鼻咽癌患者外周血EBV DNA水平与癌组织细胞凋亡的相关性

目的探讨鼻咽癌患者外周血EB病毒（EBV）DNA水平与癌组织细胞凋亡的相关性。方法分别采用荧光定量PCR法、流式细胞仪检测22例鼻咽癌患者外周血中EBV DNA拷贝数及鼻咽癌组织细胞的凋亡率。结果本组患者外周血EBV DNA检出率为86．5％（19／22）、中位数为2200拷贝／μl,癌组织细胞凋亡率为33．27％±13．46％;EBV DNA阳性鼻咽癌患者癌细胞凋亡率为35．93％±12．42％,EBV DNA阴性患者为16．47％±4．83％,两者比较,P〈0．05;鼻咽癌患者外周血EBV DNA拷贝数与癌细胞凋亡率呈正相关（r=0．517,P〈0．01）。结论鼻咽癌患者外周血EBV DNA水平与肿瘤细胞凋亡之间存在相关性。     

EBV感染与胃癌关系的研究进展

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是引起胃癌的重要生物学因素之一,其感染与胃癌的发生和发展密切相关.随着分子生物学技术的发展和应用,研究者对与EBV感染相关胃癌(EBVaGC)的特征和发生机制进行了深入研究,发现EBV潜伏感染和细胞恶性转化是EBV致EBVaGC的重要基础,为EBVaGC的诊断、治...     

鼻咽癌C666-1细胞中EBV miRNA的表达情况及其功能研究

目的观察鼻咽癌C666-1细胞中EB病毒(EBV)所编码的44个miRNA的表达情况(即BART、BHRT家族的表达情况)及BART-15对EBV的即刻早期基因(BZLF-1)表达的影响。方法培养C666-1细胞,取对数生长期的细胞,提取RNA,采用polyA加尾PCR法对EBV miRNA进行扩增,观察BHRF和BART家族的表达情况。将BART-15抑制剂转染C666-1细胞,转染成功后,用real-time PCR法检测BZLF-1的表达。结果在EBV编码的44个miRNA中,BHRF家族的表达普遍低于BART家族。BART-15抑制剂转染C666-1细胞后,转染率为77.0%,BART-15的表达降低了87%。抑制C666-1细胞中BART-15的表达后,BZLF-1的表达增高了2.54倍。结论鼻咽癌C666-1细胞中EBV的miRNA表达谱存在家族性差异,其中的BART-15可能直接或间接作用于EBV的BZLF-1,影响EBV的感染状态。     

吡柔比星对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨吡柔比星对鼻咽癌（NPC）CNE2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养NPC细胞株CNE2,加入不同浓度的吡柔比星。用MTT法检测细胞增殖情况;用RT-PCR法检测NPC细胞株中X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）mRNA的表达情况。结果吡柔比星对NPC细胞的增殖有抑制作用,并诱导其发生凋亡,且呈明显的时效和量效关系,其作用随着浓度及时间的增加而增加;RT-PCR法检测显示XIAP mRNA表达下调。结论吡柔比星可抑制体外培养的NPC细胞株CNE2的增殖和诱导细胞凋亡,其作用与下调XIAP基因表达有关。     

CD14对胃癌细胞SGC-7901生物学性能的影响

目的 观察CD14对胃癌细胞SGC-7901生物学性能的影响,探讨其在胃癌发生发展中的作用.方法 用CD14蛋白受体胞壁酰二肽(MDP)刺激CD14稳定转染的胃癌SGC-7901细胞,CCK-8法以及平板克隆形成实验检测细胞的活性和增殖能力,流式细胞术检测CD14对细胞凋亡的影响,Transwell侵袭模型检测细胞的侵袭能力.结果 CD14稳定转染的胃癌SGC-7901细胞活性显著降低(P ＜0.05);CD14稳定转染的细胞克隆形成率为15.66％±5.94％,与空质粒转染细胞的19.28％ ±5.48％相比,P＜0.05;CD14稳定转染的胃癌细胞凋亡率为14.38％,与空质粒转染细胞的4.58％相比,P＜0.05;CD14稳定转染的胃癌SGC-7901细胞在24、48 h的侵袭细胞数分别为(69.40±6.73)、(108.20±9.68)个,与空质粒转染细胞的(81.40±7.80)、(133.20±12.87)个相比,P均＜0.05.结论 CD14能够促进胃癌SGC-7901细胞的凋亡,同时抑制其增殖及侵袭.     

