乳腺癌中IL-2、IL-4表达与化疗药物敏感性关系的研究

目的:研究乳腺癌细胞中IL-2、IL-4表达与化疗药物敏感性的关系.方法:选取病理诊断为乳腺癌(术前未行放疗、化疗)的手术切除标本20例,体外分离细胞作培养,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析表柔比星(EADM)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)、盖诺(NVB)、顺铂(DDP)4种化疗药物对乳腺癌肿瘤细胞的相对抑制率,通过免疫组织化学染色法分析乳腺癌组织IL-2、IL-4的表达.结果:0.1×PPc浓度时乳腺癌细胞对4种化疗药物的敏感率分别为EADM 30%、5-Fu 20%、NVB 45%、DDP 25%;IL-2( )的乳腺癌细胞对4种化疗药物敏感性均高于IL-2(一)的乳腺癌细胞(P<0.05),IL-2阳性表达程度与乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性存在正相关关系(P<0.05).IL-4( )的乳腺癌细胞对EADM、NVB敏感性均低于IL-4(一)的乳腺癌细胞(P<0.05),IL-4阳性表达程度与乳腺癌细胞对化EADM、NVB的敏感性存在负相关关系(P<0.05).结论:IL-2、IL-4的表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性有关,IL-2、IL-4可作为乳腺癌临床化疗疗效预测的2个指标.对IL-2、IL-4表达的联合检测可以对乳腺癌化疗药物的选择起到指导作用.     

乳腺癌中p73α和p53表达与化疗药物敏感性的关系

目的:研究乳腺癌细胞p73α、p53表达与化疗药物敏感性的关系.方法:选取病理诊断为乳腺癌(术前未行放疗、化疗)的手术切除标本12例,体外分离细胞作培养,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析表阿霉素(EPI)、丝裂霉素(MMC)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)4种化疗药物对乳腺癌细胞的相对抑制率,通过免疫细胞化学染色法分析乳腺癌细胞p73α、p53的表达.结果:0.1×PPC浓度时乳腺癌细胞对4种化疗药物的敏感率分别为MMC(42%)、EPI(33%)、5-Fu(17%)、DDP(17%);p73α( )的乳腺癌细胞对4种化疗药物敏感性均高于p73α(-)的乳腺癌细胞(P＜0.05),p73α阳性表达程度与乳腺癌细胞对EPI、MMC、5-Fu、DDP4种化疗药物的敏感性存在正相关关系(r=0.736,P＜0.05;r=0.744,P＜0.05;r=0.674,P＜0.05;r=0.721,P＜0.05).结论:p73α的表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性有关.     

凋亡相关基因bcl-2、bad在乳腺癌中的表达及意义

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2、bad在乳腺癌组织中的表达及其与患者预后的关系.方法:采用免疫组化方法检测10例正常乳腺组织、10例乳腺纤维瘤组织、40例青年乳腺癌组织、40例老年乳腺癌组织中bel-2、bad基因的表达,并检测80例乳腺癌组织中ER、PR的表达.结果:bcl-2表达随乳腺癌的组织学分级增加呈递减趋势(P<0.01),青年乳腺癌患者bcl-2表达阳性率显著低于老年乳腺癌患者(P<0.05),bcl-2表达阳性率与腋窝淋巴结转移呈负相关(P<0.05),与FR、PR表达呈正相关(P<0.05) .bad表达随乳腺癌的组织学分级增加也呈递减趋势(P<0.05),青年乳腺癌患者bad表达阳性率显著低于老年乳腺痈患者(P<0.05),bad表达阳生率与腋窝淋巴结转移、ER、PR表达无明显相关(P>0.05) .结论:bcl-2、bad可以作为预测乳腺癌预后的因子.检测乳腺癌组织中bcl-2基因达水平,特别是联合检测bcl-2、bad以及ER、PR的表达水平,有助于个体化判断乳腺癌患者的预后,并指导治疗.     

