不同HBV DNA载量乙型肝炎患者血小板参数变化研究

目的 分析不同乙型肝炎(简称乙肝)病毒DNA(HBV DNA)载量乙肝患者血小板参数的变化,探讨血小板参数变化在抗病毒治疗中的临床意义.方法 随机选择确诊乙肝或HBV携带患者,在检测其血清HBV DNA载量的同时检测血小板5项参数[血小板计数(PLT)、大血小板比率(P-LCR)、血小板比容(PCT)、平均血小板体积(MPV)和血小板分布宽度(PDW)],以HBV DNA载量数量级不同分为三组:<103、103～105、>105 copy/mL,分析三组之间血小板参数的差异性.结果 三组HBV DNA不同载量血小板参数有明显差异,并且随着载量的增高,PLT和PCT减低,P-LCR、MPV和PDW则增高.结论血小板参数的变化对初步判断HBV复制的严重性有一定临床意义,乙肝患者血小板参数严重异常者应判断是否病毒复制严重,并及时进行抗病毒治疗,以减轻HBV对骨髓的抑制作用.     

HBV-DNA阳性乙型肝炎患者3059例病毒载量分析

目的为了解乙肝患者HBV DNA载量与性别、年龄相关性。方法荧光定量PCR技术用于定量检测乙肝患者HBV-DNA。结果 (1)2 741例阳性患者中,男1 801例,载量4.82±1.86;女940例,载量4.79±1.96。(2)2 294例患者中,从小到大七个年龄段病毒载量分别为6.26±1.94、5.85±1.68、5.38±1.97、4.43±1.80、4.44±1.77、4.27±1.61和4.19±1.49。结论男性患者极显著多于女性,病毒载量也高于女性;随着年龄的增长,病毒载量逐渐降低。     

慢性乙型肝炎患者T细胞亚群、IL-18、IFN-γ变化与血清HBV DNA水平分析

目的研究慢性病毒性乙型肝炎患者T细胞亚群、IL-18、IFN-γ变化与其血清HBV DNA的水平,探讨病毒复制程度与机体免疫功能的关系。方法应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测60例乙型肝炎病毒感染者、25例健康对照外周血T细胞亚群百分率;用ELISA法检测血清中IL-18、IFN-γ水平;用荧光定量PCR法检测乙型肝炎感染者血清HBV DNA。结果根据HBV感染者血清中HBV DVA载量的高低,将它们分为低拷贝组[(103～104)copy/mL]、高拷贝组[(>104～108)copy/mL]以及DNA阴性组(<103copy/mL)。HBV感染者外周血CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值较健康对照组明显减低,且随着HBV DNA载量的增加,CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低更明显。CD8+T细胞百分率较健康对照组明显升高,乙型肝炎患者IL-18、IFN-γ表达水平明显高于健康对照组,且随着HBV DNA载量的增加,IL-18、IFN-γ增加更明显。结论慢性病毒性乙型肝炎患者存在免疫调节紊乱,HBV DNA复制增加,进一步加重乙型肝炎病毒感染者T细胞亚群和细胞因子的失衡,CD4+/CD8+比值、血清IL-18、IFN-γ的动态变化可及时提示HBV感染者机体免疫功能的变化。     

乙型肝炎患者免疫学标志与其病毒DNA表达的相关性

目的 探讨乙型肝炎病毒感染的免疫学标志(HBVM)与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)的相关性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术分别对1 573例乙型肝炎(下称乙肝)患者血清进行HBVM(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)及HBV DNA检测.结果 HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )模式,HBV DNA≥103 copy/ml检测率高达91.84%,其余HBsAg( )、抗-HBe( )、抗-HBc( )为58.13%,抗-HBe( )、抗-HBc( )模式为33.33%,抗-HBs( )、抗-HBe( )、抗-HBc( )为16.28%,抗-HBs( )模式为10.53%及HBVM全部阴性模式10.00%,并对HBVM各种模式HBV DNA表达的频率分布进行分析,结果显示HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )模式,HBV DNA拷贝值由低(≥103 copy/ml)向高(108 copy/ml),且50.20%乙肝患者在107～108 copy/ml范围内.HBVM其余模式,多数患者集中在较低拷贝值范围内(103 copy/ml).分别是HBsAg( )、抗-HBe( )、抗-HBc( )为71.4%,抗-HBs( )、抗-HBe( )、抗-HBc( )为42.86%,抗-HBe( )、抗-HBc( )为66.70%.结论 血清HBVM阳性患者中72.38%血清HBV DNA≥103 copy/ml,且HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )模式的血清中HBV DNA≥103 copy/ml检出率及HBV DNA的拷贝值均明显大于其他各种模式(P＜0.05),病毒复制活跃,传染力强,但其余模式仍可能存在病毒复制.     

