透明质酸合成酶2在肾癌中的表达及临床意义

目的：研究透明质酸合成酶2在肾癌中的表达,并探讨其潜在的临床意义。方法：运用实时定量聚合酶链反应（qPCR）方法检测五种肾癌细胞（ACHN、Caki-1、OS-RC-2、786-O、SN12PM6）透明质酸合成酶三种亚型（HAs1、HAS2、HAs3）mRNA的表达,运用Westernblot方法进一步检测mRNA表达含量高的HAS亚型在五种肾癌细胞系及肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的蛋白表达。结果：在五种肾癌细胞系中HAS2mRNA表达水平均明显高于正常肾小管上皮细胞（HK-2）,其中在。肾癌SN12PM6细胞系中表达水平最高（均P〈0．05）,HAS1mRNA的表达水平均明显低于正常肾小管上皮细胞（均P〉0．05）,而HAS3mRNA表达水平除肾癌Caki-1细胞系外均低于正常肾小管上皮细胞（P〉0．05）。在五种肾癌细胞系中HAS2蛋白均明显表达,而正常‘肾小管上皮细胞无明显表达。在肾透明细胞癌组织中HAs2蛋白表达也明显高于相应癌旁组织。结论：透明质酸合成酶2在多种肾癌细胞系和肾透明细胞癌组织中均明显表达,提示透明质酸合成酶2可能在肾癌尤其在肾透明细胞癌发生发展过程中起着至关重要的某种作用,并可能成为新的肾透明细胞癌分子标志物。     

ASF1B在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨ASF1B基因在肾透明细胞癌患者中的表达水平及对临床预后的意义。方法 通过在肿瘤基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)及UCSC Xena数据库下载并分析肾透明细胞癌基因表达数据共607例,其中正常肾组织及癌旁组织数据72例,肾透明细胞癌数据535例。明确ASF1B基因在肾透明细胞癌组织与正常组织间的表达差异,分析ASF1B表达与患者生存时间的相关性。使用生信线上工具(GEPIA、cBioPortal、STRING以及TIMER)探究肾透明细胞癌患者ASF1B表达与基因突变及甲基化水平相关性,研讨其与肿瘤免疫微环境的相互作用,探讨ASF1B对肾透明细胞癌的预测能力。结果 ASF1B基因在肾透明细胞癌细胞中表达水平明显高于正常肾组织中的表达水平(P=2.22e^-16);ASF1B基因高表达组的患者生存周期明显低于ASF1B基因低表达组(P=0.024)。ASF1B基因在经过多因素回归分析(P<0.001)后可确定为肾透明细胞癌的高风险独立预后因子。ASF1B基因突变水平无法作为患者预后的诊断指标;cg06969527甲基...     

LINC00475在肾癌中的临床意义及其对肾癌细胞786-O的影响

目的探讨长链非编码RNA LINC00475在肾癌中的表达情况及临床意义,并研究LINC00475对肾癌细胞786-O增殖、迁移能力的影响。方法通过q PCR方法检测LINC00475在我院43对肾癌组织及癌旁正常组织中的表达水平。通过TCGA数据,分析LINC00475在肾癌中的表达水平,及其与肾癌患者临床指标、预后的关系。通过si RNA技术下调LINC00475,利用MTS法及Transwell法研究LINC00475对786-O增殖、迁移能力的影响。通过GSEA分析LINC00475在肾癌中可能参与的分子机制。结果 TCGA数据库肾癌组织及我院肾癌组织中,LINC00475在肾癌中的表达明显高于癌旁正常组织。TCGA数据分析表明,LINC00475的表达与肾癌患者的临床分期(P=0.010)、M分期(P=0.022)呈正相关。Kaplan-Meier生存分析表明,高表达LINC00475的肾癌患者总体生存时间明显低于低表达LINC00475的肾癌患者(Log-rank P=0.012)。下调LINC00475明显抑制786-O的增殖、迁移能力。GSEA分析结果显示在LINC00475高表达组中,与cyclin D1、VEGFA、WNT信号通路相关的基因集明显上调(NOM P0.01,FDR Q0.05)。结论 LINC00475在肾癌组织中高表达,下调LINC00475可以抑制肾癌细胞786-O的增殖、迁移能力。     

