鸭乙型肝炎动物模型的研究进展

自1980年Mason等报道在中国鸭血清中发现鸭乙型肝炎病毒(DHBV)以来,国内外学者相继进行了鸭乙型肝炎的研究。现已得出结论:DHBV与人乙型肝炎病毒(HBV)在生物学特性和致宿主肝脏疾病方面,二者非常相似;鸭乙型肝炎动物模型是研究人病毒性肝炎的较理想模型。有关国内对该模型的研究情况,尚未见综述,故参阅相关文献,概述于下。     

鸭乙肝病毒表面抗原的检测和肝脏组织学观察

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)及其所致肝病已被认为研究乙型肝炎和肝癌的发生机理的实验模型。但由于感染DHBV的鸭血清中病毒DNA和DNA-P随鸭龄增长而逐渐下降至测不到的水平,检测鸭血清中DHBV-DNA和DNA-P不能完全反映实际感染状态。关于鸭血中DHBV表面抗原(DHBsAg)的检测及共与肝病的关系,国内外皆未见报道。因此,本实验对这一方面进行了研究,并对鸭DHBV感染的流行病学作了一定的探讨。     

鸭乙型肝炎病毒性肝炎模型的研究

由于受HBV宿主范围(人和黑猩猩)的限制及缺乏HBV体外培养系统,乙型病毒性肝炎的研究受到了障碍。因此,人们开始寻找类似于HBV的其它动物肝炎病毒以用于研究。迄今,已发现该类家族的病毒有:土拔鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)、用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)。昆类病毒均能引起慢性感染,属于嗜肝DNA病毒(hepadnavirus)科。由于宿主动物易于获得,特别是感染DHBV鸭的动物模型,近年来已越来越多地被用于探讨HBV发病机理及筛选抗肝炎病毒药物的研究。作者根据可能影响建立DHBV鸭肝炎模型的各种因素作一综述。     

人乙型肝炎病毒的三种最近描述的动物病毒模型

近年来发现的与人乙型肝炎病毒(HBV)在种系发生上有关,并属同科的动物病毒已有三种:土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)及鸭乙型肝炎病毒(DHBV)。对HBV复制及其基因表现度的研究     

广西麻鸭乙型肝炎感染病毒动物模型的实验研究

目的探讨广西麻鸭作为乙型肝炎病毒感染动物模型的可能性。方法应用广西1 d龄雏麻鸭经腹腔感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV),13 d后采用实时荧光定量PCR法检测麻鸭血清DHBV含量,筛选出DHBV强阳性鸭。结果共检测148份麻鸭血清标本,其中DHBV阳性标本136份,阳性率为91.9%。结论广西麻鸭可作为乙型肝炎病毒感染动物模型。实时荧光定量PCR法检测DHBV敏感性较高,重复性好,可用于DHBV检测。     

重庆麻鸭乙型肝炎病毒基因组克隆及序列分析

目的 克隆重庆麻鸭乙型肝炎病毒(DHBV)全基因组并进行序列分析。方法 从自然感染DHBV的重庆麻鸭血清中提取DHBV基因组DNA,以聚台酶链反应扩增DHBV基因组DNA,克隆人PGEM—T载体,鉴定后行测序分析。结果 序列分析表明,重庆麻鸭HBV基因组全长3024 bp,由P、S/PreS及PreC/C基因组成。该DHBV株与GenBank中公布的HPUS5CG(M32990)同源性最高(94.9％),与DHBVCG(X74623)同源性最低(89.8％),其各个开放读码框起止位点与HPUGA相同,DNA和蛋白质序列中含有与基因调控和蛋白质功能相关的保守区。结论 成功克隆重庆麻鸭HBV全基因组,序列分析为进一步研究提供了有益的信息。     

肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的：用鸭乙肝模型研究肝康栓对鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的体内抗病毒作用。方法：用DHBV阳性血清感染1日龄的樱桃谷鸭，制备鸭乙型肝炎模型。随机分成5组：肝康栓大、中、小3个剂量治疗组，生理盐水模型组和阿昔洛韦（ACV）对照组，每组12只，均连续给药4周。分别于给药前，给药14天、28天，停药7天时取血清，用real-timePCR法检测鸭血清中DHBV DNA拷贝数的变化情况。结果：肝康栓大剂量组给药14天、28天及停药7天，中剂量组给药14天、28天，小剂量组给药28天，鸭血清中DHBV DNA拷贝数的对数值均较给药前降低（〉2个对数级），差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：肝康栓具有有效抑制鸭体内DHBV DNA复制的作用。     