肺癌的体外化疗药物敏感性及其与临床病理的关系

目的　探讨肺癌对临床常用化疗药物的体外敏感性及其与临床病理的关系。方法　62例手术切除或活检的肺癌组织标本,采用组织块培养-终点染色-计算机辅助分析方法（TECIA）,得出该例肿瘤组织对11种常用抗癌药物的敏感性,药物包括紫杉醇 (TAX)、依托泊苷(VP-16)、长春瑞滨 (NVB)、卡铂(CDP)、顺铂(DDP)、多西他赛 (TAT)、表柔比星（EADM）、吉西他滨(GEM)、丝裂霉素(MMC)、奥沙利铂(L-OHP)和伊立替康（CPT-11）。结果　受检肺癌标本对11种药物敏感率顺序由高到低依次为TAX 45.2%(28/62)、VP-16/NVB/CBP 32.3%(20/62)、DDP/TAT/EADM 25.8%(16/62)、GEM /MMC/ L-OHP 19.4(12/62)、CPT-11 12.9%(8/62)。不同患者的肺癌组织对化疗药物具有不同的敏感谱。40～60岁组比>60岁组对化疗药物的体外敏感率高（68.42% vs 41.67%, P<0.05）。腺癌组比细支气管肺泡癌组的敏感率高（72.73% vs 42.86%, P<0.05）。结论 肺癌组织对抗癌药的体外敏感性存在明显的个体性差异,至少与患者年龄以及肿瘤的病理类型有关。 【关键词】　抗癌药 肺肿瘤 体外药敏实验     

乳腺癌ER、PR、C-erbB-2表达与新辅助化疗有效率的关系

目的:探讨乳腺癌患者术前ER、PR、C-erbB-2的表达与新辅助化疗(NCT)有效率的关系。方法:采用免疫组化方法,检测180例乳腺癌NCT患者化疗前ER、PR、C-erbB-2的表达情况,观察不同表达情况下NCT的疗效。结果:180例乳腺癌NCT病例中,ER、PR、C-erbB-2阴性率分别为32.2%、23.3%、40.0%,ER(+)组与ER(-)组、PR(+)组与PR(-)组化疗有效率差异均有统计学意义(P<0.05),C-erbB-2高表达组与低表达组化疗有效率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ER、PR阴性及C-erbB-2低表达的乳腺癌病人对化疗更敏感,化疗后获益更多,ER、PR阴性表达及C-erbB-2低表达可作为乳腺癌NCT敏感性的预测指标。     

非小细胞肺癌LRP、c-erbB-2蛋白表达与辅助化疗疗效相关性的研究

目的:研究非小细胞肺癌肺耐药相关蛋白(LRP)、c-erbB-2蛋白表达与辅助化疗疗效之间的相关性。方法:收集61例非小细胞肺癌的病理标本,通过免疫组化检测LRP、c-erbB-2的表达,61例患者均接受4～6个周期化疗,其中19例采用MVP(MMC加VDS加DDP)方案,17例采用NP(NVB加DDP)方案,25例采用TP(TXL加DDP)方案,对疗效与免疫组化结果进行统计学处理。结果:化疗前LRP表达阳性者的化疗有效率为35.29%,与阴性者(为77.78%)相比具有显著的统计学差异(P<0.05)。化疗前c-erbB-2蛋白表达阳性者的化疗有效率为38.93%,与阴性者(为62.50%)相比也具有显著的统计学差异(P<0.05)。结论:在肺癌的辅助化疗中,LRP、c-erbB-2蛋白的表达与疗效有着重要的关联,在化疗之前对LRP及c-erbB-2蛋白的检测有助于预测化疗疗效及预后。     

