多重荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征患者复杂核型异常

目的 探讨多重荧光原位杂交（M-FISH）技术存骨髓增牛异常综合征（MDS）患者复杂核型异常检测中的应用价值。方法 对10例常规R显带具有复杂染色体异常（CCA）的MDS患者应用M-FISH确定复杂染色体的重排及标记染色体的组成，识刖并确定微小易位。结果 M-FISH共检出37种结构重排，包括插入易位、缺夫、易值及衍生染色体，其中34种为不平衡重排；3种为平衡重排，包括：t（6；22）（q21；q12）、t（9；19）（q13；p13）和t（3；5）（？；？），有7种重排文献未见报道，涉及17号染色体的异常及-5／5q-最为常见（10例患者中两种异常各占7例）。结论 对伴有CCA的MDS患者M-FISH技术可以明确常规细胞遗传学（CC）分析中复杂染色体异常，并发现和纠正CC分析中漏检及误检的异常，为MDS患者染色体异常的分析提供了一种较理想的方法。     

多重荧光原位杂交检测慢性淋巴细胞白血病复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交(M-FISH)技术检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)复杂核型异常(CCA)的价值。方法应用M-FISH技术对6例常规细胞遗传学(CC)显示CCA的CLL进行研究。结果M-FISH检测仅有1例检出了CCA克隆;1例检出非复杂核型的异常克隆及1个CCA细胞;1例检出3个不同的染色体变异细胞。其余3例M-FISH未检出异常核型分裂象。6例CLL的核型分析中共发现平衡易位10种;非平衡易位9种,其中der(14)t(16;14;9)是既往文献未报道的易位。结论对伴有CCA的CLL以M-FISH技术可以发现和纠正CC漏检及误检的染色体异常。单个细胞核型异常在CLL中多见。     

多重荧光原位杂交技术检测急性髓系白血病复杂核型异常的价值

目的探讨多重荧光原位杂交技术检测急性髓系白血病(AML)患者复杂核型异常的价值。方法联合应用常规细胞遗传学、间期荧光原位杂交技术和多重荧光原位杂交技术对14例伴有复杂核型异常的 AML 患者进行研究。结果 14例 AML 患者应用常规细胞遗传学技术共检出23种染色体的数量异常和56种染色体的结构异常。常规细胞遗传学技术检出的4种染色体增加和4种染色体丢失与多重荧光原位杂交技术分析结果一致,常规细胞遗传学技术检出的12种染色体丢失经多重荧光原位杂交技术证实为衍生染色体。常规细胞遗传学技术检出的26种衍生染色体和19种标记染色体的性质被多重荧光原位杂交进一步明确。它们中大多数是由染色体不平衡易位所致,包括2种尚未报道的复杂 t(8;21)易位:t(8;21),der(8)t(8;21)(8pter→8q22::21q22→21qter),der(21)t(8;21;8)(8qter→8q22::21p13→21q22::8q22→8qter)和 t(21;8;18;1),der(8)t(8;21)(8pter→8q22::21q22→21qter),der(21)t(21;8;18;1)(21p13→21q22?::8q22→8q24?::18??::1q??q??)。复杂核型异常几乎涉及所有染色体,但以17,7和5号染色体多见。结论 AML 的复杂核型异常单用常规细胞遗传学分析常难以阐明,而联合多重荧光原位杂交则可以更好的揭示其特征。因此对伴有复杂核型异常的 AML 患者,最好进一步采用多重荧光原位杂交技术进行分析。     

M-FISH用于骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1复杂核型的检测分析

本研究的目的是观察伴有5号染色体缺失的MDS细胞株MUTZ-1细胞的遗传学变化.首先采用R显带技术对染色体标本进行核型分析,再以vysis Spectra VysionTMM-FISH作为探针,检测并分析其复杂异常核型.结果表明M-FISH分析显示有明显的高频率染色体的易位、插入、断裂与重接、缺失、数目增多;染色体分析揭示核型为50,xx,der(1)t(1;2),ins(1;14),+der(2)t(2;19),der(3)t(3;5),der(3)(3522),5q-,der(6)t(3;6),der (7)(18717),+8,+der(9)t(1;9),der(10)t(1;10),+11,+12,der(?13)(101358),der(14)t(8;14),der(14)t(14,15),der(15)t(15;21)×2,+17,+18,-21,-22.结论MDS细胞株MUTZ-1在M-FISH检测下有显著复杂的核型变化;M-FISH能增加高度复杂的异常染色体检测的准确性,有助于MDS的诊断和预后评估.     

