右美托咪定对脓毒症肺损伤大鼠的保护作用

目的 探讨右美托咪定(Dex)对脓毒症肺损伤大鼠的保护作用及其机制.方法 雄性SD大鼠100只,随机分为4组,每组25只.Ⅰ组为假手术组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型.Ⅱ组为模型对照组;Ⅲ组分别于CLP手术后0,2,4,6h腹腔注射Dex 12.5 μg·kg-1;Ⅳ组分别于CLP手术后0,2,4,6h腹腔注射Dex25.0 μg· kg-1.CLP手术后0,2,4,6,24 h分别测定肺组织肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6浓度,CLP后24 h酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平,Western blot测定肺组织Toll样受体4(TLR4)表达,检测肺组织湿/干质量比(W/D),苏木精-伊红染色观察肺组织的病理变化.结果 与Ⅱ组比较,Ⅲ组和Ⅳ组中肺组织TNF-α、IL-6及HMGB1水平明显降低(P＜0.05),肺组织TLR4表达及W/D明显降低,病理学损伤也明显减轻(P＜0.05).Ⅲ、Ⅳ组之间差异无统计学意义.结论 Dex抑制炎症反应从而减轻脓毒症大鼠的肺损伤,其机制可能通过抑制TLR4通路来实现.     

紫檀芪通过PI3K/Akt通路对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 分析紫檀芪（PTS）对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能作用机制。方法 将大鼠30只随机分为假手术组、脓毒症组和PTS组,每组10只,脓毒症组和PTS组（25 mg/kg）均通过盲肠结扎穿刺术建立大鼠脓毒症模型,24 h后处死大鼠;TUNEL染色法检测肺组织细胞凋亡,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)含量,Western blot检测肺组织中p-PI3K和p-Akt的表达。结果 与假手术组比较,脓毒症组肺组织TUNEL阳性细胞数、血清TNF-α、IL-6、MCP-1含量均升高（P<0.05）,肺组织p-PI3K和p-Akt蛋白含量均下降（P<0.05）;而与脓毒症组比较,PTS组肺组织TUNEL阳性细胞数、血清TNF-α、IL-6、MCP-1含量均下降（P<0.05）,肺组织p-PI3K和p-Akt蛋白含量均增加（P<0.05）。结论 PTS通过PI3K/Akt途径抑制脓毒症所致大鼠肺损伤的凋亡和炎性反应,为脓毒症所致肺损伤的药物治疗提供候选。     

W3D通过调控TLR4/MD2-NF-κB p65信号通路改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的研究4-(5′-二甲氨基)-萘磺酰氧基苯并噁唑酮(W3D)这一新型结构化合物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及其作用机制。方法ICR小鼠随机分为对照组、模型组、氯唑沙宗组(12.5 mg·kg^-1)、W3D组(12.5、6.25和3.125 mg·kg^-1),气道滴入LPS造模。于造模4 h后给药,12 h后处死小鼠并取肺脏,计算肺湿干比(wwt/dw),HE染色观察肺组织病理变化,试剂盒检测MPO活性、iNOS和炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平,Western blot检测肺组织TLR4、MD2、p-IRAK4、p65蛋白的表达。结果W3D可显著改善小鼠肺水肿状态,降低肺组织湿干比;减少炎性细胞浸润,减轻血管损伤及局部出血等现象;可剂量依赖性抑制MPO活性,降低iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平,抑制TLR4、MD2、p-IRAK4、p65蛋白的表达。结论化合物W3D可通过调控TLR4/MD2-NF-κB p65信号通路改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤。     

PPAR-γ受体激活对百草枯中毒致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的研究PPAR-γ受体激活对百草枯中毒致大鼠急性肺损伤的保护作用。方法 48只SD雄性大鼠随机平均分成3组,A组(百草枯中毒组):按照20 mg/kg剂量腹腔注射;B组(低剂量PPAR-γ受体激动剂罗格列酮预处理组):在给予百草枯腹腔注射前1 h腹腔注射3 mg/kg罗格列酮;C组(高剂量PPAR-γ受体激动剂罗格列酮预处理组):在给予百草枯腹腔注射前1 h腹腔注射10 mg/kg罗格列酮;D组(对照组):1 m L生理盐水腹腔注射。在注射百草枯后24 h和72 h时,每组取出6只,收集血清和肺组织标本。采用Elisa方法检测血清中IL-1β和TNF-α含量测定,行组织切片HE染色进行肺损伤评分,利用Western blot方法检测肺组织中caspase-3和AP-1蛋白表达水平,采用免疫组化方法检测caspase-3蛋白在肺组织中的表达。结果大鼠百草枯中毒后血清炎性细胞因子IL-1β和TNF-α含量明显增加。肺湿重/干重比以及肺损伤评分明显增加。罗格列酮预处理组可以减轻肺组织损伤程度,降低血清中IL-1β和TNF-α含量,减少肺组织中caspase-3和AP-1蛋白的表达。结论应用PPAR-γ激动剂罗格列酮可以抑制百草枯中毒大鼠肺组织中caspase-3和AP-1蛋白表达,抑制炎症反应和凋亡,对百草枯中毒导致急性肺损伤产生保护作用。     