不同保存时间对血浆标本中人巨细胞病毒载量的影响

目的研究4℃条件下存放30d后血浆中人巨细胞病毒DNA的稳定性。方法选择进行造血干细胞移植的150例患者的血浆标本,将其按照人巨细胞病毒DNA载量分为3组:低载量组(n=50,人巨细胞病毒DNA载量为300~1 000copy/mL)、中载量组(n=50,人巨细胞病毒DNA载量为1 000~10 000copy/mL)和高载量组(n=50,人巨细胞病毒DNA载量为10 000~100 000copy/mL)。标本采集后2h内完成基线载量(0d)检测,其余血浆在4℃条件下保存,分别在保存1、2、3、7、14、21、30d时检测人巨细胞病毒载量。结果低、中、高载量组标本在保存1、2、3、7、14、21、30d后,其人巨细胞病毒载量与0d结果比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论血浆标本在4℃条件下存放30d对人巨细胞病毒载量检测结果无影响。     

EB病毒DNA载量与患儿机体免疫及肝肾功能的相关性研究

目的 探讨EB病毒(EBV)感染患儿EBV-DNA载量与机体免疫及肝肾功能的相关性.方法 选择该院2016年5月至2019年5月收治的EB V-DNA阳性患儿90例为研究对象,按照EBV-DNA载量的差异分成低载量组(<5×104 copy/mL)44例、中载量组(5×104～5×105 copy/mL)24例和高载量...     

无症状乙型肝炎病毒携带者中乙型肝炎表面抗原半定量检测的意义

目的研究无症状乙型肝炎病毒(HBV)携带者中HBV表面抗原(HBsAg)含量与HBV复制的相关性。方法采集HBV携带者血清152例,应用电化学发光法检测HBsAg含量[以标本吸光度值与仪器所给临界值(Cut-off)的比值勤(COI)表示]、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV e抗原(HBeAg)、聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA。按照HBV DNA检测结果将病例分为4组。Ⅰ组(54例)、Ⅱ组(34例)HBV DNA水平分别为<103拷贝/mL、103~105拷贝/mL,两组HBeAg皆为阴性;Ⅲ组(32例)HBV DNA水平为105~107拷贝/mL,其中HBeAg阳性8例,阴性24例;Ⅳ组(32例)HBV DNA水平>107拷贝/mL,HBeAg皆为阳性。结果HBsAg含量与HBV DNA水平呈显著对数相关(r=0.623,P<0.001)。各组平均Log HBsAg COI分别为Ⅰ组2.65±0.85,Ⅱ组2.95±0.76,Ⅲ组3.19±0.49,Ⅳ组4.65±0.37,其中Ⅳ组显著高于其他任何一组(P<0.001);Ⅰ组显著低于Ⅲ组(P=0.001)。根据受试者工作特征(ROC)曲线,...     

乙型肝炎病毒DNA载量与血小板参数相关性分析

目的分析乙型肝炎(以下简称乙肝)病毒DNA(HBV-DNA)不同载量乙肝患者血小板参数的变化。探讨血小板参数变化在乙肝患者抗病毒治疗中的临床意义。方法随机选择确诊为乙肝或HBV携带初诊患者,排除血液疾病患者,检测血清HBV-DNA载量,同时检测血小板5项参数[血小板计数(PLT)、大血小板比率(P-LCR)、血小板比容(PCT)、平均血小板体积(MPV)和血小板分布宽度(PDW)],以HBV-DNA载量数量级不同分为3组:10~5、10~5~10~7、10~7 copy/mL,分析3组患者血小板参数差异性。并选择健康体检者(30例)作为对照组。结果 3组患者血小板参数与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05),且随HBV-DNA载量增高,PLT、PCT降低,P-LCR、MPV、PDW增高。结论血小板参数变化对初步判断HBV复制的病毒载量具有一定临床意义,乙肝患者血小板降低者应判断是否为病毒复制严重并及时给予抗病毒治疗,以减轻HBV对骨髓的抑制作用。同时对临床医生制订治疗方案也具有重要的参考作用。     

