基于荧光免疫技术检测降钙素原的方法建立和性能评估

目的研发一种应用荧光免疫层析法检测降钙素原的试剂盒,并对其进行性能评估。方法以羧基荧光微球标记鼠抗人PCT单克隆抗体及羊抗兔IgG抗体,PCT多克隆抗体和兔IgG分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。用VIDAS公司的降钙素原检测试剂盒与本研究的降钙素原检测试剂盒同时对125例临床样本进行检测,并通过线性实验、精密度实验、准确度等实验对降钙素原检测试剂盒进行性能评价。结果两种检测试剂的相关系数为0.9951,两者差异无统计学意义(P0.05);准确度实验中平均回收率是104%;精密度实验中批内和日间的变异系数均小于7%;PCT浓度在0.05～53.21ng/ml内呈良好线性。结论本研究的降钙素原检测试剂盒具有较好的精密度且结果准确可靠。     

免疫透射比浊法在AU5800全自动生化分析仪检测降钙素原的方法学评价

目的在AU5800全自动生化分析仪上用免疫透射比浊法检测降钙素原(PCT)的方法学评价。方法通过AU5800全自动生化分析仪来检测PCT的精密度、线性、参考区间等指标,并与酶免疫荧光法试剂盒进行相关性比较,从而评价其性能。结果该方法批内和批间精密度分别小于8%和15%;0~80ng/mL范围内线性良好(Y=0.994 1 X+0.124 5,R2=0.999);正常人群的参考范围为小于0.5ng/mL;与酶免疫荧光法的相关性良好(Y=0.357 4 X+0.284 2,R2=0.960 7)。结论本检测方法不仅实现了PCT检测的快速、全自动化,而且化学性能优良、操作简单,降低了临床试剂成本,适合临床推广使用。     

降钙素原乳胶增强免疫比浊法与免疫荧光法的相关性

目的探讨乳胶增强免疫比浊法与免疫荧光法定量检测降钙素原(PCT)的分析性能。方法乳胶增强免疫比浊法采用美国贝克曼库尔特公司AU5800全自动生化分析仪,免疫荧光法采用mini VIDAS全自动荧光免疫分析仪,检测相应配套高值、低值质控品,计算日内及日间的精密度,检测相应试剂非同批号定值标准品的偏倚程度,对2组检测方法的相关性进行分析评价。结果乳胶增强免疫比浊法检测PCT高值质控品日内精密度及日间精密度分别为2.89%、3.84%,低值质控品日内精密度及日间精密度分别为1.81%、3.77%;免疫荧光法检测PCT高值质控品日内精密度及日间精密度分别为2.42%、3.83%,低值质控品分别为2.03%、3.43%;乳胶增强免疫比浊法检测PCT高值定值标准品与低值定值标准品的偏倚分别为3.30%、-2.49%,免疫荧光法检测PCT高值定值标准品与低值定值标准品的偏倚分别为2.88%、3.63%;乳胶增强免疫比浊法在检测范围内线性良好(Y=1.028 1 X-0.289 4,R2=0.994 7),免疫荧光法在检测范围内线性良好(Y=1.079 8 X+0.179 4,R2=0.992 8),2种方法相关性良好(Y=0.357 2 X+0.284 5,R2=0.994 2)。结论乳胶增强免疫比浊法检测PCT性能良好,灵敏度高,操作简便,且由于其成本低,更值得临床推广应用。     

某品牌国产化学发光仪检测降钙素原的性能评价

目的对某品牌国产化学发光仪检测降钙素原(PCT)的性能进行评价。方法在新产业MAGLUMI4000化学发光仪上检测PCT,对其精密度、线性、携带污染率进行评价,并与梅里埃(mini-VIDAS)酶联免疫荧光法检测PCT进行相关性分析。结果化学发光法检测PCT的低、中浓度样本的CV_(批内)分别为1.56%、2.23%;CV_(批间)分别为2.30%、3.05%。PCT在0.5~98.0ng/mL浓度范围内线性良好(Y=0.997 22 X+0.173 77,r~2=0.998 12)。携带污染率为0.89%,样本间交叉污染小。新产业MAGLUMI4000化学发光仪检测系统与梅里埃mini VIDAS荧光免疫分析仪检测系统测定PCT的结果呈明显相关(Y=1.004 X+0.005 59,r~2=0.999 58)。结论新产业MAGLUMI4000化学发光仪检测系统测定PCT的性能良好,可供临床使用。     