多重荧光原位杂交检测慢性淋巴细胞白血病复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交（M-FISH）技术检测慢性淋巴细胞白血病（CLL）复杂核型异常（CCA）的价值。方法应用M—FISH技术对6例常规细胞遗传学（CE）显示CCA的CLL进行研究。结果M-FISH检测仅有1例检出了CFA克隆；1例检出非复杂核型的异常克隆及1个CCA细胞；1例检出3个不同的染色体变异细胞。其余3例M—FISH未检出异常核型分裂象。6例CLL的核型分析中共发现平衡易位10种；非平衡易位9种，其中der（14）t（16；14；9）是既往文献未报道的易位。结论对伴有（CCA的CLL以M—FISH技术可以发现和纠正CC漏检及误检的染色体异常。单个细胞核型异常在CLL中多见，     

多重荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病急变期复杂核型异常

目的 探讨多重荧光原位杂交（M—FISH）技术检测慢性粒细胞白血病急变期（CML—BC）复杂核型异常（CCA）的价值。方法 应用M—FISH技术对26例常规细胞遗传学（CC）分析显示CCA的CML—BC患者进行检测分析。结果 除标准t（9；22）（q34；q11）外，通过M—FISH技术共检出69种结构异常，其中10种为平衡易位，59种为不平衡易位，不平衡易位包括1种插入、6种缺失及52种易位及衍生染色体；另外还检出23种数目异常。26例CML—BC患者中所有染色体均涉及异常，除标准t（9；22）外异常最多涉及的染色体是17号、2号、8号及16号。1例标本M—FISH未检出CCA，6例标本检出了CC分析未发现的异常核型。M—FISH明确了16种CC分析未确定的异常，纠正了5种CC分析识别错误的异常，还发现了CC分析未检出的35种染色体易位，其中der（9）t（16；6；9；22）和der（18）t（16；18；19）在既往文献中未见报道。结论 对伴有CCA的CML—BC以M—FISH技术可以发现和纠正CC分析漏检及误检的染色体异常。伴有CCA的CML—BC与CML常见的附加异常不同。     

间期荧光原位杂交和常规染色体分析诊断急性早幼粒细胞白血病的比较

本研究主要探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞遗传学特征并比较间期荧光原位杂交技术(I-FISH)和常规染色体核型分析技术(CC)。应用常规染色体核型分析及I-FISH技术对157例APL患者细胞遗传学特征进行研究,采用短期培养法制备骨髓细胞染色体,应用染色体R显带技术对136例拟诊APL患者进行常规细胞遗传学检测,其中对45例同时进行了CC和I-FISH检测,对其余21例仅进行I-FISH分析。结果表明:136例进行CC分析的APL患者中,120例(88.2%)存在t(15;17)(q22;q21)易位,其中107例(78.7%)为单纯t(15;17)(q22;q21)易位,13例(9.6%)为伴t(15;17)(q22;q21)异位的复杂核型异常;在16例无t(15;17)(q22;q21)易位的APL患者中1例(0.7%)为t(5;17)(q24;q21)易位,3例(2.2%)正常核型,12例(8.8%)未见分裂相。在所有66例进行FISH检测的APL患者中,64例存在PM I/RARα融合基因,其阳性率为97.0%,灵敏度显著高于常规染色体核型分析(p=0.041);而5例其他类型AML患者和5例正常标本均未检出PM I/RARα融合基因。结论:常规染色体核型分析和间期荧光杂交技术联合分析APL患者细胞遗传学特征是诊断该病和监测微小残留病的有力工具。     

一例伴有双ider(17q)的急性早幼粒细胞白血病的临床及实验研究

本研究报道一例伴有双ider(17q)特殊复杂核型异常急性早幼粒细胞白血病(APL)的临床和实验特征。对一例复发APL患者进行多参数流式细胞术免疫分型、传统细胞遗传学分析,并应用荧光原位杂交(FISH)和多重荧光原位杂交(M-FISH)两种技术进一步明确染色体异常。结果表明:该患者染色体核型分析提示为47,XY,1p-,15q ,ider(17q)×2;FISH检测同一细胞中出现5个PML-RARα融合信号;M-FISH进一步明确并证实上述结果。免疫表型检测显示高表达CD13和CD33,而CD34、HLA-DR及T、B淋巴细胞标志阴性。结论:双ider(17q)是APL中一种罕见的附加异常,联合应用FISH及M-FISH技术是确认复杂染色体异常的可靠手段。     