乙型肝炎病毒DNA载量与HBeAg及ALT联合检测的意义

目的:分析乙型肝炎病毒血清DNA(HBV DNA)载量水平与e 抗原(HBeAg)及ALT 的关系,探讨HBV DNA 载量水平与HBeAg 及ALT 联合检测的意义.方法:采用回顾性调查法.对70 例入院乙型肝炎患者(病例组)和50 例健康体检者分别检测ALT、HBeAg 和HBV DNA.采用速率法检测ALT,HBeAg 采用电化学发光免疫分析法,同时采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA.结果:病例组血清HBV DNA含量高于103 copy/mL 者50 例,HBeAg 阳性47 例,且两者具有较好的相关性(r ＝ 0.710,P ＜ 0.001).70 例病例组中有50 例ALT 异常,且其异常率随HBV DNA 含量升高而增加.ALT 水平和HBV DNA 含量相关性差(r ＝ 0.253,P ＜ 0.05);而ALT 异常率与HBV DNA 载量呈正相关(r ＝ 0.877,P ＜ 0.05).结论:HBV DNA 载量与HBeAg 同时检测可提高临床对乙型肝炎感染的诊断.HBV DNA 是反映病毒复制的可靠指标,结合ALT 的结果可帮助临床了解病毒在体内的复制情况和肝脏的炎症活动性.     

乙型肝炎患者血清HBsAg水平与HBV DNA及肝功能指标的关系

目的探讨乙型肝炎患者血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平与乙型肝炎病毒(HBV)DNA及肝功能指标的关系。方法选取536例血清HBeAg阳性的乙型肝炎患者,采用化学发光微粒子免疫检测法测定HBV血清标志物,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定HBV DNA水平,根据HBV DNA水平将患者分为3组,A组(1×103 copy/mL)、B组(1×103~1×105)copy/mL、C组(1×105 copy/mL),贝克曼AU5421全自动生化分析仪连续检测法检测肝功能指标[天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、AST/ALT、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)],对结果进行统计学分析。结果每组比较分析后发现,大部分肝功能指标有显著性差异,尤其是AST、ALT。B组和C组的ALT、AST相对于A组明显升高(P0.01),B组ALT、AST水平高于C组(P0.01)。536例乙型肝炎患者中HBV DNA阳性检出率为72.9%,"大三阳"和HBsAg、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗体4项阳性的血清学模式的HBV DNA阳性率分别为80.9%和84.4%,阳性率较高,说明患者体内的HBV处于高复制状态。结论 HBV DNA水平与肝功能损伤无明显相关性,患者应定期检测HBV DNA的水平,清除病毒的复制情况,及早采取治疗措施。     

HBV DNA含量与T淋巴细胞的相关性研究

目的 观察乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV DNA的含量与T淋巴细胞亚群的相关性,探讨HBV感染者细胞免疫功能的变化.方法 收集60例HBV感染者的血清,用荧光定量PCR仪检测其HBV DNA的含量,按HBV DNA的浓度分为HBV DNA阴性组(<500.00 copy/mL)、HBV DNA低浓度组[(500～1)×105 copy/mL]和HBV DNA高浓度组(1×105～1×108 copy/mL),另外取20例健康人的血清作对照,同时取上述80例的新鲜外周血,用流式细胞仪检测他们的T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+及CD3+CD4+/CD3+、CD8+,对其结果 进行分析.结果 HBV DNA阴性组和低浓度组的CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD3+CD4+/CD3+CD8+与健康对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),HBV DNA高浓度组的CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD3+CD4+/CD3+CD8+与健康对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),HBV DNA低浓度组和高浓度组的HBV DNA含量与CD3+CD4+和CD3+CD4+/CD3+CD8+呈现负相关关系,与CD3+CD8+呈现正相关关系,相关系数分别为0.46、0.69和0.52.结论 HBV DNA对细胞免疫产生了影响,HBV DNA含量与T淋巴细胞亚群的分布存在一定的相关性.     

