谷氨酰胺对肠组织 NF-κB 及 TNF-α 的调节与肠损伤保护作用的关系

目的：本研究旨在探讨谷氨酰胺对肠损伤的保护作用是否与调节肠组织核因子-κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的分泌有关。方法：24 只日龄 10 d 的 Wistar 幼鼠随机分为正常对照组,内毒素血症组和谷氨酰胺组（n=8）。正常对照组采用生理盐水1 mL/kg腹腔注射;内毒素血症组给予LPS 5 mg/kg 腹腔注射;谷氨酰胺组给予力肽10 mL/kg＋LPS 5 mg/kg腹腔注射。于腹腔注射后3 h处死幼鼠,留取远端回肠组织。行苏木精-伊红染色,光镜下观察肠组织病理改变,RT-PCR 检测肠组织 NF-κB mRNA 的表达,Western blot 检测肠组织 NF-κB 蛋白表达,ELISA法检测肠组织匀浆 TNF-α 的含量。结果：光镜下对照组肠组织结构正常,谷氨酰胺组和内毒素血症组均可见间质和上皮细胞水肿,谷氨酰胺组较内毒素血症组明显减轻;谷氨酰胺组肠组织 NF-κB mRNA 和NF-κB蛋白表达均较内毒素血症组明显下降（均P＜0.01）;谷氨酰胺组肠组织TNF-α分泌较内毒素血症组明显减少（P＜0.01）。结论：谷氨酰胺减轻肠组织损伤的保护作用可能与其下调NF-κB mRNA和蛋白的表达,并降低炎症介质TNF-α的分泌相关。     

牛磺酸对内毒素血症幼鼠肠屏障功能障碍的保护作用

目的 探讨牛磺酸在内毒素血症所致肠黏膜损伤中的作用.方法 腹腔注射大肠杆菌脂多糖(5 mg/kg)以建立幼鼠内毒素血症动物模型.健康18日龄Wistar大鼠72只,随机分为内毒素血症组(LPS组)、牛磺酸干预组(TAU组)、正常对照组(NS组).LPS组和TAU组制模后分为2、6、12、24 h 4个亚组,每亚组8只.在4个时间点分别取肠黏膜标本制备石蜡切片和组织匀浆,光学显微镜及电子显微镜下观察小肠组织病理改变,免疫组织化学染色技术检测NF-κB活化水平,ELISA法检测肠组织匀浆TNF-α和IL-6.结果 LPS组病理结果示微绒毛萎缩、脱落,线粒体严重肿胀,呈空泡变性,染色质浓缩分布于核周边,核仁碎裂消失,凋亡细胞多见,细胞结构紊乱、异常;小肠组织NF-κB活化水平检测结果示各时间点的核阳性细胞比率均较NS组高,以2 h最明显;2 h时小肠匀浆TNF-α、IL-6含量明显高于NS组.TAU可以明显降低NF-κB活化和TNF-α、IL-6组的水平,肠道黏膜损伤较LPs组减轻.结论 TAU可通过减少肠道NF-κB活化,降低炎性因子TNF-α、IL-6水平,保护肠黏膜屏障功能.     

过敏性紫癜患儿血清对人脐静脉内皮细胞的影响及甲基泼尼松龙的保护作用

目的：探讨过敏性紫癜（HSP）患儿血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）炎症损伤的作用及甲基泼尼松龙（甲泼尼龙）在其中的调节作用。方法：人脐静脉内皮细胞培养分为4组：空白对照组、正常血清组、HSP血清组及甲泼尼龙干预组。分别检测各组上清液白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和一氧化氮（NO）水平;半定量RT-PCR和Western blot法检测HUVEC中核因子-κB（NF-κB）和不规则趋化因子(Fractalkine) mRNA及蛋白表达。 结果：HSP血清组上清液IL-8、TNF-α和NO水平均高于空白对照组和正常血清组（P<0.05）, 甲泼尼龙干预组上清液IL-8、TNF-α和NO水平较HSP血清组明显降低（P<0.05）;HSP血清组HUVEC中NF-κB和Fractalkine mRNA表达量明显高于空白对照组（P<0.05）,两者的蛋白表达量明显高于空白对照组和正常血清组（P<0.05）;甲泼尼龙干预组HUVEC中NF-κB和Fractalkine mRNA及蛋白表达量较HSP血清组明显降低（P<0.05）。结论：HSP急性期患儿血清可以诱导体外培养的HUVEC活化并分泌炎性细胞因子,甲泼尼龙可能通过抑制NF-κB表达、减少炎性因子产生而减轻血管炎症。     