Runt相关转录因子2在人肾透明细胞癌组织的表达及其临床意义

目的探讨Runt相关转录因子2(RUNX2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与患者预后和临床病理特征之间的关系。方法基于肾癌肿瘤基因组图谱(TCGA)数据, 分析RUNX2在癌和癌旁组织中的表达及其预后价值。采用多色免疫荧光标记(mIHC)技术分析RUNX2在癌和癌旁组织中的分布特征, 并结合临床资料进行χ2检验。单因素和拟合多因素Cox模型分析RUNX2及其他指标的预后价值。基于TCGA数据库, 探讨RUNX2与免疫细胞浸润的相关性。结果 TCGA数据分析结果显示, RUNX2在癌组织中的表达显著高于正常组织(P<0.001)。mIHC结果表明RUNX2在癌组织表达水平高于癌旁组织(Z=-2.123, P<0.05), 且其表达水平与患者总生存期呈负相关[P<0.01, 风险比(HR)=2.768, 95%可信区间(CI):1.120～6.838]。RUNX2表达水平与患者美国癌症联合委员会(AJCC)临床分期明显相关(χ2=4.505, P<0.05)。多因素Cox回归模型显示年龄(P<0.01, HR=1.068, 95%CI:1.024～1...     

VAVs基因家族在肝癌中的表达及临床意义

目的 探究VAVs家族基因在肝细胞癌（HCC）患者中的表达水平及其在预后中的临床价值，并基于阳性作用基因建立肝癌的预后预测模型。方法 从肿瘤基因组图谱（TCGA）数据库中下载并提取342例HCC癌组织和50例癌旁组织中VAVs家族基因mRNA测序表达数据及其临床信息。比较TCGA中VAVs mRNA在HCC癌组织和癌旁组织中的表达差异，并比较温州医科大学附属第一医院20例HCC患者的癌组织及癌旁组织中VAVs蛋白的表达差异。根据VAVs mRNA表达量中位值分为高表达组（n=171）和低表达组（n=171），比较两组的临床病理特征差异，采用Kaplan-Meier法分析比较两组的生存差异。采用单因素和多因素Cox分析筛选HCC患者预后的危险因素。基于VAV2 mRNA构建HCC生存预后列线图模型，采用受试者工作特征（ROC）曲线及校正曲线来评估模型的预测准确性。结果 对TCGA数据库分析显示，VAV2 mRNA在HCC癌组织中的表达量高于癌旁组织（P<0.05）；本中心免疫组化结果表明，VAV2蛋白在HCC癌组织中的表达量高于癌旁组织（P<0.05）。TCGA数据库分析结果...     

长链非编码RNA ANRIL在肾癌中的临床意义研究

目的:检测长链非编码RNA(lncRNA)ANRIL在肾癌及正常组织、细胞中的表达水平,探究其在肾癌中的临床意义。方法:提取肾癌细胞(ACHN、786O和769P)、正常人胚肾细胞(293T)和47对组织中的总RNA,逆转录获取cDNA,之后通过qPCR方法检测细胞及组织中的ANRIL表达量,分析配对组织、细胞系之间的表达差异,探究ANRIL表达水平与患者临床特征之间的关系。结果:ANRIL在肾癌细胞和组织中表达水平明显低于正常肾细胞(P0.05)和配对癌旁正常组织(P0.01),标本中共有34例(72.34%)肾癌组织ANRIL表达低于癌旁组织,癌组织中ANRIL表达与患者年龄、性别及肾癌病理类型无明显相关性(P0.05),与患者TNM分期和AJCC分级相关(P0.05)。结论:ANRIL在肾癌组织及细胞系中表达明显下调,且和肾癌临床分级相关,提示其在肾癌发生发展中发挥着一定的作用。     