携带乙型肝炎病毒产妇血清与初乳HBV DNA载量关联性研究

目的 研究产妇血清与其初乳汁乙型肝炎病毒(HBV) DNA载量的关联性.方法 选取住院分娩产妇共522例,依据HBV五项血清学指标,分为A组:乙肝"HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性"103例,B组:乙肝"HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性"221例,C组:HBsAg、HBeAg阳性20例,D组:HBsAg、HBcAb阳性43例,E组:乙肝其他血清模式49例,另选F组:HBV模式全阴性的产妇86例作为对照组;均采用ELISA法检测产妇血清、乳汁中HBV标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,阳性者采用该项目胶体金标试纸复核,同时采用实时荧光定量PCR检测产妇血清和乳汁HBV DNA载量,对相关数据进行统计分析.结果 对年龄18～44岁围产期妇女体检乙肝感染指标,A组乙肝"HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性"产妇血清和乳汁HBV DNA诊断灵敏度分别为100.00%(103/103)和86.41%(89/103)、血清HBV DNA载量平均为4.11×108 copies/ml;B组乙肝"HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性"产妇血清和乳汁HBV DNA诊断灵敏度分别为19.46%(43/221)和2.71%(6/221),血清HBV DNA载量平均为6.85×104 copies/ml ;C组乙肝HBsAg、HBeAg阳性产妇血清和乳汁HBV DNA诊断灵敏度分别为100.00%(20/20)和80.00%(16/20),血清HBV DNA载量平均为8.27×106 copies/ml ;D组HBsAg、HBcAb阳性产妇血清和乳汁HBV DNA诊断灵敏度分别为65.12%(28/43)和25.58%(11/43),血清HBV DNA载量平均为2.89×105 copies/ml ;E组HBV其他模式产妇血清和乳汁HBV DNA诊断灵敏度分别为10.20%(5/49)和2.04%(1/49),血清HBV DNA载量平均为1.59×104 copies/ml ;F组乙肝五项全阴性产妇血清和乳汁HBV DNA诊断灵敏度分别为1.16%(1/86)和0(0/86),血清HBV DNA载量＜1.00×103 copies/ml.A组与B组间乳汁HBV DNA实验诊断阳性差异有统计学意义(χ2=237.45,P＜0.01).HBV携带者乳汁HBV DNA载量与其血液HBV DNA载量呈正相关(r=0.721).结论 携带HBV产妇乳汁HBV DNA载量远低于血液HBV DNA载量;乳汁中HBV传染性也低于血液传染性;研究证实A组产妇经母乳HBV传染性是"HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性"产妇的87.45倍,HBV其他模式者乳汁传染性与乙肝"HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性"产妇乳汁传染性相近.     

血清补体C_3在慢性乙型肝炎检测中的应用价值

目的观察慢性乙型肝炎患者血清补体C3指标的变化,为临床提供实验室信息,满足临床对患者的诊治需求。方法对临床已确诊的120例慢性乙肝患者使用罗氏Lightcycler实时荧光定量聚合酶链反应仪检测其血清病毒拷贝数,并以HBV载量为标准,分为低、中、高3组进行研究;用免疫比浊法借助日立7600型全自动生化分析仪检测患者血清补体C3。结果使用实时荧光定量PCR仪检测慢性乙肝患者血清中的病毒拷贝数,据此可将患者血清HBV-DNA检测结果分为A、B、C 3个组,其中A组:103~104copy/mL,B组:105~106copy/mL,C组:≥107copy/mL;每组检测补体C3指标,结果显示,A、B、C组分别与健康对照组比较,补体C3均为降低,差异有统计学意义(P0.01);不同病毒载量(A组、B组、C组)检测补体C3指标,均无显著变化,差异无统计学意义(P0.05)。结论血清补体C3指标降低,提示临床慢性乙型肝炎患者可能有肝脏功能的损伤,故血清补体C3指标的检测将有助于临床诊断、治疗;不同病毒载量组间血清补体C3指标比较,降低程度不明显,提示可能是不同病毒载量的高低不能反映慢性乙型肝炎患者肝脏功能的损伤程度,同时也为乙型肝炎的发病机制研究积累资料。     