己酮可可碱弱化大鼠脓毒症急性肺损伤对p38MAPK/IκBα磷酸化的影响

目的探讨己酮可可碱（pentoxifylline,PTX）对腹腔感染致脓毒症急性肺损伤发挥保护作用的上游信号机制。方法采用盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）致脓毒症模型,将大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、脓毒症＋西黄著胶组、脓毒症＋生理盐水组、脓毒症＋SB203580组、脓毒症＋PTX组。检测假手术组、脓毒症组各时间点（1,3,6,12,24 h）p38MAPK及IκBα的磷酸化,然后选择1,6,24 h组分别检测应用SB203580或PTX后p38MAPK及IκBα的表达,同时检测血浆TNF-α、IL-6的含量并观察24 h组肺组织病理改变。结果与假手术组比较,脓毒症组在各个时间点p38MAPK及IκBα均有较强的表达,SB203580或PTX预处理后各组的p38MAPK及IκBα的磷酸化明显受到抑制,且与血浆TNF-α、IL-6的含量以及肺的病理切片变化一致。结论 PTX对脓毒症急性肺损伤的保护作用以及抑制促炎因子产生的作用可能是通过抑制p38MAPK的磷酸化从而抑制NF-κB的活化而产生的。     

瑞芬太尼对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺脏Toll样受体4的影响

目的研究瑞芬太尼对LPS诱导的急性肺损伤大鼠肺组织的影响。方法24只Wistar大鼠随机分为3组(n=8):对照组(C组),肺损伤组(LPS组)和瑞芬太尼组(R组)。分别于气管内给药前、给药1h、3h和5h记录平均动脉压和心率,行动脉血气分析。注药、机械通气5h后测定TLR4mRNA和蛋白表达,观察肺组织病理学及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达。结果与C组比较,LPS组及R组TLR4mRNA表达和蛋白表达明显增加,BALF中TNF-α增加。与LPS组比较,R组TLR4mRNA表达增高,BALF中TNF-α增加。肺组织损伤程度从轻至重分别为C组、LPS组、R组。结论瑞芬太尼能加重LPS诱导的ALI大鼠肺组织的损伤,其作用机制与上调TLR4表达有关。     

microRNA-125b在脓毒症急性肺损伤中的表达及其与炎症因子水平相关性

摘要：目的探讨microRNA-125b（miR-125b）在脓毒症急性肺损伤中的表达及其与炎症因子的相关性。方法 腹腔注射脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤大鼠模型,对照组注射等量的生理盐水（n=20）;各模型组（n=20）大鼠注射LPS 4、8、12及24 h后取其肺组织,HE染色观察病理学变化;PCR检测各组各时点肺组织中miR-125b、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-6（IL-6）变化。Pearson相关性分析实验组肺组织中miR-125b的表达与TNF-α、IL-6水平的相关性。NR8383细胞培养后分组,对照组不进行LPS刺激,实验组加入LPS刺激4 h、8 h、12 h及24 h时收集细胞,检测各组miR-125b、TNF-α与IL-6的含量变化。另NR8383细胞设3组,阴性对照组只转染空表达质粒,miR-125b mimic组转染miR-125b mimic表达质粒,miR-125b inhibitor组转染miR-125b inhibitor质粒。PCR测各组细胞中miR-125b 表达情况,Western blot测Notch1的表达情况。结果LPS各处理组大鼠模型肺组织严重出血、水肿及大量炎症细胞浸润。与对照组比较,在注射LPS 4、8、12以24 h后,实验组大鼠肺组织中miR-125b显著降低;而肺组织中TNF-α与IL-6水平则升高,其中在LPS注射4 h后,TNF-α与IL-6的表达水平达到峰值（P＜0.05）。实验组肺组织中miR-125b的表达与TNF-α及IL-6呈负相关（r 分别为-0.599、-0.580;P＜0.05）。在LPS诱导的第4、8、12、24 h,实验组NR8383细胞系miR-125b表达水平均低于对照组,而TNF-α、IL-6的表达水平均高于对照组（P＜0.05）。与阴性对照组比较,miR-125b mimic组miR-125b 相对表达量升高、Notch1蛋白相对表达量则降低（P＜0.05）,miR-125binhibitor组miR-125b 相对表达量降低、Notch1蛋白相对表达量升高（P＜0.05）;与miR-125b mimic组比较,miR-125binhibitor组miR-125b 相对表达量降低、Notch1蛋白相对表达量升高（P＜0.05）。结论在脓毒症急性肺损伤中,microRNA-125b可能通过调控Notch1蛋白的表达,影响炎症因子TNF-α与IL-6的表达,参与其免疫炎症调控过程。     