高压氧对化疗药物体外诱导急性髓性白血病细胞Bax和Bcl—2基因表达的影响

①目的 采用体外实验方法探讨高压氧(HBO)对化疗药物体外诱导急性髓性白血病(AML)细胞Bax和bcl-2基因表达的影响。②方法　高三尖杉酯碱(H)、阿糖胞苷(A)、足叶乙甙(V)3种化疗药物分别作用于AML患者的单个核细胞,一组加HBO,另一组不加HBO,观察各组凋亡细胞、Bax和bcl-2实验前后积分变化、Bax/bcl-2积分比和TUNEL阳性率。同时设无药加HBO组和不加HBO组以排除HBO或其它因素对AMI,细胞的影响。③结果　3种化疗药物加HBO组具有典型凋亡特征的AML细胞明显增多;Bax的表达无明显改变(P>0.05),bcl-2的表达明显减少(P<0.01),Bax/bcl-2积分比明显高于不加HBO组(P<0.05);TUNEL 阳性率明显高于不加HBO组(P<0.01);无药加HBO组与无药不加HBO组实验前后Bax、bcl-2基因的表达无明显改变(P>0.05)。④结论HBO对化疗药物体外促进AML细胞Bax基因的表达无明显影响,但增强了化疗药物对bcl-2基因表达的抑制作用,Bax/bcl-2比值明显增加,因而增强了AML细胞的化疗敏感性,使化疗药物体外诱导AML细胞凋亡增加。单纯HBO对AML细胞Bax和bcl-2基因的表达无明显影响。     

bcl-2基因的表达在卵巢恶性肿瘤多药耐药中的意义

目的探讨bcl-2基因与卵巢恶性肿瘤细胞多药耐药的关系。方法采用体外药敏实验(MTT法)检测药物敏感性,免疫组织化学方法检测45例卵巢恶性肿瘤组织bcl-2蛋白的表达,并对相关的临床病理因素进行分析。结果卵巢恶性肿瘤组织中bcl-2蛋白表达阳性率为55.6%,且不同病理类型、临床分期和术后残留病灶大小与卵巢恶性肿瘤组织中bcl-2蛋白的表达无关(P>0.05),bcl-2的表达与卵巢恶性肿瘤的耐药性呈显著的正相关(P<0.05)。结论bcl-2基因可能参与了卵巢恶性肿瘤组织的化疗耐药性,bcl-2蛋白表达的检测可以预测卵巢恶性肿瘤化疗敏感性。     

乳腺癌pS2、PSA表达与ER、PR的关系及预后意义

目的: 探讨pS2、PSA在乳腺癌中的表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)关系及预后的意义。方法: 应用免疫组织化学SP法检测52例乳腺癌中pS2和PSA的表达,并对52例进行了5年随访。结果: pS2总阳性表达率为65.38%,在ER(+)、ER(-)中的阳性表达率分别为78.57%和50.00%,差异有显著性(P<0.05),在PR(+)、PR(-)中分别为84.21%和54.55%,差异有显著性(P<0.05);PSA总阳性表达率分别为61.54%,在ER(+)、ER(-)中阳性表达率分别为57.14%和66.67%,差异无显著性(P>0.05),在PR(+)、PR(-)中分别为84.21%和48.48%,差异有显著性(P<0.05)。pS2(+)、pS2(-)两组中,5年生存率分别为85.29%和50.00%,差异有显著性(P<0.05);PSA(+)、PSA(-)组中,5年生存率分别为84.38%和55.00%,差异有显著性(P<0.05)。结论: pS2与PSA均可作为乳腺癌的预后因素,若联合检测激素受体(ER、PR),对判断预后将更有帮助。     

