LncRNA MALAT1与乳腺癌的研究进展

乳腺癌是我国常见的女性恶性肿瘤之一.近年来,非编码RNA在乳腺癌发生、发展中的作用越来越受到关注.转移相关的肺腺癌转录物1是一个与乳腺癌增殖、浸润、转移及预后密切相关的长链非编码RNA,但其在乳腺癌各发展阶段的作用还存在争议,分子机制也尚不明确.本文就转移相关的肺腺癌转录物1与乳腺癌的相关研究进展进行综述,旨在为乳腺癌...     

非小细胞肺癌患者瘤组织LncRNA LINC00460、miR-98-5p的水平及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)LINC00460、microRNA-98-5p(miR-98-5p)表达及临床意义。方法 选取2017年1月至2018年12月57例NSCLC患者病例资料进行回顾性研究。术中留取癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘2 cm),比较癌组织及癌旁组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达,分析癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与病理特征的相关性,比较不同预后患者miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达,logistic回归分析癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达与预后的关系,并比较癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达不同患者总生存率,列线图分析miR-98-5p、LncRNA LINC00460对患者预后评估价值。结果 癌组织miR-98-5p表达低于癌旁组织,LncRNA LINC00460表达高于癌旁组织(P<0.05)。NSCLC患者癌组织miR-98-5p、LncRNA LINC00460表达...     

非小细胞肺癌组织长链非编码RNA LINC00265、microRNA-98-5p的表达及其临床意义

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00265、microRNA-98-5p(miR-98-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法 选取2016年1月—2017年12月乐山市人民医院收治的97例NSCLC患者的癌组织、相应癌旁正常组织进行研究.利用实时荧光定量聚合酶链反应测定癌组...     

lncRNA MALAT1调节miR-22-3p/NLRP3轴对LPS诱导的急性肺损伤的影响

目的 探究长链非编码RNA MALAT1通过miR-22-3p/NLRP3信号轴促进脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的分子机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、ALI组、sh-NC组、sh-MALAT1组,每组9只。通过气管内灌注LPS法建立ALI大鼠模型,假手术组气管内灌注等量的PBS作为阴性对照,sh-NC组、sh-MALAT1组在LPS诱导前48 h,通过静脉分别注射2×10⁷ TU/mL的sh-NC慢病毒或相同剂量的sh-MALAT1慢病毒。通过HE染色法观察肺组织的组织病理学改变;通过TUNEL染色法观察肺组织的细胞凋亡情况。通过双荧光素酶报告基因系统验证MALAT1与miR-22-3p、NLRP3与miR-22-3p的调控关系;通过实时荧光定量PCR技术和免疫印记技术检测肺组织和细胞中MALAT1、miR-22-3p、NLRP3、ASC、caspase-1的表达水平;通过酶联免疫吸附试验检测支气管肺泡灌洗液和细胞培养基中白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏...     

LncRNA SNHG17通过miR-384靶向AEG1对非小细胞肺癌细胞生物学行为的调控作用

目的：研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因17 (lncRNA SNHG17）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法：培养人NSCLC A549细胞和H1299细胞,细胞按照分组要求分别转染pcDNA3.1-NC、SNHG17过表达质粒（pcDNA3.1-SNHG17）、si-NC、SNHG17小干扰RNA (si-SNHG17）、mimics NC、微小RNA-384模拟物（miR-384mimics）、inhibitor NC、miR-384抑制剂（miR-384 inhibitor）、pcDNA3.1-星形细胞上调基因1(AEG1）和si-AEG1。实时荧光定量PCR (RT-qPCR）法检测A549细胞和H1299细胞及各组转染后细胞中lncRNA SNHG17、miR-384和AEG1 mRNA表达水平;ENCORI和TargetScan数据库预测lncRNA SNHG17与miR-384、miR-384与AEG1 mRNA之间的靶向结合作用。A549细胞分为si-NC组、si-SNHG17组、inhibitor NC组、miR-384 ...     

