随机尿游离型NMN、MN HPLC-ED检测方法的建立和临床应用

目的 建立检测随机尿游离型甲氧基去甲肾上腺素(NMN)、甲氧基肾上腺素(MN)的高效液相色谱-电化学(HPLC-ED)方法,并探讨其临床应用价值.方法 完善样本处理流程及色谱条件,建立检测随机尿游离型NMN、MN的HPLC-ED法.采用HPLC-ED法检测35例嗜铬细胞瘤患者(嗜铬细胞瘤组)、70例原发性高血压患者(高...     

酶联免疫法检测间甲肾上腺素类物质在嗜铬细胞瘤诊断中的应用

目的：探讨间甲肾上腺素类物质（MNs）用酶联免疫法（ELISA）检测在嗜铬细胞瘤诊断中的价值。方法检测疑似嗜铬细胞瘤患者63例及健康人30例（作对照）血MNs,包括甲氧基肾上腺素（NMN）、甲氧基去甲肾上腺素（MN）水平,嗜铬细胞瘤以术后病理诊断为标准。结果63例临床上疑为嗜铬细胞瘤患者中32例经组织学诊断为嗜铬细胞瘤,其中ELISA检测NMN的特异性95%、敏感性91%,MN特异性92%、敏感性72%,NMN和MN二者合并检测特异性97%、敏感性93%。结论血浆游离MNs是诊断嗜铬细胞瘤的有效生化指标,ELISA法作为一种便捷可靠的检测方法,在诊断嗜铬细胞瘤中有着较高的特异性和敏感性。     

CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测方法的建立

目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价.方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统.观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标.测定卵巢癌患者以及卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,与化学发光免疫检测结果对比.结果:BA-ELISA方法灵敏度为3.18 U/L,与CEA、PSA等交叉反应率低;高低浓度样品平均回收率分别为107.11%、99.96%,批内和批间变异分别为7.97%、8.04%,稳定性好.本研究与化学发光免疫检测检出结果差异无统计学意义,检测卵巢癌患者血清CA125水平,回归方程为y＝-6.830 + 1.014x,r＝0.993.检测卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,回归方程为y＝1.936 + 0.937x,r＝0.986.结论:BA-ELISA检测方法的建立在诊断卵巢癌等方面灵敏度高、特异性强,操作简便,无需昂贵仪器,适合广泛应用.     

结核分枝杆菌特异性γ-干扰素化学发光免疫检测体系的建立

目的 建立一种用于便携式检测结核分枝杆菌特异性γ-干扰素的化学发光免疫检测体系,为下一步研制便携式检测试剂盒奠定基础。方法 利用生物素-链霉亲和素系统偶联磁珠和抗体,利用酰胺键结合方式偶联吖啶酯和标记抗体。采用正交实验法,优化结核分枝杆菌特异性γ-干扰素检测试剂盒所需的吖啶酯标记检测抗体及磁珠偶联包被抗体的方法、缓冲液配方、封闭液配方等条件。最后将建立的检测体系与商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)参照试剂盒进行比较。结果 建立的检测体系与商品化ELISA参照试剂盒阳性符合率为99.20%,阴性符合率为98.91%,总符合率为99.10%,Kappa值为0.982,最低检出限0.66 pg/mL。结论 建立的便携式结核分枝杆菌特异性γ-干扰素化学发光免疫检测体系与ELISA参照试剂盒相比具有类似的检测能力,可用于临床辅助诊断。     

血浆游离甲氧肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素正常的嗜铬细胞瘤/副神经节瘤患者的临床特点

目的进一步提高血浆游离甲氧基肾上腺素(MN)、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)正常的嗜铬细胞瘤(Pheos)和副神经节瘤(PGLs)患者的诊断水平。方法本研究组回顾性分析了本中心2004年到2012年电子数据库中病理确认的Pheos和PGLs(PPGLs)患者的临床症状与体征、内分泌激素水平、遗传综合征特征、增强CT表现和核素显像特点。根据血浆游离MNs的水平将患者分为MNs正常组与MNs增高组,比较两组患者的上述临床特点。结果病理证实的PPGLs患者共189例,其中MNs正常组24例,增高组165例。MNs正常组患者高血压、阵发性高血压、阵发性的头痛、心悸、大汗三联征症状≥2项、体重下降发生率明显低于增高组(P<0.05);MNs正常组患者24 h尿肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺的水平相对增高组明显降低,尤其24 h尿去甲肾上腺素仅是后者平均水平的1/6(P=0.001)。虽然增强CT上MNs正常组PPGLs肿块明显不均匀强化发生率较增高组低14.8%(P=0.101),但是它仍占该组PPGLs肿块CT增强形式的主要部分;两组中患者肿瘤增强CT上所有增强形式的发生率无明显统计学差异(P>0.05)。核素显像对两种肿瘤的发现率相似(P=1.000)。结论血浆游离MNs正常的PPGLs患者的临床症状与体征不典型,儿茶酚胺水平降低;增强CT上肿块明显不均匀强化的特征以及核素扫描阳性比内分泌激素检测更有助于血浆游离MNs正常PPGLs的诊断。     