ALT和HBV DNA联合诊断e抗原阴性的慢性活动性乙型肝炎诊断界值的建立及评价

目的建立和评估丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙型肝炎病毒(HBV)DNA和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)对乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性活动性乙型肝炎的诊断界值(Cut-off值)。方法将290例HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者以肝组织活检结果为标准分为活动性(213例)和非活动性(77例)慢性乙型肝炎,用受试者工作特征(ROC)曲线评价ALT、AST和HBV DNA载量在诊断HBeAg阴性的活动性慢性乙型肝炎中的价值。结果血清中ALT、AST、HBV DNA载量的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.849、0.807、0.867;诊断界值为男性ALT 30 IU/L、女性ALT 19 IU/L,HBV DNA载量1×105拷贝/mL时的敏感性为90.6%、特异性为98.7%、阳性预测值为99.5%、阴性预测值为79.2%;AST以40 IU/L作为Cut-off值时的敏感性为77.0%、特异性为63.3%、阳性预测值为85.4%、阴性预测值为50.0%。结论可以以男性ALT 30 IU/L、女性ALT 19 IU/L且HBV DNA载量1×105拷贝/mL作为中国四川自贡地区HBeAg阴性的慢性活动性乙型肝炎的诊断Cut-off值。     

乙型肝炎病毒载量与乙型肝炎两对半之间的关系

目的 探讨乙型肝炎(下称乙肝)病毒(HBV)载量与乙肝两对半之间的关系.方法 891例血清样本采用酶联免疫吸附试验检测乙肝病毒标志物,LightCylcer检测血清HBV-DNA载量.结果 共检出11种血清学模式,乙肝病毒e抗原(HBeAg)阳性和阴性组的病毒载量分别为106.63 copy/ml和103.13 copy/ml,二者差异有统计学意义(P＜0.01).其中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)( )、HBeAg( )模式组HBV-DNA阳性率最高(100%),平均病毒载量达107.05 copy/ml,其次为HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )模式组,阳性率为97.0%,平均病毒载量为106.14 copy/ml.结论 HBeAg阳性模式HBV载量高于HBeAg阴性模式,HBeAg阳性可以在一定程度上提示病毒的复制状况.     

乙型肝炎病毒血清免疫标志物与病毒载量的关系

目的 研究乙型肝炎(乙肝)不同免疫模式与乙肝病毒(HBV)载量之间的关系.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝标志物,用荧光定量PCR(FQ-PCR)测定HBV载量,并分析不同免疫模式与HBV载量之间的关系.结果 1(HBsAg)、3(HBeAg)、5(抗-HBc)与1、3阳性组HBV载量较高,90%在105 U/mL以上;1、4(抗-HBc)、5阳性与1、5组HBV载量相对较低80%在105 U/mL以下,χ2检验差异有统计学意义.结论 HBeAg作为HBV感染复制的指标来分组乙肝患者对乙肝的治疗和预防有重大意义.     

多项指标联合检测对乙型肝炎后肝硬化诊断治疗中的观察分析

目的探讨肝纤维化四项与天门冬氨酸氨基转移酶(AST)/丙氨酸氨基转移酶(ALT)比值、乙型肝炎病毒(HBV)DNA指标联合检测对乙型肝炎(简称乙肝)后肝硬化诊断治疗的临床应用价值。方法选择2009年5月至2011年5月在该院消化内科收治的130例乙肝后肝硬化患者,同时选择80例单纯慢性乙肝为对照组,检测其血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原蛋白(PⅢNP)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-Col)、层黏连蛋白(LN)、AST/ALT比值及乙肝DNA(HBV-DNA)指标水平。结果 (1)乙肝后肝硬化血清中HA、Ⅳ-Col、PⅢNP、LN明显高于单纯慢性乙肝组(P<0.01)。(2)肝纤维化四项指标在乙肝后肝硬化血清中HBV DNA>106copy/mL组中除LN外,其他指标水平明显高于乙肝后肝硬化血清中HBV DNA在103～105copy/mL组和HBV DNA<103copy/mL组的水平,差异有统计学意义(P<0.01);在HBV DNA 103～105copy/mL和HBV DNA<103copy/mL两组间肝纤维化四项指标升高水平差异无统计学意义(P>0.05)。(3)肝纤维化四项指标水平在AST/ALT>2、12时为(785.2±216.4)μg/L,各组间差异有统计学意义(P<0.05);Ⅳ-Col升高水平在AST/ALT>2[(598.2±158.6)μg/L]和AST/ALT<1[(438.7±146.1)μg/L]组间差异统计学意义(P<0.05);PⅢNP和LN升高的水平在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测肝纤维化四项与AST/ALT比值、HBV DNA有利于临床对乙肝后肝硬化患者病程的监测,同时为临床对乙肝后肝硬化患者的抗病毒和抗纤维化治疗及疗效的判定提供实验室依据。     

