VEGF对多发性骨髓瘤骨髓基质细胞分泌IL-6的影响

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）对多发性骨髓瘤患者骨髓基质细胞分泌白细胞介素6（IL-6）的影响,探讨多发性骨髓瘤（MM）的发病机制,为开发骨髓瘤新的治疗途径提供依据。方法 骨髓来源于18例骨髓瘤患者,并取8例缺铁性贫血患者的骨髓做正常对照组。常规分离培养骨髓基质细胞（BMSCs）,观察BMSCs生长情况,流式细胞仪检测BMSCs表型,取2-3代BMSCs进行实验,加入不同浓度外源性VEGF或作用不同时间,收集BMSCs上清液,以ELISA方法 检测IL-6浓度。结果 骨髓的基质细胞在体外成贴壁生长,为成纤维细胞形态,流式细胞仪检测其表型为CD54（＋）、CD33（-）、CD31（-）.骨髓瘤患者BMSCs分泌IL-6的结果 高于正常对照BMSCs,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。不同浓度重组VEGF作用于骨髓瘤患者BMSCs或VEGF作用不同时间,均有显著刺激BMSCs分泌IL-6增多,呈现剂量和时间依赖性,P〈0.05。结论 在多发性骨髓瘤中,VEGF除了可以促进骨髓肿瘤血管的新生,支持瘤细胞的浸润转移,还可以明显刺激骨髓基质细胞分泌IL-6,促进肿瘤生长,针对VEGF的相关治疗将成为治疗骨髓瘤的新途径。     

三氧化二砷对多发性骨髓瘤骨髓基质细胞增殖及分泌细胞因子的影响

为了探讨三氧化二砷（As2O3）对多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓基质细胞（BMSC）增殖及其分泌白细胞介素-6（IL-6）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）能力的影响，用体外培养MM患者骨髓的方法获得BMSC。BMSC和MM细胞株CZ-1单独或共同培养，给予不同浓度As2O3（1-20．0μmol／L）处理，用MTT法检测细胞活性，用ELISA法检测IL-6、VEGF的分泌水平。结果表明：As2O3对CZ-1细胞有生长抑制作用，48小时后细胞生长抑制50％的浓度（IC50）为2．3μmol／L，但对BMSC的生长无影响；MM患者BMSC高分泌IL-6、VEGF，经As2O3作用后BMSC分泌IL-6、VEGF降低，骨髓瘤细胞和BMSC相互作用导致的过量IL-6、VEGF分泌也可被As2O3抑制，其抑制程度与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）。结论：As2O3不能抑制BMSC的生长，但可以抑制其分泌IL-6及VEGF。     

白介素6与多发性骨髓瘤

新近研究表明,白介素6(IL-6)是多发性骨髓瘤(MM)细胞的主要生长因子。MM病人体内过多的IL-6主要由骨髓基质细胞的旁分泌产生。IL-6与瘤细胞膜IL-6受体结合,活化传导链gp130,促进瘤细胞增生。MM细胞gP130传导链及其后信号传导的蛋白质突变可能是导致恶性浆细胞分化阻滞的重要环节。抑制IL-6作用可能成为MM新的重要治疗方法。     

黄连素对多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨黄连素对多发性骨髓瘤细胞活性和凋亡的影响。方法:通过CCK-8试验检测不同浓度黄连素作用下多发性骨髓瘤U266细胞的增殖;ELISA试验检测不同浓度黄连素作用下U266分泌IL-6的情况;细胞凋亡试验检测不同浓度黄连素作用下U266骨髓瘤细胞凋亡行为变化;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)和扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察U266细胞的超微结构。结果:随着浓度(40~160μmol/L)的改变,黄连素以剂量和时间依赖的方式抑制U266细胞细胞增殖和IL-6分泌;黄连素以剂量依赖的方式诱导U266细胞G2/M期停滞和凋亡,80μmol/L黄连素处理后的U266细胞的超微结构发生凋亡的形态特征。结论:黄连素能抑制人多发性骨髓瘤细胞的活性,诱导骨髓瘤细胞G2/M期停滞并诱导细胞凋亡。     

