非胶原蛋白在颌面部骨肉瘤病理诊断中的价值

目的 探讨骨钙蛋白（OC）、骨涎蛋白（BSP）、骨桥蛋白（OPN）在骨肉瘤病理诊断及鉴别诊断中的意义。方法 利用免疫组化方法检测OC、BSP、OPN在50例各型骨肉瘤肿瘤细胞、基质中的表达。结果 OC、BSP、OPN在各型骨肉瘤肿瘤细胞中均有一定程度的表达（80.0％－86.0％),在未矿化、矿化骨基质中,BSP、OPN的阳性率（83.3%-97.7%）均显著高于OC（48.8%-60.4%）。在软骨基质中,OC、BSP、OPN的阳性率相对较低（25.0%-50.0%）。结论 OC、BSP、OPN在检测骨肉瘤中的肿瘤细胞时均有较高的阳性率。在鉴别肿瘤骨基质时,BSP、OPN较OC更有价值。OC、BSP、OPN在成软骨细胞型骨肉瘤的鉴别诊断中具有参考价值。     

骨桥蛋白的研究进展

骨桥蛋白 (osteopontin ,OPN)是一种带负电的非胶原性骨基质糖蛋白 ,OPN由多种组织细胞合成与分泌 ,广泛的分布于多种组织和细胞中 ,包括骨 ,肾 ,肌肉 ,膀胱及自然杀伤细胞[1]。骨细胞、破骨细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞、多种肿瘤细胞及不同成熟阶段的成骨细胞均能合成和分泌OPN分子[2 ],近年来OPN作为一种机体反应蛋白 ,在各器官系统的作用逐渐引起人们的关注。1　OPN的分子结构OPN的相对分子质量约 44kD ,约含 3 0 0个氨基酸残基 ,其中天冬氨酸、丝氨酸和谷氨酸残基占很高比例。其分子内部含有一特殊结构RGD(Arg Gly Asp)序…     

骨基质载体材料的生物学特点及其临床应用

背景:骨组织工程支架材料中的骨基质载体材料为骨缺损修复治疗提供了更为有效的方法。目的:重点介绍天然衍生骨载体材料-冻干脱钙骨基质、脱蛋白骨基质、脱细胞骨基质在骨组织工程中的应用。方法:以"骨组织工程、冻干脱钙骨基质、脱蛋白骨基质、脱细胞骨基质、骨缺损;bone tissue engineering,scaffold materials,demineralized bone matrix,deprotein bone matrix,acellular bone matrix,bone defect"为检索词,由第一作者检索1994/2010PubMed、CNKI及万方数据库等与骨组织工程领域有关的权威性文献。结果与结论:冻干脱钙骨基质、脱蛋白骨基质及脱细胞骨基质均具有良好的生物相容性、极低的抗原性、无细胞毒性,作为骨组织工程载体材料,保留了骨的天然属性,具有多孔隙结构,可降解性及良好骨传导作用,为骨缺损的治疗开辟了一条新途径。     

骨基质载体材料的生物学特点及其临床应用

背景：骨组织工程支架材料中的骨基质载体材料为骨缺损修复治疗提供了更为有效的方法。目的：重点介绍天然衍生骨载体材料-冻干脱钙骨基质、脱蛋白骨基质、脱细胞骨基质在骨组织工程中的应用。方法：以＂骨组织工程、冻干脱钙骨基质、脱蛋白骨基质、脱细胞骨基质、骨缺损;bone tissue engineering,scaffold materials,demineralized bone matrix,deprotein bone matrix,acellular bone matrix,bone defect＂为检索词,由第一作者检索1994/2010PubMed、CNKI及万方数据库等与骨组织工程领域有关的权威性文献。结果与结论：冻干脱钙骨基质、脱蛋白骨基质及脱细胞骨基质均具有良好的生物相容性、极低的抗原性、无细胞毒性,作为骨组织工程载体材料,保留了骨的天然属性,具有多孔隙结构,可降解性及良好骨传导作用,为骨缺损的治疗开辟了一条新途径。     

软组织平滑肌肉瘤组织芯片的构建及其在肿瘤标志物研究中的应用

目的:构建软组织平滑肌肉瘤(leiomyosarcom,LMS)组织芯片,并在此平台上检测多种相关蛋白的表达,为建立其蛋白表达模式提供依据.方法:选取25例LMS组织,12例平滑肌瘤(leiomyoma,LM)及9例正常平滑肌组织构建组织芯片,应用免疫组化SP法检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Ki-67、P16的表达情况.结果:软组织LMS中OPN、Ki-67和P16异常表达率分别为80%、60%和32%.3种蛋白联合检测.LMS总异常表达率为92%,而LM为25%.3种蛋白在不同部位LMS异常表达率的差异均无统计学意义(P>0.05).结论:OPN过表达、P16异常是软组织LMS发生发展过程中常见的分子事件.用OPN、Ki-67与P16对平滑肌肿瘤进行联合检测,有助于其良恶性鉴别诊断.浅部及深部软组织LMS在分子生物学改变上基本一致.     