长链非编码RNA MALAT1对胰腺癌细胞系PANC-1转移的影响

目的:探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1（MALAT1）在胰腺癌细胞系中的表达及其对PANC-1转移的影响。方法:应用荧光定量PCR检测4种胰腺癌细胞系中MALAT1的表达水平,通过siRNA下调PANC-1的MALAT1水平,应用贴壁、离壁实验和Transwell迁移、侵袭实验观察PANC-1的贴壁、离壁、迁移和侵袭能力,应用Western blotting检测PANC-1的Vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结果:4种胰腺癌细胞系中MALAT1差异性表达,PANC-1细胞系中表达最高。下调MALAT1的表达后,PANC-1的Vimentin、MMP-2和MMP-9的蛋白水平显著下降（P<0.01）,贴壁、离壁、迁移、侵袭能力均显著减弱（P<0.01）。结论:下调MALAT1通过降低Vimentin、MMP-2和MMP-9的表达可减弱胰腺癌细胞系PANC-1的转移能力。     

结肠癌组织中肺腺癌转移相关转录本1的表达及其临床意义

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集121例结肠腺癌组织标本,并以其自身正常组织作为对照,提取组织RNA,实时定量聚合酶链反应法检测结肠癌及其自身正常对照组织中MALAT1的表达水平,并在结肠癌细胞系SW620中过表达MALAT1,观察其对肿瘤细胞迁移的影响。结果结肠癌组织MALAT1表达较自身正常对照组织表达显著升高(P<0.01)。有淋巴结转移的结肠癌组织中MALAT1的表达高于无淋巴结转移的结肠癌组织(P<0.05);有淋巴结转移的结肠癌标本中,淋巴结组织中MALAT1的相对表达量高于结肠癌组织(P<0.05)。SW620转染pc DNA3/MALAT1基因组迁移细胞数明显高于单纯SW620细胞组和SW620转染载体pc DNA3组(P<0.05);单纯SW620细胞组与SW620转染载体pc DNA3组迁移细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在结肠癌中,长链非编码RNA-MALAT1可作为一个潜在的检测指标,为临床判定预后和后期治疗提供理论基础。     

阿尔茨海默病患者血清LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1的表达变化及临床意义

目的 分析阿尔茨海默病（AD）患者血清长链非编码RNA（LncRNA）转移相关的肺腺癌转录本1（MALAT1）、LncRNA核旁斑组装转录本1（NEAT1）的表达变化,探讨其是否参与AD炎症反应和认知功能损伤。方法 选取2018年1月—2021年1月青海大学附属医院收治的AD患者93例为AD组,选取同期该院54例体检健康者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1的表达,酶联免疫吸附试验检测血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,简易精神状态量表（MMSE）评估认知功能。Pearson或Spearman相关性分析AD患者血清LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1表达与病程、MMSE评分、炎症因子的相关性。ROC曲线分析血清炎症指标、LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1表达对AD的诊断价值。结果 AD组血清LncRNA MALAT1相对表达量和MMSE评分低于对照组,LncRNA NEAT1相对表达量高于对照组（P <0.05）。AD组hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于对照组（P <0.05）。Pearson或Spearman相关性分析显示,AD患者血清LncRNA MALAT1表达与MMSE评分呈正相关（r_s =0.587,P <0.05）,与hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均呈负相关（r_s =-0.522、-0.601、-0.574和-0.577,均P <0.05）,LncRNA NEAT1表达与MMSE评分呈负相关（r_s =-0.593,P <0.05）,与hs-CRP、IL-1β水平、IL-6、TNF-α均呈正相关（r =0.487、0.588、0.611和0.573,均P <0.05）。ROC曲线显示,血清LncRNA MALAT1诊断AD的AUC为0.915（95% CI：0.858,0.955）,最佳临界值为0.98,其对应的敏感性为94.62%（95% CI：87.92,98.22）,特异性为81.48%（95% CI：68.61,90.70）;血清LncRNA NEAT1诊断AD的AUC为0.858（95% CI：0.791,0.910）,最佳临界值为2.37,其对应的敏感性为90.32%（95% CI：82.45,95.52）,特异性为72.22%（95% CI：58.44,83.57）。结论 AD患者血清LncRNA MALAT1低表达、LncRNA NEAT1高表达可能参与AD炎症反应和认知功能损伤,可作为AD的诊断标志物。     

长链非编码RNA XLOC-013014在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 研究XLOC-013014在肾癌组织及细胞中的表达,探讨其影响肾癌细胞增殖和迁移的作用机制.方法 荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测XLOC-013014在37例肾癌组织和癌旁组织、多种肾癌细胞株(CaK...     