RNAi沉默Notch1基因对多发性骨髓瘤细胞致瘤性的影响

目的:探讨RNAi沉默Notch1基因对多发性骨髓瘤细胞在NOD/SCID小鼠体内致瘤性的影响。方法:使用shRNA方法靶向沉默骨髓瘤RPMI8226细胞Notch1基因,建立NOD/SCID小鼠多发性骨髓瘤模型,观察Notch1基因沉默后骨髓瘤的成瘤速度、大小的变化;用ELISA法检测荷瘤小鼠血清中IL-6和VEGF水平变化。结果:Notch1-shRNA沉默Notch1基因后肿瘤细胞成瘤速度明显减慢,肿瘤体积缩小,与对照组比较差异显著。实验组小鼠血清中IL-6和VEGF水平与对照组比较明显降低(P0.05)。结论:靶向沉默Notch1基因可显著抑制骨髓瘤细胞的致瘤能力,其机制可能与Notch1基因沉默后瘤细胞分泌IL-6和VEGF的能力降低有关,Notch1基因沉默有可能成为治疗多发性骨髓瘤的新策略。     

重组人红细胞生成素对人多发性骨髓瘤患者铁调节蛋白Hepcidin mRNA表达的影响

本研究探讨人多发性骨髓瘤血清对肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞铁调节蛋白hepcidin表达的影响,及白介素-6(IL-6)单克隆抗体或重组人红细胞生成素(rhEPO)对其的抑制作用。在Hep-3b细胞培养液中按10%终浓度加入人多发性骨髓瘤患者血清,共培养后用逆转录聚合酶链式反应半定量方法检测Hep-3b细胞hepcidin mRNA的表达水平。在上述培养体系中,加入人IL-6单克隆抗体或rhEPO观察hepcidin mRNA表达的变化。结果表明,未治疗的多发性骨髓瘤组hepcidin mRNA表达量高于正常对照组及缺铁性贫血组,这种升高作用能被IL-6单克隆抗体或rhEPO完全抑制。对多发性骨髓瘤患者短期随访中,规律治疗能稳定血红蛋白,降低患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响。结论:未治疗的多发性骨髓瘤患者血清能促进肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞hepcidin表达,这种促进作用可被人IL-6单克隆抗体拮抗,提示IL-6可能导致Hep-3b细胞hepcidin表达量升高,从而造成慢性病性贫血(anemia of chronic disease,ACD)。这种促进作用也能被rhEPO抑制,提示rhEPO可能对ACD有治疗作用。在多发性骨髓瘤患者短期随访中,血红蛋白水平稳定,患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响减小,这表明治疗使病情稳定,改善了ACD。     

全反式维甲酸对人类多发性骨髓瘤OPM-2细胞系抗增殖作用的研究

观察了全反式维甲酸(ATRA)对人类多发性骨髓瘤(MM)OPM-2细胞系作用,~3H-TdR掺入法显示ATRA使S及G_2/M期细胞标记指数下降,提示G_1→S期细胞增殖受抑制。抑制程度与其浓度呈依赖关系。当ATRA浓度在≤(1-2)×10~(-8)mol/L有时反有刺激生长的作用。外源性IL-6(rhIL-6)能刺激OPM-2细胞克隆生长,抗IL-6单克隆抗体(McAb)可抑制其生长,rhIL-6不能逆转ATRA致OPM-2细胞生长抑制,提示OPM-2细胞能自分泌IL-6。~(125)I标记IL-6测得细胞表面IL-6受体(IL-6R)密度降低及亲和性下降,RT-PCR测得IL-6RmRNA下降,但gp130 mRNA表达无改变,在培养上清液测不出IL-6活性。这进一步证明ATRA对OPM-2细胞增殖的抑制作用是通过下调IL-6R及抑制瘤细胞自分泌IL-6双重作用而实现的。本实验提出ATRA有可能作为一种新的抗增殖药物治疗MM及其它自/旁分泌IL-6依赖性生长特性的肿瘤。     

