两种麻醉方法建立大鼠盲肠结扎穿孔术脓毒症模型的比较

目的 探讨两种麻醉方法对大鼠盲肠结扎穿孔术(Cecal ligation-peferation,CLP)脓毒症模型的影响.方法 60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分成2组,每组30只,分别采用传统戊巴比妥钠腹腔注射(T组)和利多卡因、阿托品、咪达唑仑麻醉复合剂(E组)腹腔注射的方法进行麻醉,采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒...     

盲肠结扎穿孔术——脓毒症模型研究的金标准

脓毒症是一个高发病率、高病死率的疾病。其发病特点是全身炎性反应失调引起的免疫功能障碍,因此如何选择最佳动物模型对研究脓毒症至关重要。盲肠结扎穿孔术(CLP)是目前研究脓毒症应用最广泛、最具代表意义的一种模型,更类似于人类脓毒症的进展和特点。尽管CLP不能完全复制临床的脓毒症,但其仍为脓毒症发病机制和防治研究提供了大量有意义的基础数据。该文对CLP的研究应用予以综述,以促进实验研究与临床试验间的转化。     

大承气汤对盲肠结扎并穿孔引发脓毒症大鼠的免疫调节

目的：探讨大承气汤对盲肠结扎并穿孔引发脓毒症的免疫调节。方法：大鼠随机分为3组（n=26）假手术组、盲肠结扎并穿孔组、大承气汤组。外周血行中性粒细胞吞噬功能测定及白细胞移行抑制实验,直接放射免疫分析方法及酶联免疫吸附法分别测定血清皮质醇及肿瘤坏死因子-α。结果：大承气汤可提高外周血中性粒细胞的吞噬率及改善胸腺指数、白细胞移行抑制指数;减少肿瘤坏死因子-α过度释放,调节血浆皮质醇水平。结论：大承气汤对盲肠结扎并穿孔引发脓毒症有免疫调节作用。     

盲肠结扎穿刺大鼠脓毒症模型改良

目的探索更符合临床脓毒症病生理机制的动物模型。方法将75只雄性sD大鼠随机分为CLP组、实验组及假手术组,每组25只,分别行假手术、盲肠结扎穿刺及改良盲肠结扎穿刺术。3组大鼠中各取5只,于术后12h无菌心脏采血2mL,进行细菌培养及鉴定。剩余大鼠分别于术后6h、12h、24h血清TNF—a和IL一6浓度,并观察大鼠死亡率。结果实验组大鼠血培养均为阳性,术后6h、12h、24h血清TNF—a和IL-6浓度均明显高于假手术组及CLP组（P〈0．01）。结论改良盲肠穿刺结扎术所致大鼠脓毒症模型由于传统CLP模型。     

盲肠不同部位结扎穿孔致脓毒症模型的建立研究

目的 通过盲肠不同部位结扎穿孔致脓毒症模型的研究,探索符合临床病理过程的脓毒症模型.方法 50只KM雄性6周龄小鼠分为5组,空白对照(NC)组、假手术(Sham)组、轻度脓毒症(Min)组、中度脓毒症(Mod)组和重度脓毒症(Sev)组.Sham组仅进行开腹、关腹程序;Min组、Mod组和Sev组以盲肠结扎穿孔术处理,...     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO与CGRP变化及其相关性研究

目的通过观察盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO、CGRP水平变化及相关性分析,探讨CGRP在肠黏膜损害中的作用。方法将60只SD大鼠随机分成脓毒症组和假手术组,每组30只,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型,假手术组仅行盲肠探查术。各组均于术后3、6、12、24与48 h时点,采集腹主动脉血通过双抗体夹心酶标免疫分析法检测血清DAO、CGRP水平,并做相关性分析。结果脓毒症组中的DAO水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显升高(P0.05),呈持续上升趋势,在CLP术后48 h血清DAO水平明显高于假手术组(P0.05)。脓毒症组中的CGRP水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显降低(P0.05)呈持续降低趋势,虽随时间推移有所回升,但在CLP术后48 h仍低于假手术组(P0.05)。血浆CGRP、DAO含量的变化,经相关分析,CGRP与DAO具有高度正相关,相关系数为0.904,(P0.01)。结论盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠DAO明显高于正常水平、CGRP呈现持续降低状态,CGRP的释放减少可能是导致肠缺血缺氧和肠黏膜损伤的因素之一。     