染色体核型改变在不同类型白血病诊断与治疗及预后判断中的临床意义

目的分析染色体核型改变在不同类型白血病诊断、治疗及预后判断中的临床意义。方法选取2011年2月至2016年2月在该院接受治疗的白血病患者367例,包括慢性粒细胞白血病(CML)患者137例,男78例,女59例,其中加速期(AP)患者6例,慢性期(CP)患者117例,急变期(BP)患者14例;急性白血病(AL)患者230例,男109例,女121例,其中急性髓细胞白血病(AML)患者119例,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者111例;使用短期培养法制作骨髓细胞染色体标本,使用R显带技术对患者染色体核型进行分析。结果 367例患者中染色体核型异常有302例(82.3%),核型正常有65例(17.7%);AL患者中数量异常表现为非整倍体和多倍体,比如-Y、+4、+8、+21和-7等。结构异常主要是特异性染色体重新排列且和FAB亚型有联系,比如t(q23;q23)(9;20)、t(q23;q23)(9;20)等,少部分患者检查发现t(q33;q10)(8;21)、t(p13;p12)(7;15)、t(q22;p14)(2;18)等;114例CML患者Ph+表现是典型易位t(q32;q9)(10;19);剩余表现为变异易位比如t(q11;q32;q9)(3;8;19)、t(p23;q9)(2;21)等。结论 AL患者体内染色体畸变率比较高,且和FAB分型相关;CML患者体内出现额外染色体和其病情发展有紧密联系。     

联合间期和中期荧光原位杂交确定成人急性白血病患者11q23/MLL异常

目的 探讨快速、敏感、有效揭示11q23／MLL基因重排的方法，确定11q23／MLL异常存成人急性白血病（AL）中的发生情况及其临床特征，指导AL风险治疗。方法112例成人AL患者骨髓细胞经24h短期培养按常规方法制备染色体标本，R显带行核型分析；LSIMLL双色分离信号DNA探针行间期荧光原位杂交（FISH）筛选异常信号，有异常信号者行中期FISH确定11q23／MLL基因重排。结果 112例AL患者FISH揭示9例11q23／MLL易位（检出率8．0％），其中常规细胞遗传学分析（CCA）只检出4例（检出率3．6％）。3例CCA示del（11）（q23）者FISH揭示2例为11q23／MLL易位，1例为11号染色体长臂末端缺失。在1例正常核型、1例11q＋和1例无11q23明显异常者，FISH揭示为11q23／MLL易位。除9例易何外，FISH揭示8例存在MLL基因扩增，包括多倍体、均匀染色区（hsr）和双微染色体（dmin）。AL伴11q23／MLL异常者多诊断为B系祖细胞急性淋巴细胞白血病（pro-B ALL）、急性单核细胞白血病（AMoL）或急性双表型白血病（BAL）。结论 使用MLL双色分离信号DNA探针行FISH确定11q23／MLL异常是快速敏感的方法，其检出率高于CCA，有效揭示11q23／MLL易位和扩增。临床诊断pro-B ALL、AMoL或BAL，尤其正常核型者应行FISH以确定11q23／MLL异常。     

多色荧光原位杂交技术检测急性淋巴细胞白血病复杂核型异常

本研究建立多色荧光原位杂交（M—FISH）技术平台，探讨其在检测急性淋巴细胞白血病（ALL）复杂核型异常中的应用。联合应用常规细胞遗传学方法和M—FISH技术分析了5例伴有复杂核型异常的ALL患者。结果表明：M—FISH证实了原有的异常t（9；22）、t（1；19）和t（y；1），同时还发现了新的异常der（1）（1：：3：：7）、der（6）t（6；9）（q？；p13）、der（1）t（1；11）、der（12）t（1；12）、der（3）t（3；5）、der（2）t（2；16）、der（9）（9：：18：：7）和der（7）（9：：18：：7），并且纠正了原有的错误分析，其中der（9）（9：：18：：7）及der（7）（9：：18：：7）为世界上首例报道。结论：M—FISH在检测ALL复杂核型中的应用前景广阔，是进行精确染色体核型分析所不可缺少的先进手段。     

