黄荆子乙酸乙酯提取物诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡

[目的]探讨黄荆子乙酸乙酯提取物（EVn-50）体外诱导人宫颈癌Hela细胞的凋亡作用。[方法]体外培养Hela细胞,不同浓度EVn-50（1.0、10.0、100.0μg/ml）作用于Hela细胞。采用PI染色FCM检测EVn-50诱导Hela细胞的凋亡作用;采用间接免疫荧光标记FCM检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。[结果]EVn-501.0、10.0、100.0μg/ml处理Hela细胞48h后,细胞的凋亡率分别为1.06%、8.80%及20.90%,呈浓度依赖性（P〈0.05）。不同浓度EVn-50作用Hela细胞48h,细胞中Bax、Caspase-3蛋白表达逐渐升高,Bcl-2蛋白表达逐渐降低（P〈0.05）。[结论]EVn-50具有诱导Hela细胞凋亡作用,其作用可能与改变凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及Bcl-2的表达有关。     

南蛇藤提取物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡

[目的]观察南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物在体外对Hela宫颈癌细胞的凋亡作用。[方法]采用MTT法观察南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物对Hela宫颈癌细胞增殖的影响。应用FITC-AnnexinⅤ及碘化丙叮(PI)双重染色法,通过流式细胞仪(FCM)观察Hela细胞的凋亡率及p53基因表达情况。[结果]不同浓度的南蛇藤提取物(15、30、60、120μg/ml)对Hela细胞均有良好的抑制作用,呈剂量依赖性关系,并剂量依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡。FCM检测发现随着南蛇藤提取物浓度的逐步上升,胞内p53蛋白表达亦逐渐上升。[结论]南蛇藤具有抑制Hela细胞增殖及诱导其凋亡作用,上调p53表达可能是其抗肿瘤作用的重要机制之一。     

细胞同步化对肿瘤坏死因子诱导Hela细胞凋亡的影响

目的 研究细胞周期时相对肿瘤坏死因子（TNF）诱导Hela细胞凋亡的影响。方法 应用胸腺嘧啶核苷（TdR）双阻断法将培养的Hela细胞同步化,采用MTT法、流式细胞术和荧光染色,分析同步化的Hela细胞和正常培养的Hela细胞对TNF（加放线菌酮增效）诱导凋亡的敏感性。结果 同步化Hela细胞较正常培养的Hela细胞对TNF诱导调亡的敏感性增强。结论 TNF诱导Hela细胞凋亡与细胞周期有关。     

8-Br-cAMP诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究

目的探讨以8-Br-cAMP体外诱导Hela细胞凋亡中,相关基因及蛋白质表达与凋亡之间的关系,为使用无毒性8-Br-cAMP治疗宫颈癌提供依据.方法采用TUNEL法检测凋亡细胞,采用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹技术检测凋亡相关基因及蛋白质的表达.结果8-Br-cAMP试验组细胞凋亡率为(40.0±1.32)%,对照组(5.2±0.74)%;8-Br-cAMP可上调wp53,iNOS基因表达,下调mp53,bc1-2,c-myc基因表达,可增强iNOS和FasL的酶活性,降低Fas免疫反应性.以上各结果,试验组与对照组相比P＜0.01.结论8-Br-cAMP能诱导Hela细胞凋亡,可作为一种治疗宫颈癌的新途径.     

细胞周期对肿瘤坏死因子诱导Hela 细胞凋亡的影响

 目的　研究细胞周期对肿瘤坏死因子 ( TNF)诱导 Hela细胞凋亡的影响。方法　通过胸腺嘧啶核苷酸 ( Td R)阻断法阻滞 Hela细胞的细胞周期 ,以 MTT法、流式细胞术和荧光染色分析 Td R阻滞细胞和周期化的 Hela细胞对 TNF诱导凋亡的敏感性。结果　Td R阻滞细胞周期较周期化的 Hela细胞对 TNF诱导的凋亡的敏感性降低。结论　揭示 TNF诱导 Hela细胞凋亡与细胞周期有关.     

光叶合欢提取物诱导细胞凋亡的研究

背景与目的:光叶合欢为豆科合欢属植物,文献报道其同属植物茎皮的化学成分有抗癌活性,但未见对光叶合欢的化学成分和生物活性的研究报道,本文的目的是探讨光叶合欢提取物诱导癌细胞凋亡及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(略称MTT)法、细胞核形态学特征检测法、细胞颗粒粒度分析法、琼脂糖凝胶电泳法以及流式细胞术等细胞生物学手段,检测光叶合欢提取物对癌细胞增殖和细胞周期的影响以及诱导癌细胞凋亡的作用。应用细胞微生理感应仪(cytosensormicrophysiometry)检测癌细胞在活细胞状态下对药物的反应,并利用蛋白印迹法研究药物作用后凋亡相关蛋白PARP、bcl-2和Bax的变化情况。结果:光叶合欢提取物对癌细胞有明显的增殖抑制作用,并通过诱导肿瘤细胞凋亡来发挥此作用,对K562细胞株的半数抑制浓度(IC50)为(29.04±12.67)μg/ml。蛋白印迹检测结果显示,光叶合欢提取物作用后肿瘤细胞内的PARP蛋白被剪切,Bax蛋白的表达量增高,而bcl-2蛋白的表达量未见明显变化。结论:光叶合欢提取物具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,且这一作用可能与上调Bax蛋白表达有关。     