幼年鼠急性肺损伤骨髓间充质干细胞干预机制的研究

目的探讨幼年鼠急性肺损伤（acutelunginjury,ALI）肺组织核转录因子（nuclearfactor,NF）-κB及肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor,TNF）-α的变化,观察ALI动物模型应用骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）干预后肺组织损伤的修复程度。方法30只雄性C57幼年鼠采用随机数字表法随机分为3组：模型组、对照组、模型＋MSCs组（实验组）,每组再分为12h、48h2个亚组（每组各5只）。模型组腹腔注射脂多糖（1ipopolysaccharide,LPS）（10mg／kg）建立幼年鼠All模型,对照组同期注入等容积生理盐水,实验组在腹腔注射LPS同时经尾静脉注射MSCs（1×10^6／m1）0．1ml。观察肺组织病理变化并应用免疫组织化学法检测NF-κB及TNF-α蛋白表达的变化。结果与对照组相比,模型组12h、48h时,幼年鼠肺组织NF-κB、TNF-α蛋白表达显著增高（P〈0．05）,而实验组12h、48h时幼年鼠肺组织NF-κB、TNF-α蛋白表达较模型组显著降低[NF-κB：12h：（0．181±0．008）0D值VS（0．203±0．008）OD值,48h：（0．197±0．002）0D值VS（0．210±0．005）0D值;TNF-α：12h：（0．185±0．004）OD值VS（0．201±0．011）OD值,48h：（0．185±0．002）OD值VS（0．215±0．009）OD值]（P〈0．05）。病理学观察显示：模型组鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血、出血、水肿,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变;实验组肺组织损伤程度明显减轻。结论幼年鼠LPS致All模型组肺组织NF-κB及TNF-α蛋白表达增高,LPS致ALI的发病机制可能与NF-κB及TNF-α蛋白表达升高有关。应用MSCs干预后,实验组12h、48h时幼年鼠肺组织NF-κB、TNF-α蛋白表达较模型组显著降低,实验组肺组织损伤减轻,提示MSCs能够减轻ALI肺组织的炎症反应并参与了肺组织损伤的修复。     

多器官功能障碍综合征患儿外周血单个核细胞核因子-κB的活性及相关炎性因子的变化

目的探讨外周血单个核细胞核因子-κB(NF-κB)活性及相关炎性因子白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4和IL-10在小儿多器官功能障碍综合征(MODS)中的作用及临床意义。方法2004-10—2005-06,于广州市儿童医院采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测28例MODS患儿第1、3、7天3个时点外周血单个核细胞NF-κB活性,同时采用Luminex TM-100液相分析平台测定血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-4和IL-10质量浓度,并设立对照组20例。结果MODS患儿各时点单个核细胞NF-κB活性、血清IL-6、IL-10明显高于对照组(P<0.05),在存活组呈降低趋势而死亡组维持在高水平(P<0.05),TNF-α显著下降;NF-κB活性与TNF-α负相关(r=0.333,P=0.002),与IL-6正相关(r=0.292,P=0.007)。结论MODS患儿外周血单个核细胞NF-κB活性、血清IL-6、IL-10水平的持续升高预示预后不良。     

