实验性慢性肾缺血模型肾小管-间质细胞a-平滑肌肌动蛋白的表达和意义

目的:观察单侧肾动脉狭窄(RAS)大鼠模型慢性肾缺血组织中肾小管-间质a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达和意义。 方法:建立Goldblatt单侧RAS大鼠模型,观察大鼠慢性缺血肾脏在90天内不同阶段的病理改变;应用免疫组化法检测肾小管-间质a-SMA及波形蛋白(vimentin)在不同时间点的表达;应用免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察细胞角蛋白(cytokeratin,CK)与a-SMA在肾小管上皮细胞中的共定位情况。 结果:RAS术后第5天首先出现肾小管vimentin阳性,术后第7天肾间质可见少量的a-SMA阳性细胞并随时间递增。通过连续切片观察到,vimentin阳性的肾小管周围肾间质细胞a-SMA表达增强,并与肾小管间质纤维化程度基本一致。当慢性缺血状态持续存在时,后期(术后第45天至90天)少数损伤的肾小管上皮细胞表达a-SMA。应用免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察发现,部分a-SMA阳性的肾小管上皮细胞同时表达CK,并且个别细胞还有向间质游走的趋势。 结论:在慢性肾缺血早期Vimentin阳性的肾小管上皮细胞本身可能诱导了肾间质固有细胞发生肌成纤维细胞转分化,参与肾间质纤维化的发生和发展;在慢性肾缺血后期,肾小管上皮细胞转分化可能是导致肾纤维化进行性发展的关键环节。     

苦参素对大鼠纤维化肝脏金属蛋白酶-1和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

从肝内组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达和肝星状细胞(HSC)的活化，观察苦参素对大鼠实验性肝纤维化的影响，并探讨其可能的体内作用机制。     

卵巢癌中α-平滑肌肌动蛋白的表达及其临床意义

由于多种因素的影响 ,恶性肿瘤的血管增多 ,血流丰富 ,其微血管的分化不同于正常组织的血管 ,血管结构缺陷 ,基底膜不成熟 [1]。α-平滑肌肌动蛋白 ( α-SMA)是血管平滑肌细胞的主要成分 ,是血管平滑肌纤维的特异性标志。据文献报道 ,α- SMA的表达与细胞及组织的恶性程度有关 [2 ]。卵巢恶性肿瘤中血管壁 α- SMA表达下降 ,含量减少 [3 ]。因此 ,卵巢癌的血管可能在血管壁结构、数量及其功能方面不同于良性肿瘤血管 ,并可能与影响卵巢癌患者预后的因素有关。为此 ,1 999年 1 0月至 2 0 0 0年 9月 ,我们用 α-SMA单克隆抗体检测卵巢癌…     

乙型肝炎患者肝组织粘着斑激酶、α-平滑肌肌动蛋白的表达及意义

观察粘着斑激酶(FAK)与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达及分布,研究FAK与肝纤维化程度、肝组织炎症程度分级及肝星状细胞(HSCs)增殖的关系。应用免疫组织化学方法测定46例慢性乙型肝炎患者肝组织中FAK、α-SMA的分布及表达。①FAK在对照组中无表达;随着肝纤维化及炎症程度的加重,FAK阳性细胞明显增多,阳性程度( )～( ),与炎症及纤维化程度呈显著正相关,r值分别为0．712、0．730、P＜0．01。②α-SMA在对照组中以阴性表达为主;随着肝纤维化及炎症程度的加重,α-SMA阳性细胞亦明显增多,阳性程度( )～( ),与炎症及纤维化程度呈显著正相关,r值分别为0．778、0．793,P＜0．01。③FAK与α-SMA成显著正相关,r值为0．857,P＜0．01。慢性肝炎患者,随肝纤维化程度加重,肝组织FAK、α-SMA表达明显增加。     