蛋白酶体抑制剂PS—34——治疗骨髓瘤的新方法

多发性骨髓瘤(MM)是一种目前不能治愈的血液系统恶性肿瘤。一种蛋白酶体抑制剂PS-341提供了治疗MM的新方法。PS-341对MM有抑制增殖及信号传导,诱导凋亡,克服耐药,与地塞米松协同抗肿瘤作用,减少骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞的粘附及后者分泌IL-6的水平,并能抵抗IL-6的抗凋亡作用。PS-341的作用机制目前研究较多的是其对NF-κB的抑制作用。     

蛋白酶体抑制剂PS-341--治疗骨髓瘤的新方法

多发性骨髓瘤(MM)是一种目前不能治愈的血液系统恶性肿瘤.一种蛋白酶体抑制剂PS-341提供了治疗MM的新方法.PS-341对MM有抑制增殖及信号传导,诱导凋亡,克服耐药,与地塞米松协同抗肿瘤作用,减少骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞的粘附及后者分泌IL-6的水平,并能抵抗IL-6的抗凋亡作用.PS-341的作用机制目前研究较多的是其对NF-кB的抑制作用.     

依鲁替尼对多发性骨髓瘤Treg细胞的影响及相关作用机制

目的探究依鲁替尼对多发性骨髓瘤Treg细胞表达水平的影响及其作用机制。方法选取2018年6～12月济宁市第一人民医院收治的10例多发性骨髓瘤患者作为研究对象,同时选取同期来院的10例无关疾病(白细胞减少症或缺铁性贫血)患者作为对照组。分别采集两组患者的骨髓液,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测骨髓浆液中可溶性程序性死亡配体1(PD-L1)表达。流式细胞术测定RPMI-8226细胞PD-L1表达变化。选取18只6～8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠,构建骨髓瘤小鼠模型,将骨髓瘤小鼠按随机分为3组:对照组、依鲁替尼组和依鲁替尼联合IL-6组,每组各6只,对照组小鼠给予二甲基亚砜皮下注射8 d,依鲁替尼组小鼠给予6 mg/kg依鲁替尼皮下注射8 d,依鲁替尼联合IL-6组小鼠接受6 mg/kg依鲁替尼联合1 ng/kg IL-6皮下注射8 d。采用流式细胞术检测各组实验小鼠在依鲁替尼作用前后Treg细胞变化情况,以DC4~+CD25~(high)T细胞占CD4~+细胞的百分比代表Treg细胞水平。结果与对照组患者相比,多发性骨髓瘤患者骨髓液中可溶性PD-L1表达明显增高,差异具有统计学意义(P 0.01)。与对照组RPMI-8226细胞相比,依鲁替尼组RPMI-8226细胞PD-L1呈现明显低表达,依鲁替尼联合IL-6组RPMI-8226细胞PD-L1表达水平较依鲁替尼组则明显增高,与对照组RPMI-8226细胞相比则明显降低,差异均具有统计学意义(P 0.01)。与对照组小鼠相比,依鲁替尼组小鼠骨髓液Treg细胞数明显减少,依鲁替尼联合IL-6组小鼠骨髓液Treg细胞数明显低于对照组,同时明显高于依鲁替尼组,差异均具有统计学意义(P 0.05);与对照组小鼠相比,依鲁替尼组小鼠骨髓液中可溶性PD-L1呈现明显低表达,依鲁替尼联合IL-6组小鼠PD-L1表达水平较依鲁替尼组小鼠则明显增高,与对照组小鼠相比则明显降低,差异均具有统计学意义(P 0.05)。结论依鲁替尼可通过介导多发性骨髓瘤中Treg细胞占比变化,抑制多发性骨髓瘤中PD-L1的表达,参与调控多发性骨髓瘤发病的相关免疫微环境。     