鼻咽癌组织中TRPC1表达及其对鼻咽癌细胞生物学特性的影响

目的探讨鼻咽癌组织中瞬时受时电位(TRPC)1的表达情况及其对鼻咽癌细胞生物学特性的影响。方法选择鼻咽癌组织标本80例和鼻咽慢性炎症标本80例;鼻咽癌C666-1细胞分为siRNA TRPC1组、阴性对照组、空白对照组。采用免疫组织化学法测定组织中TRPC1蛋白的表达,采用Western印迹检测细胞中TRPC1蛋白的表达,采用RT-PCR测定细胞中TRPC1 mRNA的表达,采用Transwell实验测定细胞的侵袭能力。结果鼻咽癌组TRPC1蛋白阳性率高于鼻咽慢性炎症组(P<0.05)。si-TRPC1组C666-1细胞中TRPC1蛋白和TRPC1 mRNA的表达量均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。第3天和第5天si-TRPC1组C666-1细胞OD值低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。si-TRPC1组C666-1细胞G1期比例高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),S期比例低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。si-TRPC1组C666-1细胞早期凋亡比例高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),C666-1细胞侵袭力低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论鼻咽癌组织中TRPC1蛋白呈高表达,沉默TRPC1基因后鼻咽癌细胞中TRPC1水平下降,TRPC1能够促进鼻咽癌细胞的增殖和侵袭能力,抑制鼻咽癌细胞凋亡。     

病毒感染对细胞凋亡影响的研究进展

病毒感染与宿主细胞凋亡之间存在着密切的关系。宿主细胞主动性凋亡引起被感染细胞死亡,同时达到清除病毒的效果,在机体防御病毒感染中起重要作用;病毒亦主动诱导或抑制宿主细胞凋亡,从而达到在机体内复制产生更多子代病毒并完成生活周期的目的,并造成持续性感染或肿瘤发生。本文对细胞凋亡与病毒感染关系相关研究进行综述,为病毒感染性疾病的发病机制、治疗和抗病毒制剂研究提供新思路。     

Notch1表达对肾癌细胞生物学行为的影响

目的探讨Notch1表达对肾癌细胞生物学行为的影响。方法通过Western印迹检测Notch1在人正常肾小管上皮细胞HK-2,人肾癌细胞786-O,Caki-1,769-P,GRC-1及ACHN中的表达;siRNA Notch1及siRNA NC转染肾癌细胞48 h后,Western印迹及RT-PCR检测转染情况,MTT法及Hoechst染色检测细胞活力及凋亡情况,Transwell法检测细胞迁移侵袭能力,Western印迹检测Bax,Bcl-2,基质金属蛋白酶(MMP)2,MMP9蛋白表达。结果 HK-2细胞中Notch1蛋白表达量显著低于5株肾癌细胞786-O,769-P,GRC-1,Caki-1及ACHN,且在Caki-1中Notch1表达量最高,因此作为后续实验的细胞株。siRNA Notch1及siRNA NC转染肾癌细胞48 h后,与siRNA NC组比较,siRNA Notch1组Notch1蛋白及mRNA表达量下调,细胞活力降低,细胞凋亡率提高,细胞侵袭数目减少,Bax表达量上调,Bcl-2、MMP2及MMP9表达量下调(P<0.01)。结论 Notch1低表达能显著抑制肾癌细胞Caki-1的恶性生物学行为,可能与调控细胞凋亡蛋白及下调MMPs表达有关。     

miR-34b在老年鼻咽癌组织中表达及对细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨miR-34b在老年鼻咽癌组织中表达及对细胞增殖、侵袭的影响。方法选取初治原发性老年鼻咽癌患者83例,正常鼻咽黏膜组织40例作为对照组,培养人鼻咽癌CNE-2细胞株,根据转染物不同将细胞分为miR-34b转染组、阴性对照组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR技术检测老年鼻咽癌及对照组组织中miR-34b表达以及不同转染组细胞中miR-34b表达,MTT比色法检测不同转染组细胞增殖能力,检测细胞黏附能力,Transwell法检测不同转染组细胞侵袭能力。结果老年鼻咽癌组织中miR-34b相对表达量为(0.64±0.09),显著低于对照组的(0.94±0.12),差异有统计学意义(t=14.410,P<0.001);miR-34b在老年鼻咽癌组织中相对表达量与临床分期、T分期、N分期和淋巴结转移有关(P<0.001);miR-34b转染组细胞中miR-34b相对表达量为(0.85±0.10),显著高于阴性对照组和空白对照组,分别为(0.52±0.08)和(0.50±0.07),差异有统计学意义(F=243.329,P<0.001);与阴性对照组和空白对照组相比,miR-34b转染组细胞增殖能力显著降低(P<0.05);miR-34b转染组黏附细胞数显著高于阴性对照组和空白对照组,而侵袭细胞数显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.001)。结论 miR-34b在老年鼻咽癌组织中呈低表达,上调miR-34b表达可减少细胞增殖,增加细胞黏附能力,抑制细胞侵袭能力,有望成为提高鼻咽癌对放射治疗敏感性的目的基因。     