小鼠肾组织中SnoN蛋白表达水平与肾小管上皮细胞转分化的关系

目的：通过观察正常和单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾组织中转录共抑制因子SnoN表达水平的变化，探讨SnoN在肾小管上皮细胞转分化的作用。方法：采用结扎雄性CD-1小鼠左侧输尿管的方法建立UUO动物模型。设假手术小鼠为正常对照组。应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）水平，酸水解一比色法测定肾组织内胶原的含量。借助蛋白印迹技术，检测肾组织中SnoN和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白的变化。以人肾小管上皮细胞（HKC）为体外研究对象，观察TGF-β1对其SnoN表达的直接作用。结果：与假手术组小鼠相比，UUO小鼠术后3天肾组织中SnoN蛋白的表达量即明显降低，术后7天时进一步降为对照组的16％。同时，UUO小鼠肾组织TGF-β1水平、α-SMA蛋白表达量，及其胶原的含量亦随着病程的增加而显著增加。相关分析结果表明，SnoN的减少程度与肾组织内TGF-β1水平、α-SMA的表达和胶原的聚积密切相关（P〈0．01）。此外，HKC细胞培养实验结果表明，TGF-β1减低该细胞表达SnoN蛋白的作用先于α-SMA蛋白的变化。结论：肾脏SnoN表达水平与肾纤维化密切相关，可能通过干扰TGF-β1所致的小管上皮细胞转分化作用影响肾组织的纤维化过程。     

下肢静脉曲张患者血管平滑肌细胞结构及α-肌动蛋白表达变化

目的 进一步探讨下肢静脉曲张的发生机制.方法 选用17份曲张大隐静脉和3份正常静脉,应用间苯二酚品红法染色观察血管平滑肌细胞(VSMC)结构,免疫组织化学染色观察其α-肌动蛋白表达情况.结果 代偿期曲张静脉中膜内VSMC大量聚集成团,失代偿期静脉管壁中膜内大VSMC极少见,呈"空泡"样改变;与正常静脉相比,代偿期曲张静脉VSMC内α-肌动蛋白表达明显增高(P<0.05),而失代偿期曲张静脉VSMC内α-肌动蛋白表达则明显降低(P<0.05).结论 曲张静脉VSMC有明显向内膜增殖"迁移"现象,失代偿期α-肌动蛋白数量明显减少;此可能为静脉曲张发生、发展的机制之一.     

慢肝宁抗肝纤维化的肝组织形态定量及α-平滑肌肌动蛋白免疫组化评价

目的 :探讨慢肝宁胶囊抗肝纤维化的作用机制。方法 :让 3 0例慢性肝炎患者服用慢肝宁胶囊治疗 6个月 ,设对照组 10例 ,用USF图像分析仪对治疗前后两次肝活检标本以点计数法作组织形态定量及α SMA (α 平滑肌肌动蛋白 )阳性细胞数密度测定。结果 :治疗组良好肝细胞面密度增高非常显著 (P <0 .0 0 1) ,变性肝细胞、纤维组织、淋巴细胞面密度减少亦非常显著 (P <0. 0 1) ,肝组织α SMA阳性细胞数密度也显著减少 (P <0. 0 2 ) ;而对照组除变性肝细胞面密度有显著减少外其他变化不显著。结论 :慢肝宁可能是通过抑制淋巴细胞等炎细胞及活化肝星状细胞活性来发挥抗肝细胞损伤及抗纤维化作用。     

红花对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞表型转化的抑制作用

目的 目的观察红花对结扎单侧输尿管诱导的肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞表型转化的抑制作用.方法 结扎单侧输尿管方式复制肾间质纤维化实验动物模型,分别给以红花4.0 g*kg-1*d-1、缬沙坦10 mg*kg-1*d-1经口灌服,采用免疫组化、原位杂交方法检测大鼠肾脏肾小管上皮细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原的表达.结果 单侧输尿管结扎大鼠肾脏α-SMA动蛋白和Ⅲ型胶原的阳性面积及积分光密度较假手术组明显增强,红花及缬沙坦可显著性抑制其表达.结论 红花可以通过抑制肾小管上皮细胞的表型转化拮抗肾间质纤维化.     

