维拉帕米,肝素,地塞米松抑制后囊混浊的细胞学基础：对晶体上皮细胞…

通过观察维拉帕米，肝素，地塞米松在体外对牛晶体上皮细胞（ＢＬＥＣ）增殖和细胞内Ｃａ＾＋的影响评价一它们抑制后囊混浊的价值。结果维拉帕米呈浓度依赖性抑制ＢＬＥＣ增殖（Ｐ〈０．０５（１０ｍｇ／Ｌ）或Ｐ〈０．０１（≥２０ｍｇ／Ｌ）和降低细胞内Ｃａ＾＋并能增强肝素的增殖抑制作用肝素５００ｍｇ／Ｌ时可明显抑制增殖（Ｐ〈０．０１）和降低细胞内Ｃａ＾＋＋５００ｍｇ／Ｌ以上抑制作用不随浓度增加而增强，地塞米松对Ｂ     

γ干扰素防治增殖性玻璃体现网膜病变的实验研究

在兔眼玻璃体内移植５０００００个同种异体皮肤纤维细胞后，玻璃体内一次性注射γ干扰素显著降低牵引性视网膜脱离的发生率。第一周，对照组为４０％（２０眼中８眼），治疗组仅１０％（２０眼中２眼）（Ｐ＜０．０５）。第四周，对照且１００％（２０眼中２０眼），治疗组降为６０％（２０眼中１２眼）（Ｐ＜０．０１）。实验表明γ干扰素对防治增殖性玻璃体视网膜病变有效，玻璃体内注射γ干扰素１０＾４单位对眼部无毒性作用。     

内皮素(ET_1)对豚鼠视网膜组织cAMP、cGMP影响的初步观察

目的观察全身及视网膜局部血管中ＥＴ１的水平，与豚鼠视网膜微循环和代谢的平衡状态。方法应用放射免疫方法测定了２６例健康豚鼠静脉内注射ＥＴ１后１０，２０，４０和８０分钟以及７例正常对照豚鼠视网膜组织中ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ的含量。结果静脉注射ＥＴ１后１０分钟ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ值降低，２０分钟ｃＡＭＰ值下降为最低（Ｐ＜０．００１），４０分钟时ｃＧＭＰ值（Ｐ＜０．０５）和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值（Ｐ＜０．０１）下降为最低点，ｃＡＭＰ值呈回升趋势（Ｐ＜０．０１），８０分钟时三者已增至对照组低限（Ｐ＞０．０５）。结论提示全身和视网膜局部血管中ＥＴ１的水平与豚鼠视网膜微循环及代谢的平衡状态有关，并参与视网膜组织细胞局部代谢的调控。     

BAMBI过表达抑制缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞增殖和迁移

目的　探讨过表达激活素膜结合抑制剂（ｂｍｐａｎｄａｃｔｉｖｉｎｍｅｍｂｒａｎｅ-ｂｏｕｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＢＡＭＢＩ）对缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞（ＲＦ／６Ａ）增殖和迁移的影响。方法　将ＲＦ／６Ａ细胞分为四组:正常对照组、缺氧组、缺氧＋ｐＦＬＡＧ组和缺氧＋ＢＡＭＢＩ组。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组细胞中ＢＡＭＢＩ的表达,倒置显微镜观察各组细胞形态和密度,ＣＣＫ-８法和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖和周期情况,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ检测细胞的迁移,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β１,ＴＧＦ-β１）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达。结果　与对照组相比,缺氧组细胞数目明显增多,增殖增加,培养１２０ｈ后,对照组细胞增殖倍数为５．００±０．２８,缺氧组为７．６４±０．３２（Ｐ＜０．００１）;缺氧组Ｓ期进程显著加快,占（１０．４４±２．６１）％,对照组Ｓ期占（２０．７９±２．２３）％（Ｐ＜０．０５）;细胞迁移增加,缺氧组细胞数目为３３．８０±４．２０,对照组为８．３５±２．５０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显增加（Ｐ＜０．０５）。缺氧＋ＢＡＭＢＩ组:缺氧处理的细胞转染ｐＦＬＡＧ-ＢＡＭ-ＢＩ后,与缺氧组相比,ＢＡＭＢＩ蛋白表达显著上调,细胞数目明显减少,增殖显著降低,培养１２０ｈ后,增殖倍数为５．５３±０．２７（Ｐ＜０．００１）,细胞Ｓ期受到阻滞,占（１８．７５±２．９２）％,迁移显著下降,数目为１３．００±２．８０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显下调（Ｐ＜０．０５）。结论　过表达ＢＡＭＢＩ可抑制缺氧诱导的ＲＦ／６Ａ细胞的增殖和迁移,进而有望抑制视网膜血管新生。     

