林下山参的人参皂苷含量分析和指纹图谱研究

目的:采用 HPLC 测定林下山参、园参及红参中3种主要人参皂苷-Rg1、-Re、-Rb-的含量;采用HPLC建立林下山参药材的指纹图谱.方法:人参皂苷含量测定HPLC条件:色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈、水(梯度洗脱),检测波长203nm,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,分析时间100min;指纹图谱HPLC条件:色谱柱为Zorbax SB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长203nm,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,分析时间90min.结果:园参、红参和林下山参的人参皂苷Rg1、Rb1含量测定值没有显著性差异,-Re的含量测定值有差异,林下山参园参红参;共标示出林下山参药材指纹图谱中19个共有峰.利用指纹图谱相似度测试软件,以夹角余弦为测度,测得10批林下山参药材指纹图谱相似度结果均在0.90～1.00.结论:人参皂苷含量测定方法稳定准确,重现性好,可作为测定林下山参的3种皂苷的较好方法;本实验所建立的林下山参药材指纹图谱分析方法准确、重复性好,为有效控制林下山参药材的质量提供了可靠依据.     

超快速液相色谱-质谱法测定鲜人参晶及林下山参中的39个人参皂苷成分

目的：通过超快速液相色谱-质谱法(UFLC-MS/MS)同时测定鲜人参晶和林下山参中主要活性成分人参皂苷的含量,探讨鲜人参晶及林下山参中人参皂苷的差异变化,为阐明鲜人参晶物质基础提供参考。方法：室温下,用70%甲醇水溶液对鲜人参晶及林下山参药材进行超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC?BEH Shield RP C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.5 mmol·L^–1甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱。在电喷雾离子源负离子、多反应监测模式下,通过UFLC-MS/MS外标对照品法测定鲜人参晶及林下山参中39个人参皂苷的含量。结果：经方法学验证,建立的分析方法符合定量分析要求。4批林下山参和1批鲜人参晶中的总人参皂苷质量分数分别为27.59～52.63、52.26 mg·g^–1,稀有人参皂苷质量分数分别为3.79～6.65、7.42 mg·g^–1。林下山参中人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re总质量分数为0.72%～0.94%,人参皂苷Rb     

园参叶及林下参叶中人参皂苷含量比较

目的 建立UPLC法同时测定园参叶及林下参叶中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rd的含量,并比较两者人参皂苷含量。方法 采用UPLC CORTECS C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm, 1.6μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;柱温30℃;检测波长203 nm。对8种人参皂苷进行偏最小二乘法判别分析。结果 8种人参皂苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 9),平均加样回收率97.47%～103.41%,RSD<3.0%。正交偏最小二乘法判别分析可区分2种药材,人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg2的VIP值大于1。结论 该方法稳定可靠,原人参三醇类(人参皂苷Rg1、Re、Rg2)和原人参二醇类(人参皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rd)人参皂苷的比值可作为园参叶和林下参叶区别的重要依据。     

HPLC法测定汉中参叶中人参皂苷Rd的含量

目的：建立HPLC法测定汉中参叶中人参皂苷Rd的含量。方法：筛选适当提取方法,色谱柱：Inertsil ODS-sp（5μm,4.6mm×150mm）;流动相：乙腈-水（32：64）;柱温：30℃;流速：1.0ml/min;检测波长：203nm;高效液相色谱仪测定峰面积。结果：人参皂苷Rd线性范围在9～90ug,γ=0.9998,平均回收率为99.77%,RSD为1.67%。表明该法适用于汉中参叶中人参皂苷Rd的含量测定。结论：本法准确、快速、简便。     

黑参中人参皂苷Rg_3的含量测定

目的:建立黑参中人参皂苷Rg_3的含量测定方法。方法:利用高效液相色谱法,采用Thermo色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,测定黑参中人参皂苷Rg_3含量。结果:研究表明,不同批次黑参中人参皂苷Rg_3的含量差别明显,平均含量为1.236 5 mg·g~(-1),最低含量为0.368 7 mg·g~(-1),最高含量为2.500 7 mg·g~(-1),相差6.8倍。结论:建立了黑参中人参皂苷Rg_3含量的测定方法,对不同批次样品进行测定后发现,人参皂苷Rg_3含量差别明显,为黑参的质量控制和开发利用提供参考。     

生晒参红参林下参中7种人参皂苷含量的比较

目的:对本溪地产的生晒参、红参、林下参,建立可同时测定人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2和Rd含量的反相高效液相色谱方法,并对三者进行了比较。方法:采用高效液相法测定人参皂苷含量。色谱柱:Dia-monsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:50%乙腈、水(梯度洗脱),柱温30℃,流速:1.0mL·min-1,检测波长203nm。结果:这种方法可以有效地区别不同种类人参中人参皂苷的含量。结论:生晒参、红参、林下参之间多数成分上有差异。     