两种HBV DNA检测试剂的比较

目的 分析两种试剂在HBV DNA定量检测中的相关性,评价其在不同病毒载量时的检测性能.方法 用人AB型血清将WHO第2代HBV DNA国际标准品(编号:97/750)配制成不同浓度的10份样本,10份样本的浓度分别为1×106、5×106、1×105、5×104、1×104、5×103、1×103、5×102、1×102、1×101 kIU/L.采用深圳匹基生物工程股份有限公司生产的HBV DNA荧光定量PCR检测试剂(PG试剂)和美国罗氏公司生产的定量PCR试剂(罗氏试剂)检测78份HBV感染者血清、30份健康献血者血清和10份不同浓度范围的WHO标准品中HBV DNA含量.对两种试剂检测HBV DNA结果相关性进行分析;对试剂在不同病毒载量时的检测性能进行评价;并对漏检情况进行分析.两种试剂每批检测均设有阴性质控、弱阳性质控和强阳性质控.结果 两种试剂对WHO HBV DNA标准物质稀释血清均能正确检出,罗氏试剂能检出最高稀释度样本浓度为2.00(kIU/L,lg),PG试剂能检出最高稀释度样本浓度为3.00(kIU/L,lg);两种试剂检测结果存在线性相关(R2=0.938 7,P<0.01),罗氏试剂检测上限与理论值相符,大于检测上限的标本经稀释重复测定,罗氏试剂检测结果[(8.35±0.20)kIU/L,lg]高于PG试剂检测结果[(7.73±0.42)klU/L,lg],差异有统计学意义(t=3.776,P<0.05).两种试剂检测108份血清标本中HBV DNA含量,罗氏试剂检测值[(5.88±1.64)kIU/L,lg]高于PG试剂检测值[(5.25±1.55)kIU/L,lg],差异有统计学意义(t=12.297,P<0.01);检测高HBV病毒载量[(>5.00～≤7.00)kIU/L,lg和(>7.00～≤9.00)kIU/L,lg]组,两种试剂的相关性较高(R2分别为0.779 7、0.603 7,P均<0.01);对低HBV病毒载量(>3.00～≤5.00 kIU/L,lg)组,两种试剂的相关性较低(R2=0.417 3,P<0.01);病毒载量为>3.00～≤4.00 kIU/L,lg组,PG试剂的漏检率为33.3%(5/15);病毒载量为>1.08～≤3.00 kIU/L,lg组,PG试剂未检出.结论 PG试剂与岁氏试剂检测结果虽存在一定差距,但相关性较好.两种试剂低病毒载量标本的相关性要低于高病毒载量标本,PG试剂检测HBV DNA的线性范围较窄.

