紫杉醇对耐阿霉素膀胱癌细胞株T24/ADM增殖的影响及机制

目的观察紫杉醇对耐阿霉素（ADM）人膀胱癌细胞株（T24/ADM）增殖的影响,并探讨其机制。方法用阿霉素浓度梯度递增法诱导培养人膀胱癌T24/ADM多药耐药细胞。用1、10、102、103nmol/L紫杉醇培养T24/ADM细胞12、24、48、72 h,用MTT法测算T24/ADM细胞增殖抑制率,用流式细胞仪PI单染法测定培养24、48 h时T24/ADM细胞凋亡率,并进行形态学观察。结果紫杉醇可抑制T24/ADM细胞生长,且在一定剂量范围内具有时间和浓度依赖性。实验组细胞凋亡率较对照组高,且随作用时间的延长,细胞凋亡率明显增高。紫杉醇组T24/ADM细胞镜下可见凋亡。结论紫杉醇可抑制膀胱癌T24/ADM细胞株生长,这种作用呈浓度时间依赖性,其机制可能与紫杉醇诱导T24/ADM细胞凋亡有关。     

姜黄素对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响及其机制

目的观察姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及细胞内核因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将对数生长期T24细胞分为两组,实验组加入10、20、50、100μmol/L姜黄素,对照组加入完全培养液。培养24、48、72 h时采用MTT比色法检测两组细胞增殖抑制率;培养24 h采用流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot法检测细胞内NF-κB蛋白表达情况。结果实验组细胞增殖抑制率明显高于对照组,且呈时间—剂量依赖性,P均<0.05;实验组24 h细胞凋亡率明显高于、NF-κB蛋白表达水平明显低于对照组,且呈剂量依赖性,P均<0.05。结论姜黄素能有效抑制人膀胱癌T24细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与下调NF-κB表达有关。     

华蟾素对肝癌细胞株SMMC-7721增殖、凋亡的影响

目的探讨华蟾素对离体肝癌细胞株SMMC-7721的增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法将肝癌细胞株SMMC-7721分为实验组及对照组,细胞培养后取对数生长期细胞,实验组加入0．4、0．6、0．8μmol／L华蟾素,对照组不加药,采用MTr法检测两组24、48h增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期比例及凋亡率,RT-PCR法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3mRNA表达,Westernblot法检测髓系白血病基因（Md）-1的蛋白表达。结果实验组增殖抑制率明显高于对照组,且呈时间和剂量依赖性,P均〈0．05;实验组凋亡率明显高于对照组,P〈0．05;实验组Caspase．3mRNA表达量明显高于对照组,P〈0．05;Mcl-1蛋白表达量明显低于对照组,P〈0．01。结论华蟾素对肝癌细胞株SMMC-7721具有增殖抑制及凋亡诱导的作用,其机理可能为使Caspase-3表达升高,Mcl-1表达降低。     

雷米普利对慢性心力衰竭大鼠肾脏细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3及细胞色素C的影响

目的观察雷米普利对慢性心力衰竭大鼠肾脏细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3和细胞色素C的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法平均分组,正常对照组10只,余均采用肾上腹主动脉缩窄法建立CHF大鼠模型,将建模成功的20只随机均分为模型组和雷米普利组,分别采取苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠肾脏细胞的形态结构,原位末端标记法(TUNEL)测定肾脏细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾脏组织中caspase-3及细胞色素C mRNA的表达;Western印迹法检测肾脏组织caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白含量。结果与正常对照组相比,模型组肾脏组织凋亡指数(AI)显著增高,caspase-3和细胞色素C mRNA及蛋白表达明显增加(P0.01);与模型组相比,雷米普利组肾脏组织AI显著减少,caspase-3和细胞色素C mRNA及蛋白表达量均显著降低(P0.01)。结论雷米普利能够降低CHF大鼠肾脏组织凋亡率,减少肾组织中caspase-3和细胞色素C mRNA及蛋白表达,其抑制肾脏细胞凋亡的作用可能是改善肾功能的作用机制。     

葛根素对肝癌细胞增殖、凋亡及对铂类敏感性的影响

目的 探讨葛根素对肝癌细胞增殖、凋亡及对铂类敏感性的影响.方法 将对数生长期人肝癌HepG2细胞随机分为6组:空白对照组、葛根素10μg/mL组、葛根素20μg/mL组和葛根素40μg/mL组、顺铂(40μg/mL)组和联合(葛根素20μg/mL+顺铂20μg/mL)组.将各组细胞继续培养24 h后,将葛根素针无菌剂溶...     