不同参龄的石柱林下山参外观形态及7种主要人参皂苷的含量测定

目的：建立不同参龄石柱林下山参外观形态与人参皂苷含量之间的相关性。方法：采用高效液相色谱法分析人参样品,采用外标法测定人参样品中的各成分含量,采用SPSS软件分析石柱林下山参外观形态与人参皂苷含量的相关性。结果：不同参龄石柱林下山参中大部分成分的含量呈现出先升高,随后保持稳定,最后略有降低的累积趋势。石柱林下山参的总重量、总长度以及芦头重百分比与生长年限呈正相关,而须根重百分比与生长年限呈负相关。人参皂苷的含量与芦长/主根长百分比呈正相关。结论：芦长与人参皂苷含量存在相关性为通过芦长对人参分等的传统分等方法提供科学依据。     

人参皂苷类成分的HPLC指纹谱研究

采用HPLC法研究人参皂苷类成分的指纹谱,色谱柱ZORBAXSB-C18(4.6×250mm,5-Micro),流动相乙腈水(梯度洗脱),柱温30℃,检测波长203cm,分析时间70min,流速1.0ml/min,共标出人参药材16个共有峰.     

参芍片中人参皂苷Rg1,Re和芍药苷含量的HPLC研究

目的：高效液相色谱法测定参芍片中人参皂苷Rg1，Rc和芍药苷的含量。方法：Symmetry C18柱，流动相：乙腈－0．2％磷酸（11：89），流速：0．8mL/min，柱温：30℃，检测波长：203，230nm，进样量10uL，结果：本法可测定人参皂苷Rg1，Rc和芍药苷的含量，其分别在0．960ug-4.800ug;0.912ug-4.560ug;1.050ug-5.250ug范围内与峰面积成线性关系。平均回收率分别为105．2％；98．5％；103．5％。结论：该方法简便，准确，可作为参芍片的含量测定方法。     

UPLC-MS/MS法同时测定参蛤胶囊中4种皂苷类成分的含量

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法同时测定参蛤胶囊中人参皂苷Rb₁、Rg₁、Re和三七皂苷R₁含量的方法。方法:采用ACQUITY UPLC BEN C₁₈色谱柱(2.1 mm×50.0 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温为30℃;采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测,多反应监测模式。结果:人参皂苷Rb₁、Rg₁、Re和三七皂苷R₁的线性范围分别为1.018～20.356 mg·L^-1(r=0.999 4)、1.027～20.550 mg·L^-1(r=0.999 6)、1.041～20.828 mg·L^-1     

野山参中7种人参皂苷的测定

目的 应用反相高效液相色谱法测定野山参中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd.方法 采用Eclipse Plus C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水,柱温30℃;检测波长203 nm;体积流量1mL/min,进样体积10 μL.结果 7种人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd均达到完全分离,方法学考察表明,线性良好(r=0.999 9),平均加样回收率分别为97.06％、98.37％、98.71％、98.88％、100.43％、98.80％,RSD分别为0.51％、1.88％、2.13％、0.98％、1.43％、0.61％、1.73％.结论 该方法准确方便,稳定可靠,可以用来对野山参药材进行质量控制.     

HPLC法同时测定林下参、鲜人参、生晒参和红参中14种人参皂苷

目的 建立同时测定林下参、鲜人参、生晒参和红参中14种中性和酸性皂苷量的方法.方法 采用反相高效液相色谱法,以COSMOSIL 5 C18-MS柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm)为分析柱,乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,柱温25℃,体积流量为1 mL/min,检测波长203 nm.结果 人参皂苷在0.010～0.640 mg/mL内线性关系良好;加样回收率为97.4％～103.6％.结论 本法简便、准确、分离度好,可作为林下参、鲜人参、生晒参和红参的质量评价的方法,并首次发现了林下参中酸性皂苷的存在.     

野山参的生药组织学研究

 目的：探索野山参及园参组织学鉴别方法;方法：采用徒手切片,利用光学显微镜对野山参三节芦及根的横切面、粉末进行了细致的观察,并与园参作了时比,绘制了墨线图。结果：目的：探索野山参及园参组织学鉴别方法。方法：采用徒手切片,利用光学显微镜时野山参野山参与园参由于生长条件及年限不同,其组织形态也有一定的差异,这些区别具有一定的代表性,可作为野山参及园参鉴别之用。结论：野山参根的横切面具有较多的颓废组织;草酸钙簇晶多、呈类圆形;淀粉粒偶见;树脂道较少,多分布在韧皮部外侧,大多呈长椭回形或挤压成不规则形是野山参的鉴别要点。     

野山参、林下山参、趴货、园参性状及显微特征的比较研究

目的 比较野山参、林下山参、趴货、园参性状特征及显微特征的区别,建立各类人参鉴别检索表.方法 观察不同生长方式人参的芦、艼、体、纹、支根、须根的性状特征以及主根、须根的横切面显微特征.结果 圆芦、下垂艼、铁线纹、分腿灵活自然、皮条须和珍珠点,是野山参和林下山参重要的鉴别性状;人参主根中的草酸钙簇晶、须根中的木质部随生长年限的增加呈显著增加趋势,而淀粉粒的数量则随生长年限的增加呈显著减少的趋势,据此可鉴别出不同类型的人参.结论 野山参、林下山参、趴货、园参的芦、艼、纹、主根、须根等具有显著区别.     