miR-122a对肝癌细胞HepG2化疗药物敏感性的影响及其机制研究

目的:探究过表达miR-122 a是否可提高肝癌细胞HepG2对化疗药物的敏感性,并阐明其提高化疗药物敏感性的部分机制.方法:构建过表达miR-122 a的HepG2细胞系(miR-122a肿瘤细胞组),并与HepG2细胞(肿瘤细胞组)置于含不同浓度顺铂的培养液中,CKK-8法观察miR-122a上调对HepG2细胞存活率的影响,Annexin V-PE/7-AAD双染法观察miR-122a上调对HepG2细胞凋亡率的影响;Western blot检测miR-122a肿瘤细胞组和肿瘤细胞组中bcl-2和p53蛋白的表达水平.结果:低铂浓度顺铂条件下,miR-122 a肿瘤细胞组细胞的存活率低于肿瘤细胞组细胞的存活率,miR-122 a肿瘤细胞组24 h细胞的凋亡率高于肿瘤细胞组(P<0.05);Western blot法检测bcl-2和p53蛋白结果显示,在低浓度顺铂溶液中,miR-122a肿瘤细胞组bcl-2表达量低于肿瘤细胞组(P<0.05),miR-122a肿瘤细胞组p53表达量高于肿瘤细胞组(P<0.05).结论:过表达miR-122a能上调p53蛋白表达、下调bcl-2蛋白表达,增加HepG2细胞对顺铂敏感性,为肝癌患者提供基因治疗和降低肿瘤细胞耐药提供了理论和实验基础.     

乳腺癌细胞药敏试验临床应用价值探讨

目的探讨采用组织块培养、终点染色、计算机图像分析法（TECTA）在乳腺癌化疗中的临床意义及应用价值。方法选用10种常用乳腺癌化疗药物及临床常用的五组联合化疗方案,我们TECIA对75例乳腺癌改良根治术标本,评估肿瘤细胞对化疗药物的敏感性及联合化疗方案选择的合理性。结果化疗药物对乳腺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性,10种化疗药物的敏感性分别为5-氟尿嘧啶（5-Fu）33．3％、顺铂（DDP）37．5％、环磷酰胺（CTX）29．2％、足叶已甙（VP-16）16．7％、丝裂霉素（MMC）22．0％、表阿霉素（EPI）41．7％、诺维本（NVB）45．8％、阿霉素（ADM）41．7％、泰素（PTX）54．2％、氨甲喋呤（MTX）25．0％。五组联合化疗方案的敏感性分别为CAF：环鳞酰胺（CTX）＋阿霉素（ADM）＋5-氟尿嘧啶（5-FU）33．2％;CMF：环鳞酰胺（CTX）＋氨甲喋呤（MTX）＋5-氟尿嘧啶（5-FU）26．6％;TA：泰素（PTX）＋阿霉素（ADM）31．2％;NP诺维本（NVB）＋顺铂（DDP）45．2％;TP：泰素（PTX）＋顺铂（DDP）40．1％。结论体外肿瘤药敏试验在乳腺癌的临床用药及个体化化疗方面具有重要的指导意义,其检测结果与临床实际疗效具有良好相关性,可用于指导乳腺癌术后化疗。     

CUMULATIVE RESULTS OF CHEMOSENSITIVITY TEST USING MTT ASSAY IN DOUBLE-LAYER AGAROSE

Objective To investigate cumulative results of chemosensitivity test using 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyl （MTT） assay in double-layer agarose. Methods A total of 2 491 patients with different kinds of cancers were enrolled in the study, in which 18 kinds of different anticancer drugs were used. A computer soft was used to get charts. ResultsThe total evaluability rate was 82.7% （2 060/2 491）. Among all agents, the efficiency rates of 5-Fu, MMC, DDP, BLM and CBP were higher than the efficiency rates of others. The response rate range of different cancer in vitro sensitivity by using MTT assay in double layer agarose were from 9.2% （biliary duct） to 37.5% （malignant lymphoma）. For colon and rectum cancer, 5-Fu, DDP, MMC and BLM were more sensitive than other anti-tumor agents. For breast carcinomas, ACTD and DDP were more sensitive. For gastric cancer, 5-Fu, DDP and BLM were more sensitive. For leukemia, VM-26 and HHRT were more sensitive. ACM was more sensitive to kidney and MXT and BLM were more sensitive to pancreas cancer. For Lung cancer, DDP and EPI were more sensitive. Mean true positive rate, mean true negative rate, mean sensitivity, mean specificity and mean accuracy were 44% , 92% , 72% , 77% , and 76% , respectively. Conclusion Chemosensitivity tesing using the MTT assay in a double layer agarose was a very useful reference to chem- therapy.     