EGFL7和VEGF在肾透明细胞癌血管生成及转移中的相关性研究及临床意义

目的：探讨表皮生长因子样结构域7（EGF_1ikedomain7,EGFL7）、血管表皮生长因子（vascularen—dothelialgrowthfactor,VEGF）在肾透明细胞癌中的表达及其与肾癌血管生成和转移的关系。方法：选取87例行根治性肾切除的肾透明细胞癌患者癌及癌旁组织标本,采用免疫化学SP法检测EGFL7、VEGF的表达,并计数血管内皮细胞表面抗原（CD34）标记的血管密度（MVD）;同时选取46例癌及癌旁组织标本,采用RT—PCR检测EGFL7mRNA的表达。结果：EGFL7和VEGF阳性表达率及MVD值在癌组明显高于癌旁组（P〈O．05）,且EGFL7、VEGF与MVD在肾透明细胞癌组织中的表达呈正相关,并与肿瘤分级、分期显著相关（P〈0．05）;EG—FL7mRNA阳性表达率明显高于癌旁组织（P〈O．05）,并与肿瘤分级、分期相关（P〈O．05）。结论：肾透明细胞癌组织中EGFL7、VEGF的表达与肾癌血管生成有关,两者可能协同肿瘤新生血管的生成。     

LINC00475在肾透明细胞癌中的表达及对肾癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨LINC00475在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)组织中的表达及对肾癌细胞增殖和侵袭的影响及可能机制。方法:高通量转录组学测序筛选出ccRCC和癌旁正常肾组织差异表达长链非编码RNA。实时荧光定量PCR(q-PCR)检测20例ccRCC组织和癌旁正常肾组织、肾癌ACHN、caki-1、caki-2细胞中LINC00475表达。RNA干扰研究LINC00475的生物学功能，分别用CCK8和Transwell实验研究LINC00475对肾癌细胞增殖和侵袭的影响。免疫蛋白印迹法检测PYCR1 mRNA和蛋白表达。结果:与癌旁正常肾组织比较，LINC00475在ccRCC组织过表达(P<0.05);LINC00475在肾癌ACHN细胞中表达最高。沉默LINC00475表达后，抑制肾癌ACHN细胞增殖和侵袭(P<0.05),下调PYCR1 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:LINC00475过表达可能与肾癌的发生发展有关，沉默LINC00475可能调控PYCR1表达，从而抑制肾癌细胞增殖和侵袭等恶性...     

长链非编码RNA Linc01510与肾透明细胞癌预后及舒尼替尼耐药的关系

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)Linc01510在肾透明细胞癌中的表达情况、预后关系以及与肾癌舒尼替尼耐药的关系。方法:采用t检验和one-way Anova方差分析癌症基因图谱(TCGA)数据库中448例肾透明细胞癌肿瘤样本以及67例癌旁组织样本中Linc01510表达水平的差异。采用Kaplan-Meier法分析448例肿瘤患者Linc01510的表达与临床预后的关系。采用实时定量PCR检测肾癌亲代细胞系和肾癌舒尼替尼耐药细胞系Linc01510的表达。结果:448例肾透明细胞癌和67例癌旁组织中Linc01510的表达量分别为-1.00±3.07和1.27±2.81,差异有统计学意义(P0.01)。总体448例样本中临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期的表达分别为-0.29±2.30、-1.26±4.04、-1.81±3.65和-1.69±2.95,差异有统计学意义(P0.01)。病理分级中G_1、G_2、G_3和G_4期的表达分别为-0.42±1.62、-0.59±2.57、-1.01±3.54和-2.17±2.92,差异有统计学意义(P0.01)。生存分析结果显示Linc01510表达越低,患者总体生存率和无病生存率越低,差异有统计学意义(P0.01)。结论:LncRNA Linc01510在肾透明细胞癌中低表达,其表达越低预后越差,且Linc01510可能与肾癌舒尼替尼耐药有关。     