流式荧光免疫法检测多肿瘤标志物的方法学评价

目的评价流式荧光免疫法在多肿瘤标志物定量测定中的可靠性。方法用流式荧光免疫法对试剂盒精密度、线性、携带污染率、抗干扰性等指标进行评价,同时将Luminex^TM-100与Bio-Ekon SerozymeⅠ的结果进行比较。结果本方法化学性能的评价表明,批内变异系数（CV）均〈10%,批间CV均〈14%。线性良好（r〉0.99）。携带污染率均〈0.5%。血红蛋白（Hb）、胆红素（Bil）、三酰甘油（TG）对测定结果无显著干扰（P〉0.05）。与Bio-Ekon SerozymeⅠ内分泌定量分析仪及配套试剂相关性良好（r〉0.975）。对506名年龄在24-84岁健康体检人员标本用本方法进行多肿瘤标志物测定,正常参考值分别为甲胎蛋白（AFP）〈15 ng/mL、糖类抗原125（CA125）〈35 U/mL、癌胚抗原（CEA）〈5 ng/mL、糖类抗原199（CA199）〈35 U/mL、前列腺特异抗原（PSA）〈4 ng/mL。结论本方法测定结果准确、可靠且操作简便、快速,适宜于临床检测推广。     

Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原的方法学评价

目的:对Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原(PCT)进行方法学评价.方法:通过Roche Cobas E601测定PCT的精密度、准确度、分析测量范围和携带污染率来评价其性能.结果:低、高值批内精密度的变异系数(CV)分别为1.16％、0.51％,批间精密度的CV为2.98％、1.96％;测定4份定值校准品的检测结果与靶值的偏倚为-5.26％ ～ 3.16％;线性为0.039 ng/mL ～ 86.325 ng/mL;携带污染率为0.019％.结论:该系统检测性能能够满足PCT的测定要求.     

TRFIA全血降钙素原检测试剂盒的性能评价

目的评价时间分辨免疫荧光法(TRFIA)全血降钙素原(PCT)检测试剂盒的分析性能。方法采用AQT90FLEX免疫分析仪,以TRFIA检测全血PCT,评价该方法精密度、检测下限、功能敏感度、线性范围、干扰试验、携带污染率、方法比对和参考区间等性能指标;将其与罗氏cobas 6000电化学发光分析仪PCT检测试剂盒进行比较。结果 TRFIA批内变异系数(CV)小于5.5%,批间CV小于6.0%,检测下限为0.03ng/mL,功能敏感度为0.11ng/mL,线性范围0.072~100.000ng/mL,干扰物对PCT检测无明显影响(干扰小于或等于±10%),携带污染小于0.25ng/mL,参考区间为0.081~0.120ng/mL。其与罗氏cobas 6000电化学发光分析仪PCT检测试剂盒有良好的相关性(R2=0.995 3)。结论采用TRFIA的AQT90FLEX免疫分析仪PCT检测试剂盒敏感度高,精密度好,线性范围宽,与罗氏cobas 6000电化学发光分析仪PCT检测试剂盒有良好的相关性,快速便捷,能更好地适用临床即时检验。     

基于上转换纳米荧光快速定量检测PCT技术研究

目的研制基于上转换纳米荧光快速定量检测降钙素原(PCT)的免疫层析检测技术。方法采用溶剂热法制备上转换纳米荧光颗粒(UCNP),为稀土镱和铒掺杂于四氟钇钠的混合物(NaYF4:Yb3+,Er3+),利用反相微乳法对UCNP进行改性和二氧化硅(SiO_2)包裹,利用干式免疫层析技术建立PCT检测技术。结果利用反向微乳法成功制备了分散性好的水溶性UCNP,基于UCNP的干式免疫层析技术检测降钙素原的最低检测限为0.02ng/mL,线性范围为0.05~44.00ng/mL,批内精密度CV10%,批间精密度CV13%。结论基于UCNP的免疫层析检测技术是快速、灵敏定量检测血清PCT的有效方法。     