非瑟酮对人晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的　研究非瑟酮（ｆｉｓｅｔｉｎ,Ｆｉｓ）在生理状态下及氧化应激状态下对人晶状体上皮细胞（ｈｕｍａｎｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ,ＨＬＥＣ）增殖和凋亡的影响。方法　体外培养ＨＬＥＣ,通过Ｈ２Ｏ２氧化损伤建立氧化应激模型,设置空白对照组、Ｈ２Ｏ２组、Ｆｉｓ组和Ｆｉｓ＋Ｈ２Ｏ２组,其中Ｆｉｓ组和Ｆｉｓ＋Ｈ２Ｏ２组按Ｆｉｓ浓度（５μｇ?ｍＬ－１、１０μｇ?ｍＬ－１和２０μｇ?ｍＬ－１）分为３个亚组。分别于培养１２ｈ及２４ｈ后,倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态学改变,运用ＭＴＴ法检测细胞增殖的变化,运用流式细胞技术检测细胞凋亡率的变化。结果　与空白对照组比较,Ｈ２Ｏ２组较多细胞出现典型的形态学改变,细胞增殖能力明显降低（１２ｈ、２４ｈ后分别为０．１１７６±０．０１５０和０．１１７２±０．００６１）,凋亡率明显增加（２４ｈ后为１２．３５％ ±１．２３％）,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。不同浓度Ｆｉｓ组间的细胞在培养１２ｈ及２４ｈ后细胞形态均无明显改变,细胞增殖也无明显变化（Ｐ＞００５）。培养１２及２４ｈ后,与Ｈ２Ｏ２组比较,Ｆｉｓ＋Ｈ２Ｏ２组发生形态改变的细胞减少,细胞增殖能力明显改善,且随时间、Ｆｉｓ浓度增加其作用更明显（最高为０．３９９４±０．０２５７）（Ｐ＜０．０５）。培养２４ｈ后,与Ｈ２Ｏ２组凋亡率比较,不同浓度Ｆｉｓ＋Ｈ２Ｏ２组的细胞凋亡率逐渐降低,依次为（９．９９±１．５３）％、（５．８０±１．５５）％、（３．５８±０．７３）％,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　一定浓度的Ｆｉｓ在一定时段对生理状态下的ＨＬＥＣ增殖无明显影响。在氧化应激状态下,Ｆｉｓ呈时间和浓度依赖性地改善ＨＬＥＣ增殖能力,呈浓度依赖性地降低ＨＬＥＣ凋亡率。     

LY294002联合奥曲肽对bFGF诱导的兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的　探讨ＬＹ２９４００２联合奥曲肽对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）诱导的兔晶状体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＬＥＣｓ）增殖的影响。方法　兔眼ＬＥＣｓ经原代和传代培养后,共分为４组:空白对照组、增殖对照组、实验药物组、增殖药物组。空白对照组使用仅含无血清ＤＭＥＭ培养;增殖对照组使用加ｂＦＧＦ（１０ｍｇ·Ｌ－１）的无血清ＤＭＥＭ;实验药物组培养时在不加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２与１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽来培养;增殖药物组在加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２和１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽进行细胞培养,每组重复５次。各组分别培养４８ｈ。ＭＴＴ比色法测定吸光度（Ａ值）分析各组细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测各周期细胞的百分率。结果　增殖对照组与空白对照组相比,吸光度Ａ值升高（Ｐ＜０．０５）;实验药物组中各组分别与空白对照组相比,吸光度Ａ值均有不同程度下降（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中各组分别与增殖对照组相比,吸光度Ａ值明显下降（均为Ｐ＜０．０５）;生长抑制率与吸光度Ａ值趋势相同。经流式细胞仪分析,实验药物组中联合用药组与两个单独用药组相比Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中,联合用药组与两个单独用药组相比也出现Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＬＹ２９４００２联合奥曲肽较单独用药对ＬＥＣｓ的增殖抑制作用更强。这为临床筛选药物防治后发性白内障提供依据。     