鸭血清中鸭乙型肝炎病毒表面抗原与肝脏病理变化

用超速离心方法从启东鸭血清中分离和纯化了鸭乙型肝炎病毒(DHBV),提示了DHBsAg有亚型存在的可能性。纯化的DHBsAg免疫动物,制备了特异性抗血清,并用戊二醛二步法建立了检测DHBsA巴的灵敏、特异、简便的反向间接血凝法。通过对江苏启东、山东日照、广西扶绥、长春各地鸭血清中DHBsAg的检测和启东、长春鸭肝脏病理学检查,示检测血清中DHBsAg标志     

鸭乙肝病毒感染的中国鸭和人工感染的日本雏鸭的地衣红染色和病毒DNA

乙型肝炎病毒(HBV)属于一族具有共同超微结构和分子生物学特征的DNA病毒。这类病毒还包括土拨鼠肝炎病毒(WHV)、花金鼠(Ground Squirrel)肝炎病毒(GSHV)和鸭乙型肝炎病毒(DHBV)。这种双层病毒含有带部分双链的环状DNA(约3,000硷基对)和内源性DNA多聚酶。根据这些特点,可将其与已知的DNA病毒相区别。这种病毒主要感染肝脏,其中WHV感染引起的肝病还包括肝细胞癌。HBV族有两大抗原系统即表面抗原(HB_sAg)和核心抗原(HB_cAg)。已发现在WHV、GSHV和HBV之间有交叉抗原性,     

三种方法诱发鸭肝纤维化模型的对比研究

采用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)强毒株感染1日龄鸭,结果85天后均出现纤维增生(6/6),120天有3/5出现肝纤维化,与感染十四氯化碳注射组(65天3/4出现纤维增生,85天3/6出现肝纤维化)、感染 牛血清白蛋白攻击组(85天3/5出现纤维增生,120天8/12出现肝纤维化)相比,均无统计学差异。提示强毒株DHBV是引起肝脏特异性病变的主要原因,造成DHBV持续感染和延长观察时间,可望进一步提高鸭肝纤维化的造模成功率。     

鸭乙型肝炎病毒对鸭心肌细胞超微结构的影响

将鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染雏鸭制作的鸭乙型肝炎模型已被广泛用于研制抗乙肝病毒新药,为探索DHBV感染对雏鸭心脏有何影响,我们观察了被DHBV感染的雏鸭其心肌的超微结构,现报道如下。 1 材料与方法 1.1 动物及分组 20只1日龄武汉麻鸭(购自华中农业大学种禽厂),随机分为对照组和感染组,每组10只。 1.2 造模方法及标本制作 雏鸭喂养1周后,分成2组:感染组每只鸭自胫静脉注射DHBV阳性血清     

鸭乙型肝炎肝纤维化模型的研制(摘要)

目的:采用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)阳性血清反复攻击雏鸭建立鸭乙型肝炎肝纤维化动物模型。方法:用DHBV阳性血清0.1ml/只,从胫静脉注射1日龄樱桃谷鸭,每周1次,从第10周剂量加大为     

肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒和改善肝脏病理的作用

[目的]用鸭乙型肝炎（乙肝）模型研究肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）和改善肝脏病理的作用。[方法]用DHBV阳性血清感染1d龄的樱桃谷雏鸭，制备鸭乙肝模型。将其中36只感染阳性鸭随机分成3组：肝康栓治疗组，0．85％氯化钠模型组和阿昔洛韦（ACV）对照组，每组12只，均连续给药4周。分别于给药前，给药14、28d和停药7d时取血清，用实时定量PCR法检测鸭血清中DHIWDNA拷贝数。于停药7d时，处死各组雏鸭，取肝脏病理切片苏木精一伊红染色后，观察肝脏炎症情况和肝细胞变性程度。[结果]肝康栓治疗组给药14、28d及停药7d时鸭血清中DHBVDNA拷贝数的对数值均较给药前降低（均P〈0.01）。肝康栓治疗组雏鸭肝脏的肝细胞肿胀率、空泡变率、嗜酸性变率均较同期模型组降低，差异有统计学意义（P〈0.05，〈20．01）。[结论]肝康栓能有效地抑制鸭体内DHBVDNA的复制，并具有改善肝脏病理的作用。     

补锌去铁对中药保肝康抗鸭乙肝病毒疗效的影响(摘要)