盲肠结扎穿刺法大鼠脓毒症模型的复制

目的通过脓毒症动物模型的复制为脓毒症的防治提供新的靶点和新的视野,也为脓毒症的进一步研究提供应用基础。方法将18只Wistar大鼠分为对照组、术后2、6、12、24、48h组,每组3只。采用盲肠结扎穿刺法复制Wistar大鼠脓毒症模型。结果对大鼠活动习性、外表和解剖、病理切片的观察,接受盲肠结扎穿刺（CLP）术后的大鼠精神状态、生活习性发生改变。术后24h多脏器组织呈炎症改变,血液和腹腔积液细菌培养均阳性;术后2、6、12、24、48h血浆中内毒素水平均显著高于时照组。结论采用盲肠结扎穿刺法复制了大鼠脓毒症模型,证实大鼠脓毒症模型袭制成功。     

盲肠结扎穿刺致大鼠脓毒症的模型改良

目的:研究更符合病理生理学机制的脓毒症动物模型. 方法:取60只雄性SD大鼠,随机分成对照组、CLP组、实验组,各20只,分别行假手术、盲肠结扎穿刺术及改良盲肠结扎穿刺术,观察各组的死亡率、大体情况及病理学变化. 结果:实验组死亡率及多器官衰竭情况明显重于CLP组. 结论:改良盲肠结扎穿刺术所造脓毒症动物模型优于传统盲肠结扎穿刺术.     

动脉压力感受性反射对盲肠结扎穿孔致脓毒症大鼠生存率的影响

目的：观察动脉压力感受性反射（ABR）对盲肠结扎穿孔（CLP）致脓毒症大鼠生存率的影响.方法：利用破坏反射弧的方法,将雄性大鼠依据反射功能高低分为两组：假手术大鼠（n=22）和去窦弓神经（SAD）大鼠（n=22）.用CLP致大鼠脓毒症模型,采用计算机化清醒大鼠血压连续监测技术,于CLP后动态监测大鼠的血压及心动间期,并观察大鼠12 h内的存活情况.结果：大鼠CLP后收缩压和舒张压随时间逐渐下降,而心动间期则先变短再急剧变长直至动物死亡.12 h后假手术大鼠的生存率为86%,而SAD大鼠的生存率为59%,两组大鼠Kaplan-Meier生存曲线存在显著差异（P＜0.05）.结论：ABR在CLP致大鼠脓毒症中起重要作用.     

心导管留置术后盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症动物模型的建立

目的采用留置心导管采血法检测盲肠穿孔术（CLP）后脓毒症模型大鼠血清学指标并观察肝肺组织病理学形态的变化,为用于治疗脓毒症药物的活性评价的动物模型的建立奠定了实验基础。方法采用改良的心导管留置术结合盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症大鼠模型,术前和术后2、6、12、24、48 h共6个时相点采血,动态浊度法鲎试验检测血浆内毒素（LPS）水平,ELISA法检测血浆TNF-α和IL-6值,全自动血细胞分析仪检测全血白细胞（WBC）及血小板（PLT）值,术后48 h观察大鼠肝、肠、肺的病理学形态改变。结果术后大鼠的血浆LPS、TNF-α、IL-6及全血WBC水平均于术后6 h后逐渐升高,12 h达到高峰,之后逐渐下降,于48 h达到正常水平;PLT水平6 h内无明显变化,随后逐渐下降,24 h达最低值,之后逐渐升高,于48 h接近正常水平;肝、肠、肺组织则呈现以肿胀、炎性细胞浸润为主的病理学改变。结论通过心导管留置术采血观察CLP模型大鼠血细胞和细胞因子、LPS的动态变化是一稳定可靠的实验方法。     

参麦注射液对早期盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清IL-6、IL-8水平的影响

目的 研究参麦注射液(Shenmai,SM)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症大鼠模型早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8水平的影响.方法 96只SD大鼠随机分为A组(假手术组,n=32)、B组(生理盐水组,n=32)和C组(参麦注射液组,n=32),分别于CLP造模后1/2、12、24和36 h向A组、B组大鼠皮下注射生理盐水(5 mL/kg),C组大鼠皮下注射参麦注射液(5 mL/kg),并于术后12、24、36和48 h测量3组SD大鼠血清中IL-6、IL-8的水平.结果 CLP造模后B、C两组血清IL-6、IL-8水平均明显升高,C组在各时点的IL-6、IL-8水平均显著低于B组(P<0.01).结论 参麦注射液可显著降低脓毒症大鼠早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8的水平,对早期脓毒症大鼠具有保护作用.     

兔盲肠结扎穿孔早期血液动力学改变及肺抗氧化作用的探讨

实验采用乌拉坦麻醉家兔盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）模型，观察ＣＬＰ前后血液动力学变化及肺动脉氧化作用，结果发现兔ＣＬＰ后１￣５ｈ平均动脉血压（ＭＡＰ）明显下降，而在２，２．５ｈ后出现肺动脉压（ＰＡＰ）明显升高。ＣＬＰ后２．５ｈ入肺血丙二醛（ＭＤＡ）比ＣＬＰ前明显增加，出肺血无显著改变；而出肺血超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）比ＣＬＰ前者明显增高，入肺血无显著改变。结果提示兔盲肠结扎穿孔早期即有ＭＡＰ和ＰＡＰ的改     

盲肠结扎穿刺致大鼠败血症的改良模型

盲肠结扎穿刺致大鼠败血症的改良模型广州医学院病理生理学教研室（５１０１８２）林毅红梁仲培刘金保败血症动物模型可通过多种方法实现，如静脉内输入活菌，肌肉感染灶，腹腔内或腹腔后感染等。自８０年代，国内外学者用盲肠结扎加穿刺（ＣＬＰ）的方法复制大鼠实验性败...     