趋化因子受体CCR1、CCR5在多发性骨髓瘤中的表达及对瘤细胞与基质细胞黏附的影响

目的:观察趋化因子受体CCR1、CCR5在多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞、骨髓基质细胞、人多发性骨髓瘤细胞系KM3、SKO007、XG-6中的表达及介导巨噬细胞炎症蛋白-1α对瘤细胞与基质细胞的黏附。方法:选择2004-08/2006-07在桂林医学院附属医院血液科住院的患者16例,男10例,女6例,中位年龄56岁,经国内统一标准确诊为多发性骨髓瘤患者。患者知情同意,并经医院伦理委员会批准。①实验方法:取样本进行骨髓单个核细胞与骨髓基质细胞的分离培养。人多发性骨髓瘤细胞系KM3、SKO007、XG-6从外室传代引进后,在含体积分数为0.10胎牛血清的RPMI1640培养液中培养,每3天更换1次培养液,本实验用的细胞均处于对数生长期。②实验评估:半定量RT-PCR及Western-blot技术检测骨髓瘤骨髓单个核细胞、骨髓基质细胞及骨髓瘤细胞系KM3、SKO007、XG-6中的CCR1、CCR5表达;MTT微量酶反应比色法定量检测瘤细胞与基质细胞的黏附。结果:①约43.8%的多发性骨髓瘤患者骨髓及2/3的多发性骨髓瘤细胞系均表达CCR1、CCR5两种受体,约6.25%的多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞仅表达CCR1受体,且大部分能在蛋白质水平上进一步得到鉴定。②加巨噬细胞炎症蛋白1α单抗、CCR1和/或CCR5单抗组,KM3、SKO007、XG-6细胞与基质细胞的黏附作用较对照组明显下降(P<0.05),而单抗组间无明显差异(P>0.05)。结论:大部分多发性骨髓瘤患者及多发性骨髓瘤细胞系表达CCR1、CCR5两种受体,巨噬细胞炎症蛋白1α可能是运用CCR1、CCR5两种受体来介导瘤细胞与基质细胞的黏附。     

IL—6／IL—6R系统介导靶向治疗白血病策略

导向杀伤是治疗白血病的必然趋势,而IL-6/IL-6R系统是细胞因子-受体导向治疗的重要部分,IL-6R在很多肿瘤细胞上都有表达,如多发性骨髓瘤,前列腺癌,白血病等,本文简要综述了IL-6R的表达、IL-6重组毒素融合蛋白抗白血开门见山效应及其对正常造血的作用。     

IL-17在多发性骨髓瘤患者骨髓中的表达及在其发病机制中的作用

目的:探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓血中IL-17的表达及其发病机制。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例MM患者及20例对照者骨髓血清中IL-6、TNF-α、IL-17表达水平,并采用相关分析法分析IL-17与IL-6、TNF-α表达的相关性。用不同浓度的IL-17作用于多发性骨髓瘤细胞株,采用细胞增殖与毒性试验方法检测IL-17对MM细胞增殖的影响。用IL-17作用于RAW264.7细胞株,应用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察RAW264.7细胞的形态学变化。结果:MM患者骨髓血清IL-17、IL-6、TNF-α水平均较正常对照组增高,其差异具有统计学意义(P 0. 05);IL-17和IL-6、TNF-α水平之间呈正相关(r=0.6045和r=0.6275)。细胞增殖与毒性试验证实,IL-17能促进多发性骨髓瘤细胞的增殖。TRAP染色发现,IL-17能诱导RAW264.7细胞分化为多核的巨细胞。结论:IL-17可能参与MM的致病过程,促进肿瘤细胞增殖以及诱导破骨细胞活化导致骨骼破坏加重。     