乳胶增强免疫比浊PCT试剂在ADVIA 2400系统应用的性能评估及与电化学发光系统一致性研究

目的评价国产乳胶增强免疫比浊法降钙素原(PCT)诊断试剂在西门子ADVIA 2400系统上应用的性能。方法参考美国临床实验室标准化委员会(CLSI)指南对乳胶增强免疫比浊法PCT诊断试剂在西门子ADVIA 2400系统检测的精密度、准确度及线性范围进行性能验证,同时与参考方法(电化学发光法)进行一致性比较。结果乳胶增强免疫比浊法在西门子ADVIA 2400系统上测定PCT低值和高值质控品的批内精密度分别为5.5%、2.3%,批间精密度分别为6.6%、3.1%,总精密度分别为6.6%、3.9%。PCT浓度在0.19～49ng/mL范围的线性良好(r=0.995 7)。乳胶增强比浊法与电化学发光法的Passing-Bablok回归方程为Y=0.846 X+0.0772(r=0.989 4)。两种方法在cut-off值分别为0.5、2.0、10.0ng/mL时的Kappa值分别为0.742、0.893、0.921,西格玛(σ)值为3.5,两方法在低、高PCT浓度处的质量目标指数(QGI)分别为0.68、2.41。结论国产乳胶增强免疫比浊PCT试剂在ADVIA-2400系统上应用符合性能验证标准,但采用六西格玛标准,该方法在精密度和准确度方面尚需进一步改进。     

激光流式细胞仪法测定网织红细胞（Vet）在临床诊断中的应用

目的研究Sysmex XE-2100血液分析仪（以下称XE-2100）定量分析网织红细胞（reticulocyte,RC）的性能。方法分别用XE-2100系统和手工法检测病人和正常受试者标本,评价两方法的线性范围、稳定性、精密度、准确度等性能并进行比较。结果批内精密度和批间精密度试验显示其检测RC的平均变异系数（CV％）分别为3．61％和3．91％;XE-2100和手工法计数RC结果之间有良好的相关性（γ=0．979,P〈0．001）。且结果差异无显著性（P〉0．05）。结论XE-2100检测RC具有简便、快捷、精密度高、准确性好、线性范围宽等优点。     

FinecareⅡPOCT法检测降钙素原的临床应用评价

目的：评价POCT法检测血清降钙素原（PCT）的应用价值。方法采用化学发光法（罗氏Cobas e601分析仪,电化学发光法）为参考方法,以荧光免疫法（万孚FinecareⅡ分析仪,POCT法）为实验方法,检测98例住院患者的血清PCT,2种方法结果应用EP evaluator软件中的半定量方法学比较（AMC）模块进行比对分析。结果统计分析结果表明,2种方法的符合率为86.7%;对称性试验（McNemar Test）P=0.166,ChiSq=1.923,1df（P＞0.05）;Cohen＆#39;s Kappa系数为81.1%,性能指标良好。结论荧光免疫法检测PCT与化学发光法比较,结果一致性良好;因使用POCT法,万孚FinecareⅡ分析仪更具简便、灵活的特点。但因灵敏度（最小检出限）低于化学发光法,故PCT在0.05-0.5 ng/mL浓度区间,荧光免疫法尚不能精确定量,在实际应用于中要加以注意。     