微小RNA-506-3p调控UHRF1抑制大肠癌细胞转移的机制

目的 探讨微小RNA-506-3p(miR-506-3p)通过调控含PHD及指环结构域的类泛素蛋白1（UHRF1）的表达,进而影响大肠癌细胞转移能力的机制。方法 利用生物信息学的方法预测并筛选UHRF1上游可能发挥调控作用的miRNA-506-3p;在大肠癌细胞及组织中分别检测miR-506-3p及UHRF1的表达水平并分析其相关性;运用荧光素酶报告基因技术检测miR-506-3p与UHRF1 3′非翻译区（3′UTR）特异性结合的情况;荧光定量PCR（qRT-PCR）及Western blot检测大肠癌细胞转染miR-506-3p类似物（mimics）后对UHRF1表达水平的影响;构建UHRF1过表达的大肠癌稳转细胞株,分别转染miR-506-3p mimics及其对照序列（mimics control）后,利用Transwell实验检测处理前后大肠癌细胞转移能力的变化。结果 相对于正常大肠上皮细胞及癌旁组织而言,miR-506-3p在大肠癌细胞及组织中的表达均下调（均P<0.05）,且与UHRF1的表达水平呈负相关（r=-0.456,P=0.044）;miR-506-3p通过其“种子序列”与UHRF1 3′UTR特异性结合（P<0.01）,并减少了UHRF1的mRNA及蛋白表达（均P<0.01）;转染miR-506-3p mimics抑制了大肠癌LoVo细胞的转移能力（P<0.01）,而在此基础上增加UHRF1的表达则逆转了miR-506-3p的抑制作用（P<0.01）。结论 miR-506-3p通过调控UHRF1抑制了大肠癌细胞的转移能力,在大肠癌中发挥抑癌基因的作用。     

lncRNA MNX1-AS1通过调控miR-218-5p影响非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡及迁移

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1通过调控miR-218-5p的表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测MNX1-AS1和miR-218-5p在肺癌细胞系及肺正常上皮细胞系中的表达;采用双荧光素酶报告基因实验和RNA pull down实验验证MNX1-AS1和miR-218-5p之间的靶向关系;干扰A549细胞中MNX1-AS1和miR-218-5p的表达后,MTT、流式细胞术和Transwell实验检测MNX1-AS1靶向miR-218-5p对癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果与肺正常上皮细胞系相比,肺癌细胞系中MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低(P＜0.05);荧光素酶报告基因实验显示,MNX1-AS1可与miR-218-5p结合导致荧光素酶活性显著降低(P＜0.05);RNA pull down实验证实miR-218-5p能特异性结合MNX1-AS1(P＜0.05);抑制A549细胞中MNX1-AS1的表达后,miR-218-5p水平上调,细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,凋亡率显著升高;与MNX1-AS1抑制剂组相比,共抑制MNX1-AS1和miR-218-5p的细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,凋亡率下降(P＜0.05)。结论MNX1-AS1可以通过靶向下调miR-218-5p的表达影响非小细胞癌的增殖、凋亡、迁移和侵袭。     

LncRNA XIST在子宫内膜癌组织中的表达及其靶向microRNA-101-3p对癌细胞生物行为学的影响

目的 探究lncRNA XIST在子宫内膜癌组织中的表达及其靶向microRNA-101-3p(miR-101-3p)对癌细胞生物行为学的影响。方法 选取2019年7月—2021年7月南通市妇幼保健院82例手术切除且经术后病理确诊的子宫内膜癌患者的癌组织及癌旁正常子宫内膜组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测子宫内膜组织lncRNA XIST、miR-101-3p mRNA的相对表达量;比较不同因素间lncRNA XIST、miR-101-3p mRNA的差异;取Ishikawa细胞随机分为对照组（C组）、空质粒组（NC组）、lncRNA XIST表达抑制组（sh-XIST组）,其中NC组和sh-XIST组分别转染空载质粒与plko-lncRNA XIST-shRNA,C组不进行任何处理;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;双荧光素酶报告基因观察lncRNA XIST与miR-101-3p的靶向性。结果 子宫内膜癌组织中lncRNA XIST mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）,m...     