沙利度胺对多发性骨髓瘤患者外周血Th17与Treg细胞比值及IL-17、IL-35表达水平的影响

目的:探讨沙利度胺对多发性骨髓瘤(MM)患者外周血辅助T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)的比值及白介素-17、-35表达水平的影响,为临床MM患者有效治疗提供参考。方法:选取2014年1月-2016年12月医院收治的82例沙利度胺治疗的多发性骨髓瘤患者(M M组)及同时期体检健康者30例(对照组)。流式细胞术检测外周血T细胞亚群与Treg细胞占CD4~+T细胞比率,ELISA法检测血清IL-17和IL-35表达水平,比较患者治疗前后各项指标差异。结果:与对照组比较,多发性骨髓瘤患者治疗前外周血Th17细胞比率、IL-17水平均显著升高(P0.05),Treg细胞比率和IL-35水平均显著降低,Th17/Treg细胞比值显著升高(P0.05),沙利度胺治疗有效的多发性骨髓瘤患者外周血Th17细胞比率和IL-17水平明显低于治疗前,Treg细胞比率和IL-35水平明显高于治疗前,Th17/Treg细胞比值较治疗前显著降低(P0.05);治疗无效者各指标无显著变化(P0.05)。结论:Th17/Treg细胞比例失衡和IL-17和IL-35水平异常与多发性骨髓瘤疾病进展相关,沙利度胺发挥抗M M的作用机制可能与调节Th17/Treg细胞比值及IL-17和IL-35表达水平有关。     

巨噬细胞炎性蛋白-1α在多发性骨髓瘤发病机制中的作用

巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）是一种C-C趋化因子,由骨髓瘤细胞产生,通过剂量依赖性途经直接刺激破骨细胞形成和分化,刺激浆细胞的增殖、迁移和存活,促进骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞之间的粘附作用,增加核因子-κB受体活化因子配体和白细胞介素-6的表达。MIP-1α蛋白水平在多发性骨髓瘤患者骨髓浆中较高,并与疾病的分期及活动状况有关。本文就MIP-1α的生物学特性、生物学效应及其在多发性骨髓瘤中的作用作一综述。     

1例多发性骨髓瘤腰椎骨折并骶尾部压疮的护理

<正>多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是一种髓内单克隆浆细胞株异常增殖引起的恶性肿瘤,腰椎骨折是MM患者病理性骨折临床并发症之一,原因为:骨髓瘤细胞腔内大量增生的同时,由基质细胞衍变而来的成骨细胞过度表达,白细胞介素-6(IL-6)激活破骨细胞,导致骨质疏松甚至溶骨性破坏,活动不     

体外沙利度胺抑制骨髓瘤细胞生长及其机制的研究

为了解沙利度胺对初治和复发难治多发性骨髓瘤患者离体瘤细胞生长的影响及其机制 ,用甲基纤维素集落培养法观察不同浓度沙利度胺对初治、复发难治多发性骨髓瘤患者瘤细胞集落形成的影响 ,用IL 6依赖性细胞系和流式细胞术检测 2 0 0 μg/ml沙利度胺作用下骨髓瘤细胞自分泌IL 6和瘤细胞表面IL 6受体的变化。结果表明 ,当沙利度胺浓度分别为 75和 10 0 μg/ml以上时对初治骨髓瘤细胞和复发难治的多发性骨髓瘤细胞集落形成有抑制作用 ,这种抑制作用随着沙利度胺浓度的增加而增强。沙利度胺浓度为 2 0 0 μg/ml时 ,骨髓瘤细胞自分泌IL 6的浓度在初治组和复发难治组分别为 (14 8.5± 96 .7)ng/ml和 (2 86 .2± 189.1)ng/ml,明显低于沙利度胺作用前的水平 (P <0 .0 0 1和 <0 .0 5 )。沙利度胺浓度为 2 0 0 μg/ml时骨髓瘤细胞表面IL 6受体水平在初治组和复发难治组分别为 16 .7%和 2 0 .2 % ,明显低于沙利度胺作用前的水平 (P <0 .0 0 1和 <0 .0 5 )。结论提示 ,沙利度胺不仅对复发难治患者的多发性骨髓瘤细胞体外生长有抑制作用 ,对初治患者也有作用。此外 ,体外沙利度胺可以抑制瘤细胞IL 6分泌和减少瘤细胞表面IL 6受体表达 ,这可能是沙利度胺治疗多发性骨髓瘤有效的机制之一。     

