鼠脑液压伤后血脑屏障通透性变化对磷脂酶A2和脑水肿的 …

目的：研究颅脑损伤早期血脑屏障通透性（ＢＢＢＰ），磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）与脑水肿的改变及其相关关系，以及地塞米松和尼莫地平治疗的影响，方法：应用鼠脑液压伤模型，观测伤后不同时间伊文氏蓝在伤侧脑组织内吸光度变化，ＰＬＡ２和脑含水量改变。并观测经腹腔注射地塞米松和尼莫地平后上述指标的改变。结果：液压伤后１小时伤侧脑组织伊文氏蓝吸水度开始升高伤后６小时至峰值，随后逐渐降低，伤后１２小时～７２小时仍维持在     

哺乳类动物的钙离子不依赖性磷脂酶A_2

磷脂酶A2（PLA2）是一大类水解Sn－2磷脂的酶类，根据其对钙离子（Ca）的依赖性可区分为钙离子依赖性和钙离子不依赖性PLA2，后者主要包括溶酶体性、刷状缘膜性和胞内钙离子不依赖性PLA2（iPLA2）。本文主要综述iPLA2的类型及其特性。     

硫酸镁对大鼠脑损伤后血脑屏障通透性的影响

目的：探讨硫酸镁对大鼠颅脑创伤后血脑屏障通透性的影响及可能的机制。方法：在ＳＤ大鼠颅脑创伤的同时腹腔注射硫酸镁治疗,伤后２４ｈ测定颅脑创伤组及硫酸镁治疗组大鼠挫伤灶边缘脑皮质含水量,用伊文氏蓝作为示踪剂定量观察血脑屏障的通透性,并做超微结构观察。结果：硫酸镁治疗组大鼠脑皮质含水量及伊文氏蓝含量均明显低于颅脑创伤组。     

亚低温对犬心脏骤停后脑水肿及血脑屏障的影响

目的观察亚低温干预对犬心脏骤停后脑水肿及血脑屏障的影响。方法共选取16只成年健康杂种犬，将其随机分为亚低温组（n=8）和对照组（n=8），采用诱发室颤的方法导致上述2组动物心跳、呼吸骤停，随后施行脑复苏程序；亚低温组动物在心跳骤停期间给予亚低温干预。采用双抗夹心酶联免疫吸附技术测定各组动物血清S100B蛋白含量，同时观察其脑组织含水量及病理学改变。结果亚低温组动物经亚低温干预后，发现其血清S100B蛋白含量显著低于对照组（P〈0．05），脑组织含水量也显著低于对照组（P〈0．05）；2组实验动物脑标本经病理学检测后发现，亚低温组动物脑组织缺氧损伤程度明显轻于对照组。结论亚低温干预能减轻心跳骤停实验犬的脑水肿程度，改善其血脑屏障功能，从而发挥脑保护效应。     

环孢素A对大鼠脑损伤后血脑屏障通透性的影响

目的 探讨环孢素A对大鼠颅脑损伤后血脑屏障通透性的影响及其可能机制。方法 24只Wistar大鼠随机分为三组，每组8只，即假创伤组、脑创伤生理盐水组和脑创伤环孢素A治疗组。检测各组大鼠伤后24h脑组织含量及EB含量，并采用透射电镜观察形态学变化。结果 脑创伤生理盐水治疗组和环孢素A治疗组伤后24h脑组织含水量和EB含量均显著高于假创伤组，其中经环孢素A治疗的大鼠脑组织含水量和EB含量均较生理盐水治疗组明显下降，并伴超微结构的显著改善。结论 颅脑创伤早期应用环孢素A可以有效减轻血脑屏障破坏的程度。     

磷脂酶A_2的表达调控及其在炎症和多器官衰竭发病进程中的意义

创伤、感染、脓毒症以及由此引发的全身内源性炎症反应与多器官功能衰竭(MSOF)是一个连续的病理发展进程。我们前期的工作和已被确认的研究表明：在这一炎性损害进程中，Ⅱ型磷脂酶A_2(Ⅱ──PLA_2)的活性增高处于关键性的环节，PLA_2作为复杂网络系统中的重要组分，受多种细胞因子介导，并参与多种脂类介质的生成。因此，探讨Ⅱ──PLA_2的细胞来源；制约Ⅱ──PLA_2的表达调控相关因素；掌握PLA_2激活的外周标志物的检测；针对Ⅱ──PLA_2激活后炎症反应发展的机制，采取针对性的抑制手段，对临床脓毒症及MSOF的病情进程判断和针对病理时相的合理治疗决策具有重大理论指导意义和实际应用价值。     