熊果酸通过调节miR-373-3p对肺癌A549细胞凋亡和迁移的影响

目的探讨熊果酸通过调节mi R-373-3p对肺癌A549细胞凋亡和迁移的影响。方法 MTT法检测熊果酸对肺癌A549细胞的毒性作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法、流式细胞术检测熊果酸作用于转染mi R-373-3p的A549细胞后对A549细胞凋亡影响;实时荧光定量PCR法分别检测熊果酸加药组和转染mi R-373-3p mimics组中A549细胞mi R-373-3p表达程度;RT-PCR和免疫印迹法检测熊果酸作用下mi R-373-3p调控的下游靶基因TXNIP m RNA及蛋白的表达;细胞划痕愈合实验检测mi R-373-3p细胞迁移能力。结果熊果酸显著降低肺癌A549细胞的生长活力(P<0.05),IC 50为60μmol/L;瞬时转染mi R-373-3p mimics可以上调A549细胞中mi R-373-3p的表达(24 h,11.367±2.120;48 h,12.167±1.108);熊果酸作用于转染mi R-373-3p mimics的A549细胞后,能够显著提高细胞中mi R-373-3p mimics的表达水平(24 h,16.787±3.109;48 h,16.980±3.106);并且mi R-373-3p mimics下游预测的目标基因TXNIP m RNA(10.757±0.79)及蛋白表达量(0.8210±0.043)均明显上升;FCM结果显示:mi R-373-3p能够促进肺癌A549细胞凋亡(46.20±5.970)。细胞转染mi R-373-3p mimics后,迁移能力明显受到抑制(P<0.001)。结论熊果酸能够通过促进肺癌A549细胞凋亡抑制其迁移,其作用机制可能是通过上调mi R-373-3p表达来完成的。     

过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3、Panc-1铁死亡的作用机制

目的探讨过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3和Panc-1铁死亡的作用机制。 方法瞬时转染miR-199-3p/5p模拟物和抑制物至BxPC-3、Panc-1细胞中。qRT-PCR检测细胞中miR-199-3p/5p表达水平;Western blotting检测SCL7A11、BTRC、TFRC蛋白水平。谷胱甘肽(GSH)、Fe2＋、脂质过氧化物(LPO)试剂盒检测细胞GSH、Fe2＋、LPO水平。免疫共沉淀检测BTRC、TFRC泛素化水平。双荧光素酶报告实验检测miR-199与靶基因的相互作用。 结果转染miR-199-3p/5p模拟物后,胰腺癌BxPC-3、Panc-1细胞株中miR-199-3p/5p、TFRC蛋白水平显著上调;SLC7A11、BTRC蛋白水平显著降低;LPO、Fe2＋含量升高,GSH含量降低。过表达BTRC能够显著降低TFRC蛋白水平。miR-199-3p靶向结合SLC7A11,miR-199-5p靶向结合BTRC。 结论过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1铁死亡,可能与靶向抑制BTRC、SLC7A11促进LPO累积有关。     