一种改良盲肠结扎穿刺致大鼠脓毒症模型的方法

目的建立一种更符合临床脓毒症生理机制的盲肠结扎穿孔动物模型。方法 SPF级雄性SD大鼠96只,采用随机数字分组法分为假手术组(n=24)、置管组(n=24)、盲肠结扎穿刺(CLP)组(n=24)、CLP+置管组(n=24),观察造模后24 h各组病死率,造模后24 h开腹观察腹腔状况,观察大鼠心、肺、肝、肾组织的病理学形态改变及各组织损伤病理积分。取下腔静脉血检测全血白细胞(WBC)、血小板(PLT)值;检测血清白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,检测血清肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)水平。取主动脉血进行血气分析。结果假手术组和置管组大鼠24 h无病死率,CLP组大鼠24 h病死率20.8%,CLP+置管组大鼠24 h病死率54.2%。CLP+置管组心、肺、肝、肾组织均呈现以肿胀、炎性细胞浸润为主的病理学改变,CLP组多数出现单个脏器炎性细胞浸润,假手术组和置管组各脏器未出现明显肿胀及炎性细胞浸润;大鼠心肌组织病理学评分、肺组织损...     

异氟烷后处理减轻大鼠盲肠结扎穿孔所致急性肺损伤

目的 研究异氟烷后处理对大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)所致急性肺损伤(ALI)的保护作用.方法 将48只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为4组,每组12只:正常对照组,不做任何处理;假手术组,单纯行开腹关腹术;CLP组,行CLP建立大鼠ALI模型;异氟烷组,CLP模型建立后4h,使大鼠吸入体积分数为0.014的异氟烷2h.分别在实验后6和24 h,每组各处死6只大鼠作为6h亚组和24 h亚组.取腹主动脉血行动脉血气分析,取左肺测定肺组织湿/干重比(W/D),取心脏血测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6浓度,取右肺行苏木精-伊红(H-E)染色观察肺组织病理学变化、免疫组织化学染色观察核转录因子(NF)-κB的表达.结果 假手术组大鼠的动脉血氧分压(paO2)、肺组织W/D及血清TNF-α和IL-6水平与正常对照组的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).CLP组和异氟烷组的paO2均较正常对照组显著降低(P值均＜0.05),肺组织W/D均较正常对照组显著增大(P值均＜0.05),血清TNF-α和IL-6水平均较正常对照组显著升高(P值均＜0.05);但异氟烷组上述指标的变化均较CLP组小,与CLP组比较的差异均有统计学意义(P值均＜0.05).正常对照组和假手术组大鼠的肺组织无明显损伤;CLP组大鼠的肺组织损伤严重,24 h亚组的损伤更为明显;异氟烷组大鼠的肺组织损伤较CLP组轻.正常对照组和假手术组偶见NF-κB表达阳性细胞,CLP组见大量NF-κB表达阳性细胞,异氟烷组的NF-κB阳性细胞数目较CLP组减少.结论 异氟烷后处理对脓毒症ALI具有保护作用,这种保护作用可能部分是通过抑制炎性因子和NF-κB的表达实现的.     

异氟醚后处理对盲肠结扎穿孔大鼠急性肺损伤的保护作用

目的观察异氟醚（isoflurane,ISO）后处理对盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture,CLP）后大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的保护作用。方法32只SD雄性大鼠随机分为4组（每组n=8）：正常组（N组）,未行任何处理;假手术组（Sham组）,单纯行开腹关腹术;盲肠结扎穿孔术组（CLP组）,行CLP建立大鼠ALI模型;异氟醚组（ISO组）,建立CLP模型后4 h腹腔注射液态异氟醚2 ml/kg。术后12 h各组动物腹主动脉放血处死,右肺进行病理切片和肺湿/干比（W/D）测定,组织匀浆测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）的含量;左肺行支气管肺泡灌洗,取上清液测总蛋白、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素10（IL-10）的含量。结果肺组织病理学检测结果显示CLP组大鼠肺组织损伤严重,ISO组肺组织损伤较轻。与N组比较,CLP组和ISO组中SOD含量降低（P〈0.01）,其余检测指标均增加（P〈0.01）。与CLP组比较,ISO组SOD和IL-10含量较高（P〈0.01）;其余检测指标均低于CLP组（P〈0.05或P〈0.01）。结论在本实验条件下,大鼠腹腔注射液态ISO可发挥抗炎、抗氧化作用,对CLP所致大鼠ALI有部分保护作用。     

旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔诱导的小鼠脓毒症的影响

目的观察旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导的小鼠脓毒症的影响。方法80只雄性BALB/c小鼠随机 分为假手术组、CLP组、旋毛虫肌幼虫（ML）预感染组、旋毛虫肌幼虫虫体可溶性蛋白（SMP）处理组和排泄分泌蛋白（MES）处理 组。ML预感染组于术前28 d经口感染300条旋毛虫肌幼虫,其余各组分别于术后30 min腹腔注射PBS或SMP（25 μg/只）或 MES（25 μg/只）。观察小鼠术后状态和72 h生存率,检测术后12 h小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移 酶（AST）、尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、TGF-β水平,观察小鼠肝和肾组织病变。结果与假手术 组相比,CLP组72 h生存率降低,血清中ALT、AST、BUN和Cr水平及细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10和TGF-β水平均明显 升高（P<0.05）。肝中肝索排列紊乱,肝细胞水肿,肾中部分血管球皱缩,肾小管细胞水肿。与CLP组相比,ML预感染组血清中 ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水平降低,IL-10和TGF-β水平升高（P<0.05）;SMP处理组血清中ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水 平降低,TGF-β水平升高（P<0.05）;MES处理组72 h生存率明显升高,血清中ALT、AST、BUN、Cr、TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显 降低,IL-10和TGF-β水平明显升高（P<0.05）,肝和肾组织结构损伤明显减轻。结论旋毛虫及其虫源性蛋白可减少CLP诱导的 脓毒症小鼠血清中促炎因子的释放,促进免疫调节因子的释放,其中MES效果更为显著,并能减轻肝和肾结构和功能的损伤。     

脓毒症模型大鼠循环内皮细胞与肝功能状态间关系的相关性研究

目的 探讨大鼠脓毒症中循环内皮细胞(circulating endothelial cells, CEC)数量的变化及其与肝功能改变的关系.方法 利用盲肠结扎穿孔模型(CLP)在大鼠制作脓毒症模型.观察CEC数量、白细胞数量的变化、以及肝组织病理组织学、血天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的改变.并探讨CEC数量与AST和ALT的相关关系.结果 CLP 6 h后动物肝细胞明显肿胀,24 h组肝细胞大量空泡变性,乃至坏死.CLP 3 h组白细胞和CEC数量比对照组明显升高.而CLP 6 h后AST、ALT才出现明显增高.CEC数量与AST和ALT水平呈负相关,Pearson相关系数(r)分别为-0.774 和-0.734(P＜0.01).用非线性回归分析CEC数量与AST和ALT的关系,发现CEC数量对ALT的最佳拟合曲线为幂函数(P＜0.05),其方程为ALT=33.052 681 24.097 309 CEC -1.CEC数量对AST的最佳拟合曲线为对数函数,但无统计学意义(P=0.607).结论 在大鼠脓毒症模型中,比起常规肝功能指标,CEC数量更能敏感反映肝脏病理进程.当肝功能指标高于正常阈值时肝细胞已经出现了显著损伤.因此,早期监测CEC数量结合已有的肝功能指标有助于早期提示肝功能损害,及时针对治疗.     

脓毒症心肌损害新生大鼠模型的建立

【摘要】 目的 建立一种具有良好稳定性及重复性的能模拟新生儿脓毒症（NS）心肌损害的新生大鼠动物模型,为研究NS致病机制及防治提供模型动物。方法 选取出生10天的健康雄性SD新生大鼠54只,随机分为正常对照组、假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术组（CLP组）,每组各18只。通过观察血培养菌落生长,采用酶联免疫吸附法（ELISA）对血清肌钙蛋白I（cTNI）浓度、心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF α）和白细胞介素1β（IL 1β）含量进行检测,光镜下观察HE染色后心肌组织的病理变化。结果 正常对照组和Sham组新生大鼠的血培养结果均为阴性,CLP组新生大鼠的血培养中检出以大肠杆菌为主的菌落。正常对照组新生大鼠的血清cTNI浓度、心肌组织TNF α和IL 1β含量和Sham组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;CLP组新生大鼠的血清cTNI浓度、心肌组织TNF α和IL 1β含量较Sham组明显增加（P＜0.05）。正常对照组和Sham组的心肌组织HE染色示心肌细胞均未出现炎性改变,但CLP组心肌细胞周围出现了炎性细胞浸润等病理改变。结论 通过盲肠结扎穿孔可建立较为理想的脓毒症心肌损害新生大鼠模型。