基于网络药理学的小檗碱治疗缺血性脑卒中作用机制探讨

目的 采用网络药理学方法探讨小檗碱治疗缺血性脑卒中的作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、BATMAN-TCM数据库及SwissTargetPrediction平台检索并预测小檗碱的靶点,通过DrugBank、OMIM、GeneCards、DisGeNET、TTD数据库获得缺血性脑卒中疾病的相关靶点,两者取交集即得小檗碱抗缺血性脑卒中作用靶点。采用Cytoscape 3.6.1软件构建作用靶点蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,筛选出关键靶点,并对其进行分子对接验证。采用DAVID数据库进行基因本体（GO）生物学过程和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。细胞实验观察小檗碱对脑缺血再灌注损伤的作用及对关键靶基因细胞分裂周期蛋白42（CDC42）、肉瘤病毒蛋白（SRC）mRNA表达的影响。结果 共获得小檗碱抗缺血性脑卒中相关靶点44个,筛选出关键靶点6个。分子对接显示,关键靶点CDC42、SRC、丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）、MAPK8及雌激素受体1（ESR1）与小檗碱亲和力较好。KEGG富集分析结果表明,小檗碱治疗缺血性脑卒中相关的信号通路有血管内皮生长因子（VEGF）信号通路、血小板活化、受体相关蛋白1（Rap1）信号通路、鞘脂信号通路、神经营养素信号通路等。细胞实验显示,与对照组相比,氧葡萄糖剥夺/再恢复模型组细胞活力明显下降（P<0.01）,CDC42、SRC mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,而小檗碱中、高剂量能明显升高氧葡萄糖剥夺/再恢复细胞的活力（P<0.05,P<0.01）,降低CDC42、SRC mRNA表达水平（P<0.05,P<0.01）。结论 小檗碱可能通过调节CDC42、ESR1、MAPK14、MAPK8和SRC等核心靶点,干预VEGF信号途径、血小板活化通路等,发挥治疗缺血性脑卒中的作用。     

黄连粗多糖协同小檗碱改善溃疡性结肠炎肠黏膜屏障损伤的作用

目的 考察黄连粗多糖与小檗碱在溃疡性结肠炎小鼠治疗中的协同作用。方法 采用雄性BALB/c小鼠30只随机分为5组,除正常组6只外,其余在小鼠日常饮水中给予5%葡聚糖硫酸钠建立结肠炎模型。建模成功后,每组分别进行灌胃给药4 d,每日1次,小檗碱组（100 mg·kg^-1 BBR）、小檗碱+低剂量粗多糖组（100 mg·kg^-1 BBR+22.8 mg·kg^-1 CCP）、小檗碱+高剂量粗多糖组（100 mg·kg^-1 BBR+45.6 mg·kg^-1 CCP）,模型组和正常组灌胃同体积生理盐水。实验结束后处死小鼠提取结肠,通过蛋白免疫印迹法检测小鼠结肠组织紧密连接闭锁连接蛋白-1（ZO-1）、紧密连接蛋白-1（Claudin-1）和闭合蛋白（Occludin）蛋白的表达。以正常组为对照,评价各治疗组模型小鼠疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度、结肠组织形态和结肠紧密连接蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠ZO-1、Claudin-1和Occludin蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,小檗碱组Claudin-1蛋白表达无明显差异,ZO-1和Occludin蛋白表达显著升高（P<0.01）,黄连粗多糖联合小檗碱组Claudin-1、ZO-1和Occludin蛋白表达显著升高（P<0.01）;与小檗碱组比较,黄连粗多糖联合小檗碱组紧密连接蛋白表达明显强于小檗碱单独给药（P<0.05）。结论 黄连粗多糖协同小檗碱给药能有效改善溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障损伤。     

