雌激素与人尿酸盐转运子(hUAT)基因表达的相关性研究

目的 观察不同浓度雌激素对肾小管上皮细胞(HK-2细胞)人尿酸盐转运子(hUAT)基因表达的调节作用.方法 根据培养液中所含雌激素浓度由低到高,将HK-2细胞分为5组,每组均培养6 瓶细胞.上述细胞在不同培养液中分别培养48 h.采用荧光定量PCR法检测HK-2 细胞中hUAT mRNA的相对表达量.结果 所有标本均能检测到hUAT mRNA的表达,其中,与B0组(乙醇对照组)比较,B3(10-8mol/L)、B4(10-6mol/L)组hUAT mRNA水平明显升高(P0.05).与B1、B2组比较,B3、B4组hUAT mRNA水平明显升高(P0.05).B1组与B2组比较差异无统计学意义(P>0.05).B4组hUAT mRNA水平最高,是B0组的1.87倍.结论 雌二醇可上调hUAT mRNA的表达,且可能存在相应的作用阈值.     

VLDL对人尿酸盐转运蛋白hOAT1基因表达的影响

目的观察不同浓度极低密度脂蛋白(VLDL)对肾小管上皮细胞（HK-2 细胞）人尿酸盐转运蛋白（hOAT1）mRNA表达的影响。方法根据培养液中所含VLDL浓度的不同,将HK-2 细胞分为：① 单纯采用DMEM培养基组（对照组）;② DMEM培养基+50μmol/L VLDL组（V1组）;③ DMEM培养基+400μmol/L VLDL组（V2组）。每组培养6瓶细胞,在不同培养液中分别培养48h。采用实时荧光定量PCR检测HK 2细胞中hOAT1mRNA 的相对表达量（2^-ΔΔCt 法）。结果所有标本均能检测到hOAT1的表达,且V1组hOAT1 mRNA表达量为对照组的41.6%,V2组为对照组的34.5%。两组与对照组间差异有统计学意义（P＜0.05）,但两组间差异无统计学意义（P=0.927）。结论VLDL可下调hOAT1mRNA的表达,可能与脂代谢紊乱易合并高尿酸血症有关。     

人尿酸盐转运子URAT1基因rs893006多态性与男性高尿酸血症的相关性

目的 探讨海南汉族男性高尿酸血症与人尿酸盐转运子URAT1基因rs893006多态性的相关性,并分析高尿酸血症的影响因素.方法 将海南医学院第一附属医院2016年4月至2017年4月收治的100例高尿酸血症男性患者作为高尿酸血症组,另选取同期在我院体检的100例健康男性作为对照组,比较两组受检者的一般资料和生化指标水平,以及rs893006的等位基因和基因型分布情况、不同基因型个体的血尿酸水平及分析高尿酸血症的影响因素.结果 高尿酸血症组与对照组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、尿素氮(BUN)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)差异无统计学意义(P>0.05),体质指数(BMI)、肌酐(Crea)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)差异有统计学意义(P<0.05);高尿酸血症组患者的rs893006的GG型、GT型、TT型频率分别为53.0%、40.0%、7.0%,对照组分别为55.0%、35.0%、10.0%,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组TT型个体的尿酸水平比较差异有统计学意义(P<0.05),GG型、GT型个体的尿酸水平比较差异无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析结果显示,BMI、Crea、TG、LDL可能为高尿酸血症的影响因素(P<0.05).结论 海南汉族男性高尿酸血症与URAT1基因rs893006多态性显著相关,BMI、TG、Crea、LDL可能为高尿酸血症的影响因素.     

ATP结合盒转运子E1基因与人肾小球系膜细胞增殖相关性研究

目的 探讨ATP结合盒转运子E1基因(ABCE1)在人肾小球系膜细胞中的表达及与系膜细胞增殖的关系。方法 应用细胞免疫荧光法检测ABCE1在人肾小球系膜细胞中的表达,应用脂质体介导法将ABCE1-SiRNA载体转染人肾系膜细胞,观察转染ABCE1-SiRNA前后细胞增殖能力的变化。结果 ABCE1在系膜细胞浆和细胞核均有表达,在浆内表达多于核的表达,转染ABCE1-SiRNA后细胞的增殖明显减慢。结论 ABCE1在人肾小球系膜细胞中有表达,且其与细胞增殖能力有关。     