水通道蛋白4在创伤性脑水肿中的表达及其对血脑屏障通透性的影响

目的探讨水通道蛋白4（AQP-4）在大鼠创伤性脑水肿中的表达及其对血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法按照改进的Feeney自由落体撞击法建立大鼠创伤性脑损伤（TBI）模型,用磁共振成像（MRI）对大鼠脑水肿进行检测,干／湿比重法和伊文思蓝（EB）测定法观察大鼠TBI后不同时相脑组织含水量和BBB通透性的变化,并采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测AQP-4 mRNA的表达,蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测AQP-4蛋白的表达。结果TBI后MRI表现为T1WI的低信号或等信号、T2WI高信号。TBI后4h伤区脑组织含水量及EB含量开始增多,AQP-4 mRNA、AQP-4蛋白表达开始增高并逐渐上升,24h达到高峰,随后逐渐下降,伤后72h仍维持在较高水平（P〈0．05）。AQP-4 mRNA、AQP-4蛋白表达与脑组织的含水量及EB含量呈正相关。结论创伤性脑损伤后早期AQP-4 mRNA、AQP4蛋白表达的变化与血脑屏障通透性的改变及脑水肿的形成和发展密切相关。可能通过上调水通道蛋白AQP-4的表达,增加血脑屏障的通透性,参与脑水肿的形成。     

哺乳类动物磷脂酶A_2的分子生物学研究

本文以14kD磷脂酶A2和85kD磷脂酶A2为线索，简要综述了磷脂酶A2的分子结构特征、分子克隆、基因表达的诱导以及酶活性调节和催化机制等方面的研究近况。     

促甲状腺素释放激素类似物YM14673对大鼠脑外伤后脑水肿及血脑屏障通透性的影响

目的观察促甲状腺素释放激素 (TRH)类似物YM 14 673对脑外伤后血脑屏障的影响。方法制作大鼠急性脑外伤模型 ,外伤前静脉注入伊文氏蓝。大鼠分为假手术组、生理盐水组、给药组Ⅰ ( 0 1mg/kg)、给药组Ⅱ ( 1mg/kg)。伤后 2 4h处死 ,测定脑水含量及脑组织和血浆中的伊文氏蓝含量。结果大鼠脑外伤后 ,生理盐水组脑组织脑水含量明显高于假手术组 (P <0 0 1) ,遭受直接打击的左侧半球脑水含量明显高于右半球 (P <0 0 1)。经药物YM 14 673处理后 ,左右半球的脑水含量均下降 (P <0 0 5 ) ,而不同剂量治疗组之间脑水含量无显著性差异 (P >0 0 5 )。急性脑外伤后 ,脑组织中伊文氏蓝含量明显升高 ,YM 14 673对其没有影响。结论YM 14 673可减轻急性脑外伤引起的脑水肿 ,但对血脑屏障通透性没有影响。     

缺氧缺血对体外血脑屏障通透性的影响及其机制的研究

目的：探讨血脑屏障紧密连接（BBB-tight junction，BBB—TJ）蛋白和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在缺氧缺血诱导的体外血脑屏障（BBB）模型通透性增加中的作用及相互关系。方法：ECV304与原代培养的星形胶质细胞共培养建立体外BBB模型。实验分为正常对照组（C组）、缺氧缺血组（H／I组）、BB-1101预处理组（P组）3组。透射电镜分别观察各组BBB-TJ变化；通过吖计数仪测定核素标记牛血清白蛋白（^125I-BSA）通透量检测BBB屏障功能。直接免疫荧光观察细胞骨架蛋白Actin分布的改变，Westemblot检测Actin、Occludin、ZO-1和MMP-9表达量的改变。结果：电镜观察见C组内皮细胞间形成光滑、连续、较高密度的紧密连接，免疫荧光检测见细胞骨架蛋白Actin主要分布在细胞膜及细胞核周边。形成肌动蛋白丝带，轮廓内包含大量柬状排列有序的微丝结构，细胞间连接紧密。缺氧缺血后．H／I组细胞间连接开放，形成裂隙，而胞膜及胞核周边肌动蛋白丝带模糊、部分断裂，并有应力纤维形成，出现细胞间裂隙，BBB对岱I—BSA通透性明显增高，与C组和P组比较，差异有显著性（P〈0．01），同时ZO-1的表达量显著减少，MMP-9的表达显著增多，而Occludin和Actin的表达量无改变。BB-1101预处理后，P组细胞BBB-TJ破坏减少．周边肌动蛋白丝带重新出现，细胞间裂隙较少，岱I-BSA通透量较H／I组明显下降（P〈0．01）．MMP-9的表达较H／I组也明显减少（P〈0.01）。结论：（1）缺氧缺血能促使BBB—TJ的开放进而导致BBB通透性增加；（2）BBB-TJ的开放可能与BBBActin的重组及ZO-1的表达量降低有关；（3）缺氧缺血能增加MMP-9的表达：（4）MMP-9与缺氧缺血时BBBActin的重组及ZO—1的表达减少相关。     