小檗碱的酶反应动力学及其代谢酶表型和代谢产物研究

目的 采用混合人肝微粒体和重组人源细胞色素酶P450（CYP）同工酶,研究小檗碱的代谢特性,明确参与小檗碱代谢的CYP酶亚型及其贡献度,并确证相关代谢产物的结构。方法 将混合人肝微粒体分别与20、100、200、400、600、800、1 200 ng/mL的小檗碱共同孵育后,计算小檗碱酶反应动力学米氏常数（K_m）、最大反应速率（V_max）、体外肝微粒体对药物的固有清除率（CL_int）;采用CYP酶的特异性抑制剂研究小檗碱的代谢表型;将重组人源CYP同工酶CYP3A4、CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9与一定质量浓度的小檗碱孵育,UPLC法测定孵育液中原形药物的剩余量和代谢产物的生成量;整体归一化法计算各酶的代谢贡献度;LC-MS/MS法鉴定相关代谢产物。结果 小檗碱在混合人肝微粒体中的V_max为1.51 nmol?mg^?1?h^?1;K_m为2.69 nmol/mL;CL_int为0.56 mL?mg^?1?h^?1。CYP2D6的特异性抑制剂奎尼丁和CYP1A2的特异性抑制剂呋喃茶碱对小檗碱的代谢有显著抑制作用,其他CYP酶抑制剂对小檗碱的代谢无显著影响。CYP2D6、CYP1A2对小檗碱代谢产物M₁（去亚甲基小檗碱）的贡献度分别为75.253 9%、23.323 6%;对M₂产物（唐松草分定或小檗红碱）的贡献度分别为46.893 8%、8.679 5%。小檗碱在体外混合人肝微粒体温孵体系中的主要代谢途径为O-去甲基化,可生成去亚甲基小檗碱和唐松草分定或小檗红碱。结论 小檗碱在肝脏中主要被CYP2D6和CYP1A2代谢,分别生成去亚甲基小檗碱、唐松草分定或小檗红碱。     

LC-MS/MS测定药根碱、巴马汀和小檗碱在Caco-2细胞的摄取特性

 目的 建立药根碱、巴马汀、小檗碱的LC-MS/MS测定法,研究其在Caco-2细胞上的摄取特性。方法 色谱条件：Phenomenex luna C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);乙腈-水(4 mmol·L^-1醋酸铵和0.08%甲酸)为流动相,梯度洗脱;质谱条件：采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测,MRM模式。实验考察药物浓度和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂环孢素A和维拉帕米对药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞上摄取的影响。结果 药根碱、小檗碱在0.001 5~0.30 μmol·L^-1（r=0.999 8、r=1.000 0）,巴马汀在0.001 4~0.28 μmol·L^-1（r=0.999 8）内均呈良好的线性关系;药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞的摄取在一定范围内呈浓度依赖性,表现为被动扩散;P-gp抑制剂环孢素A和维拉帕米可显著增加药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞上的摄取。结论 该法快速、灵敏、简单。药根碱、巴马汀、小檗碱在Caco-2细胞的摄取存在P-gp的参与,药根碱、巴马汀和小檗碱是P-gp的底物。     

小檗碱吴茱萸碱联用对AGS细胞TNF-α和IL-8含量的影响

目的: 观察小檗碱吴茱萸碱对胃癌细胞株(AGS)细胞增殖及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-8)含量的影响。方法: 采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法测定小檗碱、吴茱萸碱及两药联用对AGS细胞生长的影响;流式细胞技术检测小檗碱、吴茱萸碱及两药联用对AGS细胞细胞周期的影响;ELISA法测定小檗碱、吴茱萸碱及两药联用 对AGS细胞TNF-α和IL-8含量的影响。结果: 小檗碱15 μmol·L^-1和吴茱萸碱45 μmol·L^-1联用时对AGS细胞增殖的抑制作 用弱于吴茱萸碱单用;小檗碱83 μmol·L^-1和吴茱萸碱1.4 μmol·L^-1 联用时对AGS细胞增殖的抑制作用稍优于两药单用,两药联用阻滞细胞周期于G₂/M期的作用较两药单用无显著差异。进一步研究发现,小檗碱83 μmol·L^-1和吴茱萸碱1.4 μmol·L^-1联用增加AGS细胞培养上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的作用优于两药单用。小檗碱具有降低AGS细胞培养上清IL-8含量的趋势,而吴茱萸碱能够显著增强AGS细胞培养上清IL-8的含量(P <0.01),两药联用能够显著降低AGS细胞培养上清中IL-8的含量(P <0.01)。结论: 不同剂量的小檗碱吴茱萸碱联用对AGS细胞增殖的影响不同。小檗碱能够抑制吴茱萸碱诱导的AGS细胞IL-8的表达上调。     