三维打印聚乳酸支架促进幼年小鼠体外骨样基质沉积的实验研究

目的 研究三维打印聚乳酸支架促进幼年小鼠体外骨样基质沉积的效果。方法 取小白鼠额、顶骨,经细胞分离培养小鼠成骨细胞,然后与三维打印聚乳酸支架、白磷钙石(WH)复合材料支架、纳米有机复合材料支架分别培养,分别计算各组12 h、24 h、36 h、48 h成骨细胞粘附率、增殖率、骨桥蛋白(OPN)基因表达水平、骨钙素分泌情况以及骨基质沉淀率。结果 三维打印聚乳酸支架细胞粘附率、成骨细胞增殖率、细胞骨基质沉淀率显著高于纳米有机复合支架和白磷钙石复合支架(均P <0. 05),且培养时间从12 h延长至48 h,三组以上指标也均显著增加(均P <0. 05);与白磷钙石复合支架组相比,各时间点三维打印聚乳酸支架组细胞OPN基因表达水平和骨钙素分泌量均显著增加(P<0. 05),但与纳米有机复合支架组相比,仅培养36 h时三维打印聚乳酸支架组细胞OPN基因表达水平显著增加(P <0. 05),仅培养48 h时三维打印聚乳酸支架组骨钙素分泌量显著增加(P <0. 05);随着时间延长,三组细胞OPN基因表达水平和骨钙素分泌量也均显著增加(P <0. 05)。结论 三维打印聚乳酸支架具有促进幼年小鼠体外骨样基质沉积的作用,其总体作用效果最显著培养时长为36~48 h,因此值得在临床骨缺损修复中推广使用。     

检测骨桥蛋白的表达与声门上型喉鳞状细胞癌临床病理指征的相关性

目的探讨声门上型喉鳞状细胞癌(SGLSCC)组织中骨桥蛋白(OPN)表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测在37例SGLSCC组织、15例喉正常组织中的OPN蛋白表达,探讨OPN蛋白表达与患者的临床分期、病理学组织分级及淋巴结转移等临床病理指征的相关性。结果 OPN在SGLSCC中的阳性表达率为67.57%,显著高于正常喉组织中的阳性表达率(13.33%),两者对比P<0.05;且OPN在SGLSCC中的表达与临床分期、病理组织学分级、颈部淋巴结转移有明显相关(P<0.05)。结论 OPN在SGLSCC中的表达明显高于喉正常组织,且与患者的临床分期、病理学分级、颈部有无淋巴结转移密切相关,提示OPN蛋白可能参与声门上型喉癌的发生、发展及转移。     

前列腺癌组织中OPN和Survivin表达与PSA的相关性分析

目的通过分析桥蛋白(OPN)和Survivin在前列腺癌(PCa)组织中的阳性表达与前列腺特异性抗原(PSA)的相关性分析,探究前列腺癌的预后判断方法。方法检测70例前列腺癌和48例前列腺增生组织应用免疫组织化学方法相关蛋白OPN、Survivin蛋白的表达和相应患者血浆中PSA值。结果前列腺癌组织中OPN和Survivin蛋白的阳性表达率分别51.4%(36/70)、65.7%(46/70),OPN和Survivin在前列腺增生组织中的阳性表达率分别10.4%(5/48)、0(0/48),在前列腺增生和前列腺癌组织组织中OPN和Survivin蛋白阳性表达率差异具有统计学意义(P0.05),Survivin与OPN在前列腺癌组织中的阳性表达呈负相关(P0.01)。OPN和Survivin蛋白表达和PSA数值与前列腺癌病理分级、临床分期、转移情况有关,具有统计学意义(P0.05)。结论在临床上检测OPN、Survivin表达和前列腺特异抗原(PSA),对前列腺癌疾病的预后有作用。     

血清中骨钙素水平的临床观察

骨钙素(Osteocalcin)是49～50个氨基酸组成的多肽.是骨组织中最丰富的非胶原性蛋白,又称为骨谷氨酸蛋白(bone gla protein,BGP),是成骨细胞分化的标志之一.其作用是促进羟磷灰石在骨基质的沉着,成骨细胞产生和分泌的BGP有2/3与羟磷灰石结晶结合沉着在骨基质,1/3进入血循环.     