d-δ-三烯生育酚对人晶状体上皮SRA细胞增殖和凋亡的影响

目的　研究ｄ－δ－三烯生育酚对人晶状体上皮ＳＲＡ细胞增殖和凋亡的影响,探讨后发性白内障治疗的新方法。方法　将人晶状体上皮ＳＲＡ细胞分为对照组和实验组,对照组不加药物干预,实验组设３个药物浓度,分别为３０μｍｏｌ?Ｌ－１、４０μｍｏｌ?Ｌ－１、５０μｍｏｌ?Ｌ－１的ｄ－δ－三烯生育酚,药物干预人晶状体上皮ＳＲＡ细胞２４ｈ和４８ｈ后,采用ＭＴＴ法、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色和流式细胞仪分析人晶状体上皮ＳＲＡ细胞的增殖和凋亡情况。结果　ｄ－δ－三烯生育酚呈浓度－时间依赖性抑制人晶状体上皮ＳＲＡ细胞的增殖,诱导其凋亡。３０μｍｏｌ?Ｌ－１、４０μｍｏｌ?Ｌ－１、５０μｍｏｌ?Ｌ－１的ｄ－δ－三烯生育酚干预４８ｈ对ＳＲＡ细胞的增殖抑制率分别为（３２．２３±５．２５）％、（５４．１７±１．６３）％和（８６．８０±０．８５）％,与对照组比较差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;干预２４ｈ增殖抑制率分别为（１２．７０±１．２０）％、（１９．５３±０．９５）％和（５１．８３±６．１１）％,与对照组相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。干预２４ｈ后,各实验组细胞晚期凋亡率Ｑ２分别为（５．８７±０．１５）％、（１１．３７±０．８５）％、（２２．７７±２．４１）％,与对照组的（１．１０ ±０．１７）％相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;各实验组细胞早期凋亡率Ｑ４分别为（３．５７±０．３２）％、（４．２０±０．４０）％、（８．００±０．５０）％,与对照组的（２．５３±０．１５）％相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ｄ－δ－三烯生育酚抑制人晶状体上皮ＳＲＡ细胞增殖,诱导其凋亡,具有抗晶状体上皮细胞增殖的生物学作用,为治疗后发性白内障提供一种新思路。     

MTT比色法测定药物对晶体上皮细胞增殖的影响

目的筛选防治后囊混浊的药物。方法进行人胚胎晶体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＬＥＣ）的培养并用ＭＴＴ比色法检测了肝素、氟脲嘧啶、双氯灭痛、顺铂对人胚胎晶体上皮细胞增殖的影响。结果肝素１００～２５００Ｕ／ｍｌ，氟脲嘧啶０．１～１００μｇ／ｍｌ，顺铂１０～５００μｇ／ｍｌ作用２４ｈ和７２ｈ对胚胎晶体上皮细胞增殖有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５）。作用７２ｈ抑制率高于２４ｈ（Ｐ＜０．０５）。双氯灭痛和对照组相比无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论肝素、氟脲嘧啶、顺铂均为剂量依赖型和时间依赖型药物，均能有效抑制晶体上皮细胞的生长；双氯灭痛对晶体上皮细胞增殖无明显抑制作用。     