ATP结合盒转运子E1基因与人肾小球系膜细胞增殖的相关性

目的 探讨ATP结合盒转运子E1基因(ABCE1)在人肾小球系膜细胞中的表达及与系膜细胞增殖的关系.方法 应用细胞免疫荧光法检测ABCE1在人肾小球系膜细胞中的表达,应用脂质体介导法将ABCE1-siRNA载体转染人肾系膜细胞,观察转染ABCE1-siRNA前后细胞增殖能力的变化.结果 ABCE1在系膜细胞浆和细胞核均有表达,在浆内表达多于核的表达,转染ABCE1-siRNA后细胞的增殖明显减慢.结论 ABCE1在人肾小球系膜细胞中有表达,且其与细胞增殖能力有关.     

人胃癌组织端粒酶活性与其催化亚单位(hTRT)基因表达的相关性

[目的]探讨胃癌组织中端粒酶活性与其催化亚单位(hTRT)基因表达的关系.[方法]采用改良端粒重复扩增法(TPAP)和RT-PCR扩增法检测胃癌组织、胃溃疡组织、正常胃黏膜中端粒酶活性和hTRT基因表达.[结果]58例胃癌组织中51例(88%)有hTRT基因表达,50例(86%)检测到端粒酶活性,58例非胃癌组织中,3例有hTRT基因表达,无l例检测到端粒酶活性.[结论]hTRT基因表达与端粒酶活性的表达具有高度一致性.     

雌激素上调LRP16基因表达的研究

目的：鉴定LRP16基因的表达调控途径并探讨其可能机制。方法：对LRP16基因进行启动子序列顺式作用元件和信息学角度的SAGE(serial analysis of gene expression)谱分析，提示雌激素对其可能具有转录调控作用。为证实这一作用，构建了LRP16基因启动子序列(2．6kb)调控的荧光素酶报告子(pS0)，并与雌激素受体α和β(ERα，ERβ)真核表达载体共转染COS-7和MCF-7细胞，加入雌二醇(β-E2)培养，lueiferase assay方法测定相对荧光素酶活性。结果：报告子pS0与ERα真核表达载体共转染细胞的相对荧光素酶活性较非共转染组及pS0／ERβ表达载体共转染组显著升高，并且在两种细胞中的升高幅度接近。结论：LRP16是受雌激素调控的一个新识别的靶基因，具体调控途径由雌激素变构激活的ERα直接介导，其临床意义有待进一步研究。     

人肺癌组织中Ⅰ型葡萄糖转运蛋白(GLUT1)过度表达与FDG摄取相关性研究

目的探讨人肺癌组织中 GLUT1的表达量与其葡萄糖摄取量之间的相关性。方法术前采用符合线路(18)~F-2-脱氧葡萄糖-单光子发射计算机体层扫描(FDG-SPECT with coincidence)技术检测30例肺癌患者肿瘤细胞对葡萄糖的类似物—(18)~F-2-脱氧葡萄糖(FDG)摄取,FDG-SPECT 扫描结果是以对目测结果进行分析得出的,以肺部病变/正常肺组织的 FGD摄取比值(T/N)作为肿瘤对葡萄糖的摄取量;用免疫组化 sp 法检测相应肺癌患者癌组织中 GLUT1的表达,实验结果以图像分析与处理系统进行半定量处理。结果 30例肺癌组织中 GLUT1表达均为阳性,与术后病理结果相对照,FDG-SPECF 扫描结果有一例假阴性。用直线相关统计分析,发现 FDG 摄取值与 GLUT1表达量具有很高的相关性(r=0.87,P<0.01)。结论GLUT1在肺癌组织的葡萄糖代谢中起到重要的作用,其过度表达可能是肺癌患者葡萄糖摄取的分子基础。     

人尿致突变活性的测定(透析法)