IL-6及其受体对MM细胞生长的作用机理研究进展

IL-6和IL-6R在多发性骨髓瘤(MM)发病中的作用非常关键。本文对IL-6的来源,特别是病毒IL-6的来源,IL-6R特性,Kaposi肉瘤相关疱疹病毒感染与MM的关系,以及IL-6对MM细胞的作用机理等研究进展作一综述。     

CD45介导的src激酶活性与骨髓瘤细胞增殖关系研究进展

多发性骨髓瘤是以浆细胞恶性增生 ,分泌单克隆免疫球蛋白 ,并伴有正常免疫球蛋白减少以及广泛溶骨病变和 (或 )骨质疏松为特征的肿瘤。根据骨髓瘤细胞表面表达的抗原可以将其分为三类 :①未成熟骨髓瘤细胞 ,表型为MPC 1-CD4 5 CD4 9e-、MPC 1-CD4 5 -CD4 9e-;②中间型骨髓瘤细胞 ,表型为MPC 1 CD4 5 CD4 9e-、MPC 1 CD4 5 -CD4 9e-;③成熟骨髓瘤细胞 ,表型为MPC 1 CD4 5 CD4 9e [1] 。其中表型为MPC 1-CD4 5 CD4 9e-的未成熟骨髓瘤细胞在IL 6作用下表现了显著的增殖活性 ,CD4 5 -的未成熟型骨髓瘤细胞不表现…     

Notch信号通路和多发性骨髓瘤

Notch信号通路是介导细胞和细胞之间直接接触的主要信号通路之一,调控了多细胞机体的细胞凋亡、增殖和分化,是造血微环境调节造血细胞增殖与分化的重要信号通路,与多种血液系统恶性肿瘤的发病有关。多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是以浆细胞克隆性增殖为特征的B系肿瘤。由于骨髓瘤细胞的增殖比例低及多药耐药的形成,因此其对常规剂量的化疗药耐药,使得MM的临床治疗仍十分困难。近年来的研究发现,多发性骨髓瘤病人肿瘤细胞和骨髓瘤细胞株都大量表达Notch的配体Jagged-2,而正常的浆细胞或是其它恶性疾病来源的病人肿瘤细胞低量表达Jagged-2。Jagged-2可诱导基质细胞分泌白介素6（IL-6）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、胰岛素样生长因子－1（Insulin—like growth factor 1,IGF－1）。Notch信号通路激活后可通过与NF－κB,C—myc的相互作用,调节细胞的增殖,促进骨髓瘤细胞的生长,从而抑制骨髓瘤细胞的凋亡,它与骨髓瘤的发生和耐药有关。抑制Notch信号通路能诱导骨髓瘤细胞的凋亡,增强化疗药的细胞毒作用。研究表明,单独使用Notch信号通路的特异性化学抑制剂γ－分泌酶抑制剂（γ－secrctase inhibitors,GSI）可通过特异性阻滞Notch信号通路从而诱导骨髓瘤细胞的凋亡,并且与传统化疗药物联合应用可以增强骨髓瘤细胞对化疗药的敏感性。本文就Notch信号通路的组成、Notch信号通路的作用机制及Notch信号通路与多发性骨髓瘤的关系进行综述．