目的:观察补锌去铁对中药保肝康抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)疗效的影响。方法:采用垂直传播的DHBV DNA阳性的6月龄麻鸭作鸭乙型肝炎病毒模型。以补锌去铁加中药保肝康进行治疗,观察其对DHBV、鸭肝功能及血清锌、铁、肝组织铁的影响。并设保肝康作为中药对照,抗乙肝转移因子作     

重庆麻鸭乙肝动物模型的建立及应用——21种中药抗鸭乙型肝炎病毒初筛研究

采用斑点杂交法检测了重庆地区263份2～3月龄麻鸭血清中的DHBV DNA,用筛选出的阳性病毒血清经腹腔感染1～2日龄的血清DHBV DNA阴性雏鸭,并用该模型进行了21种中药抗乙肝病毒初(?)。结果表明:(1)重庆地区2～3日龄麻鸭DHBV自然感染率为25.48％.(2)经腹腔感染的1～2日龄雏鸭的血清DHBV DNA阳性率1周后为82.90％,并可持续至少2个月。(3)抗乙肝病毒中药初(?)发现用广西叶下珠、苦参治疗2周可使DHBV DNA滴度下降,其余的经体外实验认为有效的抗乙肝病毒中药,动物实验并未获证实。     

919糖浆抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:研究919糖浆时鸭乙型肝炎的体内抗病毒作用。方法:以感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的武汉麻鸭为实验动物模型。使1d龄武汉麻鸭感染DHBV,7d后用Dot-EIA法筛选出DHBsAg强阳性鸭。随机分组后给予919糖浆治疗14d,于感染后第7d(为用药前)、用药7d、14d及停药后3d分别采血,采用斑点杂交方法检测血清DHBVDNA。结果。用药919糖浆7d、14d鸭血清DHBV DNA OD值均明显低于给药前,有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。停药3d后没有反跳现象。结论:919糖浆有一定的抑制DHBV DNA复制作用。     

抗乙型肝炎新药阿德福韦

阿德福韦双异戊酰氧甲酯 (Adefovirdipivoxil ,简称ADV )是一种新的抗乙型肝炎病毒 (HBV)的药物。 2 0 0 2年 9月经美国食品药物管理局 (FDA)批准在美国上市 ,是继拉米夫定后的另一个口服抗HBV药物。ADV属单磷酸腺苷磷酸核苷酸类似物 ,其化学名是 :9 [ 2 [[双·[三甲基乙酰氧 )甲氧基 ]氧磷基 ]甲氧基 ]乙基 ]腺嘌呤 ,分子式为C2 0 H3 2 N5O8P ,分子量为 5 0 1.48,化学结构见图 1。图 1　阿德福韦的化学结构　　一、抗病毒谱临床前抗病毒研究表明 ,ADV在体外和体内对HBV ,鸭乙型肝炎病毒 (DHBV) ,美洲旱獭肝炎病毒 (WHV ) ,以…     

海珠益肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:研究海珠益肝胶囊对鸭乙型肝炎的抗病毒作用.方法:使1日龄北京麻鸭感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV),7天后用Dot-EIA法筛选出DHBsAg强阳性鸭.随机分成5组:海珠益肝胶囊大、中、小3个剂量组、以生理盐水灌胃的模型组和以无环鸟苷(ACV)灌胃的对照组.每组6只,各组雏鸭均灌胃10天.用药前、用药5天、10天及停药后3天分别采血,采用斑点杂交法检测血清DHBV DNA.结果:用海珠益肝胶囊5天、10天时鸭血清DHBV DNA其OD值均明显低于给药前,差异有显著性意义(P＜0.05).与对照组相比,差异无显著性意义(P＞0.05).结论:海珠益肝胶囊有一定的抑制DHBV DNA复制的作用.     

SYBR实时定量聚合酶链反应检测鸭乙型肝炎病毒的研究

采用SYBR实时定量聚合酶链反应(PCR)检测鸭乙型肝炎病毒(DHBV)，现将结果报道如下。     

护肝灵抑制DHBV的实验研究

本文采用护肝灵治疗人工感染鸭乙型肝炎病毒的模型动物。通过斑点酶免疫测定法(Dot Engyme Immunoassay,Dot EIA)检测实验感染鸭血清中DHBsAg和ELISA法检测DHBeAg的动态变化,结果显示护肝灵对DHBV有抑制作用,其抑制作用呈药物浓度依赖性关系。