雷公藤内酯醇对耐顺铂人卵巢癌细胞株COC_1/DDP增殖和凋亡的影响

目的观察雷公藤内酯醇（TP）对耐顺铂（DDP）人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响。方法用10ng/ml TP（TP组）培养COC1/DDP细胞24、48、72 h,每组设3个复孔及3个对照孔。采MTT法检测两组细胞的细胞增殖抑制率。用透射电镜观察培养24 hTP组细胞的凋亡形态,用DNA电泳分析细胞DNA凋亡状况。结果 TP组COC1/DDP细胞增殖抑制率且呈时间依赖性提高（P均〈0.05）。作用24 h后,透射电镜观察可见TP组COC1/DDP细胞表面微绒毛消失,细胞核固缩、染色质凝集成新月状,有凋亡小体形成。DNA电泳可见TP组DNA断裂形成＂梯形＂条带。结论 10 ng/ml TP对COC1/DDP细胞有明显的抑制增殖和促凋亡作用。     

肺癌肿瘤抑制因子1对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制

目的 观察肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。方法将TSLC1过表达人膀胱癌T24细胞株(Ad-TSLC1-T24组)、空载体对照T24细胞株(Ad-T24组)及空白对照T24细胞株(T24组)种植于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线,种植细胞5周处死全部裸鼠留取肿瘤组织标本,测量肿瘤体积,称量瘤重,计算抑瘤率,光镜观察移植瘤组织病理变化,RT-PCR法检测移植瘤组织中TSLC1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)mRNA表达,Western blotting法检测移植瘤组织中TSLC1、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 肿瘤生长曲线显示Ad-TSLC1-T24组移植瘤生长明显慢于Ad-T24组及T24组,种植细胞5周Ad-TSLC1-T24组肿瘤体积及质量低于Ad-T24组及T24组(P均<0.05),抑瘤率高于Ad-T24组(P<0.05)。HE染色结果显示,Ad-TSLC1-T24组移植瘤细胞出现明显的核固缩、核碎裂等凋亡现象。与Ad-T24组、T24组比较,Ad-TSLC1-T24组移植瘤中TSLC1、Caspase-3 mRNA及蛋白相对表达量增加,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论 TSLC1过表达可抑制膀胱癌裸鼠移植瘤生长,其机制可能与上调Caspase-3表达和下调Bcl-2表达促进了肿瘤细胞凋亡有关。     

氧化苦参碱对体外培养人膀胱癌T24细胞生长的抑制作用及其机制

目的 探讨氧化苦参碱对体外培养人膀胱癌T24细胞生长的抑制作用及其机制.方法 体外培养人膀胱癌T24细胞,选择对数生长期细胞用于实验.根据氧化苦参碱浓度梯度(0.625、1.25、2.5、5、10 mg/mL)分组,同时设立阳性对照组、阴性对照组、空白对照组、溶剂对照组.采用MTT法、流式细胞术(FCM)、光镜及电镜观察不同浓度氧化苦参碱作用不同时间(24、48、72 h)对人膀胱癌T24细胞的抑制作用,免疫印迹法检测细胞内Survivin、Caspase-3的表达.结果 随着氧化苦参碱浓度的增高、作用时间的延长,对人膀胱癌T24细胞的抑制率逐渐增强;1.25 mg/mL氧化苦参碱对人膀胱癌T24细胞的抑制率明显高于阴性对照组、溶剂对照组、0.625 mg/mL氧化苦参碱组(P均＜0.05),≥2.5 mg/mL氧化苦参碱各组对人膀胱癌T24细胞的抑制率比较差异无统计学意义.1.25mg/mL氧化苦参碱作用人膀胱癌T24细胞后,在光镜、电镜下均可见到典型的调亡形态,FCM可见癌细胞株出现调亡峰.0.625、1.25、2.5 mg/mL氧化苦参碱均能明显抑制Survivin的表达(P均＜0.05),上调Caspase-3表达(P均＜0.05).结论 氧化苦参碱对体外培养人膀胱癌T24细胞生长有强烈的抑制作用,其机制可能与抑制Survivin表达、上调Caspase-3表达等诱导细胞凋亡有关.     