目的：介绍一种测定人体尿液诱变性的方法。方法：将健康人外周血置于透析袋中于待测尿样中透析一定时间后进行血液培养，通过分析淋巴细胞姐妹染色单体互换频率（ＳＣＥ）的变化来评价被测尿样潜在的致诱变性。结果：实验结果表明，透析过程不会引起ＳＣＥ频率变化（３．１４～３．２４ＳＣＥ／细胞，Ｐ＞０．０５，ｔ检验），而吸烟者，环氧乙烷作业工人，接受化疗的肿瘤患者尿液可引起ＳＣＥ明显升高（Ｐ＜０．０１，ｔ检验）分别达到４．１２～４．２８ＳＣＥ／细胞，４．５１～４．６９ＳＣＥ／细胞，１３．４０～１７．４７ＳＣＥ／细胞。结论：该方法在评价环境中诱变物／致癌物中具有一定的应用意义。     

人肿瘤细胞ERCC2基因表达与抗癌药耐药的相关性

[目的]探讨切割修复交叉互补基因2（excision repair cross-complementing rodent repair deficiency gene 2,ERCC2）表达与人肿瘤对抗癌药耐药的关系。[方法]采用Western blot检测美国国家癌症研究所（National Cancer Instiute,NCI）用于抗癌药筛选的60株人肿瘤细胞的ERCC2表达,并与170种抗癌药物的细胞毒试验结果进行相关性分析。[结果]肿瘤细胞ERCC2的蛋白表达水平高低不一,其中6株细胞的ERCC2蛋白水平在可测定范围以下。170种抗癌药物中有28种化疗药物的耐药性与肿瘤细胞的ERCC2蛋白水平相关性显著或非常显著。根据经物作用机理分析,肿瘤细胞ERCC2表达与其对烷化剂和抗有丝分裂剂类抗癌药耐药相关性显著。[结论]肿瘤细胞具有DNA修复能力,如核苷酸切割修复,更具体是具有ERCC2基因表达将表现为对主要是烷化剂和抗有丝分裂剂类抗癌药的耐药。]     

人肿瘤细胞ERCC2基因表达与抗癌药耐药的相关性

【目的】探讨切割修复交叉互补基因2（excisionrepaircross-complementingrodentrepairdeficiencygene2,ERCC2）表达与人肿瘤对抗癌药耐药的关系。【方法】采用Westernblot检测美国国家癌症研究所（NationalCancerInstitute,NCI）用于抗癌药筛选的60株人肿瘤细胞的ERCC2表达,并与170种抗癌药物的细胞毒试验结果进行相关性分析。【结果】肿瘤细胞ERCC2的蛋白表达水平高低不一,其中6株细胞的ERCC2蛋白水平在可测定范围以下。170种抗癌药物中有28种化疗药物的耐药性与肿瘤细胞的ERCC2蛋白水平相关性显著或非常显著。根据药物作用机理分析,肿瘤细胞ERCC2表达与其对烷化剂和抗有丝分裂剂类抗癌药耐药相关性显著。【结论】肿瘤细胞具有DNA修复能力,如核苷酸切割修复,更具体是具有ERCC2基因表达将表现为对主要是烷化剂和抗有丝分裂剂类抗癌药的耐药。     

雌激素及雌激素受体与骨关节炎的相关性研究进展

骨关节炎是年老人群中引起膝关节疼痛较为常见的疾病.在我国,随着人口老龄化的加剧,骨关节炎的发病率越来越高,尤其以绝经后女性较为多见;如何早期预防骨关节炎的发生,雌激素缺乏是否会引起关节病变,成为了新的认知问题.本文对雌激素及其受体与关节软骨、软骨下骨及骨代谢之间的相关性研究进展作一综述.     

雌激素缺乏对骨折愈合过程BMP-4基因表达影响的实验研究(摘要)

目的:阐明骨质疏松性骨折愈合过程中骨形态发生蛋白-4(bone morphogenetic protein-4,BMP-4)基因的定位分布,通过雌激素缺乏对BMP-4基因分布的影响进行比较研究,探索骨质疏松性骨折愈合过程中雌激素治疗的分子生物学基础.方法:通过光镜观察骨折修复过程中骨痂组织学改变,特别是骨小梁的愈合及骨小梁胶原纤维结构变化;通过电镜观察骨质疏松骨折成骨细胞及破骨细胞的形态及活性;采用原位杂交方法进行雌激素缺乏对骨折愈合过程中BMP-4基因表达影响的研究.结果:(1)OVX组在骨痂形成、早期骨痂形态、骨痂密度及成骨细胞和破骨细胞活性与S组比较有明显差异.(2)骨折后1～3?d周围血肿及肌肉中新出现的间充质细胞内BMP-4mRNA检测为阳性信号,其它时间组为阴性反应.OVX组表达的强度明显大于S组(P<0.01).结论:创伤激活BMP-4基因的表达并呈现一定的区域性,即局限于骨折周围骨痂形成区的软组织内.雌激素缺乏时,骨转换加快,从而BMP-4表达增多.雌激素在骨折愈合过程中起重要作用.     