定量与半定量检测血清降钙素原在细菌感染诊断中的应用价值评价

目的评价定量与半定量方法检测血清降钙素原（PCT）对细菌感染性疾病诊断的应用价值。方法选取186例入院疑为细菌感染的患者,分别采用化学发光定量法和胶体金免疫结合半定量法检测患者血清PCT含量,并采用Kappa一致性检验评价两种方法检测结果的一致性,ROC曲线分析其对细菌感染诊断的敏感度及特异度。结果非感染组、局部细菌感染组血清PCT均未升高,脓毒血症组PCT显著升高,细菌感染性全身炎症反应综合征（SIRS）组血清PCT轻中度升高,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。定量与半定量检测PCT结果总体一致性较好（Kappa检验,K=0.77）,以PCT≥0.5ng/mL为阳性诊断界点,ROC分析表明定量方法的敏感度98.9%、特异度92.6%均高于半定量方法的92.6%、88.4%。结论检测血清PCT水平对全身细菌感染诊断具有良好的敏感度和特异度,定量法检测结果客观、精确,对于处于阳性临界值或需要监测疗效的患者,定量检测PCT是首选方法。     

荧光免疫层析法降钙素原检测试剂盒临床性能评估

  目的  评估荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原的性能。  方法  参照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)EP5-A和EP6-A文件方法, 对荧光免疫层析法试剂盒(TEBSUN)检测降钙素原的精密度、线性、方法学比对、相对灵敏度和特异性进行评估。  结果  荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原精密度较好, 低浓度和高浓度样本精密度的变异系数分别为8.3%和4.7%;线性验证试验结果显示, 在试剂盒标示的检测范围内具有良好的线性梯度关系(r=0.9989);方法学比对结果显示, 荧光免疫层析法试剂盒与梅里埃VIDAS酶联免疫荧光法分析系统的降钙素原试剂盒检测结果一致性良好(r=0.9770);在0.5和2.0 ng/ml两个浓度水平, 荧光免疫层析法试剂盒相对于酶联免疫荧光法试剂盒的灵敏度和特异性均大于86%, 与其测定结果的总体符合率为93.75%。  结论  荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原的精密度、线性、方法学比对、相对灵敏度和相对特异性等性能评价较好, 适用于临床标本检测。     

降钙素原和白细胞计数在感染性腹泻病鉴别诊断中的价值

目的探讨降钙素原（PCT）在感染性腹泻病鉴别诊断中的价值。方法采用双抗体夹心免疫法检测72例感染性腹泻患者和30名健康体检者进行降钙素原检测,并对结果进行分析。结果细菌性腹泻患者PCT水平明显高于病毒性腹泻患者及健康体检者,差异有统计学意义（P〈0.01）;细菌性腹泻患者治疗前降钙素原明显高于治疗后水平（P〈0.01）;病毒性腹泻患者治疗前后降钙素原比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论降钙素原水平与细菌感染相平行,是一项比白细胞更敏感的、鉴别细菌和病毒性腹泻的指标。     

法国STAGO全自动血液凝固仪评价

目的对法国STAGO全自动血液凝固仪性能进行评价。方法采用8个通道，运用不同检测原理（包括凝固法、发色底物法和免疫比浊法）同时检测重复性、相关性、抗干扰性、交叉互染率及对比试验。结果试验证明，法国STAGO全自动血液凝固仪具有良好线性，准确度和精密度高，测量范围大，对高、低浓度（含量）标本均可检测，具有抗干扰性强的优点，且试剂开放。结论该仪器设计上自动化程度高，操作简便，是一台技术性能完善的全自动凝血分析仪，具有重要的临床应用价值。     

免疫透射比浊法检测血清铁蛋白的性能评价

目的对免疫透射比浊法定量测定血清铁蛋白(FER)进行方法学评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会推荐的评价方法,对免疫透射比浊法测定血清FER的精密度、线性范围、比对试验、回收试验、干扰试验、参考范围验证等进行评价。结果免疫透射比浊法测定血清FER的批内、批间变异系数均5.0%,精密度良好;免疫透射比浊法测定血清FER水平在10～1 000ng/mL,检测线性良好;免疫透射比浊法测定血清FER与化学发光法比较,结果相关性良好(r2=0.998 1),检测结果差异无统计学意义(P0.05);回收率为96.02%～102.74%;当标本中BIL≤498.40μmol/L、TG≤9.90mmol/L、Hb≤500mg/dL时,对免疫透射比浊法无干扰,参考范围验证通过。结论免疫透射比浊法用于定量检测血清FER,精密度良好,线性范围广,结果准确,干扰因素小,操作简单,能直接在全自动生化分析仪上使用,满足临床检测需求。     