肿瘤坏死因子α对体外血脑屏障模型通透性的影响

背景:以往的研究发现,感染性脑损伤时脑组织中白细胞介素1和肿瘤坏死因子α含量明显增加,并与脑损害呈正相关关系,其能否导致血脑屏障通透性增高?目的:观察肿瘤坏死因子α对体外血脑屏障模型通透性的影响及其可能的调控机制。设计:体外细胞模型对照实验。单位:中南大学湘雅医院儿科,中南大学湘雅医学院生化系。材料:选用20只生后7d健康SD大鼠,雌雄不拘,清洁级,由中南大学湘雅医学院动物部提供;肿瘤坏死因子α购自sigma公司;DMEM液体培养基、胎牛血清购自Hyclone;Rhok的特异性拮抗剂Y-27632购自Alexis公司,兔抗人Ⅷ因子相关抗原购自Zymed公司;小鼠抗大鼠神经胶质纤维酸性蛋白单抗(GFAP)购自Neomarkers公司。方法:实验于2004-03/2005-04在中南大学湘雅医院完成。利用脑微血管内皮细胞与星型胶质细胞共培养建立体外大鼠血脑屏障模型,共培养至10d开始干预,实验分为模型组、Y-27632对照组、肿瘤坏死因子α干预组和Y-27632预处理组。模型组仅给予血脑屏障模型制备,肿瘤坏死因子α干预组向血脑屏障模型内加入肿瘤坏死因子α0.01g/L干预5h;Y-27632预处理组指向血脑屏障模型内加入Y-2763230μmol/L预处理1h后,再予肿瘤坏死因子α0.01g/L干预5h,Y-27632对照组造模后仅加入Y-27632干预,方式同Y-27632预处理组。取分组处理后待用模型,分别于30,60,120,240min采用γ计数仪检测125Ⅰ-牛血清白蛋白的通透量观察肿瘤坏死因子α对血脑屏障通透性的影响。主要观察指标:各组干预后不同时间点体外大鼠血脑屏障模型对125Ⅰ-牛血清白蛋白的通透量。结果:处理后30,60,120,240min,肿瘤坏死因子α干预组体外血脑屏障模型125Ⅰ-BSA通透量均高于其他组别(P<0.01),240min时达高峰;处理后30,60min,Y-27632预处理组125Ⅰ-BSA通透量低于肿瘤坏死因子α干预组(P<0.01),表现出拮抗肿瘤坏死因子α的作用,自120min后,Y-27632预处理组与Y-27632对照组比较,差异也有显著性意义(P<0.05)。结论:肿瘤坏死因子α可导致血脑屏障通透性增高,Y-27632预处理能早期逆转肿瘤坏死因子α对血脑屏障通透性的影响。     

MRS2179对大鼠缺血性脑卒中后MMP-9表达及血脑屏障通透性的影响

目的:观察P2Y1受体抑制剂MRS2179对大鼠缺血性脑卒中后MMP-9表达及血脑屏障(BBB)通透性的影响。方法:45只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、MRS2179组各15只。假手术组及模型组经侧脑室注射5μL人工脑脊液(aCSF),MRS2179组侧脑室注射5μL MRS2179(2 nmol)。制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,假手术组不予缺血。缺血再灌注24 h后,应用干湿重法检测脑组织含水量;伊文思蓝染料(EB)溢出量定量检测BBB通透性改变;Western blot法检测MMP-9蛋白表达。结果:模型组、假手术组、MRS2179组的脑含水量分别为(81.72±0.23)%、(77.65±0.27)%、(79.92±0.24)%(n=6),模型组高于假手术组(P<0.01);MRS2179组较模型组有所下降(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.01)。模型组梗死侧脑组织血管外EB溢出量为(1737.60±67.46)ng/g,显著高于假手术组(324.18±63.35)ng/g(P<0.01);MRS2179组梗死侧脑组织血管外EB溢出量为(1165.15±93.26)ng/g,较模型组明显下降(P<0.01)(n=6)。假手术组、模型组、MRS2179再灌注24 h梗死边缘区脑组织中相对MMP-9蛋白含量分别为(0.52±0.05)、(1.69±0.08)、(0.99±0.10)(n=3),模型组与假手术组相比明显升高(P<0.01),MRS2179组与模型组比较显著下降(P<0.01)。结论:P2Y1R抑制剂MRS2179可能通过降低MMP-9表达,降低BBB通透性,减轻缺血性脑卒中后脑水肿程度。     