ASS1在肾透明细胞癌中的低表达及临床意义

目的 验证ASS1在肾透明细胞癌中的低表达,阐明其与肾透明细胞癌发生发展的相关性。方法 临床收集肾透明细胞癌患者组织样本23例,采用荧光定量PCR和免疫组织化学的方法分别检测肾透明细胞癌患者癌组织和癌旁正常组织ASS1基因mRNA和蛋白质的表达水平差异,采用ELISA方法检测癌组织和癌旁正常组织瓜氨酸的含量。结果 肾透明细胞癌患者癌组织中ASS1的mRNA和蛋白质的表达水平明显低于癌旁正常组织,ELISA结果显示,在癌组织中有瓜氨酸的含量高于癌旁正常组织。结论 肾透明细胞癌患者癌组织中ASS1表达量明显降低,且在癌组织中发现瓜氨酸的累积。该结果对进一步阐明肾透明细胞癌发生发展的分子机理具有一定的学术意义,为肾透明细胞癌的诊断和治疗提供一种新的思路。     

Survivin和Vimentin在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡蛋白抑制因子生存素（Survivin）和波形蛋白（Vimentin）在肾透明细胞癌（clearcellrenalcellcarcinoma,ccRCC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测56例ccRCC、25例癌旁组织及13例正常肾组织中Survivin和Vimentin的表达及定位情况。结果Survivin在肾透明细胞癌中高表达,而在癌旁及正常组织中未见表达;其表达与ccRCC临床分期及病理分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0．01）。Vimentin在正常肾组织及癌旁组织中亦未见表达,而在肾透明细胞癌中高表达,且与临床分期及病理分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0．01）。并且两个因子的表达呈显著正相关（r=0．566,P〈0．01）。结论Survivin和Vimentin在ccRCC组织中高表达,共同促进了ccRCC的发生、发展、侵袭与转移,联合两因子检测可为ccRCC的预后评估提供重要的信息。     

S100P蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究S100P蛋白在人肾原发透明细胞癌中的表达情况,并探讨其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测40例肾透明细胞癌及其癌旁肾组织、10例正常肾组织和8例转移性肾透明细胞癌组织中S100P蛋白的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析,并探讨该蛋白在肾透明细胞癌发生发展中的作用。结果:S100P蛋白在正常及癌旁肾组织中呈弱表达且表达率较低,分别为10%和7.5%,而在原发肾透明细胞癌组织中的表达呈明显上调,为77.5%(χ2=45.187,P0.01),阳性表达强度以弱-中度为主。S100P蛋白在转移性肾透明细胞癌组织中表达水平较原发癌显著降低,为12.5%(χ2=12.675,P0.01);在晚期肾透明细胞癌组织中的表达率显著降低,与早期组比较差异有统计学意义(χ2=4.337,P0.05)。结论:在原发性肾透明细胞癌组织中,S100P蛋白表达水平较正常组织明显上调,而在发生其他脏器转移的组织中显著降低。可见S100P蛋白可能在恶性肾肿瘤的发生发展中扮演重要角色,进一步深入研究有助于为肾透明细胞癌的诊疗开辟新思路。     