核转录因子-κB反义核酸对肾小球硬化细胞炎性反应的干预

目的检测大鼠肾组织核转录因子-κB（NF-κB）,血清IL-6、TNF-α的表达,探讨NF-κB与多柔比星肾病大鼠肾小球细胞炎性反应的关系及反义核酸的干预作用。方法SD雄性大鼠30只分为5组,A组（假手术组）,B组（硬化组）,C组（正义核酸组）,D组（无义核酸组）,E组（反义核酸组）,每组6只。采用右肾切除加尾静脉注射多柔比星法作肾小球硬化动物模型。第8周各组大鼠予不同药物干预,给药3 d及7 d,分别检测各组大鼠24 h尿蛋白,HE染色观察其肾组织形态学变化,利用图像分析系统计算肾小球硬化指数（GI）,应用免疫组织化学、酶联免疫吸附法检测其肾组织NF-κB p65,血清IL-6、TNF-α的表达。采用SPSS 10.0软件进行统计学分析。结果在不同的时间点,E组尿蛋白、GI、NF-κB p65、IL-6、TNF-α的表达与B组比较均显著降低,在7 d时间点,反义核酸的干预效应较3 d时间点强。结论NF-κB与肾小球硬化、细胞炎性反应存在密切关系。NF-κB反义核酸通过肾动脉给药可直接抑制肾组织NF-κB的翻译、表达,抑制肾小球系膜细胞的炎性反应,从而延缓肾小球硬化进程。     

婴儿捂热综合征外周血单个核细胞核因子-κB活化及血清白细胞介素-17等炎症因子变化的临床意义

目的 探讨外周血单个核细胞核因子( nuclear factor,NF)-κB活化状态及血清炎症细胞因子在婴儿捂热综合征(infant muggy syndrome,IMS)中的临床意义.方法 2008年1月至2011年1月采用酶联免疫吸附法检测100例IMS患儿及32例健康儿童(对照组)外周血单个核细胞NF-κB活化率及白细胞介素( interleukin,IL)-17、IL-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和IL-10血清水平.同时采用流式细胞法检测其中46例IMS患儿及32例对照组儿童NF-κB阳性率,并分析以上指标与多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的关系.结果 与对照组相比,100例IMS患儿采用酶联免疫吸附法检测的NF-κB活化率[(11.042±6.792)％vs (4.528±1.378)％]及46例IMS患儿采用流式细胞法检测的NF-κB阳性率[(28.780±13.820)％ vs(7.078±5.395)％]均明显升高(P均＜0.01).IMS患儿血清IL-17、IL-6、IL-10水平均显著高于对照组(P均＜0.01),血清TNF-α水平稍高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).IMS合并MODS患儿NF-κB活化率[(14.591±7.626)％vs(8.576±4.851)％]、NF-κB阳性率[(36.087±12.056)％vs( 23.590±11.263)％]及IL-17、IL-6、TNF-α和IL-10水平均显著高于不合并MODS者(P＜0.01).结论 外周血单个核细胞NF-κB活化及血清IL-17、IL-6水平对IMS患儿的缺氧性炎症损伤起重要作用.NF-κB高度活化及IL-17、IL-6、TNF-α高度活化与IMS患儿发生MODS有关.血清IL-10水平增高未能阻止IMS患儿的缺氧性炎症损伤.     

肺泡巨噬细胞核转录因子κB和核转录因子抑制物κB-α在肺透明膜病中的表达

目的 探讨新生儿肺透明膜病（HMD）支气管肺泡灌洗液（BALF）中肺泡巨噬细胞（AM）核转录因子κB（NF-κB）和核转录因子抑制物κB-α（IκB-α）的表达及其在HMD中的发病机制。方法 31例HMD机械通气治疗的早产儿,分为存活组22例和死亡组9例,另19例无呼吸系统疾病的早产儿为对照组。收集BALF,分离和培养AM;离体实验用细菌内毒素（LPS）刺激各组AM,提取细胞核蛋白。NF-κB的表达检测采用电泳迁移率实验（EMSA）;应用免疫斑点杂交（Western blot）检测IκB-α的表达;用酶连免疫法（ELISA）测定BALF上清液中细胞因子IL-1β和IL-8含量。结果 存活组在上机后24地h和72hAM中NF-κB表达均明显高于对照组。死亡组在上机后24hAM中NF-κB表达明显增高,而72h时减低,并经LPS刺激后无NF-κB表达明显增高。在上机后24和72h对照组的AM中IκB-α表达高于存活组和死亡组。死亡组在上机后24和72h,AM中IκB-α表达差异无统计学意义,并经LPS刺激后也无IκB-α的再表达。NF-κB表达与IL-1β和IL-8明显正相关。结论 NF-κB的过度表达参与了新生儿肺透明膜病的病理生理发病机制,其途径可能降低IκB-α的表达和增加了IκB-α降解或两者都有。     