应用快速微量培养人肝癌细胞抗癌药敏试验的临床意义

目的：为肝癌治疗中合理使用抗癌药提供可靠的科学依据。方法：采用改良MTT比色分析法测定35例肝癌细胞原代培养药敏。结果：35例人肝癌细胞抗癌药敏试验有33例获得成功，在六种抗癌药中敏感度最高的为EPB，其后依次为DDP、MMC、5－Fu、MTX和VCR；人肝癌细胞对6种抗癌药敏感性的不同浓度间比较皆有显性。结论：EPB和DDP一般为肝癌化疗的首选药，而VCR几乎没有作用，肝癌细胞对抗癌药有明显的药物浓度依赖性。     

人乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中p53与bcl-2表达的时序性

研究细胞凋亡过程中p53与bcl－2基因表达变化的时序关系，以探索p53调控bcl－2的可能性。方法：选择具有野生型p53的人乳腺癌MCF-7细胞系，用5－Fu为诱导剂诱导细胞凋亡；用Northern杂交及Western印迹法检测细胞凋亡过程中p53与bcl－2表达变化的时序性。结果：p53表达增高出现在bcl－2表达降低之前。结论：p53在时序上具有作为bcl－2基因负调控转录因子的可能性。     

纳米磁性靶向药囊对人肝癌裸鼠移植瘤bcl-2/bax蛋白表达的影响

目的观察纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗人肝癌裸鼠移植瘤对肿瘤细胞凋亡bcl-2及bax蛋白表达的影响。方法透射电镜观察各组移植瘤形态学特征，免疫组化SABC法测定bcl-2和bax蛋白表达水平。结果电镜观察可见B组（5-Fu）和D组（纳米磁性5-Fu药囊加内磁场）肿瘤组织大量癌细胞凋亡。B和D组bcl-2蛋白表达水平低于A组（生理盐水对照）、C组（纳米磁性5-Fu药囊）和E组（纳米磁小体加内磁场）（P〈0．01），D组bcl-2蛋白表达水平低于B组（P〈0．01）；B组和D组bax蛋白表达水平高于其他三组（P〈0．01），D组bax蛋白表达水平高于B组（P〈0．01）。结论纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗能够降低bcl-2蛋白表达，增加bax蛋白表达，促进人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡，提高5-Fu抗肿瘤作用。     

预制检测板MTT法检测癌患者外周血淋巴细胞化疗药物敏感性的研究

目的:基于众多文献报道MTT法化疗药敏测定中癌细胞抑制率与外周血淋巴细胞抑制率呈正相关,探讨预制检测板MTT法在检测癌患者外周血淋巴细胞药物敏感性中的价值,以推动检测标准化与指导临床化疗用药。方法:应用泰伦公司生产的MTT法肿瘤细胞药敏预制检测板,对75例癌患者外周血淋巴细胞进行20种药物的药敏检测,操作方法按预制检测板使用说明书。结果:39例肺癌患者外周血淋巴细胞对化疗药物敏感性,由高到低前5名依次为:卡氮芥(BCNU),紫杉醇(PTX),阿霉素(ADM),长春瑞滨(NVB)和表阿霉素(eADM);25例乳腺癌患者外周血淋巴细胞对化疗药物敏感性,前5名依次为:BCNU,PTX,NVB,ADM和米托蒽醌(MIT);11例胃癌患者外周血淋巴细胞对化疗药物敏感性,前5名依次为:PTX,ADM,BCNU,eADM和阿糖胞苷(Ara-C)。结论:该MTT法预制检测板适用于癌患者药物敏感性试验,对临床癌患者个体化化疗有重要指导意义。     