人纳米脱钙骨基质复合物的理化性质和安全性

背景：脱钙骨基质和骨形态发生蛋白已被证实具有良好的骨诱导性,但有关纳米脱钙骨基质的研究较少,其理化性质和生物安全性尚不明确。 目的：在前期实验制备人纳米脱钙骨基质的基础上加载重组人骨形态发生蛋白2,分析人纳米脱钙骨基质复合重组人骨形态发生蛋白2的理化性质及生物安全性。 方法：采用改良Urist法制备人脱钙骨基质,并进行纳米化处理,再将骨形态发生蛋白2与其按特定比例混合,冻干塑型行以下实验：①热源实验：将材料浸提液经耳静脉注入兔体内。②毒性实验：将材料浸提液与生理盐水分别经尾静脉注入小白鼠体内。③植入实验：在兔两侧后肢肌肉内分别植入实验材料和β-磷酸三钙。 结果与结论：冻干塑型后,纳米人脱钙骨基质材料表面致密,孔隙直径100-400μm,孔隙分布欠均匀,孔隙率小于30%,以碳、氧和氮为主要元素组成。人纳米脱钙骨基质复合重组人骨形态发生蛋白2材料无热源效应,注射后未见兔体温有明显波动。急性全身毒性实验结果表明人纳米脱钙骨基质复合重组人骨形态发生蛋白2材料符合国家相关规定,注射后未见小鼠出现明显毒性反应。人纳米脱钙骨基质复合重组人骨形态发生蛋白2材料植入兔体内的炎症反应明显轻于β-磷酸三钙植入后的反应。结果表明人纳米脱钙骨基质复合重组人骨形态发生蛋白2是一种无毒、组织相容性好、生物利用度高、炎症反应轻的纳米同种异体骨移植替代物。     

急性脑出血患者骨桥蛋白、S-100β蛋白及基质金属蛋白酶-9水平变化及与神经功能恢复、预后的相关性分析

目的探讨急性脑出血患者骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、S-100β蛋白及基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloprotein-9,MMP-9)水平变化及与神经功能恢复、预后的相关性分析。方法 2016年3月至2017年3月我院收治的32例急性脑出血患者为观察组;同时选取在本院进行健康体检人员34例为对照组。对比两组OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平,并分析OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平与急性脑出血患者神经功能、预后的关系。结果观察组OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平均显著高于对照组(P0.05);NIHSS评分≥6分的急性脑出血患者OPN、S-100β、MMP-9水平均明显高于NIHSS评分6分患者(P0.05);生存分析显示OPN30 ng/ml、S-100β蛋白0.5 ng/ml、MMP-9水平为40.5～55.6 ng/ml的患者中位生存期较长,Keplan-meier生存曲线存在差异(P0.05);经非条件多因素Logistic回归模型进一步分析,得出OPN≥30 ng/ml、S-100β蛋白≥0.5 ng/ml、MMP-940.5 ng/ml或55.6 ng/ml、NIHSS评分≥6分为影响急性脑出血患者预后的独立危险因素(P0.05)。结论 OPN、S-100β、MMP-9与患者神经功能与预后有着密切联系,可用来判断患者神经功能恢复程度,可作为评估患者预后的重要指标。     

应用组织芯片技术检测非小细胞肺癌中骨桥蛋白和基质金属蛋白酶-9的表达及其临床意义

目的:探讨人非小细胞肺癌(NSCLC)组织中骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达及临床意义。方法:利用组织芯片技术结合免疫组化法检测48例NSCLC组织、19例癌旁组织及13例良性病变组织中OPN和MMP-9蛋白的表达。结果:OPN和MMP-9的阳性表达率在癌组织中分别是75.0%、70.8%;在癌旁组织中分别是13.8%、17.2%;在良性病变组织分别是23.1%、30.8%。NSCLC组织中OPN和MMP-9蛋白表达均显著高于癌旁组织及良性病变组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,OPN和MMP-9表达率与患者组织学类型、TNM分期及淋巴结转移有密切关系(P<0.05)。OPN与MMP-9蛋白表达存在正相关(r=0.58,P<0.05)。结论:OPN和MMP-9的表达与NSCLC的发生、发展有关,联合检测有助于判断NSCLC患者的预后。     