COPADG对食管癌裸鼠肿瘤增殖与细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察COPADG对食管癌裸鼠肿瘤增殖与细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法建立人食管癌Eca-109裸鼠移植瘤模型并随机分为A、B、C、D四组,分别给予生理盐水、COPADG、5-FU、COPADG＋5-FU灌胃0.2ml,1次/d,连用28 d。测量动物体质量、肿瘤质量计算抑瘤率,采用免疫细胞化学法检测肿瘤组织中的Bcl-2、Caspase-3、PCNA。结果A、B、C、D组抑瘤率分别为0、54.16%、38.78%、73.91%,早期细胞凋亡率分别为6.02%、11.47%、13.05%、21.56%,晚期细胞凋亡率分别为12.65%、20.99%、13.23%、21.6%,B、C、D组与A组比较,P均〈0.01;D组抑瘤率与B、C组比较,P均〈0.01。与A组比较,B、C、D组Bcl-2、PCNA表达明显降低,Caspase-3表达明显增加（P均〈0.01）。结论COPADG可抑制食管癌裸鼠肿瘤增殖、诱导癌细胞凋亡,该作用可能与降低Bcl-2、PCNA表达以及增加Caspase-3表达有关。     

Smac/DIABLO过表达对人结肠癌细胞凋亡的影响

Smac／DIABLO是一种线粒体促凋亡蛋白，研究表明其在结肠癌细胞中表达降低。目的：研究Smac／DIABLO对人结肠癌细胞生长的影响及其可能的促凋亡机制。方法：将pcDNA3.1-Smac质粒或pcDNA3.1空质粒以脂质体转染人人结肠癌细胞株LoVo,以未转染细胞作为空白对照。以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Smac mRNA表达，蛋白质印迹法检测Smac蛋白表达，Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态学变化，Annexin V-FITC／PI双染流式细胞仪分析检测细胞凋亡率,PI染色流式细胞仪分析检测细胞周期。Caspase-3分光光度法检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果：pcDNA3.1-Smac质粒转染12h后，kVo细胞Smac mRNA表达增加；转染48h后，Smac蛋白表达增加。转染48h后,Smac组LoVo细胞呈现明显凋亡细胞核形态学特征。凋亡率显著高于hVo细胞组和空质粒组，GO／G1期细胞增多,Caspase-3活性亦显著高于空质粒组（P〈0．05）。结论：Smac／DIABLO可激活caspase-3途径，抑制人结肠癌细胞生长,促进细胞凋亡。使细胞周期阻滞于G0／G1期。     

雷公藤内酯醇对弥漫性大B淋巴瘤细胞株凋亡的影响及其机制探讨

目的探讨雷公藤内酯醇(TPL)对弥漫性大B淋巴瘤细胞株SU-DHL-4凋亡的影响及作用机制,为其临床应用提供依据。方法分别采用0、0.031 25、0.062 5、0.125、0.25及0.5μmol/L(μM)的TPL作用于SU-DHL-4细胞,采用MTS法测定细胞增殖活性;分别采用0、0.1、0.2、0.3μM的TPL作用于SU-DHL-4细胞,采用AnnexinV/PI双染流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白(PARP、Pro-caspase3、Pro-caspase8、XI-AP、Mcl-1)及细胞增殖相关蛋白(AKT、ERK、STAT5)表达。结果 0.125μM以上的TPL能明显抑制SU-DHL-4细胞的增殖活性,细胞半数致死量所需药物浓度为0.131μM;随TPL浓度升高与作用时间延长,凋亡细胞数逐渐增多;PARP活化,Pro-caspase3、Pro-caspase8、XIAP、Mcl-1表达下降,AKT、ERK、STAT5及其磷酸化形式P-AKT、P-ERK、P-STAT5的表达下降。结论 TPL能抑制弥漫性大B淋巴瘤细胞株SU-DHL-4生长,诱导其凋亡。其机制可能为抑制细胞凋亡蛋白表达、抑制增殖相关蛋白表达及激活Caspase级联反应。     