过敏性紫癜患儿血清低糖基化IgA1、核因子κB与炎症递质的研究

目的探讨儿童过敏性紫癜(HSP)血清低糖基化Ig A1(Gd-Ig A1)、核因子-κB(NF-κB)水平变化,及其与炎症递质间的关系。方法选取2014年10月至2015年3月初发HSP患儿70例,分普通组(23例)、腹型组(21例)、肾炎组(26例);同期17例健康体检儿童为正常对照组。采用ELISA法检测血清Gd-Ig A1、NF-κB、白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平。结果在HSP急性期,普通组、腹型组、肾炎组及对照组间血清Gd-Ig A1、NF-κB、IL-8、TNF-α、ICAM-1水平的差异有统计学意义(P均0.01);其中肾炎组的血清Gd-Ig A1、NF-κB、IL-8、TNF-α、ICAM-1水平均高于普通组,差异有统计学意义(P均0.05)。在HSP恢复期,肾炎组的血清Gd-Ig A1、NF-κB、TNF-α、IL-8水平仍高于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05),ICAM-1水平在四组间的差异无统计学意义(P0.05)。HSP患儿急性期血清Gd-Ig A1与NF-κB呈正相关(r=0.67,P0.05)。结论 Gd-Ig A1可能通过激活细胞NF-κB,上调炎症递质IL-8、TNF-α及ICAM-1的表达,参与介导HSP的小血管炎性损伤。     

TNF-α和IκBα在内毒素致新生大鼠肺出血中的作用研究(英文)

目的：探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核因子-κB抑制 蛋白α(IκBα)在内毒素脂多糖(LPS)致新生大鼠肺出血发生机制中的作用。方法：将48只7～10日龄Wistar大鼠分为LPS组和生理盐水(NS)组。LPS组腹腔注射LPS 5 mg/kg,按LPS⑸浜蠊鄄斓氖奔浞治0 min,1 h,2 h,4 h,8 h,16 h和24 h组,每组6只;NS组腹腔注射等量生理盐水作为对照。对鼠肺进行大体和光镜观察,分别采用酶联免疫 吸附(ELISA)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot杂交法动态观察肺组织TNF-α蛋白和mRNA表达及IκBα表达的变化。结果：LPS注射后1 h可引起新生 大鼠明显的肺出血及炎性改变。肺组织TNF-α蛋白含量从LPS注射后1 h增加,2 h达高峰; TNF-α mRNA的表达从LPS注射后 0.5 h 明显增强(P<0.01),2 h达高峰;而I κBα于LPS注射后 1 h 起表达很快减弱,明显低于NS组(P<0.05),8 h表达最 弱(P<0.01)。结论：LPS可致新生大鼠肺出血。新生大鼠肺出血可 能与肺组织IκBα蛋白表达减弱,导致NF-κB活化、TNF-α基因转录上调及蛋白合成增加有关。     

Ghrelin对匹罗卡品诱导癫(癎)大鼠大脑皮层核因子-κB和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨Ghrelin治疗匹罗卡品诱导的癫(癎)大鼠大脑皮层核因子(NF)-κB和肿瘤坏死因子(TNF)-α基因和蛋白表达水平的变化.方法 建立匹罗卡品诱导的癫(癎)大鼠模型,将模型分为模型组、生理盐水组和Ghrelin治疗组,同时设正常对照组,比较各组大鼠大脑皮层NF-κB和TNF-α蛋白和基因表达水平.结果 模型组大鼠脑组织NF-κB和TNF-α蛋白和基因表达均增多,正常对照组两者表达较少;Ghrelin治疗组大鼠脑组织NF-κB和TNF-α蛋白和基因表达水平均比模型组和生理盐水组明显降低,差异有显著性(P<0.05).结论 Ghrelin可能通过降低癫(癎)大鼠大脑皮层NF-κB和TNF-α蛋白和基因表达水平,减轻皮层神经细胞的炎症反应,达到对神经细胞的保护作用.     