人参皂苷Rh2增强紫杉醇诱导Hela细胞的凋亡

目的:探讨人参皂苷Rh2能否增强紫杉醇诱导Hela细胞的凋亡。方法:应用SRB法检测药物抑肿瘤效应;荧光染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;应用金氏公式分析药物间的相互作用。结果:人参皂苷Rh2可浓度依赖性地抑制Hela细胞的增殖,并可协同性地增强紫杉醇对细胞增殖的抑制作用;人参皂苷Rh2可协同性地增强紫杉醇诱导的Hela细胞凋亡,并具有浓度依赖性。结论:人参皂苷Rh2可协同性地增强紫杉醇对Hela细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用。     

热疗对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的:观察不同加温温度对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响.方法:人宫颈癌Hela细胞株常规方法培养,采用水浴加热法(温度为41℃、42.5℃、43.5℃、)对细胞进行加温处理,处理后继续培养24h.用流式细胞仪检测细胞凋亡,单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)法检测DNA受损状态.结果:随着温度的增加细胞凋亡率增加,42.5℃、43.5℃加温1h后细胞凋亡率最高分别为30.7%和34.6,坏死细胞分别为13.2%和29.6%.单细胞凝胶电泳发现42.5℃加温1h后40.0%的细胞有DNA损伤,43.5℃加温1h后80.0%以上的细胞DNA损伤,而41℃加温处理1h后仅有20.0%细胞DNA受损.结论:单独加温处理1h可诱导细胞凋亡,并导致细胞DNA损伤.     

人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用

目的:探讨人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用。方法:培养人宫颈癌Hela细胞,不同浓度Rg3处理,HE染色观察细胞形态学改变,CCK-8、流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果:Rg3作用后Hela细胞出现了典型的凋亡形态学变化,包括细胞皱缩、细胞核内染色体浓缩。10、20、40、80μg/ml人参皂苷Rg3处理48小时后Hela细胞的平均生存率为76.3%、57.1%、50.0%、29.8%;流式细胞术(FCM)显示肿瘤细胞凋亡率为16.4%、37.0%、50.0%、69.8%,表明肿瘤细胞在人参皂苷Rg3诱导下发生凋亡。结论:Rg3能抑制Hela细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡作用呈剂量依赖性。     

绿茶水提取物诱导体外培养的大肠癌LOVO细胞的凋亡

探讨绿茶水提取物对体外培养的大肠癌ＬＯＶＯ细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法：用ＭＴＴ法，琼脂糖凝胶电泳，秀射电镜和流式细胞仪的方法，观察绿茶水提取物处理ＬＯＶＯ细胞后其生化和形态学等指标的改变。结果；ＭＴＴ法证实绿茶水提取物对ＬＯＶＯ细胞有抑制作用，抑制率与绿茶水提取物的浓度呈正相关；透射电镜可见ＬＯＶＯ细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩，碎裂等凋亡细胞的形态学改变。     

RNA干扰技术沉默宫颈癌Hela细胞Survivin基因对细胞生物学特点的影响

目的:通过RNA干扰技术沉默宫颈癌Hela细胞中的Survivin基因,观察干扰后核酸表达及细胞凋亡情况发生的变化,为进行宫颈癌的基因治疗提供理论依据.方法:设定空白组、阴性对照组及实验组,空白组Hela细胞未进行基因干扰,阴性对照组为非特异序列干扰,实验组为针对Survivin基因设计的干扰RNA(siRNA)干扰,每组均设三个平行标本.转染后48h收集细胞,RT-PCR技术检测Survivin mRNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:转染siRNA 48h后,Hela细胞中Survivin mRNA拷贝数明显减少,实验组mRNA表达量为空白组的23.4％,存在显著性差别(P＜0.01);为阴性对照组的23.3％,存在显著性差别(P＜0.01).流式细胞术检测结果表明,实验组Hela细胞凋亡率是空白组的3.08倍(P＜0.01);是阴性对照组的2.69倍(P＜0.01),均有显著性差异.结论:通过RNA干扰沉默宫颈癌Hela细胞Survivin基因能够促进细胞凋亡的发生,Survivin可能成为基因治疗宫颈癌的理想靶基因.     

多柔比星对人宫颈癌Hela细胞凋亡的形态学观察

目的:从形态学方面探讨多柔比星影响Hela细胞生长的作用机制.方法:采用MTT法观察多柔比星对人宫颈癌Hela细胞生长的影响,并采用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜观察Hela细胞形态变化.结果:MTT实验发现,2 mg/L的多柔比星对Hela细胞的生长有显著的抑制作用,培养4 d后,其生长抑制率达到55.51%,而对L929细胞的生长抑制率仅为18.51%.形态学观察结果表明,多柔比星作用4 d后的Hela细胞呈典型的凋亡形态学改变.结论:2 mg/L多柔比星是通过诱导Hela细胞凋亡而抑制其生长的.     