独一味胶囊联合地塞米松治疗复发性口疮的临床研究

目的 验证炎调方对脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠的保护效应,并观察炎调方对核因子κB（NF-κB）信号通路主要指标活性调控的时效关系。方法 清洁级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、炎调方（生药量为9.9 g/kg）组、地塞米松（0.45 mg/kg）组,均每天ig给药1次,连续给药3 d。假手术组、模型组予等体积生理盐水,末次给药2 h后进行手术。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症ALI模型,各组分别于造模后4、6、8、10、12、18、24 h进行HE染色后肺组织损伤程度评分、检测肺组织NF-κB/p65 mRNA表达量和血清NF-κB、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-8水平。结果 与模型组比较,炎调方组造模后12、18、24 h肺组织损伤程度评分均显著降低（P<0.01）。炎调方组和地塞米松组肺组织NF-κB/p65 mRNA相对表达量、血清NF-κB水平均显著低于模型组（P<0.01）;高于假手术组（P<0.01）;炎调方组大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA相对表达量、血清NF-κB均随CLP后时间的延长呈现上升趋势,12 h后变化趋缓。不同时间点炎调方组和地塞米松组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8均显著低于模型组（P<0.01）,显著高于假手术组（P<0.01）;炎调方组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8随CLP后时间的延长呈现上升趋势。脓毒症ALI大鼠肺组织NF-κB/p65mRNA相对表达量与血清NF-κB和促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8水平呈强正相关。结论 炎调方对脓毒症ALI大鼠肺组织保护效应的机制与下调NF-κB基因表达、进而下调炎性信号通路下游的促炎细胞因子水平相关。     

己酮可可碱对大鼠脓毒症急性肺损伤p38MAPK活性的影响

目的　探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对腹腔感染致脓毒症急性肺损伤发挥肺保护作用与p38MAPK活化的关系。方法　采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,将大鼠随机分为Ⅰ组(Sham组)、Ⅱ组(脓毒症CLP组)、Ⅲ组(脓毒症加西黄著胶CLP+V组)、Ⅳ组(脓毒症加生理盐水CLP+N组)、Ⅴ组(脓毒症加SB203580 CLP+SB组)、Ⅵ组(脓毒症加己酮可可碱CLP+PTX组),其中Ⅲ组、Ⅳ组为溶媒对照组。用Western Blot检测假手术组,脓毒症1,3,6,12,24 h后p38MAPK的磷酸化,然后选择1,6,24 h分别检测应用SB203580或PTX后p38MAPK的表达,同时检测血浆TNF-α、IL-6的含量并观察24 h内肺组织病理改变。结果　与假手术组比较,脓毒症组在各个时间点p38MAPK均有较强的表达,SB203580或PTX预处理后各组的p38MAPK的磷酸化明显受到抑制,且与血浆TNF-α、IL-6的含量以及肺的病理切片变化一致。结论　己酮可可碱可能是通过抑制p38MAPK的磷酸化抑制促炎因子的过度表达,发挥对脓毒症急性肺损伤的保护作用。     