小檗碱通过调控ELK-3抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化

[目的] 研究小檗碱与ELK-3和人肝癌细胞的上皮-间质转化的关系及其作用机制。[方法] 将HuH7细胞分为空转组、pcDNA3.1-ELK-3组、小檗碱组和小檗碱+pcDNA3.1-ELK-3组。荧光倒置显微镜观察慢病毒转染后的细胞荧光状态;蛋白免疫印迹法（Western Blot）和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测ELK-3和ELK-3靶基因重组人早期生长反应蛋白-1（EGR-1）蛋白和基因表达量,上皮-间质转化相关分子钙黏附素E和波形蛋白的基因和蛋白表达量,以及乙型转化生长因子-1（TGF-β1）/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中TGFβ1、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK1/2）、p38、磷酸化p38（p-p38）蛋白表达量;细胞划痕实验和体外Transwell小室实验观察HuH7细胞迁移和侵袭能力。[结果] 与空转组比较,小檗碱组的ELK-3、EGR-1和波形蛋白的基因和蛋白表达量显著降低（P<0.05）,钙黏附素E基因和蛋白表达量显著增加（P<0.05）,TGF-β1蛋白和p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38/p38蛋白比值显著降低（P<0.05）,细胞迁移和侵袭能力显著降低（P<0.05）,而pcDNA3.1-ELK-3组的结果与之相反。与pcDNA3.1-ELK-3组比较,小檗碱+pcDNA3.1-ELK-3组的ELK-3、EGR-1和波形蛋白的基因和蛋白表达量显著降低（P<0.05）,钙黏附素E蛋白和基因表达量显著增加（P<0.05）,TGF-β1蛋白和p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38/p38蛋白比值显著降低（P<0.05）,并且细胞迁移和侵袭能力显著降低（P<0.05）。[结论] 小檗碱可通过减少ELK-3的表达量,从而抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化。     

Caco-2细胞中8-羟基二氢小檗碱和小檗碱对多药耐药基因表达的研究

目的：研究8-羟基二氢小檗碱和小檗碱与多药耐药基因之间的作用。方法：采用MTT比色法测定药物的细胞毒浓度,适时定量PCR测定不同多药耐药基因的表达。结果：在1～100μM浓度范围内,8-羟基二氢小檗碱和小檗碱对Caco-2细胞无毒性作用;8-羟基二氢小檗碱和小檗碱对mdr1和mrp 1的表达作用一致,在25～100μM范围内,小檗碱能明显降低mrp2的mRNA表达,而8-羟基二氢小檗碱对其无明显影响。结论：8-羟基二氢小檗碱与小檗碱对mrp2的基因表达差异较大,其对MRP2蛋白表达的作用以及与基因调控之间的作用关系还有待更进一步的研究。     