NF-κB抑制剂在新生儿机械通气肺损伤中的作用研究

目的 探讨NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对机械通气肺损伤的保护作用及其作用机制.方法 20只3周左右日龄的普通级健康幼兔,随机分为4组.①机械通气组,VT=24 ml/kg;②机械通气+PDTC组,机械通气前半小时耳缘静脉注射PDTC 100 mg/kg,VT=24 ml/kg;③复合损伤组,气管内滴入脂多糖(LPS)0.1 mg/kg,然后进行机械通气,VT=24 ml/kg;④复合损伤+PDTC组,耳缘静脉注射PDTC 100 mg/kg,半小时后气管内滴入LPS 0.1 mg/kg,然后进行机械通气,VT=24 mL/kg.持续通气4 h.检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、NF-κB活性与肺组织匀浆中TN-αmRNA和IL-8 mRNA的表达和蛋白含量,并观察肺组织病理改变.结果 PDTC能显著减轻机械通气和机械通气复合内毒素肺损伤的病理改变,干预组MPO、NF-κB活性、TNF-α和IL-8蛋白和基因表达均低于相应的未用PDTC干预组(P<0.01).结论 PDTC可能通过抑制NF-κB的活化,减少致炎细胞因子基因转录与蛋白表达、释放,减轻炎细胞浸润,从而对机械通气和机械通气复合内毒素肺损伤起到一定的保护作用.     

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞核因子-κB活化及核因子-κB抑制蛋白α磷酸化的影响

目的研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)磷酸化的影响。方法提取健康6~8周龄昆明种小鼠腹腔巨噬细胞,培养成活后调细胞水平为2×105mL-1,对照组加入等量9g/L盐水,LPS组加入LPS,使其终水平10μg/mL,LPS刺激细胞24h,SPC干预组加入不同水平SPC,干预细胞2h后加入终水平为10μg/mLLPS刺激24h。免疫细胞化学法观测NF-κB激活、IκBα磷酸化的表达。结果对照组小鼠巨噬细胞细胞核内NF-κBp65水平很低,LPS组细胞核NF-κBp65水平显著高于对照组(P<0.01),不同水平SPC干预组小鼠巨噬细胞NF-κBp65水平降低,即NF-κBp65表达减少,且呈水平依赖性降低(P<0.01)。细胞质内磷酸化的IκBα表达同胞核NF-κBp65水平变化基本一致。结论SPC抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞内NF-κB活化,可能是通过抑制IκBα磷酸化及降解途径完成。     

较大潮气量机械通气致幼兔肺生物伤中NF-κB的作用及对致炎细胞因子的影响

目的探讨NF-κB在幼兔较大潮气量机械通气致肺生物伤中的作用以及对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)的影响。方法27只普通级幼兔随机等分为3组,(1)对照组(NMV,n=9):不进行机械通气;(2)常规机械通气组CMV(CMV,n=9):潮气量(VT)=8ml/kg;(3)大潮气量机械通气组(LMV,n=9):VT=24ml/kg。采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测各时相点肺组织核蛋白提取物中NF-κB活性,WesternBlot法测定肺组织IκBα含量,同时应用RT-PCR和ELISA法检测肺组织匀浆中TNF-α和IL-8mRNA表达及其蛋白含量,并观察肺组织病理改变。结果在各时相点LMV的NF-κB活性明显高于NMV和CMV(P<0·01);CMV的NF-κB活性则高于NMV(P<0·01)。IκBα含量在LMV随通气时间延长呈进行性降低,与NMV和CMV比较有显著性差异(P<0·01)。机械通气后LMV的TNF-α和IL-8含量及表达较CMV、NMV明显增高(P<0·01),TNF-α表达及含量在通气后4h达高峰,6h明显降低,而继TNF-α达峰后,IL-8在通气后6h达最高。肺组织病理学显示,随通气时间延长,LMV的肺泡结构破坏,肺泡壁和肺间质内有大量中性粒细胞浸润和较多红细胞渗出。CMV的肺间质及肺泡壁轻度水肿、有少量粒细胞浸润。NMV未见病理性改变。结论在损害性机械通气肺损伤的发生过程中,IκBα降解和NF-kB活化可能参与了肺组织致炎细胞因子基因表达的调控过程。     