Id-1蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨分化抑制因子-1（Id-1）蛋白在肾透明细胞癌（RCCC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化二步法检测76例RCCC组织、29例癌旁正常组织中Id-1蛋白的表达情况,分析Id-1蛋白与患者临床病理特征及术后生存率之间的关系。结果 Id-1在RCCC组织和癌旁正常组织中的阳性表达率分别为90.8%、17.2%,二者比较差异有统计学意义（P〈0.05）,且Id-1的表达程度与肿瘤的病理分级、TNM分期相关（P〈0.05）,但与患者性别、年龄、有无复发等无明显相关性（P〉0.05）;生存分析显示Id-1表达阳性和阴性患者的5年生存率分别为23.5%、56.0%,两组生存率差异有统计学意义（P=0.017）。结论 Id-1的表达在RCCC中增高,Id-1阳性患者的预后较差,Id-1可作为RCCC诊断和预后判断的有效辅助指标。     

bcl-2、cyclinD1、P27~(kip1)在肾癌中的表达及相关性

目的探讨bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA水平在肾细胞癌(RCC)中的表达及其意义。方法采用RT-PCR半定量方法检测42例肾癌患者(透明细胞癌33例,非透明细胞癌9例)癌组织和10例正常肾组织中bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA的表达情况。结果 42例肾癌标本中bcl-2 mRNA、cyclinD1 mRNA表达的中位值(分别为0.56、0.65),均显著高于正常肾组织(分别为0.13、0.15)(P0.05);而p27kip1mRNA在肾癌中表达的中位值0.46,显著低于正常组织(0.86)(P0.05)。在肾癌临床分期中bcl-2在Ⅰ+Ⅱ期肾癌组织中表达高于Ⅲ+Ⅳ期(P0.05),cyclinD1在Ⅰ+Ⅱ期肾癌组织中表达低于Ⅲ+Ⅳ期(P0.05),p27kip1 mRNA表达量随着临床分期的升高而降低(P0.05);bcl-2、cyclinD1在非透明细胞癌组中表达量分别为0.39±0.18、0.55±0.08,低于透明细胞癌组的0.58±0.19、0.66±0.08(P0.05),p27kip1在透明细胞癌组和非透明细胞癌组中表达量(P0.05)无差异。偏相关分析示P27kip1与cyclinD1之间相关系数为-0.57(P0.01),p27kip1与bcl-2之间相关系数为0.44(P0.01);而cyclinD1与bcl-2之间相关系数为-0.06,无相关性(P0.05)。结论 bcl-2、cyclinD1高表达和p27kip1低表达与肾癌的发生、发展有密切关系;检测bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA可作为诊断肾癌的参考指标;p27kip1与cyclinD1负相关、与bcl-2正相关,而cyclinD1与bcl-2之间无相关性。     

5t4在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的探讨滋养层糖蛋白5t4在肾透明细胞癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学技术检测72例肾透明细胞癌组织标本、17例癌旁肾组织以及14例非癌因素的肾脏组织标本中5t4的表达,并对5t4在肾透明细胞癌的表达与组织学分级的关系进行分析。结果 5t4在肾细胞癌组织中的阳性率为70.8%,癌旁肾组织中的阳性率为41.2%,两者具有差异性(P0.05)。5t4在肾癌组织学分级中低分级与高分级的表达存在显著差异(P0.01)。结论 5t4可作为判断肾透明细胞癌分化程度的标志物。     

基于TCGA数据库分析BIRC5在肾透明细胞癌中的表达及预后

目的通过分析杆状病毒凋亡抑制蛋白5(BIRC5)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达,阐明BIRC5对其早期诊断及作为预后预测因子的作用。方法利用GEO、TCGA数据库和HPA分析BIRC5在ccRCC组织中mRNA和蛋白质水平的变化。运用UALCAN和LinkedOmics数据库阐述BIRC5表达与ccRCC临床病理学参数的相关性及对预后的影响。采用GEPIA、Kaplan-Meier Plotter、SurvExpress分析BIRC5表达与ccRCC预后的关系。结果BIRC5 mRNA在ccRCC中高表达,并且与ccRCC患者TNM分期相关(P<0.05),与ccRCC进展高度相关,高表达BIRC5mRNA是ccRCC患者不良预后指标。免疫组织化学结果证实,与正常肾组织相比,ccRCC中BIRC5蛋白表达量显著升高。结论在ccRCC中,BIRC5高表达是一种重要的早期诊断及不良预后指标,有望成为ccRCC早期诊断和预后预测标志物。     