吴茱萸成分在大鼠肝微粒体对盐酸小檗碱代谢的影响

 目的 研究大鼠肝微粒体温孵系统中盐酸小檗碱代谢动力学以及吴茱萸中多种化学成分对其代谢的影响。方法 采用体外肝微粒体温孵法研究盐酸小檗碱代谢的酶动力学,分别考察了温孵时间、微粒体质量浓度以及底物浓度对盐酸小檗碱代谢速率的影响,并探讨吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯对其代谢的影响。结果 盐酸小檗碱在大鼠肝微粒体温孵系统中发生较强的代谢, 其在大鼠肝微粒体中37 ℃温孵0～60 min呈时间依赖的线性消除;当肝微粒体蛋白浓度在0.5～2.0 mg·mL-1,温孵时间为60 min时,盐酸小檗碱代谢速率表现出微粒体蛋白浓度依赖性增快;当底物盐酸小檗碱浓度大于10.0 μg·mL-1时,盐酸小檗碱的代谢速率不再随底物浓度的增加而增加,表现出明显的饱和特性。其表观酶促动力学参数,米氏常数Km为（2.41 ± 0.617) mg·mL-1,最大反应速度V_max为 (6.88±1.89) μg·g-1·min-1。吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯均能显著抑制盐酸小檗碱的代谢,3个组分对盐酸小檗碱的代谢抑制常数K_i分别为 (140.85±16.48), (15.34±3.04)和(25.98±6.47) μmol·L -1,其中吴茱萸次碱和吴茱萸内酯的代谢抑制作用明显强于吴茱萸碱（P＜0.001）。结论 盐酸小檗碱在大鼠肝微粒体内被迅速代谢;吴茱萸中化学成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯对盐酸小檗碱的代谢有抑制作用,此结果有可能对小檗碱体内药动学产生影响。     

不同煎煮方式对柴芍肠宁胶囊中盐酸小檗碱含量的影响

目的：建立柴芍肠宁胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法,考察不同煎煮方式对盐酸小檗碱含量的影响。方法：采用HPLC测定盐酸小檗碱含量,DIKMA ODS-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相乙腈-0.1%磷酸（每100 mL加十二烷基磺酸钠0.1 g）（50：50）,检测波长345 nm。考察黄连与其他药味合煎或分煎时对盐酸小檗碱含量的影响。结果：盐酸小檗碱在2.4~24 mg·L^-1线性关系良好（r=1）,平均回收率101.14%,RSD 2.48%。分煎、合煎样品中盐酸小檗碱平均质量分数分别为0.128 2,0.078 6 mg·g^-1,RSD依次为1.02%,1.25%。结论：黄连与其他药味分煎时盐酸小檗碱含量显著高于合煎,为柴芍肠宁胶囊的临床应用提供参考。     

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS代谢组学技术筛选不同基原小檗皮品种鉴别的指标性成分

目的 研究不同基原小檗皮药材（甘肃小檗Berberidis kansuensis Schneid.、鲜黄小檗B.diaphana Maxim.、匙叶小檗B.vernae Schneid.和刺红珠B.dictyophylla Franch.）的整体化学成分差异,筛选品种鉴别的指标性成分。方法 采用超高效液相色谱-串联四级杆静电场轨道阱质谱（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）代谢组学技术,分析不同基原小檗皮药材的整体化学成分,结合主成分分析（principal component analysis,PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least-squares discrimination analysis,PLS-DA）和方差分析筛选不同基原鉴别的化学标志物。结果 共鉴定了47个化学成分,包括24个生物碱类、12个有机酸类及其衍生物、5个糖类及其衍生物,以及6个其他类成分。筛选出药根碱、四氢巴马汀、蟾毒色胺内盐等12个化学标志物。结论 UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS代谢组学技术结合化学计量学方法,可有效阐明小檗皮不同基原药材的化学成分差异,为其品种鉴别和质量控制提供了参考依据。     