溶血磷脂酸对血脑屏障通透性的影响及其机制

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)对血脑屏障(BBB)通透性的影响及其可能机制。方法向SD大鼠右侧基底节区立体定向注射LPA或LPA 苏拉明(L S),用伊文思蓝(EB)作为示踪剂定量测定不同时间点BBB通透性,免疫组织化学技术检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的变化,并应用透射电镜观察BBB超微结构的改变。结果LPA脑内注射后6 h同侧基底节区BBB对EB的通透性开始增加,24 h通透性达最大。到48 h通透性渐减,与对照组相同时间点比较差异有显著性(P＜0．01)。L S脑内注射组各时间点与LPA组相应时间点相比通透性明显下降(P＜0．05)。MMP-9免疫阳性细胞主要为血管内皮细胞,LPA脑内注射后6 h免疫阳性血管数增多,于24 h表达最多,48 h逐渐减少,L S组各时间点与之分别相比差异具有显著性(P＜0．01)。透射电镜观察到LPA组BBB基底膜粗糙、断裂,星形胶质细胞足突明显肿胀,血管周围间隙增宽等,然而L S组上述改变不明显。结论LPA能诱导BBB通透性的增加,其可能机制为LPA受体介导的内皮细胞高表达MMP-9,降解基底膜。     

急性脑损伤后血脑屏障通透性改变的分子机制

正常情况下,血脑屏障可选择性地阻止大、小分子溶质的外渗及任何类型的血细胞迁移.然而,急性脑损伤后,血脑屏障被破坏,其细胞旁渗透性增加,促使血浆蛋白进入脑组织液中,进而形成脑水肿,导致患者脑疝形成,甚至病死.本研究就急性脑损伤后血脑屏障通透性改变的分子机制作一综述.     

乌司他丁对心肺复苏后大鼠脑水肿和血脑屏障的作用

目的观察心肺复苏早期脑水肿与血脑屏障变化的时间特点,研究乌司他丁对复苏后脑损伤的保护作用。方法SpragueDawley(SD)大鼠96只,随机分成正常对照组,手术对照组,复苏组(分复苏后即刻、0.5h、3h、6h、9h),药物组(给药后即刻、0.5h、3h、6h、9h),建立大鼠心肺复苏模型,检测脑组织水含量及EB含量,观察心肺复苏后各时点脑水肿及血脑屏障通透性的变化情况。结果心肺复苏后0.5h起就出现脑组织水含量的持续增加,6h后EB含量升高,电镜显示神经细胞胞质水肿,血管神经突起间隙(VR间隙)扩张。而药物组仅于复苏后0.5、3h有脑组织水含量的增加,6h后水含量下降,电镜观察神经细胞水肿减轻,VR间隙呈轻度局灶性扩张。给药后9h内均未见EB含量的升高。结论心肺复苏早期即出现脑水肿,开始以细胞毒性脑水肿为主,而后血脑屏障开放,促使血管源性脑水肿形成,乌司他丁可以通过抑制血脑屏障通透性,减轻脑水肿。     

活血化瘀类中药脑伤泰对大鼠蛛网膜下腔出血后脑微血管构筑和血脑屏障超微结构变化的影响

背景：蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)是引起SAH致死和致残的主要原因，其发病机制目前还不要十分清楚。既往临床及实验研究均提示中药在某种程度上可改变SAH后脑血流变性质，改善脑功能。目的：探讨活血化瘀中药(HXHY)脑伤泰对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)后脑血流量(rCBF)及脑微血管构筑等方面的影响及其作用机制。设计：随机对照的试验。单位：解放军第三军医大学西南医院神经外科，解放军第四军医大学西京医院全军神经外科研究所。材料：实验在第三军医大学西南医院神经外科实验室和第三军医大学基础部中心实验室完成。选用288只雄性Wistar大鼠。方法：通过大鼠枕大池自体血注入法制备SAH和CVS模型，并在1，4，12，24h，3，7，14d及21d等不同时相点，观测各组大鼠局部rCBF、病理变化、脑微血管构筑和BBB超微结构变化。主要观察指标：①大鼠皮质rCBF变化。②脑光镜下病理改变。③脑皮质微血管构筑。④BBB的超微变化。结果：SAH后大鼠的rCBF、病理变化、脑微血管构筑和BBB超微结构变化的动态变化符合CVS的发展规律，HXHY和尼莫地平(Nim)对上述改变有不同程度的改善。结论：SAH后局部rCBF的变化可可以反映该时期CVS的状态．HXHY和Nim可通过多种机制对CVS发挥作用，其中“细胞保护”作用可能更为重要。     