补精益视片对大鼠慢性高眼压模型视网膜损害的影响

目的　观察补精益视片对大鼠慢性高眼压（ｅｌｅｖａｔｅｄｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒｐｒｅｓｓｕｒｅ,ＥＩＯＰ）模型视网膜损害的干预作用,探讨其作用机理。方法　将３０只ＳＤ大鼠随机分为３组:对照组、给药组、模型组,每组１０只。采用烙闭上巩膜静脉法对给药组、模型组ＳＤ大鼠建立慢性ＥＩＯＰ模型,观察补精益视片对慢性ＥＩＯＰ大鼠眼压和视网膜病理形态学变化的影响。结果　给药组、模型组大鼠在造模后即刻直至造模后８周与造模前相比眼压均升高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）,说明ＥＩＯＰ模型造模成功。造模后８周眼压与造模后即刻相比,给药组有降低趋势,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）,模型组差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。造模后８周,视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｓ,ＲＧＣｓ）数量给药组（１４．５７±１．９７）与模型组（１０．７６±２．１９）均明显低于对照组（１７．４７±１．９７）,差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）;视网膜厚度模型组为（１５０．８３±１７．９１）μｍ低于对照组的（２１９．７２±３２．２４）μｍ,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）,给药组为（２１５．５１±５１．２３）μｍ,与对照组相比差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）;给药组ＲＧＣｓ数量及视网膜厚度均优于模型组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。ＲＧＣｓ超微结构显示给药组较模型组明显改善。结论　补精益视片能保护ＳＤ大鼠慢性ＥＩＯＰ模型视功能,表现为降低眼压、提高ＲＧＣｓ数量、增加视网膜厚度、改善ＲＧＣｓ超微结构。     

吡诺克辛钠液对H202诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨吡诺克辛钠液对Ｈ２Ｏ２ 诱导的人晶状体上皮ＳＲＡ０１／__________０４细胞凋亡的抑制作用。方法　将体外培养的ＳＲＡ０１／０４细胞分为３组:先加药组:先加吡诺克辛钠液３００μＬ培养２３．５ｈ后再加０．５μｍｏｌ?Ｌ－１Ｈ２Ｏ２培养３０ｍｉｎ;后加药组:先加０．５μｍｏｌ?Ｌ－１Ｈ２Ｏ２,３０ｍｉｎ后再加吡诺克辛钠液３００μＬ培养２３．５ｈ;对照组:不加药培养２４ｈ。对３组细胞标本进行一氧化氮合酶活性及羟自由基水平检测,以免疫组织化学法检测Ｂｃｌ-２、Ｂａｘ及Ｃａｓｐａｓｅ-３的表达和ＴＵＮＥＬ法检测凋亡率。结果　后加药组的一氧化氮合酶活性（１６５．１７±１．２０）ｎｍｏｌ?ｍｇ－１及羟自由基检测值（０．２０５±０．０１０）μｍｏｌ?Ｌ－１均高于先加药组的（１６１３９±１．８３）ｎｍｏｌ?ｍｇ－１和（０．１７４±０．０１０）μｍｏｌ?Ｌ－１,更高于对照组的（１４６．９８±６．１９）ｎｍｏｌ?ｍｇ－１和（０．１４４±０．０１０）μｍｏｌ?Ｌ－１,经统计学分析各组一氧化氮合酶活性和各组羟自由基检测水平差异有统计学意义（Ｆ＝３２．１０,Ｐ＜０．０１;Ｆ＝２１１２０,Ｐ＜０．０１）;Ｂａｘ及Ｃａｓｐａｓｅ-３表达的灰度值后加药组为１８８．５０±５．２７和１９８．０４±２．４４,先加药组为１５４．０２±７．７４和?８２１?眼科新进展　２０１４年９月　第３４卷　第９期ＲｅｃＡｄｖＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ　Ｖｏｌ．３４Ｎｏ．９Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ２０１４ ｈｔｔｐ:／／ｗｗｗ．ｙｋｘｊｚ．ｃｏｍ１８６．５８±２．４０,对照组为１４２．３６±３．３３和１５７．４８±１．２１,３组差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。凋亡率后加药组为５０％、先加药组为２５％、对照组为５％,各组凋亡率通过χ２检验差异有统计学意义（χ２＝１０３．９８,Ｐ＜０．０１）;而Ｂｃｌ-２表达的灰度值对照组为１５０．０５±９．６０,先加药组为１３８．２３±４７８、后加药组为１２６．６７±０．５９,经统计学分析各组扫描灰度值差异有统计学意义（Ｆ＝１４．２２,Ｐ＜０．０１）。结论　吡诺克辛钠液可通过减低氧化应激反应抑制Ｈ２Ｏ２诱导的细胞凋亡效应,且先加药组抑制效应大于后加药组,提示应用氧化应激抑制药对白内障可能具有一定预防效应。     