罗格列酮对百草枯致大鼠肺损伤的炎症抑制作用

目的：研究罗格列酮对百草枯致大鼠肺损伤过程中的炎症抑制作用机制。方法将72只SD雄性大鼠随机分成3组,每组24只。模型对照组：腹腔注射百草枯20 mg·kg-1;罗格列酮组：腹腔注射百草枯前1 h,腹腔注射罗格列酮10 mg·kg-1;空白对照组：腹腔注射0.9％氯化钠溶液1 mL。注射百草枯后4,8 h及1,3 d,收集各组大鼠血清和肺组织标本,组织切片苏木精-伊红( HE)染色进行肺损伤评分,采用酶联免疫吸附法( ELISA)检测血清白细胞介素-1β( IL-1β)和肿瘤坏死因子-α( TNF-α)含量,采用免疫组化方法检测NF-κB蛋白在肺组织的表达,利用Western blot法检测肺组织核因子-κB (NF-κB)和激活蛋白(AP-1)蛋白表达水平。结果模型对照组大鼠血清炎性细胞因子IL-1β和TNF-α含量明显增加。罗格列酮组肺组织损伤程度明显降低,血清IL-1β和TNF-α含量减少,肺组织NF-κB和AP-1蛋白的表达降低。结论罗格列酮可以抑制百草枯中毒大鼠肺组织NF-κB和AP-1蛋白表达,减少IL-1β和TNF-α分泌,对百草枯所致大鼠肺损伤炎症有抑制作用。     

血必净对脓毒症大鼠心肌保护作用的研究

目的观察血必净注射液对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脓毒症模型组（CLP组）及血必净治疗组（XBJ组），每组10只。Sham组只开腹关腹，余同CLP组；CLP组采用盲肠结扎穿孔法造模；XBJ组造模后立即经腹腔注射血必净注射液8ml／kg。观察24h后检测血清肌钙蛋白Ⅰ（TnI）、脑钠肽（BNP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、自细胞介素（IL）-1B，留取左心室心肌组织观察超微结构的改变。结果①脓毒症状态下TnⅠ、BNP、TNF-α、IL-1β水平显著升高，应用血必净注射液后各项指标明显改善。②血必净组心肌组织超微结构的损害较脓毒症组明显减轻。结论血必净注射液能改善脓毒症大鼠的心肌损伤，其机制可能与下调TNF-α、IL-1β水平有关。     

乌司他丁调控脓毒症大鼠TNF-α与IL-6及IL-10水平的研究

目的:探讨乌司他丁对脓毒症大鼠血清TNF-α、L-6、IL-10水平的调控作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和乌司他丁组。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,于造模后2.0,8.0,12.0,24.0h处死大鼠,双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TNF-α、L-6、IL-10水平;留取完整左肺组织行病理切片,评估肺脏损伤情况。结果:模型组各时间点TNF-α、L-6、IL-10水平均高于假手术组(P<0.05);乌司他丁组与模型组相比,除24.0h外TNF-α水平明显降低(P<0.01),IL-6水平各时间点均明显下降(P<0.01),IL-10水平各时间点均明显升高(P<0.01),病理切片显示乌司他丁组肺损伤轻于模型组。结论:乌司他丁能下调脓毒症大鼠TNF-α、L-6水平,对IL-10有上调作用,并能减轻脓毒症肺损伤。     

姜黄素对脓毒症小鼠肝脏炎性反应的抑制作用

目的:观察姜黄素对脓毒症小鼠肝脏炎性反应的抑制作用及其可能机制.方法:BALB/c小鼠行盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症动物模型.将40只雄性BALB/c小鼠随机分成对照组、CLP组、CLP+二甲亚砜(DMSO姜黄素溶剂)组和CLP+姜黄素干预组.CLP+姜黄素组及CLP+DMSO组除伤后分别使用姜黄素、DMSO外,其余处理同CLP组.于伤后24h取肝脏做病理学检查;检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)的水平;测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1B(IL-1β)水平.结果:与对照组比较,CLP组血浆ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平明显高于正常对照组[(398±27) U/L vs (64± 10) U/L,P＜0.01、(122±22)U/Lvs (42±8)U/L,P＜0.01,(24.45±6.80)pg/mL vs (5.33±1.48)pg/mL,P＜0.01、(4.95± 1.55) pg/mL vs (0.89±0.07)pg/mL,P＜0.01)],用姜黄素干预后,ALT、AST、TNF-α、IL-1β血浆水平显著降低[(202±28)U/L vs (398±27)U/L,P＜0.05、(66±11)U/Lvs(122±22)U/L,P＜0.05、(14.38±2.79)pg/mL vs(24.45±6.80)pg/mL,P＜0.05、(2.06±0.39)pg/mL vs (4.95±1.55)pg/mL,P＜0.05].结论:姜黄素能明显降低脓毒症小鼠血清中的TNF-α、IL-1β表达水平,减轻肝脏组织中白细胞滞留,改善肝功能,可有效减轻肝脏炎性反应.     