NNMT在肾透明细胞癌的表达及对肾癌细胞侵袭能力的影响

目的:研究NNMT在肾透明细胞癌中的表达情况及对肾癌细胞侵袭能力的影响。方法:采用RT-PCR和Western blot方法检测正常肾小管上皮细胞株HKC、肾癌细胞株786-O及30例肾透明细胞癌组织、相应癌旁组织中NNMT的mRNA和蛋白的表达水平,并分析NNMT的mRNA水平与临床病理参数的关系。化学合成针对NNMT特异的siRNA序列,应用脂质体Lipofectamine 2000将其转染进786-O细胞中,利用RT-PCR和Western blot法检测NNMT在786-O细胞中的表达水平,用Transwell小室法检测肾癌细胞786-O侵袭能力的变化。结果:NNMT在肾癌细胞786-O中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常肾小管上皮细胞株HKC(P<0.001);肾透明细胞癌组织和对应的癌旁组织中NNMT的mRNA相对表达量分别为(1.582±0.2145)、(0.1269±0.04279),两组比较P<0.001。NNMT的mRNA水平与肿瘤大小、临床分期有关(P<0.05);Tran-swell法检测结果显示降低NNMT的表达后786-O细胞的侵袭能力明显下降。结论:NNMT在肾透明细胞癌组织和细胞中表达升高,可能在肾癌发生、发展过程中发挥重要作用。     

尾加压素Ⅱ及其受体在人肾透明细胞癌组织中的表达及意义

目的：测定肾透明细胞癌中尾加压素Ⅱ（UⅡ）与其受体（UT-R）的表达量,以期探讨UⅡ与UT—R的表达在肾透明细胞癌发生中的临床意义。方法：对12例。肾透明细胞癌肿瘤组织通过免疫组化检测肾透明细胞癌组织和正常肾组织UⅡ蛋白的表达,并采用逆转录一多聚酶链式反应（RT—PCR）的方法测定肾透明细胞癌组织和正常肾组织UⅡ mRNA和UT-RmRNA的表达量。结果：肾透明细胞癌组织和正常肾组织中有uⅡ蛋白表达。RT-PCR结果显示肾透明细胞癌中UⅡmRNA的表达明显高于正常肾组织0．92±0．09和0．62±0．06（P〈0．01）。UT-R mRNA的表达明显高于正常肾组织0．28±0．01和0．16±0．03（P〈0．01）。结论：肾透明细胞癌中UⅡ和UT—RmRNA高表达提示UⅡ／UT系统可能与肾透明细胞癌的发生、发展有关,UⅡ可能通过自分泌或軎分泌的方式发挥作用。     

RCC5基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的明确RCC5在肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的表达水平及其对肾癌患者预后的影响。方法通过荧光定量PCR方法对54对ccRCC患者标本（包括癌组织和癌旁正常组织）的RCC5mRNA进行分析;并运用免疫组化对82对配对的癌组织和癌旁正常组织切片及161例癌组织切片进行染色;运用统计学方法分析RCC5的表达量和患者的临床特点之间关系。结果荧光定量PCR结果显示92.59%（50/54））的肾癌组织中RCC5表达水平明显高于癌旁正常组织（P〈0.001）;82对癌组织及癌旁正常组织切片免疫组化显示,92.68%（76/82）的癌组织RCC5表达水平高于癌旁正常组织（P〈0.001）;同时发现RCC5的表达水平与性别、肿瘤直径、病理分期、分级、TNM分期和复发率相关;RCC5高表达的患者预后一般较低表达者差,多元分析显示RCC5表达上调是ccRCC的独立预后因素。结论 RCC5的表达水平和ccRCC预后之间存在明显相关性;研究发现RCC5表达上调的患者预后较差,RCC5可能是一个新颖并且有临床价值的预后标志物。