MMI-166对人胰腺癌细胞株SW1990体外增殖及凋亡的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂MMI-166对人胰腺癌SW1990细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用不同浓度(25、50、100μg/ml)的MMI-166处理人胰腺癌SW1990细胞24、48 h.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;采用Annexin V-PI法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 25、50、100μg/ml MMI-166处理细胞24h后,细胞生长抑制率分别为(34.23±3.87)％、(44.81±2.01)％、(53.91±1.74)％;48 h的抑制率为(39.95±1.83)％、(52.26±3.46)％、(63.20±2.48)％,呈浓度及时间依赖性.24h的细胞凋亡率分别为(4.17±0.55)％、(8.22±0.70)％、( 14.10±0.44)％;48 h的细胞凋亡率为(11.19±0.47)％、(23.01±0.53)％、(28.10±0.52)％,均显著高于对照组的(0.09±0.12)％(P＜0.05).结论 MMI-166以浓度和时间依赖性抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

雷替曲塞对人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡的影响及其机制

目的观察雷替曲塞对人结肠癌细胞(SW480)细胞增殖及细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将SW480随机分为A组、B组、C组与对照组,A组加入雷替曲塞0. 1μg/mL,B组加入雷替曲塞0. 5μg/mL,C组加入雷替曲塞2. 5μg/mL,对照组加入等量培养液。培养24、48、72 h后采用CCK-8试剂盒检测各组SW480增殖活性;培养10 d后,计算各组SW480克隆形成率;培养72 h后,采用实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2及Caspase-3 mRNA,采用Western Blotting法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3蛋白。结果随着雷替曲塞浓度的增加以及干预时间的延长,SW480的增殖速度减慢(P均<0. 05),且在浓度达到一定程度后,该现象不再明显;孵育10 d后,各组SW480克隆形成率组间两两比较,P均<0. 05;随着雷替曲塞浓度的增加,SW480 Bax及Caspase-3蛋白及mRNA表达升高,Bcl-2蛋白及RNA表达降低(P均<0. 05)。结论雷替曲塞可通过调节SW480 Bax、Caspase-3和Bcl-2蛋白及...     

曲美他嗪干预对心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体超微结构、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白、细胞色素C蛋白表达的影响

目的:探讨曲美他嗪干预对心力衰竭(心衰)大鼠左心室心肌细胞线粒体超微结构、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白和细胞色素C蛋白表达的影响。方法:雄性wistar大鼠30只随机分为假手术组、心衰模型组、曲美他嗪组,每组10只。除假手术组外,其余两组大鼠采用肾上腹主动脉缩窄法建立慢性心衰模型,其中曲美他嗪组大鼠给予曲美他嗪10 mg/(kg·d)灌胃4 w。观察各组左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升及下降速率(±dp/dtmax);苏木素伊红(HE)染色法观察大鼠心肌细胞形态结构;透射电镜观察心肌细胞线粒体超微结构;原位缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡指数(AI);SP免疫组织化学法检测各组大鼠左心室心肌细胞caspase-3蛋白、细胞色素C蛋白的表达。结果:与假手术组比较,心衰模型组大鼠心肌细胞线粒体形态发生明显改变,排列紊乱,空泡变性,LVEDP显著升高(P<0.01),±dp/dtmax明显降低(P<0.01),心肌细胞凋亡指数、caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与心衰模型组相比,曲美他嗪组大鼠心肌细胞线粒体形态变化明显改善,LVEDP明显下降(P<0.01),±dp/dtmax显著升高(P<0.01),心肌细胞凋亡指数、caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:曲美他嗪可有效改善心功能,抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与保护心肌细胞线粒体功能有关。     