口腔鳞癌淋巴结转移灶及其原发灶中肿瘤转移相关因子的表达及临床意义

目的探讨OPN、MMP-9、VEGF-C蛋白在口腔鳞癌原发灶和淋巴结转移灶肿瘤细胞中的表达规律及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测48例口腔鳞癌原发灶及其淋巴结转移灶中OPN、VEGF-C、MMP-9蛋白表达。结果 OPN、MMP-9、VEGF-C三种蛋白在正常口腔粘膜组织中无阳性表达,在口腔鳞癌原发灶及淋巴结转移灶组织中,三种蛋白呈阳性表达,其阳性表达率原发灶中依次为62.5%(30/48)、85.4%(41/48)、81.2%(39/48),淋巴结转移灶中依次为83.3%(40/48)、79.1%(38/48)、77.1%(37/48);OPN在原发灶中的表达低于淋巴结转移灶,两组间比较差异有显著性(P<0.05),而MMP-9和VEGF-C在原发灶和淋巴结转移灶中的表达均较强,差异无显著性(P>0.05)。在原发灶和转移灶之间OPN阳性表达与MMP-9和VEGF-C之间存在正相关(P<0.01)。结论 OPN可能成为预测口腔鳞癌转移的标记物和治疗新靶点,而MMP-9、VEGF-C与口腔鳞癌转移的关系有待进一步研究。     

骨桥蛋白、淋巴细胞活化基因-3、Dickkopf相关蛋白1在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性

目的探讨骨桥蛋白(OPN)、淋巴细胞活化基因-3(sLAG-3)、Dickkopf相关蛋白1(DKK-1)在胃癌组织中的表达及临床病理特征。方法选取160例胃癌患者,分析OPN、sLAG-3、DKK-1表达同患者临床病理特征之间的关系,并对比三者在胃癌组织、癌旁组织以及正常胃黏膜组织当中的阳性表达情况。结果 OPN蛋白在胃癌组织当中的表达同分化程度、淋巴结转移、浸润深度以及胃癌分期等存在显著相关性(P 0. 05);sLAG-3在胃癌组织当中的表达同患者的胃癌分期、浸润深度以及分化程度等存在显著相关性(P 0. 05);DKK-1蛋白在胃癌组织当中的表达同分化程度、淋巴结转移、浸润深度以及胃癌分期等存在显著相关性(P 0. 05);胃癌组织当中OPN、sLAG-3以及DKK-1表达阳性率显著高于癌旁组织以及正常胃黏膜组织(P 0. 05)。结论 OPN、sLAG-3、DKK-1表达与胃癌分期、浸润深度以及淋巴结转移等因素存在密切联系,能够评估患者的病情及预后质量。     

热休克蛋白70和骨桥蛋白在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和骨桥蛋白(OPN)在甲状腺癌中表达的临床意义。方法取92例甲状腺癌组织及癌旁2 cm处正常组织标本,分别采用实时聚合酶联法和Westen Blot法测定组织中HSP70、OPN的mRNA和蛋白表达水平,分析HSP70、OPN的表达与临床病理特征的关系。结果 (1)甲状腺癌组织HSP70、OPN mRNA和蛋白表达水平均较癌旁正常组织显著升高(P0.01);(2)甲状腺癌组织中HSP70和OPN mRNA及蛋白表达水平与年龄和性别无相关性(P0.05),但是与甲状腺癌病理分型、分化程度、肿瘤分期、包膜浸润情况及颈淋巴结转移情况有关(P0.01)。结论 HSP70和OPN可能参与了甲状腺癌的发生、发展,并且与甲状腺癌的分化、浸润和转移有关。     

骨形成蛋白复合材料修复狗椎板缺损的实验研究

目的探讨骨形成蛋白与脱钙骨基质颗粒、骨水泥复合后修复狗腰部椎板缺损的效果。方法制备异体狗脱钙骨基质颗粒,提取牛骨形成蛋白并行成骨诱导活性测定。将脱钙骨基质颗粒、骨水泥与骨形成蛋白复合后行扫描电镜观察和生物力学测定。无菌操作造成狗腰部椎板缺损,用复合材料覆盖修复,术后不同时间进行X射线照相、     

犬同种异体脱钙骨基质复合细胞片层的体外培养与观察(英文)

