新型磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对骨肉瘤U2OS细胞增殖的抑制作用

目的研究高选择性的新型磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对骨肉瘤的抗癌作用。方法CCK-8法检测不同浓度(0、20、40、80、160、240、320、400、480μmol·L^-1)和不同干预时间(0、24、48、72、96 h)的ZL-n-91对U2OS细胞的增殖抑制作用;平板克隆形成实验检测ZL-n-91对U2OS细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术检测细胞周期以及凋亡的影响;Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2、周期蛋白CDK2、结果ZL-n-91明显抑制U2OS细胞的增殖,呈时间及剂量依赖性(P<0.05),其半数抑制浓度IC₅₀为174.1μmol·L^-1;ZL-n-91明显抑制U2OS细胞的克隆形成能力(P<0.01);ZL-n-91影响U2OS细胞的周期进程,将U2OS细胞阻滞在G₀/G₁期,并明显促进细胞凋亡(P<0.01);Western blot结果显示ZL-n-91明显下调U2OS细胞中Bcl-2、CDK2、CDK4、CyclinD1、CyclinE1蛋白的表达(P<0.05)。结论新型选择性磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91显著抑制骨肉瘤细胞U2OS的增殖,促进细胞的周期阻滞和凋亡,可能是治疗骨肉瘤的潜在药物。     

黄芩素与黄芩苷的体外抗骨肉瘤作用的比较

目的 探讨黄芩素与黄芩苷对骨肉瘤细胞系U2OS和U2OS/MTX300生长抑制和诱导凋亡的作用,并比较两者间的差别.方法 应用MTT比色法,测定黄芩素与黄芩苷对u2OS和U2OS/MTX300细胞株增殖的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的时间、剂量效应;应用形态学观察,测定黄芩素对U2OS和U2OS/MTX300细胞的凋亡作...     

荜茇酰胺抑制骨肉瘤细胞143B增殖和迁移并通过ROS诱导细胞凋亡的研究

摘要：目的:研究荜茇酰胺对骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和凋亡的影响,探讨其可能的抗肿瘤机制。方法:给予不同浓度的荜茇酰胺处理骨肉瘤细胞143B,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的生长作用,细胞集落法检测细胞的增殖作用,流式细胞术分别检测细胞凋亡作用、细胞内活性氧（ROS）含量变化和细胞周期的作用,Western Blotting法检测Bcl-2、Bax及MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,同时,预孵育N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）,流式细胞术检测ROS介导细胞凋亡作用。结果:与空白对照组比较,用不同浓度的荜茇酰胺处理骨肉瘤细胞143B后,能够浓度依赖性地抑制细胞生长、细胞集落形成及促进细胞凋亡（P<0.05或P<0.01）。荜茇酰胺浓度依赖性地阻滞G2/M期,促进Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）。同时,荜茇酰胺升高细胞内ROS的含量并通过ROS诱导细胞凋亡（P<0.01）。结论:荜茇酰胺抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移,阻滞G2/M期,并升高细胞的ROS水平诱导细胞凋亡。     

熊果酸诱导人急性髓系白血病细胞株U937细胞凋亡的实验研究

目的探讨熊果酸对人急性髓系白血病细胞株U937细胞的作用及机制。方法用不同浓度的熊果酸处理对数生长期的U937细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测其对细胞增殖的影响;Annexin V/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫印迹法(Western blot)检测Wnt、β-catenin、p53、Bcl-2、Bax表达,以及细胞浆凋亡诱导因子(AIF)和细胞色素蛋白C(CytC)蛋白表达。结果熊果酸呈浓度依赖性诱导U937细胞增殖抑制和凋亡,上调Bax和细胞浆AIF、CytC表达,下调Wnt、β-catenin、p53及Bcl-2表达。结论熊果酸对U937白血病细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能为抑制Wnt/β-catenin/p53信号途径促发白血病细胞死亡。     

枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用

目的 探讨枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用.方法 分别以0,5,10,20,40,80,160μmol/L的枸橘苷处理U-2 OS细胞,检测细胞活力并计算枸橘苷对U-2 OS细胞的半数抑制浓度(IC50);U-2 OS细胞实验分为空白对照组[等体积磷酸盐缓冲液(PBS)]和枸橘苷高、低剂量组(52,26μmo...     