MicroRNA-338-3p通过下调SMO表达抑制结直肠癌细胞的侵袭与迁移

目的 探讨microRNA-338-3p (miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制.方法 脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达状况,运用半定量RT-PCR及Westernblot分析Smoothened(SMO)mRNA及蛋白表达状况,Transwell侵袭、迁移实验检测转染前后细胞体外侵袭迁移能力;在经anti-SMO-siRNA预先处理的SW480细胞中转染miR-338-3p-inhibitor,检测转染细胞中SMO蛋白的表达变化以及侵袭能力的改变.结果 通过生物信息学网站预测SMO可能是miR-338-3p的作用靶基因;SW620细胞中miR-338-3p表达水平较SW480细胞减低,而SMO蛋白增高.转染pre-miR-338-3p至SW620细胞,miP-338-3p表达上调,SMO蛋白表达降低,且肿瘤细胞的侵袭及迁移能力下降;而转染miR-338-3p-inhibitor至SW480细胞后,miR-338-3p表达下降,SMO蛋白表达上升,肿瘤细胞侵袭、迁移能力增强,且此种增强效应可被an-ti-SMO-siRNA所部分逆转,说明miR-338-3p确实是通过抑制SMO而发挥抗癌作用.结论 MiR-338-3p通过下调SMO表达而抑制结直肠癌细胞侵袭与迁移.     

三阴性乳腺癌组织长链非编码RNA-P21、microRNA-17-3p的表达及其临床意义

目的 探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21 (LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达,分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法 选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手术切除的癌组织和癌旁组织（距离癌组织至少5 cm）标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中LncRNA-P21和miR-17-3p的表达;收集患者的临床病理特征资料,分析LncRNA-P21、miR-17-3p表达与临床病理特征的关系;术后随访5年,采用Kaplan-Meier法绘制不同LncRNA-P21、miR-17-3p表达三阴性乳腺癌患者的生存曲线;Cox回归分析影响三阴性乳腺癌患者预后的因素。结果 癌组织LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于癌旁组织（P <0.05）;癌组织miR-17-3p mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）。临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于临床Ⅰ、Ⅱ期,无腋窝...     

Exosomal miR-485-3p derived from pancreatic ductal epithelial cells inhibits pancreatic cancer metastasis through targeting PAK1

Background:Cell competition is an important feature in pancreatic cancer (PC) progression, but the underlying mechanism remains elusive. This study aims to explore the role of exosomes derived from normal pancreatic ductal epithelial cells involved in PC progression.Methods:PC cells and pancreatic stellate cells (PSCs) were treated with exosomes isolated from pancreatic ductal epithelial cells. Cell proliferation was assessed by CCK8 assays. Cell migration and invasion were assessed by Transwell assays. PC and matched adjacent non-tumor tissue specimens were obtained from 46 patients pathologically diagnosed with PC at Peking University First Hospital from 2013 to 2017. Tissue miR-485-3p and p21-activated kinase-1 (PAK1) expression was examined by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), and the relationship of the two was analyzed using Pearman''s product-moment correlation. The clinical significance of miR-485-3p was analyzed using the Chi-square test, Wilcoxon rank-sum test, and Fisher exact probability, respectively. The binding of miR-485-3p to PAK1 5′-untranslated region (5′-UTR) was examined by luciferase assay. PC cells were xenografted into nude mice as a PC metastasis model.Results:Exosomes from pancreatic ductal epithelial cells suppressed PC cell migration and invasion as well as the secretion and migration of PSCs. MiR-485-3p was enriched in the exosomes of pancreatic ductal epithelial cells but deficient in those of PC cells and PSCs, in accordance with the lower level in PSCs and PC cells than that in pancreatic ductal cells. And the mature miR-485-3p could be delivered into these cells by the exosomes secreted by normal pancreatic duct cells, to inhibit PC cell migration and invasion. Clinical data analysis showed that miR-485-3p was significantly decreased in PC tissues (P < 0.05) and was negatively associated with lymphovascular invasion (P = 0.044). As a direct target of miR-485-3p, PAK1 was found to exert an inhibitory effect on PC cells, and there was a significantly negative correlation between the expression levels of miR-485-3p and PAK1 (r = −0.6525, P < 0.0001) in PC tissues. Moreover, miR-485-3p could suppress PC metastasis in vivo by targeting p21-activated kinase-1.Conclusions:Exosomal miR-485-3p delivered by normal pancreatic ductal epithelial cells into PC cells inhibits PC metastasis by directly targeting PAK1. The restoration of miR-485-3p by exosomes or some other vehicle might be a novel approach for PC treatment.