缺血修饰清蛋白测定试剂的性能评价

目的：评价终点法测定缺血修饰清蛋白（IM A ）试剂盒的性能,判断其分析性能是否满足临床要求。方法应用终点法测定血清中的IM A浓度,对试剂盒的精密度、正确度、线性及参考区间做出评价。精密度按照定量测量方法的精密度性能评价（EP5‐A2）指南标准进行评价;正确度按照定值参考物质检测的回收实验批准（EP15‐A ）指南标准进行评价;线性范围按照EP6‐A指南推荐方法进行评价;参考区间按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准进行评价。结果该IMA试剂盒参考范围适用本实验室;线性良好,精密度、正确度均在规定范围内。结论该商品化IM A试剂盒符合实验室性能标准,性能良好,可供本实验室对大批量血清标本进行检测。     

SYSMEX CA-510全自动血凝分析仪性能验证及评价

目的对日本SYSMEX公司CA-510型全自动凝血分析仪进行性能评价。方法按照临床和实验室标准化委员会的文件,对该仪器的凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原及凝血活酶时间正确度、精密度、线性及携带污染率等项目进行性能验证。结果该仪器的准确度、精密度、线性范围、携带污染率等性能指标评价良好。结论 CA-510分析仪性能良好,可用于标本的检测。     

VIDAS定量检测D-二聚体的性能评价

目的了解并评价VIDAS定量检测D-二聚体的主要性能特点。方法依据NCCLS文件标准，对法国生物梅里埃公司全自动免疫分析系统（VIDAS）的D-二聚体检测性能进行评价。结果高值质控物（Control 1）、低值质控物（Control 2）及混合血浆的批内精密度CV分别为3．11％，3．43％和6．17％；批间精密度吖分别为4．35％，4．10％和7．48％；总重复性为8．2％，回收率为102％，准确度为97％。此次评估线性范围为45～4641．50ng／ml，仪器在此范围内线性良好（r=0．999）；血红蛋白（0．3mmol／L），三酰甘油（2mmol／L），胆红素（125μmol／l），类风湿因子（200IU／ml）对检测结果的影响度均小于厂家给定的批内变异率（10％）；20例健康人血浆标本进行D-二聚体正常参考值验证，均符合原试剂说明书提供的参考值。结论VIDAS定量检测D-二聚体的准确度、精密度、线性均较好，无携带污染率，检测简便易行，自动化程度高，尤其适合紧急情况下的个别检测。     

定量检测降钙素原的方法学评价

目的评价酶联免疫荧光法与电化学发光法用以定量检测降钙素原(PCT)的分析性能,并探讨两种方法检测结果的相关性和一致性,为合理选择PCT的检测系统提供依据。方法酶联免疫荧光法采用mini VIDAS全自动荧光免疫分析仪(简称mini VIDAS),电化学发光法采用Cobas E411电化学发光分析仪(简称Cobas E411)。测定相应配套低、高值质控品,计算日内和日间精密度;测定相应试剂非同批号的定值标准品观察偏倚程度,分析和比较两种方法检测结果的相关性和一致性。结果 mini VIDAS检测PCT低值和高值质控品的日内精密度分别为2.02%、1.83%,日间精密度分别为3.59%、3.09%;Cobas E411检测的日内精密度分别为1.30%、0.87%,日间精密度分别为3.33%、3.06%。mini VIDAS检测PCT低值和高值定值标准品的偏倚分别为2.98%、-1.97%;Cobas E411的偏倚分别为5.26%、0.90%。两种方法的PCT检测结果比较差异有统计学意义(P0.01),但两者的相关性(r=0.993)和一致性(Kappa=0.76)良好。结论两种方法定量检测PCT的分析性能都能满足实验室要求,且具有良好的相关性和一致性,实验室可根据实际情况选择合适的检测系统。