雌激素与经前焦虑性障碍的相关性研究

近几年,经前焦虑性障碍的患病率明显提高,分析雌激素与经前焦虑性障碍的相关研究资料结果显示：经前焦虑性障碍与高雌激素水平密切相关。女性抑郁发病率高于男性;经前期综合征是女性多发疾病,而经前期正是雌激素持续高水平刺激期;两者均说明经前焦虑性障碍与雌激素过高有关。生理量的雌激素对神经内分泌功能保持正常是有益的,而过高和过低水平的雌激素都会对中枢神经系统产生不良影响,雌激素与心境改善可能呈抛物线关系。选择性雌激素受体调节剂在抗抑郁方面有很大潜力。说明经前焦虑性障碍与持续高水平的雌激素有直接关系。     

鼻咽癌中ABC转运蛋白基因表达的研究

目的 探讨10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义.方法 采用实时荧光定量PCR,检测10种耐药相关的ABC转运蛋白在25例鼻咽癌组织中的表达水平,并与其在正常鼻咽组织中的表达进行比较分析.结果 10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中均有不同程度的表达,其中ABCA2、ABCC3在鼻咽癌组织及鼻咽正常组织中均高表达;ABCC1、ABCC5及ABCG2在鼻咽癌组织中的表达高于其在正常鼻咽组织中的表达.并有统计学差异;而ABCB1、ABCC2、ABCC3、ABCC4、ABCC6及ABCC11在两类样本中均为低表达.结论 在鼻咽组织中高表达的转运蛋白与鼻咽癌的天然耐药性有关;在鼻咽癌组织中高表达,而在正常鼻咽组织中表达显著降低的ABC转运蛋白很可能在鼻咽癌对化疗的耐药中起着重要作用,在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中均低表达的转运蛋白的转运药物则可能是鼻咽癌化疗的敏感药物.     

人动脉血管平滑肌G_(αq)基因表达与原发性高血压关系研究

为揭示Cq蛋白α亚单位(G_(aq))基因表达与原发性高血压的关系,我们以G_(aq)cDNA为探针,用斑点杂交方法测定了人动脉血管平滑肌肌层中G_(aq)mRNA的相对含量。结果显示原发性高血压病人组(n=9)与对照组(n=16)相比无显著性差异。这可能是由于抗高血压药物作用的结果,也可能是另一条信号传导途径——酩氨酸激酶介导的磷脂酶C途径的异常,或者在原发性高血压病人的发病过程中无G_(aq)与磷脂酶C参与的信号途径的异常。     