高密度脂蛋白对腹腔感染败血症小鼠保护作用的实验研究

目的探讨高密度脂蛋白对败血症的保护作用及其机制。方法采用盲肠结扎并穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）法复制败血症模型。60只健康昆明小鼠随机分为对照组（假手术组）、CLP组和高密度脂蛋白组,每组20只,记录3组小鼠48h总体生存率和平均生存时间。另取36只小鼠随机分为对照组、CLP组和高密度脂蛋白组,每组12只。其中每组6只于模型制备成功后2h处死动物取血,采用酶联免疫吸附法检测血浆肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）的浓度。每组小鼠6只于模型制备成功后12h取肝、肺组织进行光镜和电镜学检查。结果48h内对照组、CLP组和高密度脂蛋白组小鼠生存率分别为100%、20%和56.7%,差异具有显著性（P〈0.05）。光镜下CLP组肝细胞肿胀,肝血窦扩张。电镜下可见CLP组肝细胞凋亡,细胞器明显破坏。高密度脂蛋白组肝组织病理改变较CLP组明显减轻。并且,CLP组血浆TNF-α的浓度较对照组明显升高。而高密度脂蛋白组血浆TNF-α的浓度与CLP组相比,明显降低,差异具有显著性（P〈0.05）。结论高密度脂蛋白可以改善腹腔感染败血症小鼠肝脏、肺脏的病理组织学改变,降低严重感染导致的机体促炎性细胞因子水平的,提高小鼠总体生存率。     

穿心莲内酯对盲肠结扎穿孔诱导的脓毒症大鼠心肺功能和炎症损伤的保护作用

摘要：目的　探究穿心莲内酯对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导的脓毒症大鼠心肺功能和炎症损伤的保护作用。方法　75只SD大鼠随机分为假手术组（A组）、脂多糖模型组（B组）、CLP组（C组）、CLP+低剂量穿心莲内酯组（D组）和CLP+高剂量穿心莲内酯组（E组）,每组15只。A组仅进行开腹、分离盲肠及关腹手术;B组采用脂多糖腹腔注射建立脓毒症模型,C、D、E组行CLP手术诱导脓毒症,D、E组建模后分别腹腔注射10 mg/kg和20 mg/kg穿心莲内酯。比较各组大鼠心率（HR）、左心室射血分数（LVEF）;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）;比较各组大鼠肺损伤评分;采用血气分析仪检测氧分压［p（O2）］,计算动脉血氧分压/吸入气氧浓度［PaO2/FiO2］;取左肺组织计算湿/干质量（W/D）比值;HE染色观察心肺损伤情况;Western blot检测心肺组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase）-3、Caspase-9、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和P65蛋白的表达;ELISA检测外周血中白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF-α）、IL-1β、中性粒细胞趋化因子1（CINC-1）水平;使用全自动血细胞分析仪检测中性粒细胞（NEU）水平。结果　与A组相比,B、C组大鼠HR、LVEF、p（O2）和PaO2/FiO2均显著降低,cTnl、CK-MB、肺损伤评分、肺W/D比值、心肺组织中Caspase-3和Caspase-9蛋白表达、Bax/Bcl-2比值、CINC-1、NEU、IL-6、IL-1β、TNF-α和p-P65/P65水平均显著升高（P＜0.05）。与C组相比,D、E组以上指标变化均相反（P＜0.05）;HE染色示,D、E组大鼠心肌肌纤维断裂溶解减少,肌细胞核溶解、固缩显著减少,肺间质中性粒细胞浸润减轻、肺泡间隔增厚、细胞水肿显著改善。结论　穿心莲内酯可以缓解CLP诱导的脓毒症大鼠体内炎症反应并改善大鼠心肺功能,同时抑制凋亡蛋白的表达,保护大鼠心肺组织。     