冠状动脉粥样硬化病变类型与α-平滑肌肌动蛋白含量的关系

目的:探讨人类冠状动脉粥样硬化病变类型与内膜α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量的关系.方法:选用53例尸检病例的312块冠状动脉组织.经苏木精-伊红染色诊断冠状动脉粥样硬化病变及其类型,用免疫组化和Scion图像软件系统,测定和计算冠状动脉标本中α-SMA阳性面积%.结果:在冠状动脉粥样病变类型中, 5% (16/312)为Ⅰ型,10% (31/312) 为Ⅱ型,21% (66/312) 为Ⅲ型, 4% (14/312)为Ⅳ型, 18% (55/312) 为Ⅴ型和2% (6/312)为Ⅵ型.冠状动脉粥样硬化病变内膜α-SMA阳性面积%随着病变进展和管腔狭窄程度的加重而减少,分别呈负相关 (r=-0.494,P<0.01,r=-0.362,P<0.01).结论:人类冠状动脉粥样硬化病变内膜α-SMA阳性面积%随着冠状动脉粥样硬化病变程度的加重而减少.     

Gremlin在原发性肾小球疾病患者肾小管间质中的表达及其意义

目的探讨原发性肾小球疾病患者肾小管间质中Gremlin的表达及其意义。方法采用免疫组化法检测63例原发性肾小球疾病患者及9例正常肾组织穿刺标本中Gremlin、转化生长因子（TGF）-β1,及a-平滑肌肌动蛋白的表达,并用计算机图像分析软件检测肾小管间质Gremlin、TGF—β1及a-SMA阳性染色相对面积,同时检测原发性肾小球疾病患者血肌酐和尿素氮。结果与对照组比较,原发性肾小球疾病患者肾小管间质Gremlin、TGF-β1。及a-SMA表达均明显增加（P〈0．05）;原发性肾小球疾病患者小管间质Gremlin表达阳性率随小管间质纤维化损害程度增高而增加（P〈0．05）,并与TGF-β1,及a—SMA表达呈正相关（r=0．583、0．596,P均〈0．05）;肾小管间质Gremlin表达阳性率与患者血肌酐、尿素氮水平呈正相关（r=0．802、0．708,P均〈0．05）。结论Gremlin表达与原发性肾小球疾病肾间质纤维化程度密切相关,它可以作为原发性肾小球疾病肾间质纤维化程度的一个标志。     

苦参素对大鼠纤维化肝脏组织金属蛋白酶抑制因子-1、α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 观察苦参素对大鼠纤维化肝脏组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨苦参素对肝纤维化的干预作用及可能的机制。方法 将32只大鼠随机分为4组,制备四氯化碳(CCL_4)性大鼠肝纤维化模型,并给予苦参素干预。应用免疫组化技术检测肝组织TIMP-1和α-SMA的表达,并作网状纤维及HE染色,观察肝脏胶原及组织病理学变化。结果 苦参素干预组的肝脏胶原表达量显著低于模型组,且干预组的TIMP-1表达量较模型组显著下降(P<0.05),但两组间的α-SMA表达则无显著差异(P>0.05)。结论 苦参素可以抑制大鼠CCL_4性慢性肝损伤所致的胶原合成而具有抗肝纤维化作用,其机制可能是通过抑制TIMP-1的合成。     

扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白和Smad3表达的影响

目的：观察扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠肝组织α-SMA（α-平滑肌肌动蛋白）、Smad3表达的影响。方法：SD大鼠90只随机分为6组,采用CCl4加橄榄油造摸,治疗组分为扶正活血1号方、2号方、3号方,并设阳性对照组、模型对照组和正常对照组,通过对各组动物灌服不同药物及生理盐水,分别检测其肝组织α-SMA和Smad3的表达水平。结果：扶正活血1号方和2号方较模型组和阳性对照组大鼠肝组织α-SMA表达产物减少,差异有显著性意义（P〈0.01、P〈0.05）;而扶正活血3号方较模型组大鼠肝组织α-SMA表达均不明显,其差异无显著性意义。对于Smad3的影响,扶正活血1号方、2号方、3号方与模型组比较,差异均有显著性意义（P〈0.05、P〈0.01）,其中1号方和2号方与阳性对照组比较,差异也有显著性意义（P〈0.05、P〈0.01）,而3号方与阳性对照组比较,差异无显著性意义。结论：扶正活血1号方、2号方、3号方对大鼠肝组织α-SMA、Smad3表达均有显著影响。     