EGCG对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）治疗鼻咽癌的作用机制。方法体外培养鼻咽癌CNE-2细胞并以不同质量浓度EGCG处理,采用MTr法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中锰超氧化物歧化酶（MnSOD）表达变化。结果EGCG处理后,CNE-2细胞增殖明显受到抑制,且呈时间和剂量依赖性;CNE-2细胞凋亡率显著升高,且呈量效关系;MnSOD表达明显上调。且随EGCG作用时间延长有升高趋势。结论EGCG能抑制CNE-2细胞增殖、促进其凋亡,可能机制为上调MnSOD表达;此为EGCG在鼻咽癌防治中的应用提供了理论依据。     

d-δ-三烯生育酚对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的探讨d-δ-三烯生育酚抗鼻咽癌的生物学活性。方法将低分化5-8F鼻咽癌细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别予40、50、60panol／Ld-δ-三烯生育酚干预48h,对照组不予干预。采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞周期;荧光染色和显微镜观察细胞形态学变化。结果观察组干预48h后,随浓度增加,镜下观察活细胞减少,漂浮的死亡细胞增多,细胞核强荧光染色细胞比例增多,细胞出现明显的抑制和凋亡现象。观察组不同浓度细胞抑制率及凋亡率明显升高,且明显高于对照组（P均〈0．01）;对照组S期的细胞百分率明显低于观察组,P均〈0．01。结论d-δ-三烯生育酚能抑制5--8F细胞增殖,诱导其凋亡,具有潜在的抗鼻咽癌生物学活性。     

非小细胞肺癌免疫治疗相关生物标记物的研究进展

免疫治疗显著提高了肿瘤患者的生存,但只有一部分患者获得临床效益。免疫治疗预测性生物标志物可准确筛选免疫治疗获益人群,减少免疫相关不良反应的发生,对个体化免疫治疗至关重要。肺癌免疫治疗相关生物标记物包括程序性死亡蛋白-1、程序性死亡蛋白配体-1(PD-L1)、新抗原及肿瘤突变负荷(TMB)、微卫星不稳定性、错配修复缺陷、驱动基因突变及肠道菌群等。PD-L1及TMB是目前免疫治疗获益相对较强的生物学标记物,对肿瘤免疫治疗有一定指导作用;其他生物标记物尚在研究的早期阶段,应用效果不够确切,仍需要更多的研究支持。     

MACC1在卵巢癌组织中表达及对卵巢癌细胞生物学特性的影响

目的探讨结肠癌转移相关基因(MACC)1在卵巢癌组织中的表达及对卵巢癌细胞生物学特性的影响。方法收集卵巢癌组织及对应的癌旁组织,Western印迹检测组织中MACC1表达水平。以卵巢癌细胞A2780为研究对象,细胞转染MACC1小干扰RNA(MACC1 siRNA)、siRNA对照(siRNA control),细胞分为未转染组(只加入转染试剂)、siRNA control组(转染siRNA control)、MACC1 siRNA组(转染MACC1 siRNA)。培养24 h后,Western印迹检测细胞中MACC1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果卵巢癌组织中MACC1表达水平高于癌旁组织。siRNA control组细胞中MACC1、MMP-2、MMP-9表达水平及细胞存活率、迁移率、侵袭细胞数目与未转染组相比均没有差异,MACC1 siRNA组细胞中MACC1、MMP-2、MMP-9表达水平及细胞存活率、迁移率、侵袭细胞数目均明显低于未转染组。结论 MACC1在卵巢癌组织中过度表达。干扰MACC1能够抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,作用机制可能与抑制MMP-2、MMP-9表达有关。     