人参皂苷在不同商品人参中的分布研究进展

商品人参种类较多,已经有大量的研究证实不同生境、生长模式、生长年限、移栽次数、加工炮制的人参商品在性状方面会有差异,体现在药效物质基础上则是人参皂苷含量和种类也会有差异。但到目前为止,相关研究主要集中于对园参、生晒参和红参中皂苷类成分的含量分析、分离纯化及鉴定上。基于此,将商品人参的主要化学成分人参皂苷进行系统综述,明确不同类型和种类的人参皂苷在各种人参商品中的分布,为今后不同商品人参的药效物质基础和活性对比研究提供帮助。     

不同规格红参中皂苷的比较分析

目的:测定几种不同规格中国红参主根及须根中人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁,Rc,Rb₂,Rd的含量。方法:应用超声波提取法及反相高效液相色谱法分析。结果:6种皂苷的和分别为15支(每500 g)1.21%,20支1.46%,30支1.54%;红参须根8.16%。结论:人参根随着体积增大,皂苷含量减少。     

人参花超微粉碎扫描电镜观察及人参皂苷测定

目的 研究超微粉碎对人参花细胞结构及人参皂苷溶出率的影响.方法 用扫描电镜观察超微粉碎人参花的细胞形态,并用分光光度法和HPLC法测定超微粉中人参花总皂苷及人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rd.结果 超微粉碎在破坏人参花细胞结构的基础上使人参皂苷溶出率显著提高.结论 超微粉碎人参花可能在相关药物或保健产品的开发中发挥作用.     

人参茎叶霜冻前后的质量变化

采用HPLC测定人参茎叶受冻前后单体皂苷、游离氨基酸含量,紫外分光光度法测定总酚含量及DPPH法测定自由基清除能力的变化,考察人参茎叶霜冻前后的质量变化。结果表明,受冻后人参茎中9种单体皂苷含量除Rg₁,Re升高外,其余皂苷含量均有所下降,人参叶中皂苷含量均明显降低;受冻后人参茎中游离氨基总含量降低,而人参叶氨基酸总含量升高;受冻后人参茎、叶中的总酚含量降低,但对自由基的清除能力提高。霜冻对人参茎叶质量产生一定的影响。     

茉莉酸甲酯调控下人参发状根皂苷合成相关基因表达的研究

通过外源添加茉莉酸甲酯(MeJA),研究其调控液体培养条件下人参发状根中皂苷生物合成途径相关酶基因在诱导子作用时表达情况。以四年生吉林人参主根诱导的人参发状根无性系为材料,利用香草醛-硫酸比色法测定MeJA处理前后人参发状根的总皂苷含量;同时,利用荧光实时定量PCR测定MeJA处理前后人参发状根中鲨烯合成酶(squalene synthase,SQS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SQE)、氧化鲨烯环化酶(oxidized squalene cyclase,OSC)、达玛烷二醇合成酶(dammarenediol synthase,DS)、β-香树脂合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)和环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因的相对表达量。结果表明:获得MeJA添加到人参发状根中最佳添加浓度为6×10~(-4)μmol·L~(-1)、添加时间为22 d、作用时间为5 d;MeJA的添加可以提高人参发状根中过氧化物酶(PPD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(PPD)的酶活性;经过MeJA处理后人参发状根中人参皂苷生物合成途径的SQS,SQE,OSC,DS,β-AS基因的表达变化均有显著提高,然而CAS基因的表达变化不显著。因此说明在添加MeJA处理后,皂苷生物合成途径中SQS,SQE,OSC,DS,β-AS基因表达情况与PPD,CAT,PPO的酶活性的变化趋势也相一致。     

不同移栽制红参品质的初步比较研究

目的:比较不同移栽制红参的品质,为人参栽培和加工利用提供依据.方法:测定不同移栽制红参中10种人参皂苷、总灰分、酸不溶性灰分、挥发油、挥发性醚浸出物和总蛋白含量.结果与结论:不同移栽制红参总灰分＜5.0％,酸不溶性灰分＜0.3％;且不同移栽制红参中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量均符合《中国药典》(2010年版)规定.