小檗碱对高脂-高盐-果糖大鼠肾损伤的影响及其机制

目的:探讨小檗碱对高脂-高盐-果糖诱致大鼠肾损伤保护作用的抗氧化机制。方法:取SD大鼠50只,随机分为正常对照组和造模组。造模组大鼠给予高脂-高盐饲料喂养,并交替饮用糖盐水(糖4%、盐1%)和果糖水(6%)8 w。根据血压情况,随机将高血压的动物分为模型组(10只,蒸馏水)、卡托普利(10只,25 mg/kg)组、小檗碱高剂量组(10只,300 mg/kg)和小檗碱低剂量组(10只,100 mg/kg)。继续给予高脂-高盐-果糖饲养,同时分别灌胃给予上述药物处理4 w。分别在0、4、8、10、12周末测定血压,药物处理4 w后,留取尿液测定尿蛋白含量,取血测定血肌酐和血尿素氮,分离血清测定SOD活性和MDA、GHb含量,测定肾脏组织H2O2、GSH-Px含量和CAT活性。结果:模型大鼠血压、尿蛋白、血肌酐和血尿素氮水平显著高于正常大鼠(P<0.01),并伴有血清SOD活性降低、MDA和GHb含量升高(P<0.01),肾脏组织H2O2含量升高,降低GSH-Px含量和CAT活性。小檗碱处理4 w,显著降低模型大鼠的血压、尿蛋白、血肌酐和血尿素氮水平(P<0.01),提高SOD活性,降低MDA和GHb含量(P<0....     

黄连素对阿尔兹海默症大鼠学习记忆功能及海马组织GSK3β、p-Tau蛋白表达的影响

目的探究不同剂量黄连素对阿尔兹海默症大鼠学习和认知功能的影响,以及黄连素对丝氨酸蛋白激酶3β(serine protein kinase 3β,GSK3β)、p-Tau蛋白表达的影响。方法大鼠分为假手术组、模型组、黄连素低中高剂量组,除假手术组外,其余各组采用腹腔注射D-半乳糖联合Aβ25-35脑注射的方法建立阿尔兹海默症模型大鼠,药物干预4周后,检测Morris水迷宫实验、海马组织GSK3β、p-Tau蛋白表达量。结果与模型组相比,黄连素治疗组大鼠逃避潜伏期、游泳总路程不同程度降低,穿越目标区域次数增加,其中黄连素高剂量组降低最显著(P<0.01,P<0.05)。黄连素组海马GSK3β、p-Tau蛋白表达较模型组显著降低,高剂量组降低最显著(P<0.01)。结论黄连素能改善阿尔兹海默症大鼠学习和记忆能力,其中150 mg/kg黄连素对善阿尔兹海默症大鼠治疗效果优于50 mg/kg及100 mg/kg,其机制与黄连素降低大鼠海马组织GSK3β、p-Tau蛋白表达有关。     

黄连解毒汤中小檗碱及其他成分模拟组合在脑缺血大鼠体内药动学比较研究

目的 比较基于黄连解毒汤原方比例的4种不同模拟组合中主成分小檗碱在脑缺血模型大鼠体内的药动学变化过程。方法 大鼠按体质量分为模型组和假手术组,模型组以线栓法复制大鼠脑缺血模型。每组又分为4个亚组,分别为小檗碱（247.4 mg/kg）组、小檗碱（247.4 mg/kg）＋黄芩苷（190.7 mg/kg）组、小檗碱（247.4 mg/kg）＋栀子苷（149.5 mg/kg）组、小檗碱（247.4 mg/kg）＋栀子苷（149.5 mg/kg）＋黄芩苷（190.7 mg/kg）组。各组分别于ig给药后0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24、48、72 h 眼眶取血,HPLC法测定小檗碱在大鼠血浆中的浓度变化,绘制药-时曲线,DAS 2.0计算药动学参数。结果 根据统计矩参数,模型组和假手术组小檗碱的吸收顺序均为小檗碱＋栀子苷组＞小檗碱＋栀子苷＋黄芩苷组＞小檗碱组＞小檗碱＋黄芩苷组。结论 针对脑缺血模型,黄连解毒汤中的栀子苷可促进小檗碱的吸收,黄芩苷则对小檗碱的吸收有一定的抑制作用,而三者组合给药后栀子苷可以降低黄芩苷对小檗碱吸收的抑制作用。     