2-脱氧-D-葡萄糖联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)与顺铂(Cisplatin,Cis-DDP)单独及联合对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响.方法:培养Hela细胞,2-DG、Cis-DDP单独及联合作用于Hela细胞,MTT法检测细胞的存活率;流式细胞仪检测各组药物处理后Hela细胞的凋亡率;ATP实验检测各处理组ATP生成情况;Western blot测定AKT、Caspase-3、PARP-1、MCL-1蛋白表达水平.结果:2-DG、Cis-DDP单独及联合作用Hela细胞均可降低细胞活性,呈时间剂量依赖性,联合用药组与其他各组存活率之间具有显著差异(P<0.05);用药组比对照组细胞ATP生成量降低但24h差异无统计学意义,48h联合用药组ATP生成量明显低于其他各组,且差异具有统计学意义(P<0.05);用药组细胞凋亡率均大于对照组,联合用药组凋亡率大于单药组,且具有明显差异(P<0.05);Western blot显示,联合用药可明显降低AKT、PARP-1、MCL-1蛋白的表达量,并使PARP-1、Caspase-3蛋白分解.结论:2-DG、Cis-DDP可有效抑制肿瘤细胞增殖,诱导其凋亡,2-DG联合Cis-DDP抗肿瘤作用明显增强.     

棕榈酸在体外通过促进凋亡作用抑制宫颈癌Hela细胞增殖的研究

目的 探讨体外棕榈酸(Palmitic acid,PA)抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡作用及其部分机制。方法 体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为对照组(不加药)、PA处理组(分别加入PA 25、50、100μg/mL处理),CCK-8法检测各组HeLa细胞增殖情况,Transwell试验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR检测不同浓度PA处理后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Cleaved-caspase-3的表达,PA处理后的HaLa细胞用膜联蛋白V/碘化丙啶双标,随后用流式细胞仪检测其凋亡情况。结果 与对照组比较,PA处理HeLa细胞后增殖抑制率逐渐增高(P＜0.05);PA处理后,HaLa细胞的迁移与侵袭能力显著下降(P＜0.05);同时,PA处理HeLa细胞后,随着PA浓度增高,Bcl-2基因表达逐渐降低,而Bax和Cleaved-caspase-3基因表达逐渐增强与流式细胞仪检测结果相符合,HeLa细胞的凋亡率随着PA浓度增高逐渐增高(P＜0.05)。结论 PA体外可抑制HeLa细胞增殖,减少其迁移与侵袭水平,并诱导其凋亡,其机制可能与调节HeLa细胞Bcl-2家族有关。     

Hsp90潜在抑制剂姜黄素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的机制

目的:研究姜黄素对人宫颈癌细胞Hela的抑制作用及对Hsp90信号通路的影响.方法:MTT法检测姜黄素对Hela细胞的增殖抑制作用.划痕实验检测姜黄素对细胞浸润侵袭的影响.流式细胞术检测姜黄素促进细胞凋亡的效果.Western blotting检测姜黄素对Hela细胞内Hsp90、Hsp70、AKT及Her-2蛋白表达的影响.结果:作用48h后,姜黄素对Hela细胞的增殖抑制呈现出显著的剂量依赖性(P＜0.01),当药物浓度为100 μmol/L时抑制率达到(87.5 ±3.5)％,IC50值为(41.8 ±2.3)μmol/L.划痕实验表明,姜黄素能抑制细胞的浸润和迁移.流式细胞结果显示,姜黄素能有效的促进Hela细胞凋亡,40 μmol/L组细胞的凋亡率即从原来的(10.3±0.6)％提高至(19.1±1.5)％(P＜0.05),当药物浓度达到100 μmol/L时凋亡率达到(55.8±2.6)％.Westem blotting结果显示,姜黄素能引起Hsp70蛋白表达上调,并促进Hsp90下游客户蛋白AKT及Her-2降解.结论:姜黄素表现出较强的抗Hela细胞活性,其机制可能是通过抑制Hsp90活性,影响相关信号通路引起的.     

沉默TUG1对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的:研究长非编码RNA牛磺酸上调基因1(Taurine-upregulated gene 1,TUG1)对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭的影响.方法:通过RNA干涉技术沉默Hela细胞中TUG1的表达,通过荧光实时定量PCR(RT-QPCR)检测Hela细胞中TUG1的沉默效果;MTT法检测沉默TUG1对Hela细胞增殖的影响,流式细胞术检测TUG1对Hela细胞凋亡的影响,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果:TUG1-siRNA可有效沉默TUG1在Hela细胞的表达,沉默Hela细胞中TUG1的表达可以明显抑制Hela细胞的增殖及侵袭能力,而促进Hela细胞的凋亡能力.结论:TUG1在宫颈癌的进展及转移中发挥着重要作用.