Abstract：

Objective To evaluate clinical significance of two real-time fluorescence quantitative PCR kits for quantitative detection of HBV DNA and detection performance at different viral load levels.Methods A series of calibrators with different concentrations(1×106,5×105,1×105,5×104,1×104,5×103,1×103,5×102,1×102,1×101 kIU/L) were prepared with AB-type sera using the second generation WHO international standard (NIBSC code:97/750). HBV viral load in the sera of 78 patients,30 healthy blood donors and 10 calibrators were detected by real-time fluorescence quantitative PCR HBV DNA test kit from PIJI Bio-Technical Development Company Ltd (PG kit) and Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV test kit. The correlation of the two methods was evaluated, and the performance of the two kits different viral load levels was evaluated. The false negative rate was analyzed. Negative control, low positive control and high positive control were included in every batch. Results Both two kits showed the correct results for the 10 specimens from the WHO international standards. The lowest detection limit of HBV DNA for Roche Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV test and PG kit were 2.00 (kIU/L, lg) and 3.00 (kIU/L,lg) ,respectively. There was linear correlation between the results from Roche Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV test and PG kit ( R2=0.938 7, P < 0.01 ), the upper limit of Roche kit had coincided with theoretical value. The samples with HBV DNA level above the upper limit of detection were diluted and retested to obtain the precise result. The result form Roche Cobas AmpliPrep/Cabas TaqMan HBV test [(8.35±0.20) kIU/L, lg] was higher than that from PG kit [(7.73±0.42 ) kIU/L, lg] (t=3. 776, P <0.05) . The detection of 108 serum samples showed that the level of HBV DNA detected by Roche Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV test [(5.88±1.64) kIU/L, lg] was higher than that by PG kit [(5.25±1.55 kIU/L,lg] (t=12. 297 ,P <0.01 ). The correlation coefficients were high in samples with high HBV viral load[HBV DNA(>5.00 and≤7.00) kIU/L,Ig,R2=0. 779 7, P <0.01 ;HBV DNA( >7.00 ands≤9.00) kIU/L,lg,R2=0.603 7, P <0.01]. The correlation coefficient was low in samples with low HBV viral load[HBV DNA ( > 3.00 and≤5.00) kIU/L, lg, R2=0. 417 3, P <0.01 )]. When HBV DNA ( >3.00 and≤4.00) kIU/L,lg,the false negative rate was 33.3% (5/15). When HBV DNA ( > 1.08and≤3.00) kIU/L,lg,none of positive samples was detected with PG kit. Conclusions PG kit is not as good as Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV test . The linear correlation between the results from the two kits is good. The correlation between the results detected with PG kit and Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV test is higher in the high viral load groups than in the low viral load group. It is suggested that PG kit had a narrower linear range.     

产妇血清与乳汁中乙型肝炎病毒DNA含量相关性研究

目的通过分析乙型肝炎病毒(HBV)携带产妇血清HBV DNA含量与其乳汁中HBV DNA含量相关性,探讨乙型肝炎孕妇母乳喂养的安全性问题,并指导母乳喂养。方法选择在项城市永丰乡中心医院住院分娩HBV携带产妇136例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术测定其血清及产后乳汁中HBV DNA含量。结果 76例血清HBV DNA阳性产妇,乳汁标本中40例阳性,总阳性率为52.6%。其中22例血清HBVDNA含量在1.0×103～1.0×105 U/mL者,乳汁标本中阳性率为9.0%;30例血清HBV DNA含量在1.0×105～1.0×107 U/mL者,乳汁标本中阳性率为60.0%,24例血清HBV DNA含量在1.0×107～1.0×109 U/mL者,乳汁标本中阳性率为83.3%。乙型肝炎产妇血清HBV DNA含量与乳汁中HBV DNA含量呈正相关。结论 HBV携带产妇均应作血清、乳汁HBV DNA定量检测,根据其传染危险性采取措施,正确指导母乳喂养,确定哺乳方式,从而降低新生儿HBV感染率。     

慢性乙型病毒性肝炎患者血清TGF-β_1水平与肝纤维化、HBV DNA载量的关系——附116例报告

目的: 探讨慢性乙型病毒性肝炎(慢乙肝)患者血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平与肝纤维化、HBV DNA载量的关系.方法: 检测116例慢乙肝(慢乙肝组)患者和60名正常人(对照组)的血清TGF-β1、4项肝纤维化指标[透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原],以及HBV DNA载量,并作比较.结果: 与对照组比较,慢乙肝组的血清TGF-β1水平、4项肝纤维化指标升高,病情严重程度不同的慢乙肝患者的TGF-β1水平及4项肝纤维化指标均高于对照组(P<0.05～0.01),上述指标的增高水平与病情严重程度呈正比,且TGF-β1与4项肝纤维化指标呈正相关(r值分别为0.629、0.586、0.622、0.618,均为P<0.01).慢乙肝患者的TGF-β1水平与HBV DNA载量呈正比.结论: 慢乙肝患者血清TGF-β1水平与其病情严重程度、肝纤维化指标及HBV DNA载量呈正比,检测慢乙肝患者的血清TGF-β1水平有助于判断其肝纤维化程度和病毒复制的活跃程度.