肺炎大鼠心肌组织核因子-κB和炎症因子的变化及腺苷的影响

目的观察金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)感染大鼠肺炎时心肌组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6 mRNA的表达和核因子-κB(NF-κB)活性,以及腺苷的作用.方法 30只SD大鼠被随机分为对照组、肺炎组和腺苷治疗组.将金葡菌经气管插管注入复制肺炎大鼠模型,于注菌后第2、3、4天静脉滴注腺苷治疗,每天90 min,剂量150 μg/(kg*min).第5天处死大鼠,立即取心脏液氮保存,心肌组织用于病理检测、提取核蛋白后用EMSA方法检测核因子-κB活性,采用RT-PCR方法检测TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结果 (1)心肌病理组织检查示肺炎组病变明显,与正常组比较差异有显著意义(P<0.01), 经腺苷治疗后病变较肺炎组明显减轻(P<0.05);(2)肺炎组心肌中TNF-α(2.27±0.27)、IL-6 mRNA(1.89±0.31)的表达高于对照组(1.05±0.16、1.12±0.25)(均P<0.01);腺苷治疗组(1.25±0.18、1.31±0.25)低于肺炎组(均P<0.01),与对照组比较差异无显著意义;(3) 肺炎组心肌中NF-κB 活性(13 033±1 286)高于对照组(383±15)(P<0.01),腺苷治疗组(4 487±562)低于肺炎组(P<0.01).结论金葡菌感染大鼠肺炎可致心肌损害,NF-κB和细胞炎症因子IL-6和TNF-α参与心肌损伤的发生和发展,外源性腺苷可通过抑制NF-κB活性,下调炎症因子TNF-α、 IL-6的基因表达,有利于炎症的减轻和保护心肌.     

香烟烟雾提取物对肺泡Ⅱ型上皮细胞核因子 -κB及肿瘤坏死因子的影响

目的 观察香烟烟雾提取物（CSE）对肺泡兀型上皮细胞（A549）的损伤、对核因子-κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子（TNFα）的影响。方法 体外培养A549,加入不同浓度的CSE,应用倒置显微镜、MTT法、免疫组化染色和ELISA法观察A549细胞形态、活性、NF-κB活化和TNFα水平的变化。结果 与对照组相比,A549细胞的镜下形态和结构随CSE浓度和时间发生改变;MTT示各组问差异有显著性（P〈0．01）;不同浓度CSE刺激后均可诱导NF-κB的活化,且在8h达高峰;各组TNFα水平具时间依赖性,其中5％和10％CSE组上升,20％CSE组下降（P均〈0．01）。结论 CSE可导致A549形态结构改变和活性下降,其损伤可能与NF-κB活化和TNFα水平变化有关。     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织核因子κB表达的影响

目的研究小剂量氢化可的松(HC)对内毒素诱导的脓毒症大鼠海马组织核因子-κB(NF-κB)、抑制因子κB(IκB)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠54只随机分为:对照组(A组)6只,模型组(B组)24只、小剂量HC干预组(C组)24只。腹腔注射脂多糖(LPS)1 mg/kg建立脓毒症大鼠模型,尾静脉注射小剂量HC(6 mg/kg)作为干预,分别在注射后2、8、16、24 h分时段麻醉并灌注固定取脑。B组和C组每个时段点各6只。采用免疫组织化学方法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-κBI、κB的表达。结果模型组NF-κB表达较正常对照组显著上调(P<0.05),IκB表达先降低后逐步上升,较对照组亦明显增加(P<0.05),以8 h为最高;干预组海马NF-κB表达较模型组显著下调(P<0.05);IκB表达较模型组明显增加(P<0.05)。结论小剂量HC可通过诱生IκB来抑制NF-κB的表达,进而调控LPS诱导的脓毒症脑功能障碍,NF-κB信号转导途径在其发病机制中起重要作用。     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠巨噬细胞移动抑制因子的表达