沙利度胺对人胰腺癌细胞株SW1990体外增殖及凋亡的影响

目的 观察沙利度胺(THD)体外抑制人胰腺癌细胞株SW1990增殖及诱导其凋亡的作用.方法 应用不同浓度的THD(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、400μg/ml)处理胰腺癌SW1990细胞24、48、72 h,用MTT法测定细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期,Annexin V/PI检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 THD呈浓度和时间依赖性抑制胰腺癌细胞SW1990的生长.200μg/ml的THD干预使SW1990细胞G0/G1期比例从(41.15±2.23)％上升到(58.83 ±2.33)％;细胞凋亡率从2.6％增加到28.0％;细胞Bax蛋白表达量从0.17±0.03上调到0.33±0.04,Bcl-2蛋白表达量从0.35±0.02下调到0.17±0.01,Bcl-2/Bax比值从2.17±0.44下降到0.52±0.07.结论 THD可以抑制SW1990细胞增殖,其机制可能与上调Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

槲皮素对肾癌786-0细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨

目的观察槲皮素对肾癌786-0细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的细胞,观察组加入不同浓度的槲皮素,对照组加入1‰的DMSO,每组设3个复孔。MTT法观察培养24、48、72 h时细胞的增殖活性,流式细胞仪检测培养48 h时的细胞凋亡率,Western blot法检测培养48 h时细胞内的磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及总Akt。结果槲皮素可明显抑制肾癌786-0细胞生长,并呈时间和剂量依赖性(P均<0.05);观察组细胞凋亡率与对照组相比明显增加(P均<0.05),且随剂量升高而增加;细胞内p-Akt表达水平,随槲皮素表达剂量增加而降低(P均<0.05)。结论槲皮素可显著抑制肾癌786-0细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制PI3K/Akt通路活性有关。     

z-VAD-fmk对烫伤大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 探讨广谱半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）抑制剂z-VAD-fmk对烫伤大鼠肾脏细胞凋亡的影响。方法 48只雄性Wistar大鼠制作严重烫伤模型并随机分为治疗组与对照组各24只。z-VAD-fmk首次剂量3 mg/kg,此后每隔12 h腹腔注射1.5 mg/kg;对照组用等剂量生理盐水干预。两组分别于造模后2、8、24、48 h各处死6只大鼠,取出肾脏。采用TUNEL法检测肾脏细胞凋亡指数（AI）,免疫组化法检测B淋巴细胞瘤/白血病-2（bcl-2）和Bcl-2同源拮抗蛋白/致死蛋白（Bax）表达,荧光比色法检测Caspase-3活性。结果 与对照组比较,治疗组造模8、24、48 h AI水平降低、Bax表达水平降低、Bcl-2表达水平升高（P均〈0.05）。两组Caspase-3活性均于伤后8 h达峰值;与对照组比较,治疗组造模2、8、24、48 h Caspase-3活性均降低（P均〈0.05）。结论 z-VAD-fmk可抑制烫伤大鼠早期肾脏细胞的凋亡,其作用机制可能为下调AI、Bcl-2表达水平、Caspase-3活性,上调Bax表达。     

尤瑞克林对大鼠脑I/R后大脑皮层细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察尤瑞克林对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)后不同时间点大脑皮层细胞凋亡及Caspase-3、Bcl-2蛋白表达的影响。方法 84只SD雄性大鼠随机分为假手术组,模型1、2、3组及尤瑞克林1、2、3组,各12只。各模型组及尤瑞克林组采用线栓法制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型;假手术组只分离、暴露血管,不结扎血管,不插入尼龙鱼线;尤瑞克林1、2、3组在造模后30 min舌下静脉注射尤瑞克林。模型1、2、3组及尤瑞克林1、2、3组分别于缺血后6、12、48 h小心向外拉鱼线约1 cm使其断端回至颈外动脉内,形成再灌注。对各组大鼠行Zea Longa神经缺损功能评分,以1~3分判定为模型制作成功。每组各取2只大鼠于再灌注24 h采用TUNEL法检测细胞凋亡情况,剩余10只采用免疫组化法检测脑组织Caspase-3、Bcl-2蛋白。结果与假手术组相比,模型组及尤瑞克林组大脑皮层细胞凋亡率及脑组织Caspase-3表达增高,Bcl-2表达降低(P均<0.05);其中,尤瑞克林1、2、3组Caspase-3表达低于模型1、2、3组(P<0.05),尤瑞克林2、3组Bcl-2表达高于模型2、3组。结论尤瑞克林可抑制局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮层细胞凋亡;该作用可能是通过下调Caspase-3表达、上调Bcl-2表达而实现的。