丹皮酚对IL-1β诱导HFLS-RA的保护作用及相关机制研究

目的　探讨丹皮酚对白细胞介素（IL）-1β诱导人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（HFLS-RA）的保护作用及机制。方法　将HFLS-RA细胞分为空白对照组,10 μg/L IL-1β组及0.1、1、10、100 μmol/L丹皮酚组,采用MTT法检测细胞增殖情况;酶联免疫吸附测定试验（ELISA）法检测HFLS-RA中肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-6水平。采用免疫荧光法观察空白对照组、10 μg/L IL-1β组及10 μmol/L丹皮酚组HFLS-RA中核因子（NF）-κB p65细胞核移位情况;Western blot法检测空白对照组,10 μg/L IL-1β组,0.1、1、10 μmol/L丹皮酚组及阴性对照组（仅10 μmol/L丹皮酚处理）的基质金属蛋白酶（MMP）-1、MMP-3和Toll样受体-4（TLR4）蛋白表达。将24只雄性DBA/1小鼠随机均分为对照组、CIA组和治疗组,对小鼠进行四肢累计评分,HE染色观察关节组织病理学变化,ELISA法检测滑膜组织中TNF-α、IL-1β水平。结果　丹皮酚对IL-1β诱导HFLS-RA细胞增殖无明显抑制作用。与空白对照组相比,10 μg/L IL-1β组TNF-α、IL-6、NF-κB p65核移位、MMP-1、MMP-3和TLR4蛋白表达水平均升高,而经丹皮酚干预后可逆转这些改变（P＜0.05）。与CIA组相比,治疗组小鼠四肢累计评分明显下降（P＜0.05）;HE染色结果示丹皮酚治疗48 d时踝关节病理变化有所改善,其中炎性细胞明显下降,软骨破坏减轻。治疗组小鼠滑膜组织中TNF-α、IL-1β水平低于CIA组。结论　丹皮酚具有减轻IL-1β诱导HFLS-RA炎性因子表达和缓解CIA小鼠关节炎症状的作用,其机制可能与抑制TLR-4-NF-κB p65通路,减轻炎症反应有关。     

Hydrogen gas reduces HMGB1 release in lung tissues of septic mice in an Nrf2/HO-1-dependent pathway

BackgroundLung injury is a vital contributor of mortality in septic patients. Our previous studies have found that molecular hydrogen (H₂), which has anti-oxidant, anti-inflammatory, and anti-apoptosis effects, had a therapeutic effect on a septic animal model through increasing expression of nuclear factor-erythroid 2-related factor 2 (Nrf2). The aim of this research was to investigate the effects of 2% H₂ gas inhalation on sepsis-induced lung injury and its underlying mechanisms.MethodsMale wild-type (WT) and Nrf2-knockout (Nrf2-KO) ICR mice underwent sham or cecal ligation and puncture (CLP) operation. Two percent of H₂ gas was inhaled for 60 min beginning at both 1 h and 6 h after sham or CLP surgery. To assess the severity of septic lung injury, the 7-day survival rate, wet/dry (W/D) weight ratio of lung tissue, lung histopathologic score, pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin 6 (IL-6), high-mobility group box 1 (HMGB1)), anti-inflammatory cytokine (interleukin 10 (IL-10)), antioxidant enzymes (superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and heme oxygenase 1 (HO-1)), and an oxidative product (malondialdehyde (MDA)) were detected after sham or CLP operation. The histopathologic changes were observed in lung tissues by hematoxylin and eosin (HE) staining, and pro-inflammatory cytokines (TNF-α and IL-6), anti-inflammatory cytokine (IL-10), antioxidant enzymes (SOD and CAT), and MDA were detected in lung tissues by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).ResultsThe results indicated that 2% H₂ gas treatment increased the survival rates, decreased the W/D weight ratio and the lung injury score, alleviated the injuries caused by oxidative stress and inflammation, and induced HO-1 level but reduced HMGB1 level in WT but not Krf2-KO mice. These data reveal that H₂ gas could suppress lung injury in septic mice through regulation of HO-1 and HMGB1 expression and that Nrf2 plays a main role in the protective effects of H₂ gas on lung damage caused by sepsis.     

氯化钆对脓毒症大鼠急性肺损伤的肺保护作用

目的探讨氯化钆(GdCl3)在脓毒症大鼠急性肺损伤中的肺保护作用及可能机制。方法采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。将36只成年Wistar大鼠随即均分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)和氯化钆治疗组(GdCl3组),GdCl3组术后经尾静脉注射氯化钆溶液。检测血浆TNF-α、丙二醛(MDA)水平,用HE染色法观察肺组织形态,测定肺湿/干重比,统计方法采用SPSS19.0。结果 GdCl3组血浆TNF-α及MDA水平、肺湿/干重比均显著低于CLP组(P<0.05),光镜下可见GdCl3组肺组织病理学改变明显减轻。结论 GdCl3可明显减轻脓毒症所致的急性肺损伤的炎性反应。