背景:如何构建具有类似天然骨结构组织工程骨的问题是组织工程学发展的一个难题.细胞片层技术的出现,为其提供了新的途径.目的:观察细胞片层与脱钙骨基质的生物相容性及其在脱钙骨基质上的生长情况.设计、时间及地点:体外观察性实验,于2009-06/2009-09在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:利用温度感应培养基制备犬骨髓基质细胞片层;脱脂、脱钙、脱非胶原蛋白方法制备犬脱钙骨基质.方法:将温度感应技术制备刮取的细胞片层铺盖于脱钙骨基质表面,用含体积分数为10%胎牛血清及成骨诱导剂的DMEM培养液浸没培养.主要观察指标:扫描电镜下观察脱钙骨基质的结构及细胞片层在脱钙骨基质上的附着、生长情况.计算脱钙骨基质孔隙率和孔径大小.结果:扫描电镜下观察可见脱钙骨基质呈三维立体网孔结构.材料孔隙率约为.75%.平均孔隙直径为(250.11±98.89)μm,成正态性分布.扫描电镜下观察细胞片层在脱钙骨基质上的附着、生长状况良好,增殖迅速.结论:细胞片层与脱钙骨基质有较好的生物相容性,脱钙骨基质/细胞片层复合体能够应用于组织工程骨,为构建类似骨结构组织工程骨起到促进作用.     

骨桥蛋白在实验性腹主动脉瘤中的变化及意义

目的 建造大鼠腹主动脉瘤模型,观察骨桥蛋白(OPN)在实验性腹主动脉瘤中的表达情况,探讨OPN在腹主动脉瘤发病中的意义.方法 采用酶灌注法建造大鼠腹主动脉瘤模型,两周后取材并测量大鼠手术后腹主动脉的直径;苏木精-伊红(HE)染色检测主动脉的结构改变及炎性细胞浸润程度;特殊染色检测主动脉中层弹力蛋白变化情况;免疫组织化学技术、蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测动脉组织中OPN的表达量.结果 成功建造大鼠腹主动脉瘤模型;腹主动脉瘤组的术后主动脉直径扩张率(220.3％)明显高于对照组(112.3％)和未处理组;HE染色结果显示腹主动脉瘤组中层弹力蛋白明显减少,炎性细胞浸润程度显著增高;免疫组织化学结果显示OPN在腹主动脉瘤组、对照组组及正常组中的表达分别为7.500×1011±9.233×1011、3.073× 105±2.581×10 5、2.037×105±1.866×105(F =6.595,P＜0.01); Western Blot法显示OPN在上述3组中的表达分别为2.777×105±2.817×105、4.524× 103±1.357×103、2.110× 103±1.985×103(F =9.489,P＜0.01).结论 OPN表达量的增加可能加速实验性腹主动脉瘤的发生发展.     

烟雾暴露大鼠气道胰岛素样生长因子1及骨桥蛋白的表达变化

目的观察烟雾暴露与戒烟大鼠气道胰岛素样生长因子1(IGF-1)与骨桥蛋白(OPN)的表达变化,探讨烟雾暴露大鼠气道损伤的机制。方法将雄性SD大鼠40只随机分为5组:对照组(C组)、烟雾暴露1个月组(S1组)、烟雾暴露1个月及戒烟1个月组(Q1组)、烟雾暴露3个月组(S2组),烟雾暴露3个月及戒烟1个月组(Q2组),HE染色观察肺组织病理学改变;免疫组化染色检测IGF-1及OPN蛋白在气道的表达;RT-PCR检测肺组织IGF-1及OPN mRNA的表达。结果与C组比较,S1、S2组支气管上皮细胞IGF-1、OPN蛋白及mRNA表达均增强(P<0.05),Q1、Q2组支气管上皮细胞的IGF-1、OPN蛋白及mRNA表达低于各吸烟组(P<0.05),支气管IGF-1蛋白与OPN蛋白呈正相关(r=0.558,P<0.05)。结论 IGF-1、OPN参与烟雾暴露大鼠的气道重塑,早期戒烟有助于逆转气道重塑。     

骨桥蛋白促MV4-11白血病细胞uPA表达及信号通路研究

目的初步研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在MV4-11白血病细胞株促尿激酶纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,u PA)表达的信号通路。方法 1)细胞培养:IMDM培养基培养MV4-11白血病细胞。2)分组:1人重组OPN蛋白(0-0.3)μg/m L处理MV4-11白血病细胞24h组;2 PI3-K抑制剂(0-30)μmo L,LY294002处理MV4-11白血病细胞1 h,再用OPN 0.3μg/m L处理细胞24 h组;3NF-ΚB抑制剂(0-15)μmo L处理MV4-11白血病细胞1 h,再用OPN 0.3μg/m L处理细胞24 h组。3)Western blot法分别检测三组细胞u PA表达。结果人重组OPN蛋白单独处理组,随OPN蛋白的浓度增加,u PA表达增加;预先用LY294002及BAY 11-7082处理组,OPN诱导的u PA表达降低。结论 OPN能促进MV4-11白血病细胞u PA表达;LY294002及BAY 11-7082均阻断了OPN促u PA蛋白表达效应,PI3K及NF-KB是这一信号通路中的关键分子。