一种新的抗原修复方法的应用

在用多聚甲醛固定组织时,常在组织中的氨基酸残基的分子间或分子内形成醛键,从而使得一些抗原决定簇封闭起来,在免疫组织化学过程中需要进行抗原修复,使被封闭的抗原决定簇重新暴露而容易被检测到[1-3].因此,抗原修复是免疫组化中非常重要的步骤.常用的抗原修复方法有高压修复、微波修复、胰酶修复、胃蛋白酶修复、透明质酸酶修复、蛋白酶K修复以及复合酶修复等.一般认为修复能力由强到弱依次是:高温高压法>高温煮沸法>微波法>超声法>酶消化法[4].对于某些特定的抗原,加热修复法并不是最理想的修复方法[5].尿素作为一种蛋白质的变性剂,可以打断分子间的化学键,从而暴露抗原决定簇.     

微波抗原修复对乳腺癌基因蛋白表达的影响

免疫组织化学染色成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露。组织经10％甲醛固定，组织蛋白发生交联而在一定程度上遮蔽抗原决定簇，从而影响检测蛋白表达。微波抗原修复是目前常用的方法^[1]。本实验利用高灵敏HPIAS-1000图像处理系统进行定量分析，从而得到微波处理与否，乳腺癌组织中p53、rasp21、PCNA蛋白表达的阳性率和阳性表达强度对比。     

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用孙保存赵秀兰章明放林建韶随着免疫组织化学方法的普及，双标记技术的应用日益增多。但该技术操作复杂，影响因素多，不易获得满意结果。利用微波辐射对组织抗原进行修复可明显提高免疫组化染色效果。我们在对克隆病组织中...     

免疫组化染色前抗原修复方法的合理选择

由于组织在福尔马林或其他固定液中固定,经常会引起蛋白质空间结构的改变而导致抗原决定簇被封闭,阻碍了抗原与抗体的结合,随着免疫组化技术在临床病理诊断中不断深入和广泛应用,抗原修复技术在免疫组化操作过程中成为了一个极其重要的环节。我们针对不同的抗原,采取不同的修复     

pH9.0 Tris-EDTA 和pH6.0 Citrate在抗原修复中的应用

甲醛是形态学和免疫组织化学的标准固定液。但是,经甲醛固定的组织常引起蛋白质空间结构的改变而导致抗原决定簇的封闭。抗原决定簇是否充分暴露,是免疫组织化学成败的关键因素之一。抗原修复技术在石蜡切片免疫组织化学染色中是一种简单有效的增强方法,但目前尚没有单一的化学物质既能作为基本的修复液又能作为最佳的抗原修复液,为了确定理想的修复液,我们采用“组合实验”的方法,比较了0．05mol／LTris＋0．001mol／L EDTApH9．0（简称pH9．0Tris-EDTA）和0．01mol／LpH6．0Citrate微波热修复及不修复的情况下,免疫组织化学染色的表达效果。     

不同的抗原修复条件对免疫组织化学染色结果的影响

抗原是指能刺激机体产生抗体,并能与抗体相结合的物质。物质所具有的这种特性称为抗原性,它主要由分布在抗原表面的抗原决定簇决定。但是部分组织经甲醛固定、石蜡包埋后,部分甚至全部抗原决定簇被封闭,影响免疫组织化学的标记效果,误导诊断。因此,不少的研究者纷纷采用不同的方法去暴露被封闭的抗原决定簇。笔者比较了30种常用的抗体在9种不同的抗原修复条件中的表达情况,     

蒸馏水修复抗原法

抗原修复是做好免疫组化（ＰＲ、ＥＲ等）染色的重要步骤之一，目前进行的常规石蜡切片标本，一般均用甲醛固定。事实上经甲醛固定的部分组织细胞，免疫组化标记敏感性明显降低，其原因为：（１）在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇；（２）甲醛在保存过程...     

抗原修复在免疫组化染色中的应用

免疫组织化学染色是利用抗原抗体特异性反应,对组织或细胞内的抗原物质进行定性和定位的标记方法。它对某些抗原物质的定位检测及某些疾病的临床病理诊断具有重要的指导作用。免疫组化染色对已知抗原的检测,其阳性程度不仅取决于抗体的效价及抗体的生物学活性,还取决于组织细胞中抗原决定簇的暴露程度及其稳定性。抗原决定簇是相应的抗体特异性结合的抗原部分。在临床病理诊断中常采用福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片标本,因固定液中所含的甲醛在固定过程中逐渐形成醛键或形成羟甲基,这些化学键可使蛋白与蛋白之间发生交联,从而封闭了抗原…     

微波、高压、真空负压和电炉四种加热法在抗原修复中的比较

常规免疫组织化学染色难以使癌基因、抑癌基因及其产物显示满意的效果。应用高温对组织抗原进行修复，可有效地暴露抗原决定簇而增强免疫组织化学染色的结果t‘］。据此，我们应用T4种不同的加热法，对胶质瘤组织抗原的修复进行了对比研究。l材料和方法1．l材料为我科收集的外科检查确诊为胶质瘤的标本，共80例，均经10％福尔马林液固定，石蜡包埋。每例做连续4M切片20张，附贴于涂有多聚一L一赖氨酸的玻片上，置60t烤箱内烘烤4h。P16，Rb，EGFR，CyclinDI及S－P试剂盆，均为美国饲edmBiotech公司产品；多聚一L一赖氨酸购自福州通新…     