外源高表达miR-133b抑制骨肉瘤的增殖与转移

目的分析miR-133b对骨肉瘤细胞增殖与转移的影响。方法q RT-PCR检测人骨肉瘤细胞系(MG-63)与人正常成骨细胞系(h FOB)中miR-133b的表达水平;运用MTT实验检测miR-133b对人骨肉瘤MG-63细胞的生长能力的作用;运用划痕实验检测miR-133b对人骨肉瘤MG-63细胞的迁移能力的作用;Transwell侵袭实验检测miR-133b对人骨肉瘤MG-63细胞的侵袭能力作用。结果qRT-PCR检测结果显示,MG-63细胞中miR-133b的表达水平明显低于h FOB细胞的表达水平(P<0.01);MTT检测发现,外源高表达miR-133b可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的生长(P<0.01);划痕实验检测发现,外源高表达miR-133b可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的迁移能力(P<0.01);Transwell侵袭实验显示,外源高表达miR-133b可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论外源高表达miR-133b可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖与转移。     

熊果酸衍生物的合成及对前列腺癌PC-3细胞的抑制活性

目的:合成具有不同电负性基团的熊果酸衍生物并研究其抗癌活性。方法:合成一系列携带正电性基团或负电性基团的熊果酸衍生物,并用软件预测衍生物油水分配系数及水溶性的改善情况;采用MTT法考察熊果酸衍生物对人前列腺癌PC-3细胞的抑制活性;采用细胞周期分析及AnnexinV/PI双标记法探讨其抗癌机制。结果:熊果酸衍生物的水溶性较熊果酸有明显改善;荷负电基团的熊果酸衍生物抑癌活性远低于熊果酸,而负载正电性基团显著提高了熊果酸的体外抗癌活性,其作用机制为诱导细胞发生凋亡及细胞周期阻滞;其中熊果酸衍生物UA-3,UA-4,UA-5b的水溶性提高70倍以上,对PC-3细胞的IC50(48 h)均<10μmol.L-1,将细胞阻滞于G0/G1期并具有诱导凋亡作用(凋亡率均>50%)。结论:采用正电性基团修饰熊果酸是提高抗癌效果并改善其水溶性的有效途径之一。     

熊果酸诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡研究

目的 探讨熊果酸对人RD横纹肌肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡作用.方法 将不同浓度的熊果酸作用于培养的RD横纹肌肉瘤细胞,通过MTT比色法、流式细胞仪和DNA凝胶电泳、电子显微镜技术观察检测细胞凋亡,研究分析其对RD横纹肌肉瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用.结果 熊果酸浓度为10、20、40 μmol/(l·h)时,细胞生长抑制率分别为11.3%、20.5%、42.6%;流式细胞术测定RD细胞的凋亡率分别为9.1%、16.6%、27.2%;DNA电泳见DNA"梯形"图谱;电镜显示肿瘤细胞的凋亡形态.结论 熊果酸能抑制RD横纹肌肉瘤细胞增殖,诱导其凋亡.     

Columbamine suppresses the proliferation and neovascularization of metastatic osteosarcoma U2OS cells with low cytotoxicity

Osteosarcoma is one of the most common malignant bone tumors in children and adolescents. Although extensive efforts have been made in anti-osteosarcoma therapy in recent decades, there are no effective low-toxicity drugs for treating patients with metastatic osteosarcoma. Hence, potent anti-metastatic osteosarcoma drugs are highly desired. In this study, we explored novel small molecular anti-metastatic osteosarcoma agents and found that columbamine (COL), an active component of the herb Coptis chinensis, inhibited the proliferation and neovascularization of metastatic osteosarcoma U2OS cells. COL effectively suppressed U2OS cell proliferation in vitro with an IC₅₀ of 21.31 ± 0.38 μM, with low cytotoxicity. Mechanistic studies revealed that COL induces cell cycle arrest at the G2/M transition, which is associated with attenuating CDK6 gene expression and diminishing STAT3 phosphorylation. COL did not significantly promote U2OS cell apoptosis at any of the dosages tested. Additionally, COL inhibited U2OS cell-mediated neovascularization, which was accompanied by the down-regulation of matrix metalloproteinase (MMP) 2 expression and reduction of cell migration, adhesion, and invasion. Taken together, our data show that COL exerts anti-proliferative and anti-vasculogenic effects on metastatic human osteosarcoma U2OS cells with low toxicity. These results warrant further investigation of COL as a potential anti-osteosarcoma and anti-cancer drug.     

HPLC法测定山楂中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的 建立山楂的质量控制指标和含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法.以乙腈-甲醇-0.5%醋酸铵(67:12:21)为流动相,检测波长为210nm,流速为1ml·min-1.结果 熊果酸和齐墩果酸的线性范围分别为0.318～25.44μg、0.084～6.72μg,r值均为0.9999;回收率分别为101.09%,99.47%,RSD分别为1.93%,1.10%.结论 熊果酸和齐墩果酸可作为山楂质量控制指标.测定方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可作为山楂中熊果酸和齐墩果酸的含量测定方法.     