子宫内膜样腺癌中胰岛素样生长因子的基因表达与雌激素受体相关性探讨

目的胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)是多肽类生长激素中的一类,是细胞增生、分化过程中的促有丝分裂因子。有研究表明IGF在肿瘤细胞的增生分裂中起很重要的作用。文中探讨IGF-1和2及其受体基因在子宫内膜样腺癌中的表达模式,分析它们与雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型α、β间的关系以及临床病理意义。方法选取58例患者临床不同期的子宫内膜样腺癌组织标本(内膜癌组),同时选取癌旁组织31例(癌旁组)、正常内膜组织42例(对照组),采用TRizol一步法提取总RNA。TaqMan荧光实时定量PCR检测3组患者的IGF-1、IGF-2、IGF-1受体(insulin-likegrowth factor-1 receptor,IGF-1R)、IGF-2R、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)、ERα、ERβ的mRNA表达,分析3组标本中的表达差异以及在内膜癌组织中的表达模式和相关关系。结果 IGF-1、IGF-1R、IGF-2、IGF-2R、IGFBP-3的mRNA表达量在内膜癌组中分别为1.19±0.79、6.23±3.98、2.44±2.32、4.32±2.98、14.47±12.31,在癌旁组中分别为2.66±1.73、35.34±22.02、8.59±7.13、0.39±0.36、8.28±4.57,均明显高于对照组中0.58±0.30、0.54±0.32、0.33±0.19、0.04±0.03、4.58±3.35,差异均有统计学意义(P<0.05)。癌旁组与内膜癌组比较,IGF-1、IGF-1R、IGF-2的mRNA量明显升高,而IGF-2R、IGFBP-3的mRNA则下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。ERα、ERβ-mRNA表达水平在内膜癌组分别为10.67±7.63、31.44±25.22;对照组中分别为16.24±10.10、50.10±21.60(P<0.05),癌旁组中分别为45.54±33.58、529.62±296.70,较对照组及内膜癌组均显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组中,ER与IGF之间无相关性。内膜癌组中ERα与IGF-1、IGF-2呈高度正相关,r分别为0.6439、0.5228;与IGF-2R呈轻度正相关,r为0.297 0;ERβ与IGF-1、IGF-2、IGF-2R呈轻度正相关,r分别为0.415 5、0.355 5、0.275 6;癌旁组中,ERα与IGF-1R、ERα与IGF-2、ERβ与IGF-2呈高度正相关,r分别为0.554 5、0.850 2、0.932 7,均有统计学意义(P<0.05),其他均显示无相关性。在内膜癌组织中IGF-1、IGF-2、IGF-2R、ERα、ERβ-mRNA表达量随着分期、分级以及浸润深度的增加呈下降趋势,而IGF-1R、IGFBP-3-mRNA表达量变化不明显;IGF-1、IGF-2、ERα、ERβ-mRNA与内膜癌分期、分级以及肌层浸润深度呈高度负相关,IGF-2R与分期、分级、浸润深度呈轻度负相关(P<0.05),IGF-1R和IGFBP-3与上述临床病理特征间相关性分析无统计学意义。结论癌旁组织和癌组织中IGF-1、IGF-2、IGF-1R的基因呈明显高表达,尤以癌旁组织中更明显;癌旁组织中ERα、ERβ的基因活性亦明显高于癌组织,癌组织中ERα、ERβ与IGF-1及IGF-2呈高度正相关,提示IGF-1和IGF-2可能激活ERα/ERβ,是正常内膜发生癌变的重要机制之一。IGF-1、IGF-2、IGF-2R、ERα、ERβ-mRNA高表达可能提示子宫内膜样腺癌预后良好。     

PANDA基因表达与乳腺癌发生的相关性研究

DNa损伤活化p21相关非编码RNa(p21-associated ncRNa DNa damage activated,PaNDa)在一些肿瘤组织中,可检测到PaNDa基因表达。通过提取20对乳腺癌肿瘤组织及癌旁正常组织的总RNa、逆转录、进行PaNDa的实时荧光定量PCR检测,以研究其在乳腺肿瘤组织中的表达情况。结果进行统计学处理和分析:乳腺癌组织中PaNDa表达量(10.01±2.97)显著高于癌旁正常组织(8.20±2.10)中,P=0.04;说明PaNDa表达变化可能与乳腺癌的形成有关,结果与国内外学者的报道类似。     

雌激素受体基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的　探讨中国汉族人群雌激素受体 (ER)基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切多态性与脑梗死的相关性。方法　采用病例 对照研究方法和PCR RFLP方法 ,检测 2 34例脑梗死和 2 59例非脑血管病患者的ER基因PvuⅡ及XbaⅠ多态性 ,用多元Logistic回归模型分析与脑梗死的相关性。结果　经年龄、性别、吸烟、饮酒、文化程度、高血压、糖尿病、冠心病、高脂血症调整后可见 :(1 )ER基因PvuⅡ酶切多态性的Pp基因型致脑梗死发病危险性显著增加 (OR =1 97,95 %CI:1 2 1～ 3 2 1 ) ;(2 )ER基因XbaⅠ酶切多态性与脑梗死无显著相关性 ;(3)ER基因PPXx Ppxx基因型经高血压、高脂血症分层前后均致脑梗死发病危险性显著增加 (OR值分别为 1 67,2 52及 2 1 8,P <0 0 5) ;(4)ER基因PvuⅡ酶切多态性与高血压、糖尿病、高脂血症对脑梗死的发生具有明显的协同作用。结论　ER基因可能是中国人群脑梗死的遗传易感基因