中药方剂玉液汤治疗2型糖尿病大鼠的作用机制研究

目的研究分析中药方剂玉液汤治疗2型糖尿病大鼠的作用机制。方法 2016年9月—12月期间,取80只大鼠作为本次的研究对象,所有大鼠均来自本地区医学研究动物实验中心,予以将80只大鼠分为正常组、2型糖尿病模型组、玉液汤4周组和玉液汤8周组,用高脂高糖饲料、腹腔注射链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型,8周后对比不同组别大鼠各项生理指标变化情况。结果正常组与2型糖尿病组的FBG、LDL-C、HDL-C、TC、TG、SOD和MDA水平均存在较大差异,有统计学意义(P0.05);玉液汤4周组和玉液汤8周组的FBG、LDL-C、HDL-C、TC、TG、SOD和MDA水平与2型糖尿病组比较,存在较大差别,有统计学意义(P0.05);玉液汤4周组的LDL-C、HDL-C、TG水平与玉液汤8周组并无较大差别,无统计学意义(P0.05);玉液汤4周组的FBG、TC、SOD和MDA水平与玉液汤8周组差异显著,有统计学意义(P0.05);2型糖尿病组胰岛体积显著比正常组小,胰岛细胞数量显著较少,而玉液汤4周组和玉液汤8周组胰岛体积比2型糖尿病组胰岛体积较大,细胞数相对较多。结论中药方剂玉液汤能发挥抗氧化及修复胰岛β细胞作用,有效控制2型糖尿病大鼠血糖。     

基于高效液相的黄连药性物质组群对实热证模型大鼠IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量的影响

目的:研究基于高效液相的黄连药性物质组群对实热证模型大鼠IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量的影响。方法:皮下注射2,4-二硝基苯酚复制大鼠实热证模型,分别使用黄连水煎液、热性趋势标记物、寒性趋势标记物,在模型复制后0.5h按体重(10ml/kg)灌胃进行治疗,测定IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量。结果:与空白对照组相比,模型对照组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量明显升高(P<0.05);与模型对照组相比,水煎液组、寒性趋势标记组、IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低(P<0.05),热性趋势标记组IL-6、IL-8、TNF-α含量明显降低(P<0.05)。结论:基于高效液相的黄连药性物质组群对实热证模型大鼠IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量升高有治疗作用。     

小檗碱对糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞 TGF-β1 与Ⅳ型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨小檗碱对糖尿病肾病(DN)大鼠肾病变的保护作用及其机制.方法:以链脲佐菌素(STZ)复制DN大鼠模型,动物分为正常对照组、模型组、小檗碱低、中、高剂量治疗组(50,100,200mg·kg-1 ·d-1)、消渴丸治疗组( XKW,0.8g·kg-1·d-1),8周后检测空腹血糖(FBG)、肾重/体重比(KW/BW)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及尿蛋白(Upro);免疫组织化学检测肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)与Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)蛋白的表达.结果:ig给药,小檗碱可降低大鼠FBG,KW/BW,BUN,Cr及Upro水平,降低肾小球系膜细胞TGF-与Ⅳ-C蛋白的表达.结论:小檗碱对DN大鼠肾微循环病变具有保护作用,这种作用可能与其抑制肾组织TGF-β1与Ⅳ-C蛋白表达有关.     

