血清外泌体LncRNA H19表达水平与骨肉瘤患者临床病理参数的相关性；绘制ROC曲线，并分析血清外泌体LncRNA H19对骨肉瘤的诊断价值。结果?血清外泌体LncRNA H19的表达水平与骨肉瘤患者的病程及是否发生远处转移相关，差异有统计学意义(P均<0.01)，而与患者的性别、年龄、居住地及发病部位均无显著相关性(P均>0.05)；骨肉瘤患者血清外泌体中LncRNA H19的表达水平显著高于健康人对照组(P<0.01)；血清外泌体LncRNA H19诊断骨肉瘤的ROC曲线下面积(AUCROC) 为 0.881，敏感性为87.2%，特异性为75.6%，均高于其余各单项指标组。结论?外泌体高表达的LncRNA H19可能成为骨肉瘤诊断、靶点的个体化治疗及疗效监测的生物学标志物。     

外泌体miRNA作为肿瘤微环境调节剂的研究进展

在癌症的发展过程中,外泌体常常发挥着重要的作用.肿瘤微环境中,各类细胞均能够释放外泌体,并通过其中生物活性分子的传递来调节肿瘤微环境.外泌体中的微小RNA(miRNA)通过细胞对外泌体的摄取而发挥各种作用,如影响肿瘤微环境中的免疫细胞,调节癌细胞的增殖及凋亡,通过控制上皮-间质转化过程和血管生成在肿瘤转移中发挥调节作用...     

非酒精性脂肪肝患者血清游离脂肪酸与胰岛素抵抗的关系

目的研究非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者血清游离脂肪酸(FFA)水平及其与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法测定118例NAFLD患者(NAFLD组)及103名健康体检者(正常对照组)的血清FFA并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 NAFLD组血清FFA浓度为(752.50±101.42)μmol/L,HOMA-IR为1.48±0.42,均高于正常对照组[(441.75±95.64)μmol/L,0.67±0.33](P<0.01)。NAFLD组FFA与HOMA-IR呈正相关(r=0.325,P<0.05)。结论 FFA与NAFLD密切相关,FFA致NAFLD可能通过IR起作用。     

酒精性与非酒精性脂肪肝患者生化指标的观察

目的探讨酒精性脂肪肝与非酒精性脂肪肝特异性的鉴别指标,以指导临床诊断。方法对126例酒精性脂肪肝患者及182例非酒精性脂肪肝患者的血清酶、血脂、尿酸、血糖、血细胞比容等指标进行测定及分析。结果酒精性脂肪肝组丙氨酸转氨酶(AST)、门冬氨酸转氨酶/丙氨酸转氨酶(AST/ALT≥2)、谷氨酰转肽酶(GGT)、尿酸(UA)异常的百分数分别为76.1%、36.5%、44.4%、62.7%,非酒精性脂肪肝组分别为30.2%、17.0%、19.2%、29.6%,两组相比差异有统计学意义。结论AST、AST/ALT≥2、GGT、UA等指标可能是鉴别酒精性脂肪肝与非酒精性脂肪肝有效的临床辅助诊断指标。     

非酒精性脂肪肝患者血清瘦素和胰岛素抵抗水平的研究

目的了解非酒精性脂肪肝患者血清瘦素、胰岛素和胰岛素抵抗的水平。方法选择非酒精性脂肪肝患者40例和健康对照组40例,测定所有研究对象的空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（Inso）、血脂、血清瘦素（Leptin）、身高、体质量,计算其体质量指数和胰岛素抵抗（HOMA—IR）。结果（1）非酒精性脂肪肝组Leptin和HOMA—IR均显著高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;（2）通过多元回归相关分析发现,非酒精性脂肪肝与Leptin、Inso及HOMA—IR均呈独立正相关。结论高Leptin、高Inso和HOMA—IR在非酒精性脂肪肝发病中起重要作用。     