降钙素原生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附分析法的建立

目的建立生物素一链霉亲和素酶联免疫吸附分析（biotin．streptavidinamplifiedELISA,BA．ELISA）法半定量检测人血清中降钙素原含量。方法通过双抗体夹心法,结合生物素一链霉亲和素系统的放大作用,建立降钙素原的半定量检测方法。并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果该方法的最低检测限为0．12mg／mE,线性范围为0．12～20ng／mL,回收率为98．59％。分析内和分析间变异系数分别为4．9％～16．8％和7．1％～14．9％。与降钙素原结构类似物及血清中常见的干扰物质特异性良好。通过对73例血清样本进行检测分析,当阈值为0．5ng／mL时,敏感性和特异性分别为100％和96．0％。结论本研究建立的降钙素原生物素一链霉亲和素酶联免疫吸附分析法具有灵敏、简便、准确等特点,具有良好的应用前景。     

血浆游离甲氧基肾上腺素水平在诊断嗜铬细胞瘤中的价值

目的 探讨酶联免疫分析法(EIA)检测血浆游离甲氧基肾上腺素[3-甲氧基肾上腺素(MN)和3-甲氧基去甲肾上腺素(NM)]诊断嗜铬细胞瘤的价值.方法 病理确诊的30例嗜铬细胞瘤患者和51例高血压患者,用EIA检测血浆MN和NM,结合[3]I-间碘苄胍(MIBG)全身扫描结果进行分析比较.结果 嗜铬细胞瘤组30例患者全身扫描均呈阳性;高血压组中有15例接受全身扫描,结果均呈阴性;嗜铬细胞瘤组MN浓度的中位数为59.3 ng/L,高于高血压组(中位数为33.7 ng/L,Z=-2.440,P<0.05);2组NM浓度的中位数分别为652.0 ng/L和36.3 ng/L,显著高于高血压组(Z=-6.699,P<0.001);2项联合检测(任一或全部阳性)的敏感度、特异度和准确性分别为96.7%(29/30),86.3%(44/51)和90.1%(73/81),联合检测的准确性与全身扫描结果比较,差异无统计学意义(100.0%,P>0.05).结论 EIA法检测血浆游离甲氧基肾上腺素对嗜铬细胞瘤具有较高的诊断效能,有可能替代高压液相层析法而成为该病诊断的首选方法.     

人血清中总前列腺特异性抗原化学发光免疫分析法的建立

目的建立一种定量分析人血清中总前列腺特异性抗原（t—PSA）的化学发光免疫分析方法。方法采用生物素和碱性磷酸酶分别标记捕获抗体与检测抗体,与样本中的抗原形成免疫复合物,然后通过链霉亲和素与生物素的反应被链霉亲和素标记的磁微粒捕获,利用碱性磷酸酶与发光底物的反应建立了双单抗夹心法检测人血清中t—PSA的化学发光免疫分析方法。结果标准品对WHO96／670国际标准品进行溯源,同时检测血清样本,线性回归方程为y=0．9434X-0．1605,相关系数r=0．99。选择具有等摩尔分子反应性的单抗,对不同存在形式的PSA检测偏差在士3％以内。病人血清样本的测试结果与雅培architecti2000化学发光试剂盒检测结果显著相关,相关系数r=0．989。结论该方法具有较高的灵敏度和重复性,检测结果准确,提高了国产同类试剂的竞争力,同时比同类进口试剂成本低,适于临床检测和科研应用。     

生物素-亲和素ELISA技术检测H BeAg与抗H Be

生物素-亲和素系统(BAS)是一种新型生物反应放大系统,具有很高的灵敏度和特异性.我们参考有关文献建立了生物素-亲和素ELISA 检测技术,提高了检测HBeAg和抗HBe的灵敏度。     

间接包被ELISA法检测血清游离β-HCG

目的 研制生物素-亲合素间接包被ELISA法定量检测血清游离β-HCG试剂盒。 方法 用生物素化牛血清清蛋白和链霉亲合素包被微孔反应板,生物素化抗游离β-HCG抗体和酶标记抗游离β-HCG抗体检测游离β-HCG,评价试剂盒相关技术参数。 结果 本试剂盒具有较好的稳定性,灵敏度0.1 ng/ml,回收率95.9％~102.5％,批内CV 7.5％~11.1％,批间CV12.5%~18.1%,与FSH、TSH、LH和α-HCG的交叉反应率均<0.1％,检测范围0.1~500 ng/ml,与美国DRG公司试剂盒的相关系数r2=0.789 2,P<0.05。 结论 本方法研制的试剂盒灵敏度高,特异性好,操作方法简便,适于临床常规应用。     

Tiotidine and cimetidine--kinetics and dynamics

Tiotidine and cimetidine kinetics and dynamics were compared to assess mechanisms of the longer duration of effect of tiotidine in man. Both drugs has similar lag times for absorption. Tiotidine with a meal was more slowly absorbed than when fasting and was also more slowly absorbed than cimetidine with a meal. The elimination rates for both drugs did not differ; they were both approximately 2 to 3 hr. Oral doses of cimetidine achieved areas under the plasma concentration curve approximately three times that of tiotidine but these concentrations were only 1/10 as potent. The cimetidine concentration inducing 50% inhibition of food-stimulated gastric acid secretion was 0.41 +/- 0.04 whereas it was 0.04 +/- 0.003 microgram/ml for tiotidine. The effect of tiotidine lasted longer than that of cimetidine because the doses recommended for use in man resulted in higher concentrations in plasma relative to effective concentration than clinical doses of cimetidine.