高压抗原修复方法在免疫组化染色的应用比较

目的:优化免疫组化高压抗原修复法染色效果。方法:同一组织分别采用高压抗原修复直接法或间接法,用柠檬酸缓冲液或EDTA抗原修复液进行抗原修复,检测10种常用抗体的免疫组化染色效果。结果:抗原修复间接法与直接法染色强度有明显差异,直接法优于间接法;两种抗原修复液间也存在差异,EDTA抗原修复液效果优于柠檬酸缓冲液。结论:高压抗原修复直接法并用EDTA抗原修复液对组织切片进行抗原修复效果更好。     

不同修复方法对免疫组化染色结果的影响

目前,免疫组化染色技术已成为病理学诊断中不可少的重要手段,而进行抗原修复使抗原决定簇暴露则是免疫组化染色成功的关键。本研究中,观察了高压加热法、微波加热法、胰酶消化和胃酶消化4种抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响。1材料和方法1.1材料收集乳腺癌、淋巴瘤和大肠癌组织标本各12例,均由唐山市协和医院病理科提供。选用鼠抗人单克隆抗体(mAb)ER、PR、c-erbB-2、CK7、EMA、CEA、CK(pan)、MDR-1、P53、Ki67、GCDFP-15、LCA、CD3、CD20、CD45RO、CD79α及PV9000试剂盒,均购自北京中山生物技术有限公司。1.2方法按…     

加热法修复抗原的方法和应用进展

加热法修复抗原的方法和应用进展石砚综述李甘地刘卫平审校作者单位：华西医科大学病理学教研室，成都６１００４１免疫组织化学在日常病理诊断中的作用越来越重要。但常规福尔马林液固定、石蜡包埋的组织，因固定液中甲醛的影响许多抗原失去了活性，导致假阴性的染色结果...     

免疫组织化学抗原修复处理方法的改进

免疫组织化学抗原修复处理方法的改进韩昱晨贾心善（中国医科大学分子病理研究室沈阳１１０００１）免疫组化染色的成败，很大程度上取决于组织内抗原的保存及暴露，在用１０％福尔马林固定组织时，由于蛋白质的交联反应而导致了组织内蛋白抗原被封闭，以致影响抗原的显露...     

免疫组化抗原修复技术新进展

抗原修复是影响免疫组化染色结果的重要因素,现已广泛应用于病理学和形态学研究领域.基于抗原修复的蛋白质组学研究,有助于从福尔马林固定石蜡包埋组织中提取蛋白质,为个性化医疗中相关分子生物标记物的应用建立实用而先进的平台.该文现对抗原修复的机制与其在细胞或组织样品的制备、免疫组化的标准化以及蛋白质组学等方面的应用进行综述.     

生理盐水作为抗原修复液的可行性

免疫组化技术是临床病理工作中必不可少的辅助诊断技术,而抗原修复则是免疫组化成功与否的决定性因素之一.既往抗原修复液多采用柠檬酸盐缓冲液、EDTA溶液等,但均或多或少存在某些缺点.我们利用生理盐水作为抗原修复液,发现其抗原修复效果满意,方法简单、经济实惠,并经我室6 000余例临床标本验证,现介绍如下.     

真空负压、微波辐射和电炉三种不同处理方法对抗原修复的比较研究

本实验选用了真空负压、微波辐射和电炉３种不同的加热方法，进行了抗原修复的应用比较。实验证明：真空负压干燥箱加热法均匀恒定，不会使抗原修复液被煮沸，避免了切片的脱落；不受条件限制，方法简单，实验效果好，阳性物颜色鲜艳，背景清晰。微波辐射加热法使用方便，操作简单，实验效果与上法基本一样；不足的是温度不恒定，不好控制，抗原修复液常被煮沸；由于常可导致切片的松动和脱落，用小容器装抗原修复液时，容易被蒸发干；而且受条件的限制，金属染色架装的载片不能使用。电炉加热法使用也很方便，但温度不恒定，离不开人；实验效果也比上述两种方法差。     

真空负压,微波辐射和电炉三种不同处理方法对抗原修…

本实验选用了真空负压、微波辐射和电炉３种不同的加热方法，进行了抗原的应用比较。实验证明：真空负压干燥箱加热法均匀恒定，不会使抗原修复液被煮沸，避免了切片的脱落；不受条件限制，方法简单，实验效果好，阳性物颜色鲜艳，背景清晰。微波辐射加热法使用方便，操作简单，实验效果与上法基本一样；不足的是温度不恒定，不好控制，抗原修复液常被煮沸；由于常可导致切片的松动和脱落，用小容器装抗原修复液时，容易被蒸发干；而     

免疫组化中高压消毒蒸锅处理修复抗原时间的选择

石蜡切片浸泡于0．01mmol／L柠檬酸缓冲液（pH6．0）中，置高压消毒蒸锅处理（125℃103KPa）4～12min，以恢复组织中因甲醛固定而被封闭的抗原。结果表明：相同温度和压力，但经不同时间处理后，抗原活性部位的暴露情况不同，免疫组化染色的敏感性和效果也不一致．提出了高压消毒蒸锅在处理修复抗原时，需摸索最佳修复时间，以期抗原活性部位充分暴露，从而提高免疫组化的敏感性和显色效果。     

HE染色切片褪色后免疫组织化学染色抗原修复方法

经甲醛固定的组织,由于各种交联键的形成,引起蛋白质的空间结构的改变,最终导致部分或全部的抗原决定簇被封闭,从而影响免疫组织化学检测的敏感性。因此,进行免疫组织化学检测时,绝大多数抗体需要进行抗原修复,以达到最理想的检测效果。为了防止脱片,用于免疫组织化学检测的组织切片几乎都是硅化玻片捞贴的,而普通玻片（即未经APES胶或多聚赖氨酸处理的玻片）捞贴的并已做HE染色的组织切片能否用于免疫组织化学检测？其处理方法与硅化玻片捞贴的组织切片是否一致？我们在这方面做了些尝试,现总结如下。