多色荧光原位杂交技术的临床应用

目的 检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体。方法 用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv（9）（p11q13）,＋mar和1例46,XY,t（5;？）核型进行诊断。结果 病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,inv（9）（p11q13）,＋SMC（15）。病例2的核型为46,XY,der（5）t（4,5）（q27;q35）。在此基础上对患者的核型—表型进行了分析。结论 多色荧光原位杂交技术结合细胞遗传学核型分析,对于来源不明的标记染色体和衍生染色体的诊断是非常有帮助的。     

Application of multicolor fluorescent in situ hybridization for enhanced characterization of chromosomal abnormalities in congenital disorders

OBJECTIVE: To determine the efficacy of multicolor fluorescent in situ hybridization (M-FISH), which paints each chromosome in a unique color, for identification of congenital derivative and marker chromosomes. MATERIAL, METHODS AND CASES: Commercially available M-FISH probes were used to label each chromosome in a specific fluorescent color. Six representative cases involving derivative chromosomes, markers, and subtle anomalies were analyzed by M-FISH. RESULTS: Three familial, rather subtle derivative chromosomes were identified by M-FISH with relative ease. A small ring that was unidentifiable by banded-chromosome analysis was identified by M-FISH. A case of a subtle telomeric anomaly could not be resolved without the use of telomeric-specific probes. The M-FISH results were confirmed by individual chromosome-specific painting probes. CONCLUSION: M-FISH was helpful for identifying a wide range of congenital chromosomal anomalies. However, for subtle chromosomal abnormalities, use of locus-specific probes may be necessary.     

急性髓系白血病22号染色体三体和inv(16)的相关性研究

目的探讨22号染色体三体（＋22）在诊断inv（16）急性髓系白血病（AML）中的价值。方法采用红、绿荧光直接标记的双色断裂点分离的基因探针CBFβ对18例存在＋22克隆异常的AML患者进行间期荧光原位杂交（FISH）检测，并与R显带常规细胞遗传学（CC）检测结果进行比较分析。应用多重荧光原位杂交（M—FISH）技术检测同时伴有＋22和inv（16）的AML患者。结果18例存在＋22的AML患者中，CC分析未发现inv（16）阳性，而FISH检测发现11例inv（16）阳性、1例del（16）（q22）。这11例阳性患者中，9例CC分析为单纯＋22异常，1例伴有＋8，1例患者为del（16）（q22），而FISH检测为inv（16）。M—FISH检测4例同时伴有＋22和inv（16）的患者，除＋22外，未发现其他异常。结论＋22是预测inv（16）AML的重要标志，具有潜在的诊断inv（16）AML的价值。     

Multicolor fluorescence in situ hybridization and comparative genomic hybridization reveal molecular events in lung adenocarcinomas and squamous cell lung carcinomas

We have used the molecular cytogenetic techniques of multicolor fluorescence in situ hybridization (M-FISH) and comparative genomic hybridization (CGH) to analyze two established lung cancer cell lines (A549, H520), 80 primary lung adenocarcinoma samples and 80 squamous cell lung carcinoma samples in order to identify common chromosomal aberrations. M-FISH revealed numerous complex chromosomal rearrangements. Chromosomes 5, 6, 11, 12, and 17 were most frequently involved in interchromosomal translocations. CGH revealed regions on 1q, 2p, 3q, 5p, 5q, 7p, 8q, 11q, 12q, 14q, 16p, 17p, 19q, 20q, 21q and 22q to be commonly over-represented and regions on 2q, 3p, 4p, 5q, 7q, 8p, 9p, 13q, 14q, and 17p to be under-represented. In lung adenocarcinomas the most common gains were found in 16p13 (50%); while in squamous cell lung carcinomas the common gains were found in 17q21 (45%) and these alterations were observed to be associated with their specific pathological subtype. In conclusion, the present study contributes to the molecular biological characterization in lung adenocarcinomas and squamous cell lung carcinomas and through evaluation of molecular events to the recently emergent focus on novel markers for lung cancer treatment.