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠中的作用及可能机制.方法 健康7日龄新生SD大鼠共120只.随机分为3组,分别为假手术组、HIBD组、抗MIF中和抗体干预组(anti-MIF组,缺氧缺血后即予抗MIF中和抗体5 mg·kg-1腹腔注射),每组40只.于HIBD模型制成后6 h、12 h、24 h,3 d及7 d处死,应用免疫组织化学法(SP法)观察各组脑缺血侧皮质区MIF及核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达,双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组缺血侧脑组织匀浆TNF-α水平.结果 HIBD组新生大鼠脑组织皮质区MIF、TNF-α表达均在缺氧缺血6 h明显增加,24 h达高峰(Pa<0.01),7 d时恢复正常,与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05);HIBD组NF-κB表达在缺氧缺血6 h开始增加,24 h达高峰,并维持至3 d(Pa<0.01),7 d降至正常,与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05);anti-MIF组大鼠脑组织MIF、NF-κB、TNF-α的表达与HIBD组比较,在各个实验时间点均有降低(Pa<0.01).结论 MIF可能通过调控NF-κB的途径影响其脑皮质TNF-α水平,从而介导缺氧缺血后新生大鼠脑组织的炎性损伤.     

新生儿败血症外周血核因子-κB表达的研究

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在新生儿败血症中的表达及意义。方法分别于患儿入院时、入院后24、48h采用流式细胞仪检测外周血白细胞中NF-κB表达的百分数;根据血培养结果将患儿分为败血症组(26例)和非败血症组(31例),对照组为正常新生儿(20例)。结果败血症组外周血中NF-κB的表达明显高于非败血症组和对照组(P<0.0001),而非败血症组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);败血症组NF-κB的表达水平在入院时明显高于入院后24h和48h(P均<0.0001),入院后24h与48h比较,NF-κB表达水平差异无显著性(P>0.05);非败血症组在入院时、入院后24、48h NF-κB的表达水平差异无显著性。结论NF-κB在新生儿败血症早期表达明显增加,NF-κB的活化可能是败血症炎症发生的分子机制之一。     

黄芩甙对大鼠感染性脑水肿NF-κB活性的影响

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)及其抑制蛋白(IκB)在百日咳菌液所致的大鼠感染性脑水肿模型中的变化及黄芩甙对感染性脑水肿的保护作用是否与抑制NF-κB活化和IκB降解有关。方法健康SD大鼠45只随机分成三组：生理盐水对照组(NS组);百日咳菌感染性脑水肿模型组(PB组);黄芩甙治疗组(BC组)。BC组动物从注菌后1 h起每4 h腹腔注射黄芩甙一次。用电泳迁移率改变法(EMSA)检测各组动物脑组织的NF-κB与靶基因DNA的结合活性,用Western印迹分析法检测各组动物脑组织的IκBα表达。结果在NS组、BP 1 h组NF-κB活性较弱,BP 2 h组NF-κB活性增加,以后持续升高,并以PB 24 h组活性最强;PB 2 h组IκBα表达开始减少,24 h降到最低。BC 2 h,4 h,8 h,24 h组NF-κB活性低于相应PB组。黄芩甙组IκBα表达比相应PB组增多。结论百日咳菌所致的大鼠感染性脑水肿模型中NF-κB的活性明显增强,NF-κB活化可能参与了感染性脑水肿发病机制。黄芩甙对感染性脑水肿的保护作用可能是通过抑制NF-κB异常活化和IκBα降解起作用的。