外泌体miRNAs在前列腺癌细胞激素非依赖转化中的差异表达分析

目的研究前列腺癌细胞激素非依赖转化中外泌体小RNAs(miRNAs)的差异表达,以期进一步阐释激素非依赖前列腺癌的发生机制,为其治疗寻找新的靶点。方法选取激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP及激素非依赖性前列腺癌细胞LNCaP-AI+F(去雄激素和氟他胺联合诱导)作为研究对象,采用Illumina HiSeq^TM 2500对两组细胞外泌体miRNAs进行高通量测序,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证组间差异表达的外泌体miRNAs,t检验分析差异是否具有统计学意义。结果通过分析高通量测序结果,筛选出miR-7-5p、let-7a-5p、miR-375、miR-423-3p、miR-378a-3p和miR-92a-3p等13个在前列腺癌激素非依赖细胞外泌体中表达上调的分子,其中miR-7-5p经qRT-PCR验证上调19.52倍(t=9.857,P=0.001)。结论差异表达外泌体miRNAs可能预示激素非依赖前列腺癌的发生,并进一步调控激素非依赖前列腺癌的发展过程。     

非酒精性脂肪肝患者血清抵抗素与胰岛素抵抗关系的探讨

目的 探讨非酒精性脂肪肝患者血清抵抗素水平及其与肥胖、胰岛素敏感性、血糖、血脂的关系.方法 选择非酒精性脂肪肝患者64例,正常对照30例,观察一般情况,并测定血清抵抗素、空腹血糖、空腹血胰岛素和血脂等指标,计算胰岛素敏感指数.结果 非酒精性脂肪肝患者血清抵抗素水平高于正常对照(非酒精性脂肪肝组(24.1±7.2) μg/L,正常对照(14.3±5.6) μg/L,P＜0.05).相关分析显示抵抗素与体重指数、甘油三酯呈正相关关系,与胰岛素敏感指数呈负相关关系,而与血脂、血糖等指标无明显相关性.结论 在非酒精性脂肪肝的发病过程中,抵抗素可能参与了胰岛素抵抗.     

血清外泌体源性长链非编码RNA RP N2-4在胃癌中的表达及其筛查价值

目的探讨外泌体源性长链非编码RNA RPN2-4(lncRPN2-4)在胃癌患者血清中的表达及其筛查胃癌的价值。方法收集47例胃癌患者与32例行胃镜检查者血清标本;用试剂盒法分离外泌体,并提取RNA;粒径分析和透射电镜法鉴定外泌体;qRT-PCR法检测外泌体lncRPN2-4的表达水平;电化学发光法检测血清CEA、CA19-9与CA72-4的表达水平;利用ROC曲线评价其筛查胃癌的效能。结果与胃部良性疾病组[0.91(-2.98,6.92)]相比,胃癌组血清外泌体中lncRPN2-4的表达水平[3.78(-0.06,9.12)]明显降低(U=343,P0.01);LncRPN2-4的相对表达量与肿瘤分化程度(P=0.005)和淋巴结转移(P=0.033)有关; lncRPN2-4筛查胃癌时的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.772(95%CI:0.662～0.882,P0.01),当cut-off值为1.31时,其敏感性为87.2%,特异性为59.4%。结论血清外泌体来源的lncRPN2-4在胃癌患者中低表达,可能作为胃癌筛查的肿瘤标志物。     

电针对骶上脊髓损伤后大鼠神经源性膀胱及血清外泌体miRNA差异表达的影响

目的：观察电针对骶上脊髓损伤致尿潴留型神经源性膀胱大鼠的效果,并观察电针对血清外泌体miRNA差异表达的影响。方法：从48只成年雌性SD大鼠中随机抽取12只为假手术组,剩余36只大鼠进行T8椎体下脊髓完全横断手术造模,制备尿潴留型神经源性膀胱模型,将评估成模大鼠二次随机分为模型组与电针组,各12只。电针组从术后第19天开始干预,共10天。随后,各组行尿流动力学检测后取膀胱组织行HE染色,应用miRNA-seq技术筛选三组血清外泌体中共同差异表达miRNA后,对其靶基因进行生信分析,并行qRT-PCR验证。结果：与假手术组比,肉眼观下的模型组大鼠膀胱明显肥大,电针组较模型组减轻;与假手术组比,模型组大鼠漏尿点压、灌注时间、膀胱最大容量、膀胱最大压力显著升高（P<0.01）,而电针组较模型组显著降低（P<0.01）;HE染色见假手术组膀胱组织基本正常,模型组膀胱病理改变明显,电针组病理改变部分减轻;筛选出三组共同差异表达miRNA共11个,6个上调,5个下调,电针治疗作用主要富集在调节细胞代谢、细胞通讯与信号转导、RNA调控、神经发育及损伤等方面,并与轴突导向、肌动蛋白细胞骨架...     