Strabisme Alternant - Etude clinique - traitement

The author defines motor and sensory alternation: the term alternation should not be used in isolation, it should always be accompanied by the name of the parameter concerned. Sensory alternation is always found together with motor alternation but the reverse is not true.The examining criteria for a diagnosis of sensory alternation are given, sensory alternation must not be confused with alternating inhibition. Working from clinical observations of cases of motor alternating strabismus, the author selects 2 types of binocular sensory relations which allow one to differentiate between:- cases of primary alternating strabismus- cases of secondary alternating strabismusThese forms will develop in different ways; in both cases a cure is possible providing that the right treatment is prescribed and once prescribed carefully followed, etc. It is always a case of serious forms of strabismus whose developmental period is spread over several years.According to the authors, the frequency of cases of true primary strabismus is from 1–3%, the frequency of cases of secondary alternating strabismus varies according to the type of therapy practised on cases of monocular strabismus with amblyopia. These latter will become cases of alternating strabismus under the influence of certain types of therapy carried out over several years (penalization, rocking, alternated occlusion, etc...).Experimental data on kittens confirm clinical data; kittens placed in abnormal environments during the sensitive period will show modification in the distribution of cortical cells and the absence of binocular cells (either because the excitation of the two eyes was not simultaneous, or not identical: artificial strabismus, occlusion, opaque glasses). This disturbances become irreversible after a certain period of exposure (a function of age, length of exposure, etc...).It is thus necessary to bear in mind: 1) the iatrogenic risks of certain orthoptic treatments, 2) the necessity for a binocular form of treatment as soon as possible, as once a certain stage is passed, cortical plasticity diminishes and the elaboration of normal binocular relations becomes impossible.

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Effects of Adenosine Agonists on Intraocular Pressure and Aqueous Humor Dynamics in Cynomolgus Monkeys

The effects of single or multiple topical doses of the relatively selective A₁adenosine receptor agonists (R)-phenylisopropyladenosine (R-PIA) and N⁶-cyclohexyladenosine (CHA) on intraocular pressure (IOP), aqueous humor flow (AHF) and outflow facility were investigated in ocular normotensive cynomolgus monkeys. IOP and AHF were determined, under ketamine anesthesia, by Goldmann applanation tonometry and fluorophotometry, respectively. Total outflow facility was determined by anterior chamber perfusion under pentobarbital anesthesia. A single unilateral topical application of R-PIA (20–250 μg) or CHA (20–500 μg) produced ocular hypertension (maximum rise=4.9 or 3.5 mmHg) within 30 min, followed by ocular hypotension (maximum fall=2.1 or 3.6 mmHg) from 2–6 hr. The relatively selective adenosine A₂antagonist 3,7-dimethyl-1-propargylxanthine (DMPX, 320 μg) inhibited the early hypertension, without influencing the hypotension. Neither 100 μg R-PIA nor 500 μg CHA clearly altered AHF. Total outflow facility was increased by 71% 3 hr after 100 μg R-PIA. In conclusion, the early ocular hypertension produced by topical adenosine agonists in cynomolgus monkeys is associated with the activation of adenosine A₂receptors, while the subsequent hypotension appears to be mediated by adenosine A₁receptors and results primarily from increased outflow facility.