肺间质纤维化大鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原的表达

目的 探讨α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在肺间质纤维化中的意义.方法 发将64只Wistar大鼠随机分为对照组和博莱霉素模型组.在第3天、第7天、第14天和第28天,HE染色观察大鼠肺组织结构的改变,免疫组织化学法测定肺组织α-SMA和Ⅰ型胶原的表达,同时用流式细胞术检测肺组织单细胞悬液α-SMA的相对含量.结果 博莱霉素模型组大鼠肺组织α-SMA和Ⅰ型胶原的表达在各时间段均高于对照组(P<0.05),并且两种因子表达呈正相关.同时,博莱霉素模型组各时间段两种因子测定结果 均结果 的差异有统计学意义(P<0.05).结论 经 肺间质纤维化大鼠肺组织α-SMA表达增高,预示肌纤维母细胞的形成,导致Ⅰ型胶原堆积,从而引起肺纤维化.     

秋水仙碱对肾间质纤维化大鼠细胞表型改变的影响

目的 :明确细胞表型改变在肾间质纤维化中的作用和意义 ,以及秋水仙碱对细胞表型改变的影响。　 方法 :通过经典的单侧输尿管梗阻 (UUO)肾间质纤维化模型 ,利用RT PCR和免疫组化法分别观察模型组、秋水仙碱治疗组实验第 3天、第 7天、第 14天和第 2 1天肾组织α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)mRNA和蛋白表达、分布规律。　 结果 :①UUO后肾皮质α SMAmRNA表达于实验第 3天、第 7天、第 14天、第 2 1天分别上调 2 1倍 (2 5 1± 3 6vs11 9± 31 7)、3 9倍 (46 4± 3 0vs 12 0± 1 8)、4 4倍 (5 3 1± 2 9vs 12 1± 2 1)和 3 7倍 (47 5± 3 1vs 12 8± 1 5 ) ;α SMA肾间质阳性表达指数进行性增加 ,分别为 :19 9± 2 6、32 6± 3 1、5 4 8± 4 4、6 3 5± 4 6 (模型组组间比较 ,F =113 3,P <0 0 0 1)。秋水仙碱治疗组在整个实验过程中肾皮质仅微弱表达α SMA ,其mRNA和蛋白表达水平均极显著低于同期模型组 (P <0 0 0 1)。②正常肾组织仅在肾间质血管壁见α SMA表达 ,肾小管上皮细胞、间质以及肾小球均未见表达。第 7天开始肾小管上皮细胞见α SMA明显表达并进行性加重。模型组皮质肾小管α SMA阳性细胞数第 7、14、2 1天分别为 :(12 5± 2 1)个 /HP、(5 8 9± 4 6 )个 /HP、(6 7 3± 4 5 )     

α-平滑肌肌动蛋白表达及血浆转化生长因子β1变化在肝纤维化发生发展中的作用

目的 测定肝纤维化不同分级α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)蛋白表达及血浆转化生长因子β_1(TGF β_1)变化,以探讨其在肝纤维化发生发展中的意义。方法 慢性肝病患者37例,依据肝组织HE、VG染色分为0～4级,其中1级8例,2级9例,3级7例,4级13例。6例正常肝组织为正常对照组。免疫组织化学法测定肝组织α-SMA、uPA、PAI-1蛋白表达变化。ELISA法测定血浆TGF β_1变化。检测血透明质酸。结果 肝纤维化S_(1～4)级肝组织α-SMA表达分别为(4.2±0.5)％、(5.5±0.7)％、(7.9±0.5)％、(9.7±0.7)％,uPA分别为(4.0±0.5)％、(4.8±0.5)％、(5.0±0.5)％、(4.8±0.4)％,PAI-1分别为(4.7±0.4)％、(7.0±0.4)％、(8.9±0.3)％、(11.9±0.3)％,且随肝纤维化分级增加血浆TGF β_1水平也逐渐增加。在肝纤维化S_3、S_4级,α-SMA、PAI-1蛋白表达以及血浆TGF β_1水平增加尤为明显,而uPA仅轻微增加,表现为uPA相对不足。结论 肝组织α-SMA、uPA、PAI-1蛋白表达以及血浆TGF β_1变化在肝纤维化发生发展过程中发挥着重要作用,抑制TGF β_1的早期激活,抑制肝硬化晚期PAI-1过度表达,可能有助于抑制肝星状细胞的激活、增加肝细胞外基质降解,从而有助于延缓肝硬化的发生发     