尿液外泌体miRNA与肾脏疾病关系的研究进展

外泌体是细胞分泌的细胞外囊泡结构,可通过其携带的miRNA、蛋白质、脂质等活性分子来调节受体细胞生物学活性,在细胞间的通讯交流过程中发挥重要作用。最新研究表明,多种肾脏疾病患者尿液外泌体miRNA含量均发生改变,其变化可反映肾功能,且具有作为肾脏疾病分子标志物的潜能。该文就尿液外泌体miRNA在肾脏疾病的水平及其诊断价值作一综述。     

非酒精性脂肪肝动物模型建立及相关实验研究

目的 建立不同程度家兔非酒精性脂肪肝模型,观察血生化指标及CT与非酒精性脂肪肝程度的关系.方法 选用32只新西兰家兔,随机分为对照组(n=8)和模型组三组(每组n=8),采用高腊高糖饲料建立不同程度脂肪肝模型,分别于4,6,8 w行家兔血清TG,TC,AST,ALT及CT检查,并进行病理学检查.结果 高脂高糖饲料哏养4 w后可形成轻度的脂肪肝并出现血脂的升高,血清TG和TC水平及肝/竖眷肌密度比率存在组间差异,血清TG和TC与肝/竖眷肌密度比率呈负相关.结论 血生化、CT检查对脂肪肝有一定的诊断价值.     

外泌体源性miRNA在子痫前期发病机制中的研究进展

子痫前期作为一种妊娠期特有的高血压综合征,严重威胁母婴安全,但目前尚无准确的生物标志物作为诊断依据且其病因和发病机制尚未完全阐明。外泌体是广泛存在于体液中的细胞外囊泡,携带多种蛋白质、脂质和核酸等生物活性分子,具有多种生物学功能,其所携带的miRNA具有特异性、多元性、抗降解、能被稳定检出的特点。研究发现子痫前期患者胎盘组织分泌的外泌体中有多种差异表达的miRNA,表明其可能参与了子痫前期的发生发展,可能作为子痫前期预测的潜在靶点。本文对外泌体源性miRNA的结构、功能及其与子痫前期发病机制的研究进展进行综述,旨在为子痫前期早期预测及诊治提供新思路。     

非酒精性脂肪肝肝纤维化评分与脂肪肝及胰岛素抵抗的相关性研究

目的分析非酒精性脂肪肝肝纤维化评分（NAFLDFS）与非酒精性脂肪肝（NAFLD）及胰岛素抵抗（瓜）的相关性。方法以来自江苏徐州地区的2622例健康体检人群为研究对象,检测受试者的血清谷丙转氨酶（“r）,谷草转氨酶（AsT）,血小板计数（PLT）,血清白蛋白（ALB）,空腹血糖（FBG）,餐后2h血糖（PBG）,空腹胰岛素（Fins）等相关生化指标,计算出NAFLDFS及胰岛素抵抗指数（HOMA2-IR）,将研究对象按非酒精性脂肪肝纤维化评分的低诊断阈值（～1．455）及高诊断阈值（0．676）分成三组,A1组：NAFLDFS〈-1．455;A2组：0．676≥NAFLDFS≥-1．455和A3组NAFLDFS〉0．676。Pearson分析肝纤维化评分与各指标相关性;运用二元Logistic回归计算NAFLDFS与NAFLD、IR的风险性。结果随着NAFLDFS值增高,年龄（Age）、体重（Weight）、体重指数（BMI）、腰围（wc）、臀围（Hip）、糖化血红蛋白（HbAlc）、颈围（NC）、FBG、PBG、Fins、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）水平逐渐增高,且三组问的差异有统计学意义;而ALT、AST、PLT、ALB、高密度脂蛋白（HDL．c）随着NAFLDFS值的增高而减小。Pearson分析显示Age、NC、WC、Hip、Weight、BMI、HbAlc、FBG、PBG、PLT与NAFLDFS正相关。随着NAFLDFS值的增加,NAFLD与取的患病风险（OR）也增加。NAFLD的患病风险由1．22（OR=1．22）增加到1．79（OR=1．79）：IR的患病风险由1．13（OR=1．13）增加到1．91（OR=1．91）;进一步校正性别及年龄后,NAFLD的患病风险由1．15（OR=1．15）增加到1．53（OR=1．53）;IR的患病风险由1．15（OR=1．15）增加到2．02（OR=2．02）。结论NAFLDFS与NAFLDF及瓜密切相关,在临床上可将其作为简易评价NAFLD及IR的指标。