肺癌细胞株对6种抗癌药物敏感性测定

目的　探讨肺癌细胞株抗癌药物的敏感性。方法　采用体外MTT比色分析法对 10株肺癌细胞进行NVB、GEM、TAX、SN - 38、CDDP、5 -Fu 6种抗癌药物的体外敏感试验。结果　 ( 1) 6种抗癌药物对SCLC的显效顺序依次为GEM、NVB、CDDP、TAX、5 -Fu、SN - 38,4株SCLC的敏感性顺序依次为Lu135、N2 31、H6 9、SBC - 3;( 2 ) 6种抗癌药物对NSCLC的显效顺序依次为 5 -Fu、NVB、GEM、CDDP、TAX ,对SN - 38均为耐药 ,3种 6株NSCLC的敏感性顺序依次为Lu 6 5、PC 7、LK - 2、PC 9、PC 14、A 5 49;( 3)SCLC株对 6种抗癌药物敏感性优于NSCLC ,6种抗癌药物对 4株SCLC的总有效率为 87 5 % ,敏感为 6 2 5 % ,较敏感为 2 5 % ,耐药为12 5 % ;对 6株NSCLC的总有效率为 5 2 78% ,敏感为 16 6 7% ,较敏感为 36 11% ,耐药为 4 4 4 4%。结论　 10株肺癌细胞株对 5 -Fu最敏感 ,GEM、NVB、CDDP、TAX次之 ,SN - 38效果最差。 6种药物中对 5 -Fu、CDDP未表现出明显耐药性 ,其余 4种均存在不同程度的耐药性 ,表明肺癌细胞株存在自然耐药性。     

白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素12(IL-12)对肺腺癌细胞作用机制的研究

目的:探讨人肺腺癌A549/DDP的多药抗药机理。方法:采用四氮唑盐快速比色法(MTT法)进行体外细胞毒性实验;免疫组化方法检测A549及A549/DDP在细胞因子作用前后突变型P53、bc l-2、MDR1的表达。结果:IL-2与顺铂合用前顺铂对两株细胞的毒性作用无明显变化;IL-12与顺铂合用后顺铂对两株细胞的毒性作用明显增强;IL-2、IL-12与顺铂合用后顺铂对两株细胞的毒性作用进一步增强。免疫组化结果显示:IL-2作用于两株细胞后,突变型P53、bc l-2、MDR1的表达无明显变化;IL-12作用于两株细胞后,bc l-2、突变型P53、MDR1的表达均下调,IL-2能增强上述作用。结论:IL-12与顺铂具有协同抑制肺腺癌A549细胞的作用,IL-12能增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,IL-2能进一步增强上述作用。     

胃肠道肿瘤细胞周期素A的表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的探讨胃肠道肿瘤细胞细胞周期素A（Cyclin A）的表达及其与肿瘤化疗敏感性之间的相关性。方法用流式细胞术双参数标记法对45例临床胃肠道肿瘤标本Cyclin A的表达进行检测，同时用四甲基偶氮唑盐显色法（MTT法）检测该肿瘤标本对几种常用化疗药物单药和联合用药方案的敏感程度。结果Cyclin A阳性表达的肿瘤细胞中对5-氟尿嘧啶（5-FU）、顺铂（DDP）、5-FU＋丝裂霉素（MMC）敏感的标本比例分别为76.9%、73.1%和84.6%；Cyclin A阴性表达的肿瘤细胞中相应的比例分别为15.8%、15.8%和10.5%，Cyclin A的表达与5-FU、DDP、5-FU＋MMC的药物敏感性之间具有相关性（均P〈0.01）。Cyclin A的表达与泰素（Taxol）、替尼泊苷（VM-26）、MMC、5-FU＋Taxol、5-FU＋DDP药物敏感性未发现有相关性（均P〉0.05）。结论Cyclin A的表达与某些肿瘤术后化疗方案的敏感程度显著相关，检测该指标对术后化疗药物和联合化疗方案选择可起到一定指导作用。