长链非编码RNA HOTAIR在肝癌细胞生物学行为中的调节作用及其机制研究进展

反义转录长链非编码RNA-同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)是在肝癌细胞中第一个被发现的长链非编码RNA,其可通过调控表观遗传和染色质状态来调节其基因的表达水平,并影响肝癌细胞的生物学行为。其中,HOTAIR可通过与PRC2转录抑制复合物结合,使其相应靶基因甲基化,从而诱导和促进肝癌细胞的激活与增殖,或者通过竞争同种miRNA,参与靶基因的水平表达调节,来促进肝癌细胞的侵袭与转移。沉默HOTAIR可通过调控miR-217-5p活化磷酸化-磷脂酰肌醇3-激酶/磷酸化-苏氨酸蛋白激酶/基质金属蛋白酶-2/9信号通路及降低磷酸化信号转导和转录激活因子3的表达水平,促进肝癌细胞凋亡现象的发生。     

吲哚美辛对结肠癌细胞CDK2、CDK4、P21WAF1/CIP1、Bcl-2及Bax蛋白表达的影响

目的：非甾体类抗类药通过环氧合酶途径是抑制肿瘤的机制之一，是否还有其他途径抑制细胞增殖及诱导凋亡。探讨吲哚美辛抗肿瘤的作用机制。为其临床应用实验依据。方法：不同浓度的吲哚美辛作用于结肠癌细胞株HCT116细胞24h，通过Western蛋白印迹技术检测CDK2、CDK4、p21s^WAF1/CIP1、Bcl-2及Bax蛋白表达。结果：吲哚美辛降低细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2、CDK4及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达上，上调细胞周期依赖蛋白激酶抑制剂p21s^WAF1/CIP1蛋白，而对促凋亡蛋白Bax的表达无影响。结论：吲哚美辛通过降低CDK2、CDK4、Bcl-2蛋白，上调p21s^WAF1/CIP1的表达来抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

miR-195在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达变化及其过表达对瘤细胞肿瘤生物学特性的影响

目的 探讨微小RNA-195(miR-195)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞中的表达变化,并探讨miR-195过表达对瘤细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移等肿瘤生物学特性的影响及可能的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR检测人DLBCL细胞系U2932、HBL1、OCI-LY-10及人正常B淋巴细胞系IM-9中的mi...     

胶质母细胞瘤相关circRNA的研究进展

环状RNA(circRNA)是一种新发现的内源性非编码RNA,可以介导多种肿瘤的进展,如乳腺癌、结直肠癌、胃癌、肝细胞癌和肾透明细胞癌等.大部分circRNA通过miRNA海绵的作用解除其对靶基因的抑制作用,通过竞争内源性RNA机制升高靶基因表达.在胶质母细胞瘤(GBM)细胞和组织中,表达上调的circRNA主要有ci...     

姜黄素对人肺癌细胞凋亡相关蛋白Survivin表达的影响

目的研究姜黄素对人肺癌细胞诱导凋亡的作用机制。方法用10、20μM两种浓度姜黄素分别作用于SPC-A1细胞12h和24h,用末端标记法检测细胞凋亡率,原位杂交检测姜黄素作用24h后SPC-A1细胞凋亡相关蛋白Survivin表达。结果20μM姜黄素作用24h组凋亡率达43.7％,明显高于其他组;20μM姜黄素作用24h组凋亡相关蛋白Survivin mRNA表达明显降低。结论姜黄素可诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡,其作用机制可能与凋亡相关蛋白Survivin mRNA表达降低有关。     

hsa＿circ＿0131457在胰腺癌组织中的表达变化及其过表达对癌细胞生物学行为的影响

目的 观察环状RNA hsa＿circ＿0131457在胰腺癌组织和细胞中的表达变化,探讨hsa＿circ＿0131457过表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。方法 收集胰腺癌组织及配对癌旁正常组织各7例份,对数生长期的胰腺癌细胞PANC-1、SW1990、CFPAC-1和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7,采用实时荧光定量PCR法检测hsa＿circ＿0131457表达。以hsa＿circ＿0131457表达最低的胰腺癌细胞为研究对象,分为过表达组和对照组,分别采用脂质体转染法转染hsa＿circ＿0131457过表达质粒及对照质粒。取转染后的两组细胞,采用CCK-8法检测两组培养0、24、48、72、96 h的OD值,TUNEL染色法检测细胞凋亡率,细胞划痕实验记录细胞迁移距离,Transwell小室实验记录穿膜细胞数,Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白细胞周期素D2(CCND2)和周期素依赖性激酶4(CDK4)蛋白相对表达量。结果 胰腺癌组织和癌旁正常组织hsa＿circ＿0131457相对表达量分别为0.011±0.017、2.084...