血红素氧合酶－1对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响

目的：探讨血红素氧合酶(hemeoxygouase-1，HO-1)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障(blood brain barrier，BBB)通透性的影响。方法：健康成年雄性SD大鼠，体质量250～300g，采用线栓法制备局灶性脑缺血模型，通过免疫组化观察脑组织：HO-1的表达，通过比色法测定脑组织中伊文思蓝(EB)的含量来反映血脑屏障通透性的改变。结果：缺血2h再灌注2h即见脑缺血区的周围大脑皮质及远隔区域有HO-1蛋白的表达，免疫阳性持续到再灌注后48h。缺血2h再灌注3h EB含量(1．36&;#177;0．10)g／L，BBB通透性开始增加，24h达高峰(5．64&;#177;1．30)g／L，48h后开始减弱。Znpp组EB含量(6．53&;#177;0．02)g／L较缺血2h再灌注24h增高。结论：脑缺血再灌注后HO-1快速高效表达，可能对BBB有保护作用。     

硫酸镁对大鼠脑损伤后血脑屏障通透性的影响

目的 :探讨硫酸镁对大鼠颅脑创伤后血脑屏障通透性的影响及可能的机制。方法 :在SD大鼠颅脑创伤的同时腹腔注射硫酸镁治疗 ,伤后 2 4h测定颅脑创伤组及硫酸镁治疗组大鼠挫伤灶边缘脑皮质含水量 ,用伊文氏蓝作为示踪剂定量观察血脑屏障的通透性 ,并做超微结构观察。结果 :硫酸镁治疗组大鼠脑皮质含水量及伊文氏蓝含量均明显低于颅脑创伤组。超微结构观察也发现硫酸镁治疗组血脑屏障的破坏程度较创伤组减轻。结论 :在颇脑创伤早期应用硫酸镁可以有效地减轻血脑屏障破坏的程度     

磷脂酶A2阻断剂对缺血再灌注损伤诱导细胞凋亡和坏死的影响

目的：探讨磷脂酶Ａ２ 活性对缺血 再灌注损伤过程中主要免疫细胞凋亡和坏死的影响。方法：采用ＤＮＡ 凝胶电泳、电镜、光镜以及流式细胞分析（ＦＡＣＳ）等方法测定了大鼠肠缺血 再灌注损伤后外周血中性粒细胞、脾脏细胞和胸腺细胞细胞凋亡和坏死情况及外源性磷脂酶Ａ２ 阻断剂对其的影响。结果：大鼠经小肠前动脉夹闭６０分钟、再灌注２７０ 分钟后,上述细胞出现程度不同的凋亡或坏死,ＤＮＡ电泳出现“梯形”或弥散状“拖尾”。缺血后再灌注前使用磷脂酶Ａ２ 阻断剂４ 溴苯甲酰乙烷（ｐ ＢＰＢ）、氯喹、血小板活化因子（ＰＡＦ）受体阻断剂ＳＲ２７４１７（５ ｍ ｇ／ｋｇ）后,对中性粒细胞的ＤＮＡ降解、坏死有显著的抑制作用,而对胸腺和脾细胞ＤＮＡ 降解、细胞凋亡没有明显的影响。结论：肠缺血 再灌注损伤可诱导外周血中性粒细胞、脾脏细胞和胸腺细胞细胞凋亡和坏死,在整体实验中阻断磷脂酶Ａ２ 活性可显著减少中性粒细胞坏死的发生     

脑超声造影中超声强度对血脑屏障通透性的影响

目的探讨不同机械指数的诊断性超声在超声造影中对血脑屏障通透性的影响,以了解脑超声造影检查中超声强度的安全应用范围。方法50只清洁级SD大鼠,经尾静脉注射剂量为1ml/kg的“脂氟显”超声造影剂,辅以不同机械指数的超声进行辐照,观察超声照射后血脑屏障通透性的变化。结果在MI等于0.4时,血脑屏障通透性与对照组相比无统计学差异,当MI≥0.8时,血脑屏障通透性增加,且随着超声能量的进一步提高血脑屏障的通透性增加。结论高机械指数的体表超声在超声造影中可导致血脑屏障通透性增加,但应用适当强度的超声在进行大脑超声造影时仍是安全的。