FIZZ1对α-肌动蛋白和Ⅰ型胶原在大鼠支气管哮喘模型中表达的影响

支气管哮喘（简称哮喘）患者的气道慢性炎症可导致上皮细胞损伤，成纤维细胞活化并分化为表达α-肌动蛋白（α-SMA）的肌成纤维细胞和胶原沉积，因此，α-SMA和Ⅰ型胶原是哮喘早期气道重塑中的重要指标。FIZZ1是2000年首次在过敏性炎症中发现的独立新基因。我们试图检测大鼠哮喘模型Ⅱ期肺泡上皮细胞（AECⅡ）中FIZZ1表达水平、肺组织内α-SMA和成纤维细胞内Ⅰ型胶原含量，揭示FIZZ1与早期气道重塑的关系。     

卡托普利通过下调α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、人单丝氨酸蛋白激酶抑制心肌纤维化

目的通过检测相关因子,研究卡托普利对大鼠心肌纤维化抑制机制。方法将30只大鼠随机分为对照组、模型组、卡托普利组,除对照组外其他组给予异丙肾上腺素腹腔注射5 mg/kg,卡托普利组按5 mg/(kg·d)灌胃卡托普利片悬液;对照组每日给予等体积自来水灌胃,共连续3 d。麻醉取心尖部位,眼球采血,收集血清。心肌组织做HE染色观察,分光光度法检测大鼠心肌羟脯氨酸含量,收集的血清进行分组细胞培养。分别对细胞进行荧光定量聚合酶链反应(PCR)及Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、波形蛋白(Vim)、人单丝氨酸蛋白激酶(LIMK)含量。结果苏木素-伊红(HE)染色法镜下观察心肌组织变化:与对照组比较,卡托普利组与模型组中细胞排列紊乱,细胞变大,心肌坏死灶明显。与对照组比较,模型组与卡托普利组羟脯胺酸含量明显增加(P<0.05);与模型组比较,卡托普利组羟脯胺酸含量明显减少(P<0.05)。与对照组比较,模型组、卡托普利组α-SMA、Vim蛋白和mRNA、LIMK mRNA相对表达量均明显增加(P<0.05);与模型组比较,卡托普利组上述3种指标蛋白和mRNA相对表达量明显下降(P<0.05)。结论卡托普利可以有效改善大鼠心肌纤维化,且通过下调Vim、α-SMA、LIMK因子含量而实现。     

2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA的表达及其与肾功能的关系

目的 探讨α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在2型糖尿病（T2DM）大鼠肾小管上皮细胞中表达的变化,揭示α-SMA的表达及其与肾功能的关系.方法 应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测T2DM大鼠模型中12、24 w时肾小管上皮细胞中α-SMA的表达.结果 免疫组化显示：T2DM组大鼠较同期对照组的肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA表达增强,24w比12 w表达更加明显.流式定量测α-SMA表达与免疫组化结果一致.结论 α-SMA在T2DM大鼠肾小管上皮细胞中表达随时间延长逐渐增加,并且与肾功能的损伤程度呈正相关关系.     

转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的表达

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGFmRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变。结果:HK2细胞有基础量的CTGFmRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24h后,CTGFmRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性。1ng/mlTGF-β1刺激时,CTGFmRNA表达量开始显著增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降,CTGFmRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍(P<0.05)。CTGFmRNA表达量呈时间依赖效应。TGF-β1(5ng/ml)干预30min后,CTGFmRNA表达量开始呈现增加趋势,为对照组的1.48倍(P>0.05),2h后出现显著差异,为对照组的2.14倍(P<0.05);CTGFmRNA表达量在24h达到高峰,持续至36h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍(P<0.005);0.5ng/mlTGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降。在TGF-β1(5ng/ml)干预下,HK2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量αSMA表达。大部分细胞转分化的时间(72h)明显晚于CTGFmRNA     

霉酚酸酯治疗对狼疮性肾炎肾组织内α-SMA和TGF-β1的影响

目的研究霉酚酸酯(MMF)对狼疮性肾炎(LN)肾脏慢性化病变的影响.方法9例LN患者采用MMF联合中小剂量激素疗法.免疫组化法检测治疗前后肾内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β