灵芝多糖对2型糖尿病大鼠血流动力学及氧化应激的影响

目的:探讨灵芝多糖(GLPs)对2型糖尿病大鼠血流动力学及心肌组织中NO,SOD,MDA,CAT,GSH-Px含量的影响.方法:SD大鼠高脂饮食喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg·kg~(-1)建立2型糖尿病(T2DM)模型.成模后将大鼠随机分为6组:正常对照组、模型对照组、灵芝多糖低、中、高剂量治疗组(200,400,800 mg·kg~(-1))、小檗碱阳性对照组,给予药物治疗,第16周末测定血流动力学参数(LVSP,LVEDP,dp/dt_(max),-dp/dt_(max)),检测心脏NO,SOD,MDA,CAT,GSH-Px水平;用电镜观察左室心肌组织超微结构.结果:与模型对照组比较,灵芝多糖中、高剂量能有效降低血糖水平;改善糖尿病大鼠血流动力学指标:降低LVEP,升高LVSP,dp/dt_(max),-dp/dt_(max);能够有效对抗氧化应激作用.同时可以显著改善心肌超微结构.其中高剂量组效果优于中剂量组和BerG.结论:灵芝多糖能够明显改善T2DM大鼠血流动力学参数,降低其氧化应激的水平.     

Effect of berberine on regression of pressure-overload induced cardiac hypertrophy in rats

Berberine is the basic chemical component of a Chinese herb, Coptis chinensis Franch (coptis), considered to be useful in treating some diseases of the cardiovascular system, such as hypertension and chronic heart failure (CHF). In this study, we investigate the inhibitory effect of berberine on experimental cardiac hypertrophy, which is regarded as a risk factor of CHF and other heart diseases. Forty-two male SD rats were divided into four groups: age-matched control, aortic banding model, berberine-treated group and captopril-treated group. Cardiac hypertrophy was induced by suprarenal abdominal aorta constriction (banding). The drugs were orally administered for 8 weeks starting from 4 weeks after surgery at dosage of berberine 10 mg/kg and captopril 50 mg/kg. Blood pressure (BP) was measured four times during the period of the experiment, and hemodynamic parameters, cardiac index, cell size of left ventricular myocardium and total protein of left ventricular tissue were detected 8 weeks after treatment with drugs. The data from the present study showed that: (1) The BP of the aorta banded rats was increased compared with those of the normal (p < 0.001) and the age-matched control rats (p < 0.001), and berberine showed no significant effect on it. (2) After 8 weeks of treatment with berberine, the elevated left ventricular end diastolic pressure (LVEDP) was slightly decreased compared with the aortic banded rats. Meanwhile, the maximum rates of contraction and relaxation (+/- dp/dtmax) was increased (p < 0.05) and the time to reach the point of maximum rate from beginning of contraction (t-dp/dt) was shortened (p < 0.01), indicating that the functions of heart, both contraction and relaxation, were improved. (3) Cardiac growth was inhibited by treatment with berberine. Both whole heart and left ventricular weight were notably decreased compared with the banded rats (p < 0.05 and p < 0.01). (4) The cell size of left ventricular myocardium was significantly reduced (p < 0.001) and the total protein of left ventricular tissue was slightly down-regulated by treatment with berberine. These data suggest that berberine can improve abnormal cardiac function and can prevent the development of left ventricular hypertrophy induced by pressure-overload. This indicates that it may have therapeutic potential in the treatment of CHF.     

黄连素对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血脑区细胞黏附分子表达的影响

目的:观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血脑区细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及P-选择素(P-selectin)的表达和黄连素对两者的影响。方法:将36只大鼠随机分为3组:假手术组,模型组,给药组。给药组分别于栓塞前15 min和栓塞后2 h,再灌注时ip给黄连素30 mg.kg-1;模型组和假手术组ip等量生理盐水。采用大脑中动脉线栓法制作大脑局灶缺血再灌注模型。再灌注24 h后取脑,应用免疫组化方法检测ICAM-1和P-selectin的表达。结果:黄连素能够显著降低缺血再灌注引起的脑梗死体积以及脑组织ICAM-1,P-selectin的表达增高(P<0.05)。其中梗死体积从25%降至17%;ICAM-1阳性细胞百分率从平均65%降至35%;P-selectin从平均60%降至30%。结论:黄连素能够通过脑缺血再灌注炎性反应的免疫调节机制保护脑缺血再灌注引起的损害。