HPLC测定肝达片中熊果酸的含量

目的建立测定肝达片中熊果酸含量的HPLC方法。方法采用ODS柱,流动相为甲醇-水-磷酸(86∶14∶0.1),流速1.0ml.min-1,检测波长208nm,进样量20μl。结果熊果酸在0.4~4.0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9996),平均回收率为101.7%,RSD=1.24%。结论所用方法准确、可靠、简便,精密度好,可对肝达片进行质量控制。     

A novel redox-responsive ursolic acid polymeric prodrug delivery system for osteosarcoma therapy

Ursolic acid (UA), found widely in nature, exerts effective anti-tumoral activity against various malignant tumors. However, the low water solubility and poor bioavailability of UA have greatly hindered its translation to the clinic. To overcome these drawbacks, a simple redox-sensitive UA polymeric prodrug was synthesized by conjugating UA to polyethylene glycol using a disulfide bond. This formulation can self-assemble into micelles (U-SS-M) in aqueous solutions to produce small size micelles (∼62.5 nm in diameter) with high drug loading efficiency (∼16.7%) that exhibit pH and reduction dual-sensitivity. The cell and animal studies performed using the osteosarcoma MG-63 cell line and MG-63 cancer xenograft mice as the model systems consistently confirmed that the U-SS-M formulation could significantly prolong the circulation in blood and favor accumulation in tumor tissue. Targeted accumulation allows the U-SS-M to be effectively internalized by cancer cells, where the rapid release of UA is favored by a glutathione-rich and acidic intracellular environment, and ultimately achieves potent antitumor efficacy.     

利多卡因调控微小RNA-195对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

目的 探讨利多卡因(lidocaine)对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及其可能的作用机制.方法 研究于2018年5―12月,体外培养骨肉瘤MG63细胞,不同浓度的利多卡因干预MG63细胞,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测MG63细胞存活率及顺铂半抑制浓度(IC50值);流式细胞术检测细胞凋亡率;实时...     

熊果酸的提取工艺研究

目的寻找熊果酸提取的最佳工艺。方法应用4种不同的溶剂和5种不同方法对山茱萸中所含的熊果酸进行提取,比较其收率和含量。结果最佳工艺为用95%乙醇、破碎提取法。结论应用该工艺提取不仅含量、收率高,而且省时、省力。     

熊果酸及其衍生物抗肿瘤作用的研究进展

熊果酸（ursolic acid,UA）是一种五环三萜类化合物,广泛存在于夏枯草、女贞子等多种药用植物中,具有多种生物活性。体内外研究表明,熊果酸抗瘤谱广,且对正常细胞毒性低,是一种理想的天然抗肿瘤候选药物,进行结构改造后具有更广泛的抗肿瘤活性。现综合国内外文献报道,对熊果酸及其衍生物抗肿瘤的作用进行综述。     

熊果酸衍生物的合成及抗肿瘤活性的研究

目的：通过研究五环三萜类新型化合物对癌细胞的抑制力,从而发现新型抗癌药物。方法以天然产物熊果酸（ UA）为先导化合物,对C-2位氢、C-3位羟基和C-28位羧基以及A环进行结构改造,设计并合成了8个新的熊果酸衍生物。结果采用MTT法对目标化合物进行初步的体外抗肿瘤活性研究。该类化合物对HeLa、HepG2和BGC-823细胞增殖具有一定程度的抑制作用,其中化合物I3对HeLa、HepG2和BGC-823细胞表现出很强的抑制活性。结论该化合物对于上述细胞的抑制作用明显高于已上市药物吉非替尼,值得进一步研究。     

RP-HPLC-MS离线联用分析姬松茸中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的建立姬松茸中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方法反相高效液相色谱法和质谱离线联用。色谱柱Agilent Zorbax C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸水溶液(87∶13),检测波长为210nm,柱温25℃,流速0.8mL.min-1。结果齐墩果酸和熊果酸在2~80μg.mL-1范围内呈良好的线性关系,r值分别为0.9984、0.9976,回收率分别为98.66%、98.96%,RSD值分别为2.46%、1.65%。结论本方法简便,快速,测定结果准确,重现性好,可作为姬松茸中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。     

HPLC测定复方大红袍止血片中熊果酸的含量

目的建立复方大红袍止血片中熊果酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法。用Kromasil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水-磷酸(85∶15∶0.2);流速0.5 ml.min-1;柱温40℃。结果熊果酸在0.2012~1.6096μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.4%,方法精密度RSD=1.8%。结论所用方法简便可行、重复性好,适用于复方大红袍止血片的质量控制。